京农科728三系配套杂交种制种方法_3

文档序号:8208418阅读:来源:国知局
方法,包括如下步骤:以玉米不育系S京MC01为不育系,玉米自交 系京MC01为保持系,玉米自交系京2416为恢复系,进行三系配套制种,得到杂交种京农科 728〇
2. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于: 所述不育系S京MC01为按照包括如下步骤的方法转育: a) 玉米不育系S京724做母本,京MC01做父本杂交,得到雄性不育杂交子代F1; b) 以所述雄性不育杂交子代匕为母本、与京MC01回交,得到雄性不育BCjf群体; c) 以所述雄性不育代单株为母本、与京MC01继续回交,得到雄性不育BC 2代群体; d) 以所述雄性不育BC2代单株为母本、与京MC01继续回交,得到京MC01的雄性不育系。
3. 根据权利要求2所述的方法,其特征在于: 在步骤b)和c)之间,还包括代分子鉴定的步骤,所述BC i代分子鉴定为利用40 对SSR核心引物中在S京724和京MC01间存在差异的11对引物umc2105k3、phi053k2、 bnlg2291k4、bnlg2305k4、umcl545y2、umcll25y3、bnlg240kl、umc2160k3、umcl936k4、 umcl231k4和phi041y6分别对所述雄性不育群体单株进行PCR扩增,选择与京MC01 遗传相似度在96-97. 5%的BCdf单株; 在步骤c)和d)之间,还包括BC2代分子鉴定的步骤,所述BC2代分子鉴定为用引物A对 所述雄性不育此2代群体单株进行PCR扩增,选择扩增图谱与用所述引物A对所述京MC01 进行PCR扩增得到的图谱相同的雄性不育BC 2R单株; 所述引物A为BC2代单株对应的母本BC i代与京MC01相比扩增带型不同的SSR引物; 所述核心引物umc2105k3是由序列表中序列9所示的单链DNA分子和序列表中序列10 所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物Phi053k2是由序列表中序列11所示的单链DNA分子和序列表中序列12 所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物bnlg2291k4是由序列表中序列15所示的单链DNA分子和序列表中序列 16所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物bnlg2305k4是由序列表中序列19所示的单链DNA分子和序列表中序列 20所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物umcl545y2是由序列表中序列25所示的单链DNA分子和序列表中序列 26所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物umcll25y3是由序列表中序列27所示的单链DNA分子和序列表中序列 28所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物bnlg240kl是由序列表中序列29所示的单链DNA分子和序列表中序列 30所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物umc2160k3是由序列表中序列65所示的单链DNA分子和序列表中序列 66所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物umcl936k4是由序列表中序列67所示的单链DNA分子和序列表中序列 68所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物umcl231k4是由序列表中序列75所示的单链DNA分子和序列表中序列 76所示的单链DNA分子组成; 所述核心引物Phi041y6是由序列表中序列77所示的单链DNA分子和序列表中序列78 所示的单链DNA分子组成。
4. 根据权利要求3所述的方法,其特征在于: 在步骤b)和c)之间的代分子鉴定前还包括代表型鉴定的步骤,所述此^戈表 型鉴定为选取所述雄性不育代群体中表型与京MC01 -致的BC :代单株; 在步骤c)和d)之间的BC2代分子鉴定前还包括BC2代表型鉴定的步骤,所述BC 2代表 型鉴定为选取所述雄性不育BC2代群体中表型与京MC01 -致的BC 2代单株。
