保护下从接种阀门将菌种接入，一般二人配合进行，用浸湿酒精的火环套在接种口 上，关闭进气阀门，打开排气阀门，让发酵罐内压力归零，第一人点着火环，用镊子拿掉接种 阀门口的酒精棉球，打开接种阀门，第二人手持摇瓶，将金属管口放入火焰内，第一人用镊 子拔掉管头内的棉塞，第二人将管子插入接种阀门内，斜提摇瓶接入菌种，接完后拔出管 子，关闭阀门，去掉火环，接种口重新用75%医用棉球封好，打开进气阀门，通入无菌空气、 发酵培养。
[0037] 5、发酵液的培养 接种后以180转/分的叶轮速度搅拌培养72小时，中间每隔12小时取样检测糖、氮、pH值、液体无菌度。放罐标准是发酵液pH值下降至5,残糖含量降至2. 5左右，氨态氮不 超过30毫克/升，菌球浓度达到1000~1500个/毫升，或经3000转/分离心10分，固 形物湿重在20~25克/100毫升。检查发酵液质量项目包括：纯度检查，镜检或平板培 养无细菌、霉菌；活力检查，镜检菌球边缘菌丝分枝细密，用结晶紫染色时着色深，菌丝 细胞原生质尚未出现凝集现象，醪液静止5分，固形物不下沉；菌球大小，80%菌球直径 小于1毫米；将温控仪温度设定到23- 25°C，罐内压力保持0. 03- 0. 04MPa，通气量：料： 气在1 : (0. 2 - 0. 5)v/v发酵10天即可。
[0038] 四、桦褐孔菌液体分离过滤(发酵液的制备） 1、使用专用过滤机在温度23~25°C开始过滤，要求滤网达到120目，回流过滤液10分 钟，收集澄清的滤液。即得桦褐孔菌发酵液。
[0039] 2、一次杀菌：过滤所得的液体经超高温瞬时杀菌机杀菌，杀菌温度（110±5) °C， 时间10秒。杀菌过的液体放至暂存罐急速冷却到50~55°C，进行浓缩。
[0040] 3、真空浓缩：在真空度0? 096~0? 099兆帕、液体温度50~55 °C、蒸汽压力 0. 196~0. 294兆帕下浓缩，浓缩至可溶性固形物达42%~45%后进行二次杀菌。
[0041] 4、二次杀菌：将浓缩好的液体用液体灌装机将液体装入专用瓶(袋）中，然后在 90C杀囷30分钟。
[0042] 5、冷藏：将成品在-18~_25°C冷库中恒温冷藏。
[0043] 6、产品质量指标 (1).感官指标 色泽：黑褐色液体，半透明；滋味及气味：具有桦褐孔菌特有的香气及气味，稀释到原 汁浓度时无焦糊味，无异味；组织形态：组织为半透明均匀液体，五分层、沉淀现象；杂质： 无外来杂质。
[0044] (2)?理化指标 可溶性固形物42% ±1% ;pH值5. 0~7. 0。
[0045] (3)?微生物指标 细菌总数< 3000个/毫升；大肠菌群、致病菌不得检出。
[0046] 五、过滤固形物冻干磨粉(发酵粉的制备） 1、 将桦褐孔菌发酵液过滤固形平铺于冻干盘内，滤上物平铺于冻干盘时应保持其高度 均匀，以减少冻干后含水量的批内差，高度不可大于2cm，以免影响冻干效果； 2、 冻干盘内待冻干物高度不能低于1. 5cm; 3、 开启冻干机，运行情况见下表：
4、 把过滤后的发酵固形物用低温冻干设备全部干燥后，再用低温磨粉设备磨成120目 的细粉，再进行真空包装保存。
【主权项】
1. 桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，其特征在于，按照以下步骤进行： a、 母种纯化； b、 桦褐孔菌前发酵； c、 连续混合深层发酵； d、 发酵液的制备； e、 发酵粉的制备。2. 根据权利要求1所述的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，其特征在 于，所述a步骤按照以下方式进行：1)配制原料；2)制作培养基；3)分装试管；4)塞皮塞； 5)试管包扎；6)培养基灭菌；7)摆放斜面；8)检查灭菌效果；9)母种接种；10)培养桦褐孔 菌母种； 上述配制原料具体为：按照质量百分比的下列组分分别进行配置，桦褐孔菌子实体 0. 5%，马铃薯5%，葡萄糖0. 05%，蛋白胨0. 1%，琼脂0. 4%，磷酸二氢钾0. 012%，硫酸镁0. 05% 和余量的水，PH为7 ; 上述制作培养基具体为：桦褐孔菌子实体磨成80目的细粉，将桦褐孔菌子实体和马铃 薯加入1000 ml的水中，煮沸后微火保持30分钟，然后用双层沾湿纱布过滤，之后加入琼脂 继续加热，并不断用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶化，再依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、蛋白胨、 硫酸镁，继续加热并搅拌至全部溶化，最后用清水补足至1000毫升，完成培养基制作。