一种提高人参皂甙含量的人参培养基及其配制方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于人参组织培养技术领域，特别设及一种提高人参皂武含量的人参培养 基，还设及一种提高人参皂武含量的人参培养基的配制方法。
【背景技术】
[0002] 人参是被子植物口双子叶植物纲离瓣花亚纲五加科，多年生草本植物，生长于密 林，多分布于黑龙江、吉林、迂宁和河北北部深山中，含有10多种人参皂武，W及人参快醇、 多种氨基酸和维生素，是名贵的中草药材。
[0003] 人参治病养生的能力主要依靠人参皂武，但是直接从人参植株中提取人参皂武的 成本非常高，且产量低，直接从人参愈伤组织中提取人参皂武不仅方便、原料易得、成本低， 还间接能起到保护野生人参植株的作用，但人参愈伤组织中人参皂武的含量对能否使用愈 伤组织代替植株提取人参皂武起着决定性的作用。
【发明内容】
[0004] 基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种提高人参皂武含量的人参培养基， 其WBs培养基为基础培养基，并添加有NAA(糞乙酸）、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸铜、 琼脂粉和白砂糖，本发明提供的培养基具有可提高愈伤组织人参皂武含量，促进人参愈伤 组织增殖的优点。
[000引一种提高人参皂武含量的人参培养基，其WBs培养基为基础培养基，并添加有NAA (糞乙酸）、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸铜、琼脂粉和白砂糖，相对于人参组织培养常用 的MS培养基，Bs培养基更能促进人参细胞合成人参皂武，同时W硝酸铜作为添加剂，其中的 铜元素可W调节人参细胞的生理状态，促进人参皂武合成。
[0006] NAA (糞乙酸）的浓度为3-8mg/L、2，4-D (2，4-二氯苯氧乙酸）的浓度为2-6mg/L、硝 酸铜的浓度为200-500mg/L、琼脂粉的浓度为8-12g/L、白砂糖的浓度为25-35g/L。
[0007] NAA (糞乙酸）的浓度为4-6mg/L、2，4-D (2，4-二氯苯氧乙酸）的浓度为3-5mg/L、硝 酸铜的浓度为350-450mg/L、琼脂粉的浓度为9-llg/L、白砂糖的浓度为28-32g/L，将两种植 物激素NAA(糞乙酸)和2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸）的用量提高，可W更好促进人参愈伤组织 增殖和合成人参皂武。
[0008] 所述的硝酸铜还可W是氯化铜和氧化铜，硝酸铜中W主要作用的是稀±元素铜， 所W可W使用其他含铜元素的化合物替代硝酸铜。
[0009] 所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.0-7.0。
[0010] 所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.5。
[0011] -种提高人参皂武含量的人参培养基的配制方法，其包括W下步骤： 步骤SlO溶解配制培养基:用蒸馈水溶解Bs基础培养基各成分，并添加NAA(糞乙酸）、2， 4-D(2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸铜、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高溫灭菌:将步骤SlO配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高溫灭 菌20~21分钟，冷却凝固。
[001引所述的步骤SlO还包括步骤Sll调节pH值：使用肥L和KOH滴定调节培养基pH值至 6.0。
【具体实施方式】
[0013] 下面结合具体实施例对本发明作进一步描述。
[0014] 实施例一:配制一种提高人参皂武含量的人参培养基。
[0015] 根据表1所示的Bs培养基配方W及表2所示的提高人参皂武含量的人参培养基配 方，制备本发明所述的提高人参皂武含量的人参培养基。
[0016]用天平分别称取Bs培养基中的各成分W及NAA(糞乙酸）、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙 酸）、硝酸铜、琼脂粉和白砂糖，置于立角瓶中，加入适量纯化水，揽拌溶解，定容至1000 mL, 并使用肥L或者KOH调节抑值至6.5。将S角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121°C灭菌21min， 然后于超净工作台中，将提高人参皂武含量的人参培养基分装至组织培养瓶中，自然冷却， 待其凝固后将组织培养瓶封口，备用。
[0017]表1 Bs培养基的成分及其用量。
[0018] 表2提高人参皂武含量的人参培养基的成分及其用量。
[0019] 实施例二:本发明所述的提高人参皂武含量的人参培养基的测试。
[0020]根据表1所示的Bs培养基配方W及表3所示的提高人参皂武含量的人参培养基配 方，参照实施例一所述的培养基制备方法，分别制备各试验组、对照组的提高人参皂武含量 的人参培养基。
[0021 ]表3提高人参皂武含量的人参培养基的成分及其用量。
[0022] 从诱导培养基中选择没有污染、生长正常、没有褐化和玻璃化的人参愈伤组织，在 超净台中取出愈伤组织，用无菌手术刀将愈伤组织切成1立方米左右大小的愈伤组织块，接 种到上述制备好的各试验组、对照组的提高人参皂武含量的人参培养基中，每块外植体相 互间隔1.2厘米。
[0023] 接种结束后将人参愈伤组织块置于人工气候箱中进行培养，培养条件如下:光照 时间为14/10小时(光照/黑暗），光照强度为23001UX，培养溫度为23°C，培养25天后统计增 殖系数和人生皂武含量，统计结果如表4所示。
[0024] 表4提高人参皂武含量的人参培养基测试结果。
[0025] 由表4的试验结果可知，采用本发明所述的提高人参皂武含量的人参培养基，能 够显著提高人参组织的人参皂武含量。试验组5为采用本发明所述的提高人参皂武含量的 人参培养基的试验组，所测得的人参组织人参皂武含量高达29%，明显高于对照组4。另外从 对照组3与其他试验组对比中可W看出稀±元素铜对人参组织培养只起到一个调节改变人 参细胞生理状态的作用，本身不具有促进人参增殖的作用。
【主权项】
1. 一种提高人参皂甙含量的人参培养基，其特征在于，其以B5培养基为基础培养基，并 添加有NAA(萘乙酸）、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖。2. 根据权利要求1所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基，其特征在于，NAA(萘乙 酸）的浓度为3-8mg/L、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸）的浓度为2-6mg/L、硝酸镧的浓度为200-500mg/L、琼脂粉的浓度为8-12g/L、白砂糖的浓度为25-35g/L。3. 根据权利要求2所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基，其特征在于，NAA(萘乙 酸）的浓度为4-611^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的浓度为3-511^/1、硝酸镧的浓度为350-450mg/L、琼脂粉的浓度为9-1lg/L、白砂糖的浓度为28-32g/L。4. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基，其特征在 于，所述的硝酸镧还可以是氯化镧和氧化镧。5. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基，其特征在 于，所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.0-7.0。6. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基，其特征在 于，所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.5。7. -种提高人参皂甙含量的人参培养基的配制方法，其特征在于，其包括以下步骤： 步骤S10溶解配制培养基：用蒸馏水溶解B5基础培养基各成分，并添加NAA(萘乙酸）、2， 4-D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌:将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。8. 根据权利要求7所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基的配制方法，其特征在 于，所述的步骤S10还包括步骤SI1调节pH值:使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.0。
【专利摘要】本发明提供一种提高人参皂甙含量的人参培养基，属于人参组织培养技术领域，其以B5培养基为基础培养基，并添加有NAA（萘乙酸）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖，本发明提供的培养基具有可提高愈伤组织人参皂甙含量，促进人参愈伤组织增殖的优点。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105475141
【申请号】CN201610011299
【发明人】何志铿
【申请人】黄庆梅
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2016年1月9日