一种离体肝脏灌流系统和离体肝脏灌流方法_2

文档序号:9894678阅读:来源:国知局
号、并根据该信号调节肝动脉进液管内灌流液压力和流速的第二控制模块。
[0036]同样地,所述第二联接件为螺旋形管或静脉留置针。
[0037]同样地,肝动脉进液管上也设有处于第二监测模块下游的第二采样管。
[0038]本发明中,所述离体肝脏灌流系统还包括与所述灌流液温控槽相连、用于向灌流液中充氧的氧合模块。氧合模块可使灌流液充分携氧,为离体肝脏提供氧气。
[0039]作为优选,所述氧合模块可以选用中空纤维膜式氧合器、板式氧合器等。
[0040]作为优选,所述灌流液回流通路包括联通离体肝保存槽和灌流液温控槽的灌流液回收管,该灌流液回收管上设有回流微栗;所述灌流液回收管的进液端带有联通灌流液回收管和离体肝脏肝静脉的第三联接件。
[0041 ]同样地,所述第三联接件为螺旋形管或静脉留置针。
[0042]同时,作为优选,所述灌流液回收管上设有第三采样管。第三采样管用于采集从离体肝脏中流出的灌流液,便于检测经内循环后灌流液中各生化指标的含量,以便及时了解离体肝脏的健康情况。
[0043]本发明还提供了一种离体肝脏灌流方法,该离体肝脏灌流方法是使用本发明的离体肝脏灌流系统实现的,包括:
[0044](I)将离体肝脏置入离体肝保存槽中,将灌流液温控槽内的灌流液温度调节至4?6°C、20 ?25°C 或 36 ?37°C;
[0045](2)接通门静脉灌流通路、肝动脉灌流通路和灌流液回流通路,使门静脉灌流通路内灌流液流速维持在40?200ml/min,灌流液压力维持在4?1mmHg;使肝动脉灌流通路内灌流液流速维持在10?lOOml/min,灌流液压力维持在20?30mmHg ;
[0046](3)灌流过程中,采用胆汁收集器收集胆汁。
[0047]具体地,所述离体肝脏灌流方法包括:
[0048](I)将离体肝脏置入离体肝保存槽中,将灌流液温控槽内的灌流液温度调节至4?6°C、20?25°C或37°C,温度调节过程中,氧合模块持续向灌流液温控槽中充氧;
[0049](2)开启门静脉微栗、第一除泡模块和第一监测模块,开启肝动脉微栗、第二除泡模块和第二监测模块,使灌流液分别进入门静脉进液管和肝动脉进液管;
[0050]第一监测模块、第二监测模块分别监测门静脉进液管和肝动脉进液管内灌流液的压力和流速,根据第一监测模块的监测数据,第一控制模块实时控制门静脉进液管内灌流液流速在40?200ml/min,灌流液压力在4?1mmHg;根据第二监测模块的监测数据,第二控制模块实时控制肝动脉进液管内灌流液流速在10?lOOml/min,灌流液压力在20?30mmHg;[0051 ]优选地,第一控制模块实时控制门静脉进液管内灌流液压力在80?150ml/min,灌流液压力在6?8mmHg ;
[0052]第二控制模块实时控制肝动脉进液管内灌流液压力在40?80ml/min,灌流液压力在20?25mmHg;
[0053](3)灌流开始时即开启回流微栗,使灌流液从门静脉和肝动脉进入离体肝脏、并在离体肝脏内循环后从肝静脉流出、进入灌流液回收管,灌流液经离体肝脏回流至灌流液温控槽内,循环使用;
[0054](4)灌流过程中,采用胆汁收集器收集胆汁。
[0055]与现有技术相比,本发明的有益效果为:
[0056](I)本发明的离体肝脏灌流系统模拟了肝脏在活体内的生存环境,利用门静脉灌流通路和肝动脉灌流通路这两个通路分别从门静脉和肝动脉处对离体肝脏的进行灌流,适用于离体肝脏保存过程中存在的损伤防护,可显著缓解肝脏再灌注损伤,有效保证了离体肝脏的生命活性;通过收集从离体肝脏流出的灌流液进行活性检测、或直接测定灌流液的生物活性变化或生化反应,可以进行药理学研究或新型灌流液的开发研究,具有较强的可靠稳定性及重复性;
[0057](2)本发明的离体肝脏灌流系统可以在低温、亚低温、常温条件下对离体肝脏进行有效保存,改变了现有技术需要在低温条件下保存离体肝脏的局限性;
[0058](3)本发明的离体肝脏灌流系统中设置有灌流液回流通路,如此可对灌流液进行回收利用,提高灌流液的利用率;
[0059](4)本发明的离体肝脏灌流系统中设置有胆汁收集器,便于动态监测肝脏代谢功會K。
【附图说明】
[0060]图1为本发明一种离体肝脏灌流系统的结构示意图;
[0061]图2A为4°C下采用生理盐水作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中ALT浓度的比较图;
