一种紫叶稠李繁殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种紫叶稠李繁殖方法。
【背景技术】
[0002] 紫叶稠李（Prunus virginiana)又名加拿大红樱，蔷薇科（Rosaceae)落叶乔木， 原产北美，20世纪50年代从美洲稠李（Prunus virginiana var. schubert)中选育出来， 植株高8~14m，树皮灰褐色，小枝光滑树形自然开张，叶片繁茂，叶片长椭圆形至倒卵形， 长8~14cm宽5~7cm，缘具粗齿短枝开花，叶腋抽生总状花序，花序长4~6cm，花白色， 花期4~6月果实紫红色，味苦，果皮光亮，果期7~9月根系发达，适生性强，喜阳光及温 暖湿润的气候环境，在肥沃疏松而排水良好的沙质壤土上生长健壮抗逆性极强，耐寒耐旱 耐瘠薄抗病虫害，可耐-40°C的严寒和40°C以上的酷热，适宜长江以北的大部分地区生长 属于变色树种，叶色变化四季极为丰富，色彩艳丽，从粉红色嫩绿色淡红一直到紫红色，是 目前国内紫叶彩化的唯一乔木树种，有良好的观赏价值和经济效益。
[0003] 1993年由中科院北京植物园从北美东北部引进，经多年培育而成的优良彩叶树 种，后逐步引入黑龙江地区多年的栽培试验表明：该树种有较强的耐寒、耐旱、耐贫瘠能 力，具有较高的观赏价值，是北方地区不可多得的观赏彩叶树种。
[0004] 但是目前，繁殖培育紫叶稠李的方法效果差，并不能有效地对紫叶稠李进行大规 模繁殖。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是为了解决上述问题，而提供了一种紫叶稠李繁殖方法。
[0006] 本发明的一种紫叶稠李繁殖方法，是按照以下步骤进行的：
[0007] 一、外植体选择：
[0008] 选取4月末的腋芽作为外植体；首先用清水洗净，用体积百分含量为75%的乙醇 浸泡30s，取出清水冲洗3~5遍，再用体积百分含量为0. 5%的次氯酸钠浸泡lOmin，再用 无菌水冲洗3~5遍；
[0009] 二、外植体芽诱导：
[0010] 将步骤一处理后的外植体切成1~2cm的茎段置于外植体芽诱导培养基中，在温 度为20~22°C，光照强度为23001x，光照12~15h/d，培养30d ;其中，外植体芽诱导培养基 为 MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+IBA 0.3mg/L+Vc 400 ~500mg/L+Sm(N03)320 ~25mg/L ;
[0011] 三、增殖培养：
[0012] 将步骤二诱导组织置于增殖培养基中，在温度为20~22°C，光照强度为23001x， 光照12~15h/d，培养30d ;其中，增殖培养基为MS+Sm(N03)3 30~45mg/L+NAA 0· 5mg/ L+6-BA 0. 5mg/L+IBA 0. 5mg/L ；
[0013] 四、生根培养：
[0014] 将步骤三增殖培养的组织，置于生根培养基中，在温度为20~22°C，光照强度为 23001x，光照 12 ~15h/d，培养 30d ;其中，生根培养基为 1/2MS+GA3 0. 3 ~0. 6mg/L+IBA 0· 5mg/L+Ce(N03)3 5 ~10mg/L ;
[0015] 五、将步骤四生根后的紫叶稠李在6月末至7月末扦插至扦插床中，进行炼苗；所 述的扦插床为底层铺设10~15cm厚的河卵石、10~15cm厚的粗河砂和10~15cm厚的 腐殖土，上层将活性炭：蛭石：珍珠岩按质量比为1:2:3的比例铺设；扦插后在温度为25~ 30°C的条件下，炼苗20~25d，即完成所述的紫叶稠李繁殖方法。
[0016] 本发明包含以下有益效果：
[0017] 本发明通过选择稀土元素，配以合理的添加量，使本发明能够达到以下效果：
[0018] 本发明通过加入Sm(N03)3能够对紫叶稠李的色素的含量，能够提高紫叶稠李的绿 化效果。并且Sm(N03)3能够提高提高芽的出芽率，平均出芽为10个左右，且在保证出芽率 高的同时，能够保证增值效果达到最佳。通过在生根培养基中加入Ce(N03)3能够提高紫叶 稠李的生根率，生根率可达94%。
