所属领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种对齿藓用于生态修复的方法，但不局限于尖叶对齿藓。
背景技术：
苔藓是第一批登陆的绿色高等植物，适应范围及广，在生态系统中的作用至关重要，例如沙漠中苔藓结皮占据植被覆盖的40％以上(魏江春，2005)。有案例显示苔藓在干旱和半干旱地区对于水土保持和大气氮循环贡献巨大。库布齐沙漠东缘的拉特旗人工接种形成苔藓结皮，使得表土质地也发生了明显的变化，其中沙粒含量逐渐减少，粉粒、黏粒含量增加(wuetal.,2014；young&reed,2017)。在有苔藓结皮的植被覆盖区明显比没有苔藓结皮的地方水土保持效果好，植被退化的问题弱。苔藓作为先锋植物，能在极端环境中生长，优于其他高等绿色植物(baquiranetal.,2016；deane-coe&stanton,2017)。城市化建设的加快和人类活动造成越来越严重的生态环境破坏，山体破损，公路边坡裸露以及“五采区”大面积的破坏。修复与恢复生态系统对我国环境保护、生态建设、农业生产和社会经济可持续发展均具有重要的现实意义。
尖叶对齿藓(didymodonconstrictus(mitt.)k.saito)是云南山坡、岩石面广泛分布的一种苔藓，生境极广，既能适应林下潮湿阴暗，又能适应阳光充足的地方。具有耐贫瘠、耐高温、低温、生长快和耐脱水等多种优点，与极端抗旱的苔藓品种山墙藓或齿肋赤藓等近一年的生育周期相比具有应用优势。作为先锋物种生长迅速，能在被干扰的生境中第一时间形成群落加速微生境恢复速率。本发明以其为材料，为后期对齿藓运用于生态修复提供技术指导。
技术实现要素：
本发明旨在提供一种对齿藓用于生态修复的方法，包括对齿藓的扩大繁殖、定植于试验地、养护和监测方法。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
一种对齿藓用于生态修复的方法，该方法包括对齿藓的扩大繁殖、定植于试验地、养护和监测步骤。
如所述的一种对齿藓用于生态修复的方法，该方法包括以下步骤：采集对齿藓茎叶配子体和孢子朔，空气干燥5天；打磨粉碎至50-100目以1g:20l的比例接种于泥炭藓和椰糠的混合基质；在温度为23℃，80μmolphotonsm-2s-1光强，16小时长日照下的培养箱中生长2周，期间用体式显微镜和倒置显微境观察计算生长效率；试验点先制备一层改良bcd培养基涂层，然后将生长2周的对齿藓与基质混合物粉碎后均匀撒播在涂层上，覆盖蓝色尼龙网，每天喷雾3次保湿，每次10分钟，一个月后揭开尼龙网自然条件下生长。
如所述的一种对齿藓用于生态修复的方法，其中所述的打磨粉碎是使用中药粉碎机，参数设置为50-100目。
如所述的一种对齿藓用于生态修复的方法，其中所述的椰糠经过水洗，除去盐离子，然后与泥炭藓1:5混合。
如所述的一种对齿藓用于生态修复的方法，培养基设置是利用bcd基础培养基作为背景培养基，其中的改良bcd培养基配方为：mgso4.7h2o1μm，kh2po418.4μm，kno310μm，feso4.7h2o45μm；cuso4.5h2o0.22μm，h3bo310μm，cocl2.6h2o0.23μm，na2moo4.2h2o0.1μm，znso4.7h2o0.19μm，mncl2.4h2o2μm，ki0.17μm，5mmcacl2，琼脂1％，按照所述成分逐一加到沸水中溶解，凉至45℃在试验地做成涂层。
如所述的一种对齿藓用于生态修复的方法，其中苔藓配子体生长状态观测采用体式显微镜观测，并每天拍照记录，对比分枝及生长状态，用student’st-test统计分析。
