一种紫叶酢浆草的组培快繁方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物组培育苗技术领域，具体设及一种紫叶酢浆草的组培快繁方法。
【背景技术】
[0002] 紫叶酢浆草是酢浆草科(Oxalidaceae)酢浆草属(Oxalis L.)多年生彩叶草本植 物，又名堇花酢浆草、紫蝴蝶。紫叶酢浆草原产于美洲热带区域，是一种珍稀的优良彩叶地 被植物，越来越受到广大花友及园林工作者的宠爱。紫叶酢浆草植株整齐，叶色紫红，紫红 色叶片美丽诱人，粉红色花朵烂漫可爱，是极好的盆栽和地被植物。目前，紫叶酢浆草常规 种子繁殖速度较慢，且变异率较高，分株繁殖速度较慢，人工成本较高，大量繁殖存在一定 的局限性，远不能满足国内对种苗的需求。
[0003] 因此，如何提高其生产效率，缩短培育时间，降低变异率，降低人工成本，保持优良 幼苗的遗传稳定性，提高其繁殖系数成为目前亟待解决的问题。
【发明内容】
[0004] 有鉴于此，本申请提供一种紫叶酢浆草的组培快繁方法，所用培养基配方简单，组 培流程简便，培养时间短，增殖频率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了 人工成本，变异率低，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业 化生产。
[0005] 为解决W上技术问题，本发明提供的技术方案是一种紫叶酢浆草的组培快繁方 法，包括W下步骤：
[0006] (1)外植体选取及灭菌:切取紫叶酢浆草的叶片或叶柄，采用酒精和升隶灭菌处理 后，得外植体；
[0007] (2)初代培养:将步骤(1)所得外植体接种到初代培养基中培养5-6周，幼苗生成， 所述初代培养基的组成包括:MS基本培养基，补充0.5-1.5mg/L6-BA、0.1-0.5mg/L NAA、 0.05-0.25mg/L IAA；
[000引（3)增殖培养:切取步骤(2)所得幼苗，接种到增殖培养基中培养5-6周，丛生芽生 成，所述增殖培养基的组成包括:MS基本培养基，补充0.5-1.5mg/L 6-BA、0.1-0.5mg/L NAA ；
[0009] (4)生根培养:将步骤(3)所得丛生芽幼苗分离成单株，接种到生根培养基中培养 2-4周即得紫叶酢浆草无菌苗，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充 0.05-0.15mg/L NAA；
[0010] (5)炼苗移栽:将步骤(4)所得紫叶酢浆草无菌苗转移到室外，闭瓶炼苗3-5天，松 口炼化一2天，即可移栽，炼苗基质为体积比为2:1:1的腐殖±、珍珠岩、赔石的混合物。
[0011] 优选的，所述外植体选取及灭菌的具体操作为:选取紫叶酢浆草的叶片或叶柄，先 采用自来水清洗干净，再用流水冲洗30min，用75%的酒精处理20-40s，再用0.1 %的升隶 处理3-4min，无菌水冲洗4-6次，用吸水纸吸干水分，将叶柄切成0.5-1.5cm长度，或将叶 片切成边长0.5-1.5cm的正方形即可。
[0012] 优选的，所述初代培养基的组成包括:MS基本培养基，补充0.5-1.0mg/L6-BA、 0.1-0.3mg/L NAA、0.1-0.2mg/L IAA。
[0013] 更为优选的，所述初代培养基的组成包括:MS基本培养基，补充I.Omg/L 6-BA、 0.2mg/L NAA、0.1mg/L lAA，还补充30g/L薦糖、5.5g/L琼脂。
[0014] 优选的，所述增殖培养基的组成包括:MS基本培养基，补充0.5-1.0mg/L6-BA、 0.2-0.4mg/L NAA。
[0015] 更为优选的，所述增殖培养基的组成包括:MS基本培养基，补充I.Omg/L 6-BA、 0.2mg/L NAA。
[0016] 优选的，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充0.05-O.lmg/L NAAo
[0017]更为优选的，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充O.lmg/L NAA， 还补充30g/L薦糖、5.5g/L琼脂。
[001引优选的，所述初代培养基的抑值为5.8-6.0。
