快速准确地定位禽蛋胚盘的方法

专利名称：：快速准确地定位禽蛋胚盘的方法
技术领域：
：本发明一般地涉及蛋，更具体而言是蛋加工方法。技术背景在家激瞎化场及其他蛋品加工机构，蛋被大量处理加工。术语"加工"包括但不局限于当胚胎还在蛋中(即还是卵)时，j柳药物、营养物、、和/或其它有益物质处理活的蛋。注射不同物质进入禽蛋已经用于减少孵化后的发病率和死亡率，增大潜在生长率或成鸟的体型，甚至能影响胚胎性别。注射疫苗进入活禽蛋已经可以在蛋中有效地免疫禽类。现已有许多用于向含有早期禽胚的禽蛋进行注射的专利申请。例如，希望能输注物质进入早期胚胎如胚盘的方法。如，希望在养禽工业中对蛋内早期胚胎进行操作从而将外源核酸分子(即产生转基因禽类)或外源细胞(即产生嵌合禽类)导入发育中的胚胎。但是，定位禽蛋内的胚盘经常比较困难，即使可以定位，其可见性，特别^1过蛋内壳膜的可见性，都很差。另外胚盘和周围的蛋物质的颜色和对比度非常樹以，从ffiH顿剛艮检出胚盘更加困难。如果在内壳膜上形成开口(在蛋壳上开口后)，胚盘可被更容易地检出。但是，内壳膜的损坏可能破坏发育中的胚胎，并可能继而导致无法孵化。另外注射物质进入胚盘的常规方法经常因为胚盘定位困难而不可靠。因此，在本领i^在着对在禽蛋内定位和处理胚盘而不损伤蛋的改进方法的需求。
发明内容鉴于上述讨论，此处提供了在禽蛋内定位胚盘的方法。根据本发明的一些实施方式，在蛋壳上形成一个开口，开口应根据蛋的方向位于胚盘位置之上，并露出内壳膜；获得暴露的内壳膜及其下方的物质的影像；处理获得的影像以增弓舰盘可视性；在所成影像中定位胚盘。在获取影像前可以对蛋应用物质以增强内壳膜的透明度。在影像中定位胚盘可包括确定胚盘在影像中的位置坐标。这些位置坐标可被传至蛋品加工装备以进行后续蛋加工。根据本发明的一些实施方式，随后的蛋品加工程序可以包括推进，3131蛋壳开口SA定位的胚盘。装置可以是释放物质进入胚盘的输送装置，禾口/或从胚盘中取出样品物质(例如，胚盘细胞、与胚盘邻接的细胞，等等)的取样，，和/或检出蛋内部信息的检测装置。根据本发明的一些实施方式，蛋上的开口可以在获取影像或进一步操作(如向蛋中注射物质、从蛋中移取物质、检测蛋内部信息等)后封闭。封闭了的蛋可再被孵育至被孵化。根据本发明的一些实施方式，一种确定禽蛋是否能育的方法，包括在蛋壳的一部份区域内形成开口；获得暴露的内壳膜及其下物质的影像；处理获得的影像以确定胚盘在影像中的位置；以存在或缺失胚盘为基础评估禽蛋的生育力。图l是正常禽蛋的侧面剖视图。图2是根据本发明的一些实施方式说明在禽蛋之内定位胚盘的操作流程图。图3A是描述根据本发明的一些实施方式经设置用于获取开口的蛋的影像的高架数字视频摄像机的方框图。图3B是通过图3A的摄像机捕获的胚盘的典型影像。图3C显示的是根据本发明的一些实施方式进行处理以增加胚m比度之后图3B的典型影像。图3D显示的是根据本发明的一些实施方式，图3C的典型影像与放置在胚盘周边的定位框。图4A4D是开口禽蛋的照片，其中图4A和4C中暴露的内壳膜是未经处理的，图犯和4D中暴露的内壳膜是用二甲基亚砜M以增加胚盘的可视性。具体实施方式现在结合附图更全面地描述本发明，其中展示了本发明的优选实施方式。但是本发明可以包含在许多不同的形式之中，而不应认为仅限于在此阐述的实施方式；更恰当地说，提供这些的实施方式是为了公开的彻底和完整，并全面地向本领域技术人员描述本发明的范畴。