[0062]其中41^(1]/1)表示谷丙转氨酶的浓度(1]/1),41^0^1^1^1^3^1^6分别表示在灌流过程中的O小时、I小时、3小时、6小时采集的灌流液样品,saline SCS表示采用生理盐水作为保存液对离体肝脏进行静态保存,saline MP表示实施例2采用生理盐水作为灌流液对离体肝脏进行灌流,下同;
[0063]图2B为4°C下采用生理盐水作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中AST浓度的比较图;
[0064]其中431'(1]/1)表示谷草转氨酶的浓度(1]/1)431'0^31'1^313^316分别表示在灌流过程中的O小时、I小时、3小时、6小时采集的灌流液样品,下同;
[0065]图2C为4°C下采用生理盐水作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中LDH浓度的比较图;
[0066]其中431'(1]/1)表示乳酸脱氢酶的浓度(1]/1),1^0、1^1、1^3、1^6分别表示在灌流过程中的O小时、I小时、3小时、6小时采集的灌流液样品,下同;
[0067]图3A为40C下采用UW液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中ALT浓度的比较图;
[0068]其中,UWSCS表示采用生理盐水作为保存液对离体肝脏进行静态保存,UW MP表示实施例2采用生理盐水作为灌流液对离体肝脏进行灌流,下同;
[0069]图3B为4°C下采用UW液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中AST浓度的比较图;
[0070]图3C为40C下采用UW液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中LDH浓度的比较图;
[0071]图4A为40C下采用HTK液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中ALT浓度的比较图;
[0072]其中,HTK SCS表示采用生理盐水作为保存液对离体肝脏进行静态保存,HTK MP表示实施例2采用生理盐水作为灌流液对离体肝脏进行灌流,下同;
[0073]图4B为40C下采用HTK液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中AST浓度的比较图;
[0074]图4C为40C下采用HTK液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中LDH浓度的比较图;
[0075]图5A为4°C下实施例2和对比例I采用生理盐水作为灌流液或保护液后肝脏组织中MDA的含量;
[0076]|/0^(111]101/11^口1'01:)表示丙二醛的浓度(111]101/11^口1'01:),SCS表示对离体肝脏进行静态保存,MP表示采用实施例1的灌流系统对离体肝脏进行灌流,下同;
[0077]图5B为4°C下实施例2和对比例I采用生理盐水作为灌流液或保护液后肝脏组织中MPO的含量;
[0078]MP0(u/g)表示髓过氧化物酶的浓度(u/g),下同;
[0079]图5C为4°C下实施例3和对比例2采用生理盐水作为灌流液或保护液后肝脏组织中MDA的含量;
[0080]图5D为4°C下实施例3和对比例2采用生理盐水作为灌流液或保护液后肝脏组织中MPO的含量;
[0081]图5E为4°C下实施例4和对比例3采用生理盐水作为灌流液或保护液后肝脏组织中MDA的含量;
[0082]图6A为20°C下采用HTK液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中ALT浓度的比较图;
[0083]图6B为200C下采用HTK液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中AST浓度的比较图;
[0084]图6C为200C下采用HTK液作为灌流液或保护液时、灌流或保护过程中灌流液或保护液中LDH浓度的比较图;
[0085]图6D为20°C下实施例5和对比例4采用HTK液作为灌流液或保护液后肝脏组织中MPO的含量;
[0086]其中,MP0(U/g组织湿重)表示髓过氧化物酶
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