3. 根据权利要求1所述的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，其特征在 于，所述b步骤按照以下方式进行：1)配制原料；2)培养液制作与灭菌；3)培养液接种；4) 液体菌种的培养； 上述配制原料具体为：按照质量百分比的下列组分分别进行配置，桦褐孔菌子实体 0. 5%，马铃薯5%，葡萄糖0. 05%，玉米粉5%，麦麸3%，蛋白胨0. 1%，琼脂0. 4%，磷酸二氢钾 0. 012%，硫酸镁0. 05%和余量的水，PH为7 ; 上述培养液制作与灭菌具体为：桦褐孔菌子实体磨成80目的细粉，将桦褐孔菌子实体 和马铃薯加入1000 ml的水中，煮沸后微火保持30分钟，然后用双层沾湿纱布过滤，之后加 入琼脂继续加热，并不断用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶化，再依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、 玉米粉、麦麸、蛋白胨、硫酸镁，继续加热并搅拌至全部溶化，最后用清水补足至1000毫升， 完成培养液制作；培养液熬制后要分装在发酵器中，装入量为总体容量的60%，然后用封口 纸或封口膜将器具口封包住，将包装好的液体器具装入高压锅内进行高压灭菌，待温度升 至121°C开始计时，温度控制在121 - 123°C，维持30分钟即可达到灭菌效果。4. 根据权利要求1所述的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，其特征在 于，所述c步骤按照以下方式进行：1)连续发酵液体培养基；2)连续发酵罐的消毒；3)装料 灭菌；4)接种；5)发酵液体的培养； 上述连续发酵液体培养基具体为：按照质量百分比的下列组分组成，桦褐孔菌子实体 干粉2%，葡葡糖0. 5%，磷酸二氢钾0. 15%，硫酸镁0. 075%，马铃薯浓缩液5%，蛋白胨0. 05%、 消泡剂60mL/100L、50目的玉米粉3%、麦麸5%、早莲草0. 15%、生白术0. 15%、柴胡0. 1%、炒 栀子0. 1%、牡丹皮0. 15%、制女贞子0. 15%、茯苓0. 15%、白茅根0. 15%、生白芍0. 15%、蔓荆子 0. 1%、熟地黄0. 15%、党参0. 15%、芦根0. 15%、炒杏仁0. 1%和余量的水组成。5. 根据权利要求1所述的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，其特征在 于，所述d步骤按照以下方式进行：使用过滤机在温度25~28°C开始过滤，回流过滤液10 分钟，收集澄清的滤液，即得桦褐孔菌发酵液；过滤所得的液体经超高温瞬时杀菌机杀菌， 杀菌温度（110±5) °C，时间10秒，杀菌过的液体放至暂存罐急速冷却到50~55°C，进行浓 缩；在真空度〇. 096~0. 099兆帕、液体温度50~55°C、蒸汽压力0. 196~0. 294兆帕下 浓缩，浓缩至可溶性固形物达42%~45%后进行二次杀菌；将浓缩好的液体用液体灌装机 将液体装入专用瓶(袋）中，然后在90°C杀菌30分钟；将成品在-18~-25°C冷库中恒温冷 藏。6.根据权利要求1所述的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法，其特征在 于，所述e步骤按照以下方式进行：把过滤后的发酵固形物用低温冻干设备全部干燥后，再 用低温磨粉设备磨成120目的细粉，即得桦褐孔菌发酵粉，再进行真空包装保存。
【专利摘要】本发明涉及桦褐孔菌技术领域，更具体而言，涉及桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法；提供一种将发酵设施技术和中草结合的桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法；按照以下步骤进行：a、母种纯化；b、桦褐孔菌前发酵；c、连续混合深层发酵；d、发酵液的制备；e、发酵粉的制备；本发明将发酵设施技术和中草进行结合，以其桦褐孔菌菌种本身特有的生物活性和营养成分及化学特性结合中草药进一步连续深层发酵；本发明主要应用在人体保健及治疗方面。
【IPC分类】A01G1/04
【公开号】CN104956925
【申请号】CN201510440658
【发明人】刘随记
【申请人】刘随记
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2015年7月24日