5. 根据权利要求2-4中任一所述的方法,其特征在于: 所述不育系S京724为按照包括如下步骤的方法选育:以玉米S型细胞质雄性不育系 MD32 CGMCC No. 8657为供体、玉米自交系京724为受体,进行回交转育,得到京724的雄性 不育系S京724。
6. 根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述回交次数为3次; 所述回交转育具体包括如下步骤: 1) 以玉米雄性不育系MD32 CGMCC No. 8657为供体、玉米自交系京724为受体,杂交,得 到雄性不育杂交子代F1; 2) 以雄性不育杂交子代匕为母本与京724回交,得到雄性不育BC :代群体; 3) 以雄性不育代单株为母本与京724继续回交,得到雄性不育此2代群体; 4) 以雄性不育BC2代单株为母本与京724继续回交,得到京724的雄性不育系S京724。
7. 根据权利要求6所述的方法,其特征在于:在步骤2)和步骤3)之间,还包括如 下分子鉴定的步骤:从所述雄性不育代群体中选取与所述玉米京724遗传相似度在 92. 5-95 %的雄性不育BCjf单株。
8. 根据权利要求7所述的方法,其特征在于:在所述分子鉴定前还包括如下步骤:从所 述雄性不育代群体中选取表型与所述玉米京724 -致的雄性不育BC :代单株; 在步骤3)和步骤4)之间,还具体包括如下分子鉴定的步骤:从所述雄性不育BC2代群 体中选取与所述玉米京724遗传相似度在98. 75% -100%的雄性不育BC2R单株; 在所述分子鉴定前还具体包括如下步骤:从所述雄性不育BC2R群体中选取表型与所 述玉米京724 -致的雄性不育BC2R单株。
9. 一种培育不育系S京MC01的方法,包括如下步骤: a) 玉米不育系S京724做母本,京MC01做父本杂交,得到雄性不育杂交子代F1; b) 以所述雄性不育杂交子代匕为母本与京MC01回交,得到雄性不育BCjf群体; c) 以所述雄性不育代单株为母本与京MC01继续回交,得到雄性不育BC 2代群体; d) 以所述雄性不育BC2代单株为母本与京MC01继续回交,得到京MC01的雄性不育系; 在步骤b)和c)之间,还包括代分子鉴定的步骤,所述代分子鉴定为用权利 要求 3 中的 SSR 核心引物 umc2105k3、phi053k2、bnlg2291k4、bnlg2305k4、umcl545y2、 umcll25y3、bnlg240kl、umc2160k3、umcl936k4、umcl231k4 和 phi041y6 分别对所述雄性不 育群体单株进行PCR扩增,选择与京MC01遗传相似度在96-97. 5%的BC :代单株; 在步骤c)和d)之间,还包括BC2代分子鉴定的步骤,所述BC2代分子鉴定为用引物A对 所述雄性不育此2代群体单株进行PCR扩增,选择扩增图谱与用同样引物A对所述京MC01 进行PCR扩增得到的图谱相同的雄性不育BC 2R单株; 所述引物A为BC2代单株对应的母本BC i代与京MC01相比扩增带型不同的SSR引物。 在步骤b)和c)之间的代分子鉴定前还具体包括代表型鉴定的步骤,所述Bq 代表型鉴定为选取所述雄性不育代群体中表型与京MC01 -致的BC :代单株; 在步骤c)和d)之间的BC2代分子鉴定前还具体包括BC2代表型鉴定的步骤,所述BC 2 代表型鉴定为选取所述雄性不育BC2代群体中表型与京MC01 -致的BC 2代单株。
10.权利要求1-9所述方法中的所述玉米不育系S京MC01在杂交制种中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种京农科728三系配套杂交种制种方法,本发明提供了一种杂交制种的方法,包括如下步骤:以玉米不育系S京MC01为不育系,玉米自交系京MC01为保持系,玉米自交系京2416为恢复系,进行三系配套制种,得到杂交种京农科728。本发明的实验证明,本发明利用育成的不育系S京MC01、保持系京MC01和恢复系京2416进行京农科728三系配套杂交种制种,配制的不育化杂交种京农科728种子在产量、抗性及其他农艺性状上与常规制种方法生产的京农科728种子基本相同。CGMCC No.865720131225
【IPC分类】A01H1-02, C12Q1-68
【公开号】CN104521738
【申请号】CN201410743766
【发明人】赵久然, 宋伟, 邢锦丰, 王元东, 段民孝, 刘春阁, 冯培煜, 张如养, 王凤格, 毛振武, 李瑞媛, 王乃顺, 王文广, 张莎莎
【申请人】北京市农林科学院
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月8日
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