相同的编号指f^f有相同的元件。图中为了清晰起见，特定线条、图层、组件、元件或部件的厚度可能有所夸张。为了清晰起见，除有另行说明，虚线用于显示延续部分，并可以表明可选部件或操作。在此提到的所有出版物，专利申请，专利及其他参考全部纳入此处作为参考。应该理解，当描述一个元件在另一个元件"上"时，它能直接位于另一个元件上，也能存在中介元件。相反，当称一个元件为"直接"在另一元件上时，就不存在中介元件。也应该理解，当称一个元件"连接"或'附着'于另一元件时，它可以是直接连接或附着于另一个元件，或也可能存在中介元件。相反，当称一个元件"直接连疾或'直接附着"于另一元件时，将没有中介元件存在。在此处使用的"向上地'，"向下他'，"垂直的"，"水平的"之类的术语仅为解释的目的。本领域技术人员也应理解，涉及一个结构或部件与另一部件相连时，可能具有重叠#相邻部件之下的部分。除非另外定义，所有在此使用的专业和科学名词具有的含义与本发明隶属的领域中的普通技术人员通常所理解的相同。在此发明说明书中使用的术语仅是为了描述具体实旨式而不是用于对本发明的限制。除非上下文有明确表述，在本发明说明书和附加的权禾腰求中使用的"a"，"an"，"the"单数形式也包括了复数形式。在此使用的术语"和/或，包括了一个或多个相关的列表项目的任意组合。在此使用的术语"禽邻"受试禽，，包括了所有禽类的雄性和雌性，但主要包括用于商业化生产禽蛋、肉类或作为宠物的家禽。因此，术语"禽邻"受试禽'具体地包括各种禽类，而不限于家鸡、妇鸟、鸭、鹅、鹌鹑、^pheasant)、长尾鹦武l(parakeets)、鹦鹉、美冠鹦徵cockatoo)、澳洲l鹦武Kcockatiel)、鸵鸟、鸸鹋(emu)等。在此i顿的术语"早期胚胎"指一个禽类的胚胎，从产下的时间(胚盘阶段)经过大概的发育阶段，该时期其原生殖细胞(PGCs)會^多移动。对于鸡胚胎特殊的是，一个"早期胚胎"通常大概是胚胎期20(H&H)胚胎或更早。家鸡胚胎的发育阶段在本领域中已广为知晓，见例子，嫩鸟生长图解TheAtlasOfChickDevelopment,R.BellairsM.Osmondeds.,AcademicPress,1998。在此使用的术语"胚盘"在本领域中有它明确的意思。通常，胚盘包括从产出到原肠期末期的胚胎。在本领域中，胚盘有时也用另外的名称'种脐(germinaldisc)"或'胚胎盘(embiyonicdisc)"指代。胚盘可以被描述成是在早期胚胎分裂形成的细胞平盘，并持续到原肠期末。在产蛋的时候，两个胚盘的主要结构区域是可见的，处于中部的明区和末端的暗区(雏鸡生长图解TheAtlasOfChickDevelopment，R.BellairsM.Osmond,eds.，AcademicPress,1998)。家鸡胚月台特殊的一个方面是，胚盘一般被认为从产出时(即DC期或X期EG&K)大概经过Xm期(EG&K)或更晚期的胚胎。在此使用的术语"注射(名词形式)"和"注射(动名词形式)"，包括将装置插入蛋或胚胎的方法，包括传递或放出物质进入蛋或胚胎的方法、从蛋或胚胎中移取物质的方法和/或插入检测装置进入蛋舰胎的方法。术语"嵌合禽类"或'嵌合胚"指受体禽类或胚胎，含有从另外禽类或胚胎，即"供体'，来源的细胞。