本发明涉及一种植物带芽茎段离体保存的方法，确切地说是一种早梨带芽茎段离体保存的方法。
背景技术：
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上饶早梨是江西上饶县花厅和田墩等镇的优良地方早熟梨种质资源。上饶早梨的主栽品种一般有两个，即“六月雪”和“黄皮消”，其中“六月雪”品质更胜一筹，是上饶早梨最优良品种，成熟早，且表皮细薄、肉质脆嫩、核少汁多、味道香甜，清朝曾被荐为贡品。目前，上饶早梨种质资源大多采用种质圃的形式保存，费时、费力、费财，且易受到自然灾害和人为失误等影响。离体保存是利用植物组织培养的手段在有限的空间内保存植物材料，具有用地少、人工少、消耗少等优点，现广泛用于各种地方优良植物的种质资源保存。离体保存的缺点是保存过程中容易使培养基和水分逐渐减少，导致离体保存的植物材料容易死亡，无法长时间实现中长期离体保存的目的。针对这些问题，本发明开发了一种早梨带芽茎段离体保存的方法，可为上饶早梨种质资源的中长期保存提供技术基础。
技术实现要素：
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本发明的目的是提供一种离体保存时间长、成活率高、离体保存效果好的早梨带芽茎段离体保存的方法。实现本发明目的的技术方案是，一种早梨带芽茎段离体保存的方法，其特征在于有以下步骤：(1)在超净工作台内，切取早梨带芽茎段并将其接种于培养基一(ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+30g/l蔗糖+0g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(2)在培养基一上培养7-10d后，将早梨带芽茎段转入培养基二(ms+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+0g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(3)在培养基二上培养7-10d后，将早梨带芽茎段转入培养基三(ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+0g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(4)在培养基三上培养7-10d后，将早梨带芽茎段转入培养基四(ms+1-2mg/l噻苯隆+0.2-0.5mg/liba+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+7.5g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(5)在培养基四上培养360d后，将早梨带芽茎段取出，重新接种到继代培养基(ms+1-2mg/l噻苯隆+0.2-0.5mg/liba+30g/l蔗糖+7.5g/l琼脂)上进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间16h/d，光强1500-2500lx，可成活形成完整试管苗。
具体实施方式：
结合下述实施例对本发明作进一步说明：
(1)第一次培养
在超净工作台内，切取早梨带芽茎段并将其接种于培养基一(ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+30g/l蔗糖+0g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间16h/d，光强1500-2500lx；
(2)第二次培养
在培养基一上培养7-10d后，将早梨带芽茎段转入培养基二(ms+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+0g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间16h/d，光强1500-2500lx；
(3)第三次培养
在培养基二上培养7-10d后，将早梨带芽茎段转入培养基三(ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+0g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间16h/d，光强1500-2500lx；
(4)第四次培养
在培养基三上培养7-10d后，将早梨带芽茎段转入培养基四(ms+1-2mg/l噻苯隆+0.2-0.5mg/liba+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+7.5g/l琼脂)，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间16h/d，光强1500-2500lx；
在培养基四上培养360d后，将早梨带芽茎段取出，重新接种到继代培养基(ms+1-2mg/l噻苯隆+0.2-0.5mg/liba+30g/l蔗糖+7.5g/l琼脂)上进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间16h/d，光强1500-2500lx，可成活形成完整试管苗。