一种星星草直播水培的方法
【专利摘要】一种星星草直播水培的方法，它涉及一种星星草直播水培的方法。本发明是要解决现有星星草栽培方法存在发芽不整齐，灵活性不够应用不便，易被绿藻污染，操作繁琐，无法大规模实施的问题。方法：一、加工水培定植篮；二、栽培容器的组装；三、星星草种子处理及播种；四、星星草幼苗的培养。本发明用于大规模直播水培星星草。
【专利说明】
一种星星草直播水培的方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及一种星星草直播水培的方法。
【背景技术】
[0002]星星草(Puccinellia tenuiflora)，是一种禾本科碱矛属盐生牧草，主要分布于我国东北、华北、西北、内蒙古及青海等地。星星草具有很强的耐旱、耐寒、耐盐碱能力，能在pH为9?10的盐碱地上生长。因此，星星草可以作为研究耐盐碱机制的一种重要模式植物，为培育具耐盐碱等抗性小麦、水稻等农作物提供重要依据。同时，星星草叶片柔软细嫩，适口性好，可以作为牲畜的优良饲草。因此，对星星草抗逆机理的研究具有重要的理论意义和应用价值。近年来，人们不断利用生态学、生理学、分子生物学、转录组学和蛋白质组学等研究策略，对星星草的耐盐碱机制进行了研究。随着研究的深入，对大量、快速培育星星草幼苗提出了更高的要求。
[0003]长期以来，植物幼苗的培育方法主要有土培法与水培法两种。土培法因操作简便而被广泛采用，但是由于不能严格控制固体介质中的营养成分，土培法给一些研究工作带来了诸多不便，同时也不利于根系生长状态的观察和取样研究。水培法用均衡的营养液代替了传统植物培育的土壤或基质。水培可以提供稳定可控的培养系统，能够根据试验的要求精确控制培养溶液的成分，且便于观察和取材。水培法成为植物培养的有力手段。
[0004]植物水培法目前多采用移栽法。一般先将种子播种于MS培养基或者其它土培基质，再将培育所得幼苗转入水培系统。但是，由于星星草属于须根草本植物，根系脆弱，在移栽过程中幼苗极易受伤害，成活率低。因此，移栽法并不适合星星草的水培培养。
[0005]水培直播法多采用将种子点播于不锈钢筛网或者棉纱布上进行水培。即包括播种和发芽在内的整个植株生长过程都在该装置中进行，无需移栽。但是由于星星草种子非常细小，位于筛网上的种子难以固定易飘走，生长界面不平稳导致发芽不整齐，灵活性不够应用不便，且由于筛网无法实现避光而易被绿藻污染。当提取植物根系RNA，DNA、蛋白质等组分时，常因为根系被绿藻所污染，从而影响实验结果，甚至会因实验材料达不到要求而无法开展实验。
[0006]目前，科研工作者采用培养基与营养液相结合的水培系统来进行拟南芥等不宜进行移栽植物的水培培养。例如，利用人工加工后的Eppendorf离心管和离心管盒，或者枪头盒套装，拟南芥种子无需通过移栽即可实现琼脂上萌发和水培营养液中生长的有机结合。但是这些实验装置后期制作需人工进行，大多繁琐，耗时耗力，无法大规模实施。并且，培养基中水分非常容易蒸发，必需及时补充营养液，保持固体培养基与液面接触，一旦没有及时补充营养液，导致培养基脱水干枯，幼苗很可能缺水而死。目前，可大规模直播培养、无绿藻污染、根系发达、简单易行且灵活的草本植物水培装置和水培方法并不多见。
【发明内容】
[0007]本发明是要解决现有星星草栽培方法存在发芽不整齐，灵活性不够应用不便，易被绿藻污染，操作繁琐，无法大规模实施的问题，而提供一种星星草直播水培的方法。
[0008]一种星星草直播水培的方法具体是按以下步骤进行:
[0009]—、加工水培定植篮:将尼龙筛网固定于水培定植篮的底面和内壁，所述尼龙筛网的外沿包覆住水培定植篮的边沿，然后通过防水黑胶布将水培定植篮的外壁缠绕起来，同时将尼龙筛网的外沿和水培定植篮的边沿通过防水黑胶布固定在一起，使用玻璃棒从水培定植篮底部的孔眼将尼龙筛网顶出水培定植篮的篮口，然后将尼龙筛网与水培定植篮底面接触的部分完全浸润到经加热溶解后的浓度为1%的琼脂溶液中，取出，然后采用玻璃棒将尼龙筛网重新固定于水培定植篮的底面和内壁，得到已浸润琼脂的水培定植篮，静置5?1min至琼脂凝固，然后向已浸润琼脂的水培定植篮中加入粒径为Imm?3mm的輕石，加入粒径为Imm?3mm的輕石的厚度为I cm，采用晃动使輕石表面平整，得到加工后的水培定植篮；
[0010]二、栽培容器的组装:将加工后的水培定植篮置于蝴蝶兰托盘中，所述蝴蝶兰托盘置于培养方盆中，然后向培养方盆中加入营养液至加工后的水培定植篮内的琼脂和蛭石都浸没在营养液中，采用黑色KT泡沫板将放置蝴蝶兰托盘后培养方盆中多余的位置覆盖，得到水培装置；
[0011]三、星星草种子处理及播种:将星星草干种子在黑暗和室温下置于蒸馏水中浸泡24h，得到浸泡后的种子，然后采用四层棉纱布对浸泡后的种子进行滤干，得到滤干后的种子，将滤干后的种子与蛭石按体积比1:2混匀撒入步骤二得到的水培装置中的水培定植篮内，然后再铺上一层厚度为2?3mm的輕石，然后采用喷壶将厚度为2?3mm的輕石润湿，再采用保鲜膜将水培装置在室温下密封，并在保鲜膜外采用黑色加厚不透光塑料布遮挡，得到栽有待培养星星草幼苗的水培装置；
[0012]四、星星草幼苗的培养:将步骤三得到的栽有待培养星星草幼苗的水培装置转移至培养间，待3?5天后种子萌发，揭开黑色加厚不透光塑料布和保鲜膜后更换营养液，之后每隔五天更换一次营养液，直至星星草成熟，即完成星星草直播水培。
[0013]本发明的有益效果是:
[0014]1、本发明通过加工水培定植篮，结合土培与水培的优点，实现星星草的大规模直播培养。水培装置中的尼龙筛网可以作为琼脂的支撑物，而琼脂既可以保持营养液的通透性，又可以防止置于其上的蛭石从尼龙筛网空隙中漏出，避免所长出的根系上附有蛭石，影响材料的获取。而琼脂上覆盖的蛭石由于其强吸水性，可以通过吸收培养方盆中营养液保持湿润状态，从而既能使种子萌发及生长，又能保持底部琼脂的湿润，防止琼脂易失水干燥而失去作用。而且种子可以稳定地固定于蛭石上，生长界面平稳，发芽整齐。因此，本发明大大优于之前直接将种子点播于筛网或者棉纱布上进行的水培直播法，也优于之前单纯采用培养基与营养液相结合的水培直播法。
[0015]2、本发明所使用的水培定植篮、蝴蝶兰托盘、及培养方盆，彼此之间配套使用简单易行。蝴蝶兰托盘的高度比水培定植篮高，可将水培定植篮托起，为根的生长留余空间。培养方盆比蝴蝶兰托盘稍大，多出的位置用可掀开的黑色KT泡沫板覆盖，便于培养盆中加入营养液，也方便观察营养液的液面高度变化情况及根的生长状态。
[0016]3、本发明无需无菌操作。本发明在水培定植篮周围采用黑色防水胶布包缠，应用黑色蝴蝶兰托盘，使用加厚黑塑料袋包围培养方盆，以及使用黑色KT泡沫板遮盖蝴蝶兰托盘外的多余空隙，可最大限度减小光照对根系生长的影响，同时也可防止绿藻的繁殖。
[0017]4、本发明的水培装置使用灵活。可将蝴蝶兰托盘连带水培定植篮取出，方便营养液的更换。更重要的是，因为每个水培定植篮是可灵活移动的，所以待星星草成长至所需大小后，可以根据所需星星草用量的多少，选择相应大小的培养方盆和蝴蝶兰托盘，可取其中的多个或单个的水培定植篮进行不同的胁迫处理。
[0018]5、本发明所使用的水培定植篮、蝴蝶兰托盘、及培养方盆等栽培容器价格低廉，后期加工简单。而且，这些栽培容器都不易变形，可重复使用，从而降低成本，有利于大规模培养。
【附图说明】
[0019]图1是本实施例培育50天后的星星草幼苗照片。
【具体实施方式】
[0020]【具体实施方式】一:本实施方式一种星星草直播水培的方法具体是按以下步骤进行:
[0021]—、加工水培定植篮:将尼龙筛网固定于水培定植篮的底面和内壁，所述尼龙筛网的外沿包覆住水培定植篮的边沿，然后通过防水黑胶布将水培定植篮的外壁缠绕起来，同时将尼龙筛网的外沿和水培定植篮的边沿通过防水黑胶布固定在一起，使用玻璃棒从水培定植篮底部的孔眼将尼龙筛网顶出水培定植篮的篮口，然后将尼龙筛网与水培定植篮底面接触的部分完全浸润到经加热溶解后的浓度为1%的琼脂溶液中，取出，然后采用玻璃棒将尼龙筛网重新固定于水培定植篮的底面和内壁，得到已浸润琼脂的水培定植篮，静置5?1min至琼脂凝固，然后向已浸润琼脂的水培定植篮中加入粒径为Imm?3mm的輕石，加入粒径为Imm?3mm的輕石的厚度为I cm，采用晃动使輕石表面平整，得到加工后的水培定植篮；
[0022]二、栽培容器的组装:将加工后的水培定植篮置于蝴蝶兰托盘中，所述蝴蝶兰托盘置于培养方盆中，然后向培养方盆中加入营养液至加工后的水培定植篮内的琼脂和蛭石都浸没在营养液中，采用黑色KT泡沫板将放置蝴蝶兰托盘后培养方盆中多余的位置覆盖，得到水培装置；
[0023]三、星星草种子处理及播种:将星星草干种子在黑暗和室温下置于蒸馏水中浸泡24h，得到浸泡后的种子，然后采用四层棉纱布对浸泡后的种子进行滤干，得到滤干后的种子，将滤干后的种子与蛭石按体积比1:2混匀撒入步骤二得到的水培装置中的水培定植篮内，然后再铺上一层厚度为2?3mm的輕石，然后采用喷壶将厚度为2?3mm的輕石润湿，再采用保鲜膜将水培装置在室温下密封，并在保鲜膜外采用黑色加厚不透光塑料布遮挡，得到栽有待培养星星草幼苗的水培装置；
[0024]四、星星草幼苗的培养:将步骤三得到的栽有待培养星星草幼苗的水培装置转移至培养间，待3?5天后种子萌发，揭开黑色加厚不透光塑料布和保鲜膜后更换营养液，之后每隔五天更换一次营养液，直至星星草成熟，即完成星星草直播水培。
[0025]本实施方式水培装置中的尼龙筛网可以作为琼脂的支撑物，而琼脂既可以保持营养液的通透性，又可以防止置于其上的蛭石从尼龙筛网空隙中漏出，避免所长出的根系上附有蛭石，影响材料的获取。而琼脂上覆盖的蛭石由于其强吸水性，可以通过吸收培养方盆中营养液保持湿润状态，从而既能使种子萌发及生长，又能保持底部琼脂的湿润，防止琼脂易失水干燥而失去作用。而且种子可以稳定地固定于蛭石上，生长界面平稳，发芽整齐。
[0026]本实施方式选择高于水培定植篮的蝴蝶兰托盘，使得蝴蝶兰托盘可将水培定植篮托起，为根的生长留余空间。选用的培养方盆比所用蝴蝶兰托盘稍大。黑色KT泡沫板可掀开，方便向培养盆中加入营养液，也方便观察营养液的液面高度和根的生长状态，亦可避免营养液中水分的蒸发。此水培装置中所使用的缠绕水培定植篮的防水黑胶布，应用的黑色蝴蝶兰托盘，遮盖蝴蝶兰托盘外多余空隙的黑色KT泡沫板，以及包围培养方盆的黑色加厚不透光塑料布或者锡箔纸，可最大限度减小光照对根系生长的影响，同时防止绿藻的繁殖。
[0027]【具体实施方式】二:本实施方式与【具体实施方式】一不同的是:步骤一中所述尼龙筛网的目数为20目。其他与【具体实施方式】一相同。
[0028]【具体实施方式】三:本实施方式与【具体实施方式】一或二不同的是:步骤一中所述水培定植篮的尺寸为外直径8cm、内直径6cm、高3.4cm。其他与【具体实施方式】一或二相同。
[0029]【具体实施方式】四:本实施方式与【具体实施方式】一至三之一不同的是:步骤二中所述蝴蝶兰托盘的尺寸为长45cm、宽27cm、高7cm、孔外径7cm。其他与【具体实施方式】一至三之一相同。
[0030]【具体实施方式】五:本实施方式与【具体实施方式】一至四之一不同的是:步骤二中所述培养方盆的尺寸为长52cm、宽30cm、高13.5cm。其他与【具体实施方式】一至四之一相同。