在此j顿的术语"转基因禽类"和"转基因胚胎"与他们在本领域的通常意义一致。转基因禽类或转基因的胚胎在一个或多个细胞中含有外源核酸。在此使用的术语"膜"指在蛋中的任何间质组织层。蛋中典型的膜包括，但不局限于外壳膜、内壳膜、绒毛尿囊膜、卵黄膜和羊膜(内胎膜)。现参考图l，图解禽蛋10。图中蛋10包括壳12，外壳膜14，内壳膜16，和在蛋10钝端内壳膜14与外壳膜16之间的气室18。图中蛋10还包括蛋黄20和胚盘22，由内部稀薄卵清蛋白24a、外部浓稠卵清蛋白24b和外部稀薄卵清蛋白24c围绕。图2是流程亂说明根据本发明的一些实施方式定位禽蛋之内胚盘的方法。应该注意的是方框内标注的功能不一定按照图2标注的顺序执行。连续显示的两个(或更多的)方框实际上可能是同时执行或者有时方框可能逆序或以不同次;m行，这取决于涉及的功能。另外，应该注意到本发明实施方式可以在禽蛋的不同胚胎发育阶段应用。本发明的实施方式不局限于禽蛋的胚盘阶段。例如，本发明的实施方式可以应用在经过胚盘的阶段，比如孵化的3-5天。首先，除去蛋的一部分蛋壳和一部分外壳膜以形成开口或窗口，以露出内壳膜(方框100)。优选的开窗过程不能对内壳膜造成有害的影响并保持其完整。可以M多种方式开窗，包括如打L机、钻孔机或其它本领域技术人员熟悉的装置。另外，可以在蛋的任何适合的位置开口，例如在蛋侧面接近z繊轴的地方、蛋的任一端等等，在本发明一些实施方式中，在大致7K平放置蛋的壳面向上方的部份和气室上方的开口蛋壳。本领域技术人员知道早期胚胎(例如，胚盘)一般定位在或靠近卵的最上面部份。因此，除非测定是为了操纵胚胎到卵内不同的位置，蛋壳上的开口通常开在卵的最上面部分，即接近早期胚胎(例如，胚盘)应在的位置。根据本发明的一些实施方式，蛋的表面，至少在开窗位点的附近，可以消毒以减少细菌(或其它的)污染(例如，使用酒精或其它的消毒溶液)。但是，对本发明的实施方式来说，消毒蛋，包括窗口的位点不是必需的。根据本发明的一些实施方式，可以提高内壳膜的透明度，例如应用一，质如二甲亚,MSO)或甘油处理内壳膜(方框200)。也可用其它的可增强内壳膜透明度的或在其它方面帮助成像的物质，包括而非限于，7K、酒精、磷酸缓冲液(PBS)、芸苔油、植物油、矿物油、三乙酸甘油酯、丙酮、乙二醇、单甲基醚等等。然后对暴露的内壳膜及其下的物质(包括胚盘)(方框300)进行一种或多种数字成像。根据本发明的一些实施方式，可以用一种数码相机获得单帧数字图像和/或可以用数字视频摄像机获得数字视频。但是，本发明的实施方式不局限于数字成像。也可以获得暴露的内壳膜及其下物质的非数字图像，然后转变成为数字格式用于后续的图像处理，如下所述。根据本发明实施方式，其它的成像方法和技术可以应用于胚盘影像的获取。例如可以应用高^fJ摔超声波和光学连续断层照相衣OCT)。例如，一种小型的OCT探针可以安置在针的尖端或其它装置上以插入蛋中。OCT可以fflMiS行一系列若干悬空扫描和观察充满液体的区域以产生胚盘及其下的囊胚腔的三维影像。然后可以将针插入蛋内(例如，在基本完整的内壳膜之下)。然后可对获得的数字图像进行一种或多种图像处理以增强胚盘的在影像(方框400)中的可视性。但是，根据本发明实施方式，图像处理不是必需的。胚盘在未加工影像中的可视性也可能很好。然后使用"计算机视觉"软设對方框500)定位胚盘。