[0019] 在外植体芽诱导过程，通过合理的加入Vc并配以Sm元素，增加 SOD和POD的活性， 降低MDA的的合成速率，减少细胞膜的缩小，增强紫叶稠李有效去除氧自由基的能力，同时 加入的Vc能够降低KT诱导褐化的作用。
[0020] 本发明通过组织培养基中加入Sm元素和Ce元素，能够有效促进细胞的分化的作 用，提高愈伤组织的分化能力，而愈伤组织的分化能力又与次生代谢产物的合成有密切的 关系，本发明加入Sm元素和Ce元素提高了紫叶稠李的黄酮、多酚及花色苷的含量，从而为 提高紫叶稠李的提取物的产率，提高了紫叶稠李的应用价值。
【具体实施方式】
【具体实施方式】 [0021] 一：本实施方式的一种紫叶稠李繁殖方法，是按照以下步骤进行 的：
[0022] 一、外植体选择：
[0023] 选取4月末的腋芽作为外植体；首先用清水洗净，用体积百分含量为75%的乙醇 浸泡30s，取出清水冲洗3~5遍，再用体积百分含量为0. 5%的次氯酸钠浸泡lOmin，再用 无菌水冲洗3~5遍；
[0024] 二、外植体芽诱导：
[0025] 将步骤一处理后的外植体切成1~2cm的茎段置于外植体芽诱导培养基中，在温 度为20~22°C，光照强度为23001x，光照12~15h/d，培养30d ;其中，外植体芽诱导培养基 为 MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+IBA 0.3mg/L+Vc 400 ~500mg/L+Sm(N03)320 ~25mg/L ;
[0026] 三、增殖培养：
[0027] 将步骤二诱导组织置于增殖培养基中，在温度为20~22°C，光照强度为23001x， 光照12~15h/d，培养30d ;其中，增殖培养基为MS+Sm(N03)3 30~45mg/L+NAA 0· 5mg/ L+6-BA 0. 5mg/L+IBA 0. 5mg/L ；
[0028] 四、生根培养：
[0029] 将步骤三增殖培养的组织，置于生根培养基中，在温度为20~22°C，光照强度为 23001x，光照 12 ~15h/d，培养 30d ;其中，生根培养基为 1/2MS+GA3 0. 3 ~0. 6mg/L+IBA 0· 5mg/L+Ce(N03)3 5 ~10mg/L ;
[0030] 五、将步骤四生根后的紫叶稠李在6月末至7月末扦插至扦插床中，进行炼苗；所 述的扦插床为底层铺设10~15cm厚的河卵石、10~15cm厚的粗河砂和10~15cm厚的 腐殖土，上层将活性炭：蛭石：珍珠岩按质量比为1:2:3的比例铺设；扦插后在温度为25~ 30°C的条件下，炼苗20~25d，即完成所述的紫叶稠李繁殖方法。
【具体实施方式】 [0031] 二：本实施方式与一不同的是：所述的外植体芽诱导 培养基为 MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+IBA 0.3mg/L+Vc 450mg/L+Sm(N03)320~25mg/L。其它与一相同。
[0032]
【具体实施方式】三：本实施方式与【具体实施方式】一不同的是：所述的增殖培养基为 MS+Sm(N03)3 40mg/L+NAA 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L。其它与【具体实施方式】一相 同。
【具体实施方式】 [0033] 四：本实施方式与一不同的是：所述的生根培养基为 1/2MS+GA3 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+Ce(N03)3 5 ~8mg/L。其它与一相同。
【具体实施方式】 [0034] 五：本实施方式与一不同的是：步骤五中扦繁殖过程 是在温室中进行的。其它与一相同。
【具体实施方式】 [0035] 六：本实施方式与一不同的是：步骤五中扦插的深度 为2~3cm。其它与一相同。
【具体实施方式】 [0036] 七：本实施方式与一不同的是：步骤五中扦插苗选择 步骤四生根培养苗挺拔，株苗相对高的苗进行扦插。其它与一相同。
【具体实施方式】 [0037] 八：本实施方式与一不同的是：步骤五中繁殖过程中 空气湿度保持在70%以上。其它与一相同。
【具体实施方式】