一种具有杀线虫和土传真菌活性的植物提取物组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农业防治病害领域，具体地说是一种具有杀线虫和土传真菌活性的植 物提取物组合物。
【背景技术】
[0002] 在全球范围内根结线虫（Meloidogyneincognita)每年造成大约1570亿美元的 农业损失。在我国，以南方根结线虫分布最广，危害最大，发病区域的寄主减产量一般达到 15%-20%，严重时可高达70%以上，而且线虫对于作物的侵害还会导致并发症状，即真菌病 害更容易侵染感染了线虫的作物。
[0003] 当前我国南方根结线虫的防治仍然以化学手段为主，例如如涕灭威、呋喃丹、溴甲 烷、氯化苦、威百亩等在线虫控制起到重要作用。然而，由于合成化学杀菌剂本身的高毒缺 点以及长期不合理使用，已经暴露出了很多严重的问题：毒性大，残留高，易于对环境造成 污染，威胁人类健康。这些高毒化学农药，直接通过环境和食物链等传递给人畜。因此开发 生物活性高、环境友好的天然杀菌剂目前已经成为杀菌剂发展的新趋势。
[0004] 为此，从环境友好的视角出发，科学家根据植物天然活性成分"毒性小"、"分解快" 和"污染少"等特点，积极开发各种符合有机农业要求的植物源杀线制剂。
[0005] 然而，植物天然活性成分大多表现出较高的疏水性，必须开发合适的水溶性剂型 方可投入实际应用。但现有研究在制剂时多采用乙醇、丙酮等有机溶剂作为活性成分的运 载体系，仍存在一定毒性，且物理稳定性较差，不能或无法规模化应用于有机农业生产。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的就在于针对上述现有技术的不足，旨在提供一种具有杀线虫和土传 真菌活性的植物提取物组合物，它的活性成分均来自天然植物提取物，对环境无污染，属于 绿色环保型制剂。
[0007] 本发明提供的技术方案包括以下重量百分比的成分：植物油脂肪酸2-55%或植物 精油5-55%，抗氧化剂0. 1-0. 6%，表面活性剂10-35%，余量为乳酸。
[0008] 其中，所述植物油为椰子油、油菜油、海滨锦葵种子油中的一种或几种。
[0009] 其中，所述抗氧化剂为叔丁基对苯二酚（TBHQ)，丁基羟基茴香醚（BHA)，2, 6-二叔 丁基对甲苯酚（BHT)中的一种或几种。
[0010] 其中，表面活性剂为Dofaxlll和111中的一种或两种。
[0011] 本发明提供了一种高效安全、环境友好、可续行发展的具有杀土传真菌、线虫作用 的组合物，且这些组合物是微乳化剂，可显著增加活性成分溶解度，提高其生物利用度，本 发明的活性成分均来自天然植物提取物，对环境无污染，属于绿色环保型制剂。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合实施例对本发明的具体实施方法作进一步描述。该实施例用于更加清楚 地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
[0013] 本发明的优选实施例制剂组如下：（按重量百分比）
将上述制剂分别用于进行试验，以说明本发明的具体实施过程并验证技术优势效果。
[0014] (一）MEC-8910和MEC-1003对南方根结线虫的离体实验 1、南方根结线虫iflcogflica)悬浮液的制备 取感染根结线虫的病根，洗净后，立即置于500目网筛中不断淘洗数次，冲洗筛子上的 卵于烧杯中，定容备用。取1ml根结线虫二龄幼虫悬浮液，含根结线虫二龄幼虫90-130条， 体视显微镜下检测J2活虫数，加入药剂，使线虫与药剂接触时间为30min时观察剩余线虫 活虫数。
