油菜素内酯和水杨酸的组合物提高三氯生胁迫下烟草光合作用的应用的制作方法

本发明涉及植物生物学领域，更具体地，涉及一种油菜素内酯和水杨酸的组合物提高三氯生胁迫下烟草光合作用的应用。

背景技术：

三氯生(tcs)作为杀菌消毒物质广泛用于香皂、漱口水、化妆品、洗涤用品、头发定型水等个人护理品,也用于医用器械的消毒,以及纺织品(尤其是内衣等贴身衣物)出厂前的消毒、抗菌处理。随着工业的发展及个人护理产品的广泛使用，tcs被大量使用，向环境中排放的tcs的量也随之增加，tcs在湖水、沉积物、水生生物甚至母乳中被频繁检出。土壤和水体中tcs的增加，影响植物的光合作用，进而影响植物的正常生长和发育。

油菜素内酯(br)是一种天然的留醇内酯结晶类化合物，在植物种子、花、叶片等器官中均存在，与植物生长发育过程紧密相关。随着对它生理活性研究的深入，目前已成为公认的高效无害的植物生长激素。br具有非常广泛的生理功能，主要具有调节植物根的生长、茎的伸长、叶的伸展、微管系统的发育、植物在黑暗条件下的形态建成、花粉管的生长、种子的发育等生理功能。除此之外，br还具有抗逆保护作用，可缓解多种非生物胁迫对植物造成的伤害。

水杨酸(sa)，即邻羟基苯甲酸，是一类小分子酚类有机化合物，是由植物体内合成介导植物产生系统获得性抗性，是一种重要的植物激素。研究表明，sa的重要生理功能是能够激活植物过敏反应和系统获得性抗性。sa在植物体内的生理作用还广泛表现在植物生长、发育、成熟、衰老等生理过程的调控及抗盐、抗旱、抗低温、抗紫外线、抗重金属等抗逆反应的诱导过程中。

目前，现有报道大多是关于br与sa分别与植物的抗旱性、抗盐性、抗寒性等的研究，尚未有br与sa共同作用提高三氯生胁迫下烟草光合作用的报道。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种油菜素内酯和水杨酸的组合物提高三氯生胁迫下烟草光合作用的应用。

本发明的技术方案概述如下：

油菜素内酯和水杨酸的组合物提高三氯生胁迫下烟草光合作用的应用，所述油菜素内酯和水杨酸的组合物按质量比为1:(0.7-7.2)的比例由油菜素内酯和水杨酸组成。

优选地，油菜素内酯和水杨酸的质量比为1:2.2。

本发明的优点:

(1)本发明的组合物无污染，对植物没有伤害。

(2)本发明的成本较低，实验证明油菜素内酯和水杨酸的组合物提高三氯生胁迫下烟草光合作用。

附图说明

图1是烟草在不同处理情况下净光合速率(pn)。

图2是烟草在不同处理情况下蒸腾速率(tr)。

图3是烟草在不同处理情况下气孔导度(gs)。

图中，wt为对照例1野生型烟草；wt+tcs为对照例2；wt+tcs+br为对照例3；wt+tcs+sa为对照例4；wt+tcs+br+sa为实施例4。

具体实施方式

本发明以野生型烟草为例，是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，但并不对本发明作任何限制。

野生型烟草种子、营养土、蛭石、珍珠岩均为市售。

tcs试剂(三氯生)购自天津鼎国生物公司，纯度98％。

br试剂(油菜素内酯)购自天津鼎国生物公司，纯度为分析纯。

sa试剂(水杨酸)购自天津鼎国生物公司，纯度98％。

吐温20购自天津鼎国生物公司。

光合指标的测定:采用li-6400便携式光合作用测定系统(li-cor，usa)测定，在室温和大气co2浓度下测定，光照强度为600μmol/m²/s，叶温为25℃。

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

油菜素内酯和水杨酸的组合物，由油菜素内酯和水杨酸组成。油菜素内酯和水杨酸的质量比为1:2.2。

实施例2

油菜素内酯和水杨酸的组合物，由油菜素内酯和水杨酸组成。油菜素内酯和水杨酸的质量比为1:0.7。

实施例3

油菜素内酯和水杨酸的组合物，由油菜素内酯和水杨酸组成。油菜素内酯和水杨酸的质量比为1:7.2。

实施例4

油菜素内酯和水杨酸的组合物提高三氯生胁迫下烟草光合作用的应用，包括以下步骤：

(1)进行种子萌发：

挑取饱满均一成熟的野生型烟草种子，将种子播种于装有营养土、蛭石和珍珠岩的塑料盆中，三者的体积比为2:2:1，在25℃/22℃昼夜、光暗16h/8h交替的温室中培养，待野生型烟草种子萌发、生长；

