桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及桦褐孔菌技术领域，更具体而言，涉及桦褐孔菌连续深层发酵液和发 酵粉的生产方法。
【背景技术】
[0002] 桦褐孔菌属担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐孔菌属，是一种生于桦树 上的药用真菌，其子实体呈现类似于碳的黑色块状形态。当桦褐孔菌10~15年后起药效 时，它能吸干桦木的精髓，使树木枯死。桦褐孔菌主要分布于俄罗斯北部、北欧、中国黑龙 江、日本(北海道)，滋生在北半球北炜40°~50°的地区。桦褐孔菌化学成分有多糖、桦褐 孔菌素、桦褐孔菌醇、多种氧化三萜类化合物、栓菌酸、多种羊毛留醇型三萜类化合物、叶酸 衍生物、芳香族的香草酸、丁香酸及Y羟基苯甲酸，还有报道称已分离出单宁化合物、类固 醇、生物碱类化合物、黑色素类、低分子多酚类及木质素类化合物.桦褐孔菌含有大量的抗 癌、降血压、降血糖、复活免疫作用的植物纤维类多糖体。可以提高免疫细胞的活力，抑制癌 细胞扩散和复发，在胃肠内防止致癌物质等有害物质的吸收，并促进排泄。桦褐孔菌的精制 菌粉对糖尿病治愈率达93%。
【发明内容】
[0003] 本发明提供一种将发酵设施技术和中草结合的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵 粉的生产方法。
[0004] 本发明采用的技术方案为： 桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，按照以下步骤进行： a、 母种纯化； b、 桦褐孔菌前发酵； c、 连续混合深层发酵； d、 发酵液的制备； e、 发酵粉的制备。
[0005] 所述a步骤按照以下方式进行：1)配制原料；2)制作培养基；3)分装试管；4)塞 皮塞；5)试管包扎；6)培养基灭菌；7)摆放斜面；8)检查灭菌效果；9)母种接种；10)培养 桦褐孔菌母种； 上述配制原料具体为：按照质量百分比的下列组分分别进行配置，桦褐孔菌子实体 0. 5%，马铃薯5%，葡萄糖0. 05%，蛋白胨0. 1%，琼脂0. 4%，磷酸二氢钾0. 012%，硫酸镁0. 05% 和余量的水，PH为7 ; 上述制作培养基具体为：桦褐孔菌子实体磨成80目的细粉，将桦褐孔菌子实体和马铃 薯加入1000ml的水中，煮沸后微火保持30分钟，然后用双层沾湿纱布过滤，之后加入琼脂 继续加热，并不断用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶化，再依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、蛋白胨、 硫酸镁，继续加热并搅拌至全部溶化，最后用清水补足至1000毫升，完成培养基制作。
[0006] 所述b步骤按照以下方式进行：1)配制原料；2)培养液制作与灭菌；3)培养液接 种；4)液体菌种的培养； 上述配制原料具体为：按照质量百分比的下列组分分别进行配置，桦褐孔菌子实体 0. 5%，马铃薯5%，葡萄糖0. 05%，玉米粉5%，麦麸3%，蛋白胨0. 1%，琼脂0. 4%，磷酸二氢钾 0. 012%，硫酸镁0. 05%和余量的水，PH为7 ; 上述培养液制作与灭菌具体为：桦褐孔菌子实体磨成80目的细粉，将桦褐孔菌子实体 和马铃薯加入l〇〇〇ml的水中，煮沸后微火保持30分钟，然后用双层沾湿纱布过滤，之后加 入琼脂继续加热，并不断用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶化，再依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、 玉米粉、麦麸、蛋白胨、硫酸镁，继续加热并搅拌至全部溶化，最后用清水补足至1000毫升， 完成培养液制作；培养液熬制后要分装在发酵器中，装入量为总体容量的60%，然后用封口 纸或封口膜将器具口封包住，将包装好的液体器具装入高压锅内进行高压灭菌，待温度升 至121°C开始计时，温度控制在121 - 123°C，维持30分钟即可达到灭菌效果。