[0019] 优选的，所述初代培养、增殖培养、生根培养步骤中，培养溫度为23-27°C，光照强 度为1500-2500LX，光照时间为12-16h/d。
[0020] 本申请所述的MS基本培养基具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿 质营养，还能加速愈伤组织的生长，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分 的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组 织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
[0021] 所述1/2MS基本培养基为MS基本培养基中，大量元素减半，其余不变形成的培养 基。
[0022] 所述6-BA为6-节氨基腺嚷岭，是一种植物生长激素，其主要作用是促进芽的形成， 也可W诱导愈伤组织发生，促进细胞分裂，促进非分化组织分化，促进生物体内物质的积 累，促进侧芽发生，防止老化，是植物组织和细胞培养中的细胞分裂素。
[0023] 所述NAA为糞乙酸，是一种植物生长激素，在植物使用杆插法繁殖时使用，也可用 于植物组织培养，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加座果，防止落果，改变雌、雄 花比率等，可经叶片、树枝的嫩表皮，种子进入到植株内，随营养流输导到全株。
[0024] 所述IAA为吗I噪乙酸，是一种植物生长激素，能够调节植物的生长，不仅能促进生 长，而且具有抑制生长和器官建成的作用。在细胞水平上，可刺激形成层细胞分裂、刺激枝 的细胞伸长、抑制根细胞生长、促进木质部、初皮部细胞分化、促进插条发根、调节愈伤组织 的形态建成，因此可用作植物组织培养。
[0025] 本申请技术方案提供了一种紫叶酢浆草的组培快繁方法，包括外植体的选取及灭 菌、初代培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽的步骤，通过对初代培养基、增殖培养基、生根 培养基的筛选，得到最佳的培养基组分和配比，采用前述植物生长激素配比形成的培养基， 配方简单，培养基成本低，配合各阶段的培养条件，得到的幼苗培养时间短，培养流程简便， 提高了紫叶酢浆草繁殖的效率，繁殖系数为11.9，变异率低，能快速获得遗传性状一致的紫 叶酢浆草无菌苗，利用组织培养技术，进行外植体培养，可不受季节气候变化、自然灾害的 影响，可进行大规模的工业化育苗及深加工。
【具体实施方式】
[0026] 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对 本发明作进一步的详细说明。
[0027] 实施例1
[0028] 本实施例所述的一种紫叶酢浆草的组培快繁方法，包括W下步骤：
[0029] (1)外植体选取及灭菌:选取紫叶酢浆草的叶片或叶柄，先采用自来水清洗干净， 再用流水冲洗30min，用75 %的酒精处理20-40s，再用0.1 %的升隶处理3-4min，无菌水冲 洗4-6次，用吸水纸吸干水分，将叶柄切成0.5-1.5cm长度，或将叶片切成边长0.5-1.5cm 的正方形，得外植体；
[0030] (2)初代培养:将步骤（1)所得外植体接种到pH值为5.8-6.0的初代培养基中培养 5-6周，幼苗生成，所述初代培养基的组成为:MS基本培养基，补充1. Omg/L 6-BA、0.2mg/L NAA、0.1 mg/L IAA、30g/L薦糖、5.5g/L琼脂；
[0031] (3)增殖培养:切取步骤(2)所得幼苗，接种到增殖培养基中培养5-6周，丛生芽生 成，所述增殖培养基的组成为:MS基本培养基，补充1.0mg/L6-BA、0.2mg/L NAA;
[0032] (4)生根培养:将步骤(3)所得丛生芽幼苗分离成单株，接种到生根培养基中培养 2-4周即得紫叶酢浆草无菌苗，所述生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充O.lmg/L NAA、30g/L 薦糖、5.5g/L 琼脂；
[0033] (5)炼苗移栽:将步骤(4)所得紫叶酢浆草无菌苗转移到室外，闭瓶炼苗3-5天，松 口炼化一2天，即可移栽，炼苗基质为体积比为2:1:1的腐殖±、珍珠岩、赔石的混合物。
[0034] 其