然后将胚盘在数字图像中的坐标位置传送至加工设备，加工设备将舰窗口和内壳膜插A^置iSA胚盘和/或与胚盘邻接的区嫩方框600)。通機置可以注入物质、禾口/或i辦材料、和/或探测蛋内部信息。如果插入蛋内的装置是一种输送装置，一种或多种物质可以通过输送，释放和沉积进入胚盘和/或其邻近位置。也可以在蛋内的其它位置沉积一种或多种物质。本发明实施方式不局限于一种或多种物质在胚盘或邻近位置的沉积。如果插入蛋内的装置是取样體，一种或多种样*(例如，胚盘细胞，等钩可以从胚盘和/或其邻近位置移去。一种或多种样本可以从蛋的胚外部分取出(例如，蛋黄或卵清蛋白)。例如，可以从蛋清蛋白中取样以确定是否存在微生物污染C例如，沙门菌属)，等等。为本领域技术人员所知的，从蛋中取样的装置可以是一种用于提取物质(例如，尿囊液，其它的液体等等)的针。例如，针可以具有钝尖和轴向的延伸的内腔，内腔终止于相邻针头部分内的孔。使用真空装置吸引，物质可通过孔被n厄驻内腔。钝尖可阻止内腔被物质阻塞。一般来说，样本从蛋中取出是为了获取其中的信息。例如，取出样本可能是为了用于胚胎的性别鉴定或活力确定。举例说明，为本领域技术人员所知，包含细胞的样本可以从胚胎中取出，细胞可能用于分析(一般的在从蛋中取出之后)以检测性染色体或染色体上的性-特异'性序列。样品也可以用于其它任何基于DNA的检验，例如，确定感兴趣的特殊基因或同位基因在胚胎的存在。在一些实施方式中，可以使用多位点注射或取样装置，例如，在美国专利No.6,032,612中的描述。其它典型的运送和/或取样装置包括如美国专利No.5,136,979;美国专利No.4，681,063和No.4,903,635;以及美国专利No.4，040，388,No.4,469,047和No.4，593,646在所述的。如果插入蛋内的装置是检测器，可以从蛋内鹏出各种信息。检测器可以插入蛋的胚外部分中(例如，蛋黄或气室)。或者，检测器可置于大致靠近胚胎(按上述定义)处。在其它实施方式中，检测器可以放入胚胎的明区或暗区或放入囊胚腔。检测器装置可以用于收集信息包括，但不限于，胚胎的大小、胚胎的位置、胚胎的发育阶段和/舰胎的任何特征要素，胚胎的性别、禾口/舰胎的活力。检测器装置可以获得关于胸台和囊胚腔位置的信息。可以舰连接到检测器的装置捕維息(例如，电脑或其它的M鹏机)。可以应用各种型式的检测器包括，但不限于，电学传感器、光学传感器、化学传感器、温度传感器、声音传感器、压力传感器或任何其它的用于探测物理或化学参数的装置。例如，典型的检测器在美国专利No.6,244,214，授权于Hebrank，中描述。顿蛋注射物质和/或移出样本和/或探测信息之后，装置将从蛋中退出。可用密封剂封闭蛋壳上的小孔，蛋可以孵育直到孵化。本领域技术人员能理解本发明的方法可以在大量蛋上进行，例如，在商业家禽业中。而且，在此描述方法可以全手动、全自动或半自动地操作。根据本发明的一些实施方式，成像系统包括硬件和软件部分。硬件部分包括光源(例如，150瓦卤素灯光源，等荀、数字视频摄像机和适当的聚焦透镜、连接到摄像机的电脑或其它的i娥处理机，例如，显卡(例如，正EE1394("火统')卡)。根据详细的实施方式，应用的摄像机具有12-brt或更高的^fjf率和高动态范围。典型的摄像机是具有高动态范围的601HDR(高至112dB)、具有16國bit^f,率和先进的扫描CMOS传^l技术的单色BaslerA601HDR。