[0007] 所述c步骤按照以下方式进行：1)连续发酵液体培养基；2)连续发酵罐的消毒； 3)装料灭菌；4)接种；5)发酵液体的培养； 上述连续发酵液体培养基具体为：按照质量百分比的下列组分组成，桦褐孔菌子实体 干粉2%，葡葡糖0. 5%，磷酸二氢钾0. 15%，硫酸镁0. 075%，马铃薯浓缩液5%，蛋白胨0. 05%、 消泡剂60mL/100L、50目的玉米粉3%、麦麸5%、早莲草0. 15%、生白术0. 15%、柴胡0. 1%、炒 栀子0. 1%、牡丹皮0. 15%、制女贞子0. 15%、茯苓0. 15%、白茅根0. 15%、生白芍0. 15%、蔓荆子 0. 1%、熟地黄0. 15%、党参0. 15%、芦根0. 15%、炒杏仁0. 1%和余量的水组成。
[0008] 所述d步骤按照以下方式进行：使用过滤机在温度25~28°C开始过滤，回流过滤 液10分钟，收集澄清的滤液，即得桦褐孔菌发酵液；过滤所得的液体经超高温瞬时杀菌机 杀菌，杀菌温度（110±5) °C，时间10秒，杀菌过的液体放至暂存罐急速冷却到50~55°C， 进行浓缩；在真空度〇. 096~0. 099兆帕、液体温度50~55°C、蒸汽压力0. 196~0. 294兆 帕下浓缩，浓缩至可溶性固形物达42 %~45%后进行二次杀菌；将浓缩好的液体用液体灌 装机将液体装入专用瓶(袋）中，然后在90°C杀菌30分钟；将成品在-18~-25°C冷库中恒 温冷藏。
[0009] 所述e步骤按照以下方式进行：把过滤后的发酵固形物用低温冻干设备全部干燥 后，再用低温磨粉设备磨成120目的细粉，即得桦褐孔菌发酵粉，再进行真空包装保存。
[0010] 本发明所具有的有益效果为：本发明将发酵设施技术和中草进行结合，以其桦褐 孔菌菌种本身特有的生物活性和营养成分及化学特性结合中草药进一步连续深层发酵，所 生产的液体和固形物具有平衡血糖、降低高血脂、高血压、改善心血管疾病、改善胃肠功能 调节血脂、镇痛、解毒、抗过敏，提高血液供氧能力，增强脑细胞的活性，增强记忆力、防止血 栓、血管硬化和中风及改善痴呆症状。
【具体实施方式】
[0011] 下面通过具体实施例对本发明作进一步详细的描述。
[0012] 本发明的工艺流程按照如下方式进行：1)母种纯化；2)桦褐孔菌前发酵；3)连续 混合深层发酵；4)发酵液的制备；5)发酵粉的制备。
[0013] 一、母种纯化 1、配方：l〇〇〇ml为例 桦褐孔菌子实体0. 5%，马铃薯5%，葡萄糖0. 05%，蛋白胨0. 1%，琼脂0. 4%，磷酸二氢钾 0? 012%，硫酸镁 0? 05%，PH7。
[0014] 2、培养基制作 选择优质的马铃薯，去皮，挖去芽眼，削掉青绿部分，切成长〇. 5毫米的薄片，称取200 克，桦褐孔菌子实体要提前磨成80目的细粉。加水1 000毫升，煮沸后微火保持30分钟， 马铃薯煮熟而不酥，即8成熟左右。然后用2层沾湿纱布过滤，之后加入琼脂继续加热，并 不断用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶化，最后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、蛋白胨、硫酸镁等， 继续加热并搅拌至全部溶化。最后用清水补足至1000毫升，即可进行分装。
[0015] 3、分装试管。左手持5支试管管口朝上，下端整齐，上移试管至漏斗软管，插入试 管内约3厘米。右手捏紧软管止流夹，使培养基液体流入试管，每支试管装量约为试管长 度的1/5即可。此时松开止流夹液体停止流入。将试管下移离开软管，再分装第2支试管， 依此方法分装其他试管，直至全部装完。分装试管要求速度要快，尤其在低温季节，以防止 培养基凝固。装量要准确，因为装量偏多摆成的斜面变短，又浪费培养基，装入量偏少则使 摆成的斜面太薄，营养少，菌丝难以正常生长。注意避免将培养基黏附到试管管口，以免造 成粘着皮塞的现象，还易引起皮塞上孳生杂菌，给菌种质量留下隐患。
[0016] 4、塞皮塞，用手把专用皮塞塞入试管，皮塞要紧贴管壁不起皱纹，皮塞塞入管中的 部分约为2. 5厘米，外露部分约占皮塞总长的1/3。
[0017] 5、试管包扎。试管塞好皮塞后，取10支同样规格的试管，用牛皮纸或双层报纸将 棉塞包住，并向下延伸到试管中部，用粗棉线将其扎成一把。
[0018] 6、培养基灭菌。母种培养基多采用手提式高压灭菌锅进行灭菌，灭菌过程是：检查 高压蒸汽灭菌锅的压力表及各部位是否灵活、可靠；尤其注意检查安全阀是否发生堵死或 锈死。在锅内加入约3千克自来水，加至支架下缘。将捆好的培养基棉塞向上垂直放入菌 筐(桶)，将锅盖上垂下的排气管插入套筒内壁的导气管中，然后双手同时用力，分别将对角 线方向的两个螺丝拧紧。封盖后关闭排气阀开始加热，当加热至压力达〇. 05兆帕时，打开 排气阀，排尽冷空气，待压力降至〇后，即可关闭排气阀。最好依上法排2次。继续加热