(2)烟草幼苗的处理：

当烟草幼苗生长至5叶1心时，选取形态良好与长势一致的烟草幼苗，移入三氯生(tcs)浓度为50mg/kg的土壤中，每4d浇灌1次清水，每2d喷施1次实施例1的组合物的溶液(以乙醇为溶剂，配制油菜素内酯终浓度为1mg/ml、水杨酸终浓度为2.2mg/ml的母液，使用时，用水稀释至油菜素内酯终浓度为0.3mg/l、水杨酸终浓度为0.66mg/l)，喷洒时加入体积分数为0.2％的吐温20作为展开剂，用喷雾器在植株叶片正反两面均匀喷施，以叶片正反两面全部湿润且无液体滴下，以保证喷施充分、均匀。

(3)光合指标测定：

在烟草苗处理21d后，从上而下选取第2片叶片，于中午12:00测定烟草的净光合速率(pn)、蒸腾速率(tr)和气孔导度(gs)。

对照例1：

步骤(1)同实施例4步骤(1)；

(2)烟草幼苗的处理：

当烟草幼苗生长至5叶1心时，选取形态良好与长势一致的烟草幼苗，移入土壤(不含三氯生)中，每4d浇灌1次清水，每2d喷施1次蒸馏水，喷洒时加入体积分数为0.2％的吐温20作为展开剂，用喷雾器在植株叶片正反两面均匀喷施，以叶片正反两面全部湿润且无液体滴下，以保证喷施充分、均匀。

步骤(3)同实施例4步骤(3)。

对照例2：

步骤(1)同实施例4步骤(1)；

(2)烟草幼苗的不同处理：

当烟草幼苗生长至5叶1心时，选取形态良好与长势一致的烟草幼苗，移入tcs浓度为50mg/kg的土壤中，每4d浇灌1次清水，每2d喷施1次蒸馏水，喷洒时加入体积分数为0.2％的吐温20作为展开剂，用喷雾器在植株叶片正反两面均匀喷施，以叶片正反两面全部湿润且无液体滴下，以保证喷施充分、均匀。

步骤(3)同实施例4步骤(3)。

对照例3：

步骤(1)同实施例4步骤(1)；

(2)烟草幼苗的不同处理：

当烟草幼苗生长至5叶1心时，选取形态良好与长势一致的烟草幼苗，移入tcs浓度为50mg/kg的土壤中，每4d浇灌1次清水，每2d喷施1次0.96mg/l的br，喷洒时加入体积分数为0.2％的吐温20作为展开剂，用喷雾器在植株叶片正反两面均匀喷施，以叶片正反两面全部湿润且无液体滴下，以保证喷施充分、均匀。

步骤(3)同实施例4步骤(3)。

对照例4：

步骤(1)同实施例4步骤(1)；

(2)烟草幼苗的不同处理：

当烟草幼苗生长至5叶1心时，选取形态良好与长势一致的烟草幼苗，移入tcs浓度为50mg/kg的土壤中，每4d浇灌1次清水，每2d喷施1次0.96mg/l的sa，喷洒时加入体积分数为0.2％的吐温20作为展开剂，用喷雾器在植株叶片正反两面均匀喷施，以叶片正反两面全部湿润且无液体滴下，以保证喷施充分、均匀。

步骤(3)同实施例4步骤(3)。

实验结果：

从图1、2、3中可以看出，对照例2与对照例1相比，说明tcs胁迫下，烟草的光合速率明显下降，对照例3、4说明分别喷施br和sa能一定程度上提高烟草的光合速率，实施例4表明喷施br和sa(即实施例1的组合物配制)能更好地保护烟草的光合机构、提高烟草的光合作用。

实验证明，实施例2、实施例3的组合物对烟草净光合速率(pn)、蒸腾速率(tr)和气孔导度(gs)的影响与实施例1的组合物相似。