[0031]【具体实施方式】六:本实施方式与【具体实施方式】一至五之一不同的是:步骤二中所述营养液中Ca(NCb)2.4H20的含量为1180mg/L、KN03的含量为506mg/L、KH2P04的含量为136mg/L、MgS04.7H20的含量为493mg/L、FeS04.7H20的含量为27.8mg/L、EDTA.2Na2的含量为37.2mg/L、H3B03的含量为28.6mg/L、MnS04.H2O的含量为 16.9mg/L、ZnS04.7H20的含量为2.1mg/L、CuS04.5H20的含量为0.8mg/L、(NH4)6MoO4.4H20的含量为0.2mg/L;所述营养液的pH为6.0。其他与【具体实施方式】一至五之一相同。
[0032]本发明在广泛应用的改良的Hoagland营养液基础上进一步改进了微量元素的物质组成及含量，没有加入改良的Hoagland营养液中所含有的NH4N03，KI，CoCl2，以及Na2MoO^因为星星草作为一种重要的耐盐模式物种，对其的研究主要集中在对其响应NaCl等盐胁迫的研究，因此本实施方式排除营养液中Cl离子和Na离子，使其所培养的星星草适用于NaCl胁迫等逆境胁迫的研究。且因为本实施方式严格避光，因此无须加入KI来避免营养液中微生物的繁殖。同时，为了弥补这些物质的缺失导致营养不足，在营养液中加入了(NH4)BMoO4.4H20，同时加大Ca(NO3)2.4H20的含量。
[0033]【具体实施方式】七:本实施方式与【具体实施方式】一至六之一不同的是:步骤三中星星草干种子的质量与步骤一得到的加工后的水培定植篮的体积比为0.5g: (80?100)cm3。其他与【具体实施方式】一至六之一相同。
[0034]【具体实施方式】八:本实施方式与【具体实施方式】一至七之一不同的是:步骤四中所述培养间的参数为:昼/夜温度为250C/200C，光照周期为12h光照/12h黑暗，光照强度为300μπιο?.τα2.s—S相对湿度为75%。其他与【具体实施方式】一至七之一相同。
[0035]【具体实施方式】九:本实施方式与【具体实施方式】一至八之一不同的是:步骤四中所述营养液中Ca(NCb)2.4H20的含量为1180mg/L、KN03的含量为506mg/L、KH2P04的含量为136mg/L、MgS04.7H20的含量为493mg/L、FeS04.7H20的含量为27.8mg/L、EDTA.2Na2的含量为37.2mg/L、H3B03的含量为28.6mg/L、MnS04.H2O的含量为 16.9mg/L、ZnS04.7H20的含量为2.1mg/L、CuS04.5H20的含量为0.8mg/L、(NH4)6MoO4.4H20的含量为0.2mg/L;所述营养液的pH为6.0。其他与【具体实施方式】一至八之一相同。
[0036]采用以下实施例验证本发明有益效果:
[0037]实施例一:一种星星草直播水培的方法具体是按以下步骤进行:
[0038]—、加工水培定植篮:将尼龙筛网固定于水培定植篮的底面和内壁，所述尼龙筛网的外沿包覆住水培定植篮的边沿，然后通过防水黑胶布将水培定植篮的外壁缠绕起来，同时将尼龙筛网的外沿和水培定植篮的边沿通过防水黑胶布固定在一起，使用玻璃棒从水培定植篮底部的孔眼将尼龙筛网顶出水培定植篮的篮口，然后将尼龙筛网与水培定植篮底面接触的部分完全浸润到经加热溶解后的浓度为1%的琼脂溶液中，取出，然后采用玻璃棒将尼龙筛网重新固定于水培定植篮的底面和内壁，得到已浸润琼脂的水培定植篮，静置5?1min至琼脂凝固，然后向已浸润琼脂的水培定植篮中加入粒径为Imm?3mm的輕石，加入粒径为Imm?3mm的輕石的厚度为I cm，采用晃动使輕石表面平整，得到加工后的水培定植篮；