[0015] 2、观察、统计数据 按Abbott公式计算校正死亡率，根据浓度对数和死亡机率值，计算出药剂的毒力回归 方程y=ax+b，半致死质量浓度（EC5。）和EC9。相关系数R。
[0016] MEC-1003和MEC-8910分别处理离体根结线虫0· 5h之后的毒力
(二）对根结线虫卵及二龄幼虫盆栽药效试验 1、番茄幼苗（3-4叶）的获取：番茄种子以常规方法催芽至露白，将其播种于直径为5cm的育苗盆内，培养土壤质地(砂：土 =2 :1)，温室温度（18-34 °C)，每皿一棵，4-5叶时移 栽。
[0017] 2、取直径为6cm营养钵进行以下预处理，MEC-1003 250X，MEC-1003 500X， MEC-1003 1000X，MEC-8910 250X，MEC-8910 500X，阿维菌素 2000X。其中两次预处理 间隔时间为一周：每盆施药量为40ml，各处理结束后，一周后移栽西红柿幼苗（4-5叶)。
[0018] 3、数据调查和记录：记录每个根系虫癭数目，并分级： 零级：健苗无病（根系上无根结）； 一级：10%以下根系上有根结，但根结相互不连接； 二级：11%~30%的根系上有根结，仅少量根结相互连接： 三级：31%~50%的根系上有根结，半数以下根结相互连接； 四级：5P/p75%的根系上有根结，半数以上根结相互连接，且部分主、侧根变粗呈畸形； 五级：75%以上的根系上有根结，且相互连接，多数主、侧根变粗呈畸形。
[0019] 4、数据处理。计算每个处理虫癭指数，然后比较虫癭指数与植物生长参数关系，比 较各处理对植物生长和线虫的影响，评价各种药剂药效。
[0020] 病情指数=Σ(各级病株数X相对应级别数V(调查总株数X最高级级别 数）X100% ; 相对防效=(对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数χ100%。
[0021] 三个实施例对二龄幼虫的盆栽药效：
(三）对四种病原真菌的室内生测试验 试验对立枯丝核菌（TPAizoctowiasoJawi)、柑橘炭疽病菌（CoUeioiricAi/a?gloeosporioides')、^fS1? 7]IMI(Fusariumoxysporiuni)n黄瓜腐霉{Pythium ajoAMiofe/Tas(Edson)Z7/)的室内药效，这四种病原真菌是世界性分布的农业病害， 寄主范围广泛，会导致各类农作物腐烂、猝倒，病害严重发生的年份可导致大量的死苗，造 成重种、补种、毁种，植物生育期推迟，造成大量减产。
[0022] 1、试验方法及步骤： 采用生长素率测定法检测。将供试药物用无菌去离子水配制成1000mg*L-l母液，然 后再稀释成5~6个浓度梯度的药液，现配现用。取供试药液lmL加到9mLPDA培养基中，倒 入培养皿，在每个培养皿中央放置1个菌饼(直径为6mm)，以无菌水为溶剂对照，每个处理 重复3次。置于28°C恒温培养，72小时之后观察记录菌丝生长情况，十字交叉法测量菌落 生长直径，用下述公式计算菌丝生长抑制率： 菌丝生长抑制率（％)=(对照菌落直径-菌饼直径）-(对照菌落直径-菌饼直径）/ (处理菌落直径-菌饼直径）*100。
[0023] 2、试验结果
以上实例说明，本发明组合物的杀菌和杀线虫效果显著。
[0024] 本发明是研究上述三种植物提取物对各种病原菌以及土壤线虫的控制效果而得 到的成果。
