专利名称：人工合成无融合生殖异源三倍体及单体附加系甜菜的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的人工合成的新种质培育方法，即人工合成无融合生殖异源三倍体甜菜(VVC)及无融合生殖单体附加系甜菜(VV+1C)。
无融合生殖是指不经过精卵细胞融合，通过种繁殖的特殊生殖现象(自然克隆)。无融合生殖广泛存在于植物界，但因其出现机率极低很难利用，成为生物学的世界难题。国内外报导一般限于观察到无融合生殖现象，尚未找到解决无融合生殖的基本途径。
本发明的目的在于提出一种人工合成无融合生殖的基本途径。人工杂交培育无融合生殖异源三倍体甜菜及单体附加系甜菜。在甜菜的白花甜菜组多倍体野生种中存在着无融合生殖现象，为了把融合生殖基因引入栽培甜菜通过栽培和白菜甜菜远缘杂交，人工合成出具有无融合生殖特性的异源三倍体甜菜(VVC)和带有单个白菜甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系(VV+1C)。
本发明的主要内容是通过栽培甜菜(Beta vulgaris L)染色体组VV 2n＝18和白菜甜菜(Beta corolifeora zoss)染色体组CCCC 2n＝36(一个V或C代表9个染色体)，远缘杂交，杂交方法如下
①、无融合生殖异源三倍体
传递率80％以上②、无融合生殖单体附加系VV+1C 2n＝19(18+1)，共有9种类型，其中之一为100％传递的无融合生殖单体附加系即VV+1C→VV+1C。称之为无融合生殖单体附加系。
异源三倍体甜菜(VVC)具有无融合生殖特性。
形态特征表现为平展深绿色叶片。植株繁茂，明显倾向于野生亲本，根形不整齐，多岔根。
经过形态学、细胞学有丝分裂中期染色体核型观察、同工酶分析及世代间传递率分析证明，获得的无融合生殖的异源三倍体甜菜(VVC)传递率达80％以上，获得的带有单个白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系，无融合生殖传递率近于100％。
本发明的技术效果在于，通过栽培甜菜和白花甜菜种间杂交及回交获得了传递率达80％的无融合生殖的异源三倍体甜菜(VVC)，获得了传递率100％的无融合生殖单体附加系说明我们经过远缘杂交，后代选拔染色体工程已经成功的人工合成了新的世界上没有的特殊材料，成功的把白菜甜菜的无融合生殖基因定位在单个染色体上，把野生种的基因引到栽培甜菜之中，为在世界上克隆第一个无融合生殖基因提供了重要条件。
一旦无融合生殖基因克隆出来，就可将其转化到栽培甜菜中，这样就可使多倍体杂交甜菜，或其它杂交甜菜以及可能的其它杂种作物直接进行无融合生殖传递，只要将这样的种子交给农民之后，就不需要再制种了，因为杂交种的杂种优势已经固定了，只要农民自己收获种子就可做为下一年生产的种子了，它们是不变的，所以将引起种子制度的变革。
实现本发明的实施例，在黑龙江大学生物工程系实验园进行杂交试验实施例1栽培甜菜与白花甜菜杂交，获得了异源三倍体甜菜(VVC)，无融合生殖传递率达80％。
实施例2由栽培甜菜与白花甜菜杂交又回交，获得了完整的单体附加系列共9种类型，其中一种带有白花甜菜特定染色体的栽培甜菜单体附加系，无融合生殖传递率达到100％。
权利要求
1.人工合成无融合生殖异源三倍体及单体附加系甜菜，其特征在于通过栽培甜菜和白花甜菜远缘杂交，杂交方法为
①、无融合生殖异源三倍体
传递率80％以上②、无融合生殖单体附加系VV+1C 2n＝19(18+1)，共有9种类型，其中之一为100％传递的无融合生殖单体附加系即VV+1C→VV+1C。
全文摘要
本发明涉及一种人工合成的新种质培育方法,无融合生殖的异源三倍体甜菜(VVC)及单体附加系(VV+1C)甜菜的培育方法,采用栽培甜菜与白菜甜菜杂交及回交的后代,经过形态学、细胞学有丝分裂中间染色体核型观察,同工酶分析,世代间传递率分析证明,异源三倍体甜菜(VVC)无融合生殖传递率达80%,带有白花甜菜染色体的栽培甜菜特定的单体附加系无融合生殖传递率近100%。
文档编号A01G1/02GK1263695SQ9911269
公开日2000年8月23日 申请日期1999年2月5日 优先权日1999年2月5日
发明者郭德栋, 贾树彪, 康传红, 李勇, 王桂芝, 刘丽苹, 高东杰 申请人:黑龙江大学