所述的一种对齿藓用于生态修复的方法用于因建筑、修路、开矿导致破损的植被的生态修复。
所述的一种对齿藓用于生态修复的方法用于土壤、石质、水泥的各种坡度的植被修复。
对齿藓用于生态修复的方法，其中所述的培养2周期间同时与同样处理的大灰藓和皱叶青藓做对照，发现对齿藓的恢复最快，生长是最旺盛的。
附图说明
图1为本发明对齿藓、皱叶青藓、大灰藓生长2周后分枝数情况统计。
具体实施方式
下面结合附图，用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。
实施例1：
1.材料和方法：
1.1研究材料：
本发明使用材料为三种苔藓，尖叶对齿藓(didymodonconstrictus(mitt.)k.saito)、皱叶青藓(brachytheciumkuroishicumbesch.)和大灰藓(hypnumplumaeformewilson)，采集地点是中国科学院昆明植物研究所温室，具体位置是alt.1938m，北纬25°9ˊ19〞，东经101°44ˊ35〞。
1.2研究方法：
1.2.1实验设计：采集尖叶对齿藓茎叶配子体和孢子朔，空气干燥5天；打磨粉碎至50-100目以1g:20l的比例接种于泥炭藓和椰糠的混合基质；在温度为23℃，80μmolphotonsm-2s-1光强，16小时长日照下的培养箱中生长2周，期间用体式显微镜和倒置显微境观察计算生长效率；试验点先制备一层改良的bcd培养基涂层，然后将生长2周的尖叶对齿藓与基质混合物粉碎后均匀撒播在涂层上，覆盖蓝色尼龙网，每天喷雾3次保湿，每次10分钟，一个月后揭开尼龙网自然条件下生长。
1.2.2配子体接种技术：利用中药粉碎机进行植物材料的机械打磨，1g植物材料混合于20l泥炭藓与椰糠的混合基质中，铺成1-5mm厚度，置于23℃，80μmolphotonsm-2s-1光强，16h长日照培养。
1.2.3培养基配置：mgso4.7h2o1μm，kh2po418.4μm，kno310μm，feso4.7h2o45μm；cuso4.5h2o0.22μm，h3bo310μm，cocl2.6h2o0.23μm，na2moo4.2h2o0.1μm，znso4.7h2o0.19μm，mncl2.4h2o2μm，ki0.17μm，5mmcacl2，琼脂1％，按照所述成分逐一加到沸水中溶解，凉至45℃在试验地做成涂层。改配方添加了钙离子，有利于细胞大量繁殖时细胞壁的生长。
1.2.4生长状态观测：采用体式显微镜照相，随机挑选3种苔藓每个时间点不少于5个显微照片，统计分枝数，用student’st-test统计分析。本发明使用的体式显微镜仪器型号：奥林巴斯szx16。
2.结果
2.1对齿藓、皱叶青藓、大灰藓生长2周后分枝数情况统计：
苔藓的体细胞再生能力极强，经过植株材料的机械粉碎后有可能进行大量繁殖。然而孢子囊仅仅在温度交替变化时产生，但败育率较高，因此，利用配子体繁殖是很有利的途径。为了比较不同种苔藓的再生能力，选取3种综合抗逆能力比较强，适应极端生境苔藓试验，在同样粉碎后接种并喷水后观察，对齿藓立即恢复绿色，说明在这种培养条件下对齿藓的恢复能力最强。5天后观察，3种苔藓都萌发出新枝，皱叶青藓的萌发最慢。生长2周后统计分枝数，发现对齿藓的数量最多，证明对齿藓具备最旺盛的分生能力。横坐标显示生长天数，纵坐标显示分枝数。星号显示该数值与统一生长时期皱叶青藓分枝数比较时t-test检测在p<0.01水平上的显著性差异；数据表示为平均值±标准误，n≧5(图1)。
2.2试验地在接种对齿藓生长1月前后的情况
对齿藓的繁殖能力极强，在bcd涂层上定植喷雾保持一定湿度生长1个月后，苔藓成功覆盖于表面，有明显的绿化效果。