[0039]二、栽培容器的组装:将加工后的水培定植篮置于蝴蝶兰托盘中，所述蝴蝶兰托盘置于培养方盆中，然后向培养方盆中加入营养液至加工后的水培定植篮内的琼脂和蛭石都浸没在营养液中，采用黑色KT泡沫板将放置蝴蝶兰托盘后培养方盆中多余的位置覆盖，得到水培装置；
[0040]三、星星草种子处理及播种:将0.5g星星草干种子在黑暗和室温下置于蒸馏水中浸泡24h，得到浸泡后的种子，然后采用四层棉纱布对浸泡后的种子进行滤干，得到滤干后的种子，将滤干后的种子与蛭石按体积比1:2混匀撒入步骤二得到的水培装置中的水培定植篮内，然后再铺上一层厚度为2?3mm的輕石，然后采用喷壶将厚度为2?3mm的輕石润湿，再采用保鲜膜将水培装置在室温下密封，并在保鲜膜外采用黑色加厚不透光塑料布遮挡，得到栽有待培养星星草幼苗的水培装置；
[0041]四、星星草幼苗的培养:将步骤三得到的栽有待培养星星草幼苗的水培装置转移至培养间，待3?5天后种子萌发，揭开黑色加厚不透光塑料布和保鲜膜后更换营养液，之后每隔五天更换一次营养液，直至星星草成熟，即完成星星草直播水培。
[0042]步骤一中所述尼龙筛网的目数为20目。
[0043]步骤一中所述水培定植篮的尺寸为外直径8cm、内直径6cm、高3.4cm。
[0044]步骤二中所述蝴蝶兰托盘的尺寸为长45cm、宽27 cm、高7cm、孔外径7 cm。
[0045]步骤二中所述培养方盆的尺寸为长52cm、宽30cm、高13.5cm。
[0046]步骤二中、步骤四中所述营养液中Ca(NO3)2.4H20的含量为1180mg/L、KN03的含量为506mg/L、KH2P04的含量为 136mg/L、MgS04.7H20的含量为493mg/L、FeS04.7H20的含量为27.8mg/L、EDTA.2Na2的含量为37.2mg/L、H3B03的含量为28.6mg/L、MnS04.H2O的含量为16.9mg/L、ZnS04.7H20的含量为2.lmg/L、CuS04.5H20的含量为0.8mg/L、(NH4)6MoO4.4H20的含量为0.2mg/L;所述营养液的pH为6.0。
[0047]步骤四中所述培养间的参数为:昼/夜温度为25°C/20°C，光照周期为12h光照/12h黑暗，光照强度为300μπιΟ1.m—2.s—1，相对湿度为75%。
[0048]图1是本实施例培育50天后的星星草幼苗照片；从图中可以看出星星草幼苗生长状态良好，根系发达且无绿藻污染，可见本实施例可得到完整且无污染的星星草根系用于研究。
【主权项】
1.一种星星草直播水培的方法，其特征在于星星草直播水培的方法具体是按以下步骤进行: 一、加工水培定植篮:将尼龙筛网固定于水培定植篮的底面和内壁，所述尼龙筛网的外沿包覆住水培定植篮的边沿，然后通过防水黑胶布将水培定植篮的外壁缠绕起来，同时将尼龙筛网的外沿和水培定植篮的边沿通过防水黑胶布固定在一起，使用玻璃棒从水培定植篮底部的孔眼将尼龙筛网顶出水培定植篮的篮口，然后将尼龙筛网与水培定植篮底面接触的部分完全浸润到经加热溶解后的浓度为1%的琼脂溶液中，取出，然后采用玻璃棒将尼龙筛网重新固定于水培定植篮的底面和内壁，得到已浸润琼脂的水培定植篮，静置5?1min至琼脂凝固，然后向已浸润琼脂的水培定植篮中加入粒径为Imm?3mm的蛭石，加入粒径为Imm?3mm的輕石的厚度为I cm，采用晃动使輕石表面平整，得到加工后的水培定植篮； 二、栽培容器的组装:将加工后的水培定植篮置于蝴蝶兰托盘中，所述蝴蝶兰托盘置于培养方盆中，然后向培养方盆中加入营养液至加工后的水培定植篮内的琼脂和蛭石都浸没在营养液中，采用黑色KT泡沫板将放置蝴蝶兰托盘后培养方盆中多余的位置覆盖，得到水培装置； 三、星星草种子处理及播种:将星星草干种子在黑暗和室温下置于蒸馏水中浸泡24h，得到浸泡后的种子，然后采用四层棉纱布对浸泡后的种子进行滤干，得到滤干后的种子，将滤干后的种子与蛭石按体积比1:2混匀撒入步骤二得到的水培装置中的水培定植篮内，然后再铺上一层厚度为2?3mm的輕石，然后采用喷壶将厚度为2?3mm的輕石润湿，再采用保鲜膜将水培装置在室温下密封，并在保鲜膜外采用黑色加厚不透光塑料布遮挡，得到栽有待培养星星草幼苗的水培装置； 四、星星草幼苗的培养:将步骤三得到的栽有待培养星星草幼苗的水培装置转移至培养间，待3?5天后种子萌发，揭开黑色加厚不透光塑料布和保鲜膜后更换营养液，之后每隔五天更换一次营养液，直至星星草成熟，即完成星星草直播水培。