专利名称：一种促进紫芝孢子萌动的方法
技术领域：
本发明涉及一种促进紫芝孢子萌动的方法，经萌动的紫芝孢子可作为药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
背景技术：
紫芝(Ganoderma sinense)是含有多种生物活性物质的一种药用真菌。紫芝子实体入药在中国虽已有儿千年的应用史，但直至20世纪紫芝孢子才被人们所认识和利用。紫芝孢子是从成熟的紫芝子实体菌盖底部喷射出的、大小为6-12μm、极其微小的呈烟雾状的紫芝种子。微小的紫芝孢子外形如桃核状，有着十分坚韧的双层孢壁。大自然中紫芝孢子萌发速度较慢，萌发率极低，在适宜条件下一般经24至48小时才可伸出芽管，72小时后菌丝才可形成分枝，萌发率只有1.5～13％。为减低成本，通常人工培植的紫芝普遍使用木屑、稻草、棉籽壳、甘蔗渣作为培养基料。然而用上述培养基料培植的紫芝虽然子实体菌盖外形与段木培植的紫芝子实体菌盖外形差别不大，但是菌盖质地明显轻泡松软，特别是所喷射出的紫芝孢子由于发育不良，通常轻而干瘪。此外，人工培植的紫芝由于其孢子在收获前已在相对湿度大于90～99％且温度达到25～32℃的湿热培植环境下经历数十天的堆积过程，堆积于紫芝菌盖表面的紫芝孢子在湿热环境下已发酵且品质下降，导致紫芝孢子活力丧失而不可能萌发。研究发现，用段木培育的赤芝所产生的孢子通常比较成熟饱满。成熟饱满的新鲜紫芝孢子经萌动工艺激活，所含活性物质具有较高的药理活性，是治疗慢性疾病的重要药物原料。有关应用紫芝孢子治疗慢性疾病的临床试验及药理学研究的科学成果已有许多专利及科学文献报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种促进紫芝孢子萌动的方法，经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
本发明的促进紫芝孢子快速萌动的方法具体包括如下步骤一、诱导休眠将段木培育的成熟饱满的紫芝孢子置于常规生化设备CO2培养箱进行孵育，调控CO2浓度在1.8～2.8％，孵育时间为40～60min，使紫芝孢子重新进入休眠状态；二、解除休眠将进入休眠状态的紫芝孢子铺成厚度为1～2cm的薄层，采用晴天上午10时至下午3时自然阳光照射2～3.5h接受温热和紫外线的刺激；或者置于光照强度为2000～2500勒克斯的钠光灯、或白色日光灯和15W紫外线灯/M2下照射，时间为2～3.5h；然后再将紫芝孢子置于0～2.5℃的冰柜中25～40min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢；三、快速萌动将已恢复生理代谢的紫芝孢子置于用已收获紫芝后的段木基料残渣水提液中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比一般为1∶1～1∶4，调节紫芝孢子浸泡温度为26～33℃，浸泡时间为30～120min，得到已充分萌动的紫芝孢子；所述的段木基料残渣水提液一般是以段木基料残渣∶水的重量比为1～2∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取30～60min所得到的水提液；本发明的方法所述的段木培育的紫芝孢子最好是采用在高山林区或野外用阔叶树段木培植紫芝而得到。阔叶树段木可选用米槠、栲树、枫树、栎树、梅等木质坚硬的木材。由于在高山林区或野外可获得清新的空气，提供洁净的水，及显著的昼夜之间产生的温差(温差通常昼夜间超过15～25℃)，以及合适的湿度下良好的环境培植紫芝，所收获的紫芝孢子品质优良。为了确保紫芝孢子无重金属和杀虫剂污染，选用的阔叶树段木须经系统的检测，防止Cu、Hg、Pb等重金属污染及杀虫剂污染。培植紫芝的工艺，除按上述要求严格把关之外，按常规紫芝培植工艺与技术，包括在段木中接入紫芝菌种进行培养及常规管理等工序。当紫芝子实体菌盖发育进入成熟期开始喷射紫芝孢子时，用洁净的常规牛皮纸罩套收集2天内喷射的紫芝孢子，牛皮纸罩套以套住紫芝菌盖的大小为宜，所收获的成熟饱满的新鲜紫芝孢子可提供作为进行萌动的紫芝孢子原料。
经检测，用上述本发明方法处理的紫芝孢子萌动效果好，其所含超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷氨酸脱羧酶、脱氢酶的活性显著提高，生育酚含量显著递增，紫芝孢子呼吸强度显著增强。
据测定，测定显示，经本发明方法处理的紫芝孢子(快速萌动组)的萌发势指数显著高于对照组；快速萌动组萌发势指数＞97，而对照组萌发势指数＜13。
说明1.萌发势指数是指受试的紫芝孢子在经萌动处理之后，放置于26～32℃环境下持续孵育，并记录孵育12h～72h期间伸出芽管或产生分枝菌丝的孢子所占总孢子数的百分比。2.快速萌动组按本发明方法处理的紫芝孢子。3.对照组采用段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子经26～32℃洁净水浸泡12h诱导萌动。
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明具体实施方式
实施例一1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.8％，孵育时间为60min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为2cm的薄层，在自然阳光下照射3.5h，然后将紫芝孢子置于2.5℃的冰柜中40min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为1∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取60min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.8，调节紫芝孢子浸泡温度为33℃，浸泡时间为30min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝97。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例二1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在1.9％，孵育时间为40min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为1cm的薄层，在自然阳光下照射2.5h，然后将紫芝孢子置于1℃的冰柜中30min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为2∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取30min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.2，调节紫芝孢子浸泡温度为28℃，浸泡时间为110min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝98.1。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例三1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.2％，孵育时间为55min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为2cm的薄层，在自然阳光下照射3h，然后将紫芝孢子置于2℃的冰柜中35min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为2∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取40min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.4，调节紫芝孢子浸泡温度为30℃，浸泡时间为100min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝97.4。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例四1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在1.8％，孵育时间为60min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为1.5cm的薄层，在光照强度为2500勒克斯的白色日光灯及15W紫外线灯/M2下照射3.5h，然后将紫芝孢子置于2.5℃的冰柜中35min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为1∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取60min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶3，调节紫芝孢子浸泡温度为26℃，浸泡时间为95min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝98.3。