[0025] 本发明中使用的植物油为椰子油、海滨锦葵种子油、油菜油的一种或几种，其中： 椰子（CocosnuciferaL.)是由外层为纤维的壳组成的、提供椰子皮纤维和内含可 食厚肉质的大坚果。椰子油是一种提取自成熟椰果肉中的食用油。椰子油在食品制造、 药物和工业上有多种用途，对热非常稳定，因此它具有氧化慢，抗酸败的特点。椰子含油 35%_45%。油中含游离脂肪酸20%，羊油酸（caproicacid) 2%，棕榈酸（palmiticacid)，羊 脂酸（。&卩^1：[03(^(1)9%，羊錯酸（0&卩1'；^&(^(1)，油酸（016；^3(^(1)2%，月桂酸（1&111·;^acid)0
[0026] 海滨锦葵（Kosteletzkyavirginica)为锦葵科多年生草本植物，是适应于海滨重 盐土环境的先锋耐盐植物，海滨锦葵肉质根产量可高达15 000kg/hm2,其中多糖（约5. 36% 左右）、黄酮(约〇. 72%)、皂苷(约0. 62%)等活性物质含量丰富，作为食物（饲料）、能源植 物、景观植物的开发潜力很大。海滨锦葵种子含油量18%以上，蛋白质20%以上，堪比大豆。
[0027] 油菜（BrassicacampestrisL.)为十字花科、芸薹属植物，农艺学上将植物中种 子含油的多个物种统称油菜。油菜营养丰富，其中维生素C含量很高。油菜籽可以榨油， 油菜油中含有多种维生素，如维生素A、维生素D和维生素E，其中维生素E含量达60毫克 /100克油，尤其是甲型维生素E含量高达13. 2毫克/100克油，为大豆油的2. 58倍，而且在 长期储存和加热后减少不多，可作为食品中维生素E的来源。是人体脂溶性维生素的重要 来源。油菜油中的植物留醇含量也较豆油等常见植物油为高，且种类繁多，有些留醇还具有 特殊的生理功能。
[0028] 上述三种植物的提取物均具有杀死红蜘蛛的作用，它们环境毒性低，在美国EPA 40CFR152:25B明确注明免于登记。
[0029] 另外，本发明将植物油与其它组分混合制成微乳化制剂，便于施用于红蜘蛛控制。 表面活性剂使植物油在水中均匀分散形成稳定的微乳化液，溶剂起到稀释作用。并且本发 明使用的溶剂为为低V0C溶剂，对生态环境无危害。
[0030] 因此，本发明解决了植物油不能施用于土壤的技术问题，提供了一种同时具有杀 菌和杀线虫双重作用的组合物，它不含毒性，对环境无污染，属于绿色环保型制剂。
[0031] 上述仅为本发明的优选实施方式，应指出的是，对于本行业内的普通技术技术人 员而言，在本发明的原理之下可以由一些改进和替换，该改进和替换也应视为本发明的保 护范围。
【主权项】
1. 一种具有杀线虫和土传真菌活性的植物提取物组合物，其特征在于包括以下重量 百分比的原料：植物油脂肪酸2-55%或植物精油5-55%，抗氧化剂0. 1-0. 6%，表面活性剂 10-35%，余量为乳酸。2. 根据权利要求1所述的一种具有杀线虫和土传真菌活性的植物提取物组合物，其特 征在于：所述植物油为椰子油、油菜油、海滨锦葵种子油中的一种或几种。3. 根据权利要求1所述的一种具有杀线虫和土传真菌活性的植物提取物组合物，其特 征在于：所述抗氧化剂为叔丁基对苯二酚（TBHQ)，丁基羟基茴香醚（BHA)，2, 6-二叔丁基对 甲苯酚（BHT)中的一种或几种。
【专利摘要】本发明涉及一种具有杀线虫和土传真菌活性的植物提取物组合物，包括以下重量百分比的成分：植物油脂肪酸2-55%或植物精油5-55%，抗氧化剂0.1-0.6%，表面活性剂10-35%，余量为乳酸。本发明提供了一种高效安全、环境友好、可续行发展的具有杀土传真菌、线虫作用的组合物，对环境无污染，属于绿色环保型制剂。
【IPC分类】A01N25/04, A01P3/00, A01N65/40, A01P5/00, A01N65/08
【公开号】CN105360110
【申请号】CN201510795264
【发明人】刘小锦
【申请人】安徽云溪农业有限公司
【公开日】2016年3月2日
【申请日】2015年11月17日