2.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤一中所述尼龙筛网的目数为20目。3.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤一中所述水培定植篮的尺寸为外直径8cm、内直径6cm、高3.4cm。4.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤二中所述蝴蝶兰托盘的尺寸为长45cm、宽27cm、高7cm、孔外径7cm。5.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤二中所述培养方盆的尺寸为长52cm、宽30cm、高13.5cm。6.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤二中所述营养液中 Ca (NO3) 2.4H20的含量为 1180mg/L、KNO3 的含量为506mg/L、KH2PO4的含量为 136mg/L、MgSO4.7H20的含量为493mg/L、FeS04.7H20的含量为27.8mg/L、EDTA.2Na2的含量为37.211^/1、!13803的含量为28.611^/1、]\111504.H2O的含量为 16.9mg/L、ZnS04.7H20的含量为2.1mg/L、CuS04.5H20的含量为0.8mg/L、(NH4)6MoO4.4H20的含量为0.2mg/L;所述营养液的pH为6.0。7.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤三中星星草干种子的质量与步骤一得到的加工后的水培定植篮的体积比为0.5g: (80?100)cm3。8.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤四中所述培养间的参数为:昼/夜温度为25°C/20°C，光照周期为12h光照/12h黑暗，光照强度为300μπιΟ1.m—2.s—1，相对湿度为75%。9.根据权利要求1所述的一种星星草直播水培的方法，其特征在于步骤四中所述营养液中 Ca (NO3) 2.4H20的含量为 1180mg/L、KNO3 的含量为506mg/L、KH2PO4的含量为 136mg/L、MgSO4.7H20的含量为493mg/L、FeS04.7H20的含量为27.8mg/L、EDTA.2Na2的含量为.37.211^/1、!13803的含量为28.611^/1、]\111504.H2O的含量为 16.9mg/L、ZnS04.7H20的含量为.2.1mg/L、CuS04.5H20的含量为0.8mg/L、(NH4)6MoO4.4H20的含量为0.2mg/L;所述营养液的pH为6.0。
【文档编号】A01G31/00GK105830888SQ201610195319
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年3月30日
【发明人】戴绍军, 喻娟娟, 赵琪, 张恒, 霍达, 宋保华, 尹赜鹏, 刘军铭, 金鑫
【申请人】东北林业大学