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例五1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.3％，孵育时间为45min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为1.5cm的薄层，在自然阳光下照射2h，然后将紫芝孢子置于2.5℃的冰柜中30min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为1.8∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取40min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.4，调节紫芝孢子浸泡温度为32℃，浸泡时间为45min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝98.9。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例六1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.4％，孵育时间为50min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为2cm的薄层，在自然阳光下照射2.5h，然后将紫芝孢子置于0℃的冰柜中25min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为2∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取60min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.3，调节紫芝孢子浸泡温度为28℃，浸泡时间为120min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝98.8。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例七1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.5％，孵育时间为55min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为2cm的薄层，在自然阳光下照射3h，然后将紫芝孢子置于1℃的冰柜中35min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为1.5∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取60min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.5，调节紫芝孢子浸泡温度为31℃，浸泡时间为115min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝98.8。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例八1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.6％，孵育时间为60min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导体眠的紫芝孢子铺成厚度为2cm的薄层，在光照强度为2000勒克斯的钠光灯及15W紫外线灯/M2下照射3.5h，然后将紫芝孢子置于1℃的冰柜中35min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为1∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取35min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶3.5，调节紫芝孢子浸泡温度为30℃，浸泡时间为100min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝98.4。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例九1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.7％，孵育时间为40min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为1.5cm的薄层，在自然阳光下照射3h，然后将紫芝孢子置于2℃的冰柜中40min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为2∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取48min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶1.5，调节紫芝孢子浸泡温度为28℃，浸泡时间为118min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝99.1。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
实施例十1、取段木培育的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于CO2培养箱中进行孵育，调控CO2浓度在2.1％，孵育时间为55min，使紫芝孢子进入休眠状态。
2、将经诱导休眠的紫芝孢子铺成厚度为1cm的薄层，在自然阳光下照射3h，然后将紫芝孢子置于0℃的冰柜中25min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢。
3、将恢复生理代谢的紫芝孢子置于已收获紫芝后的段木基料残渣水提液(段木基料残渣∶水的重量比为1∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取48min)中浸泡诱导，紫芝孢子∶段木基料残渣水提液的重量比为1∶4，调节紫芝孢子浸泡温度为33℃，浸泡时间为60min。经试验显示，经处理的紫芝孢子萌发势指数＝99.3。
4、经萌动的紫芝孢子可作为工业药物原料，或经进一步深加工成不同类型的产品。
权利要求
1.一种促进紫芝孢子萌动的方法，其特征是包括以下步骤(1).诱导休眠将段木培育的成熟饱满的紫芝孢子置于常规生化设备CO2培养箱进行孵育，调控CO2浓度在1.8～2.8％，孵育时间为40～60min，使紫芝孢子重新进入休眠状态；(2).解除休眠将进入休眠状态的紫芝孢子铺成厚度为1～2cm的薄层，采用晴天上午10时至下午3时自然阳光照射2～3.5h接受温热和紫外线的刺激；或者置于光照强度为2000～2500勒克斯的钠光灯、或白色日光灯和15W紫外线灯/M2下照射，时间为2～3.5h；然后再将紫芝孢子置于0～2.5℃的冰柜中25～40min；通过上述变温处理刺激，紫芝孢子解除休眠并恢复生理代谢；(3).快速萌动将已恢复生理代谢的紫芝孢子置于用已收获紫芝后的段木基料残渣水提液中浸泡诱导，调节紫芝孢子浸泡温度为26～33℃，浸泡时间为30～120min，得到已充分萌动的紫芝孢子。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)所述的紫芝孢子段木基料残渣水提液的重量比为1∶1～1∶4。
3.按照权利要求1所述的方法，其特征是所述的段木基料残渣水提液是以段木基料残渣水的重量比为1～2∶100，用常规工业多功能提取罐沸水提取30～60min所得到的水提液。
4.按照权利要求1，2或3所述的方法，其特征是所述的段木培育的成熟饱满的紫芝孢子是在高山林区或野外用阔叶树段木培植紫芝而得到。
全文摘要
本发明涉及一种促进紫芝孢子萌动的方法。该方法是将段木培植的成熟饱满的新鲜紫芝孢子置于常规生化设备CO
文档编号C12N1/14GK1807577SQ20061003313
公开日2006年7月26日 申请日期2006年1月20日 优先权日2006年1月20日
发明者刘昕, 吴佳扬, 季青 申请人:中山大学, 深圳学者生物有限公司