但是也可以采用不同的照相机。本发明的实施方式不局限于特殊的摄像机、透镜和/或影像捕获和存储技炎例如CCD或CMOS)。本发明的实式不局限于特定种类的光源或特定的光源瓦数或光源的特定位置和/或方向。根据本发明的一些实施方式，可以应用额外的组件包括光学部件如滤光器和/或光源(包括那些商品来源的如Edmund镜片，Omega镜片等笱以帮助提高(白色的)胚盘与攻黄色的)周围环境之间的对比度。例如申请人已经发现如果用蓝光照明可以使胚盘的可见性变得更好。可以fflil使用蓝光源或用蓝色滤镜滤过白光源产生蓝光。这种可视性改善可有助于包含用于找寻获得影像中胚盘的图像获取和处理算法的软件部分。根据本发明的一些实施方式，应用图像处理来定位影像中的胚盘，和可选地增强影像中胚盘的对比度。用于定位胚盘的图像处理包括如图像匹配和斑点分析之类的算法。用于增强影像中胚盘对比度的图像处理包括红绿蓝层提取和各种其它的过滤算纟封例如，平滑、边缘检测、高斯化等等)。依照本发明实式的可用的典型图像处理技术在美国专利No.6，219,452;6,222,940;6,229,921;6,256,625;6,370,270;6,366,686;6,493,079和6,535,640中有所描述。例如，图像匹配中用户选择一种模板影像用于软件来查找后续影像，然后设定其它参数比如查找的匹配数量、搜索的深與有禾盱粗查)，标记限制和旋转图像。图像匹配、斑点分析、红绿蓝层提取及其他图像处理技术为本领域技术人员所熟知，在此没有进一步描述的必要。根据本发明的实施方式使用的典型的成像软件包括用于自动检査的VisionBuilder,可从NationalInstruments,Inc.获得。该软件可很好的与LabVIEW软件整合，LabVIEW软件应用于其它的蛋品加工程序，包括压力传感和注射，也可以从NationalInstruments,Inc.获得。参考图3A，俯视的数字视频摄像机30被设定用于获得开口蛋10的影像(即，如上所述的在壳上开口的蛋)，蛋被装置或托架32固定。蛋可以Mil各种型式的装置固定，并无限制。而且，根据本发明的一些实施方式多个蛋可以同时处理。例如对于多个蛋处理，一个蛋托盘可以起到托架32的作用。ffiil摄影机30捕获的胚盘22的典型影像在图3B中展示。图示的胚盘22难以同周围的蛋黄20区分。本发明的实施方式不局限于图示中的光源的方向。根据本发明的其它的实施方式，一轴向弥漫性照明^a(例如，从AdvancedIllumination,Inc.获得)可以装置于摄像机和蛋之间。轴向弥漫性照明装置具有用(蓝色)LED围绕的楔角^fe镜来控制光线适当地到达胚盘然后返回摄像机30。参考图3C，Mii图像处理软件处理图3B中的影像，生成的影像其中胚盘22相对于蛋黄20具有增强的对比度。图3D中，软件在影像中检测出胚盘22，并放置方框40围绕胚盘22。方框的坐标(例如，几何中点)可供装置来插入胚盘22和/敏爾入与之接近的位置，如上所述。根据本发明的一些实施方式，如上所述的成像系统可扩大至同时处理多个蛋，并可以包括多台照相机。而且，实际上任何方向的蛋，包括水平、直立、倾斜等等，都可按本发明的一些实施方式进行处理。本发明的一些实施方式具体适应于准确快速地定位在可育的、未孵过的0天蛋。本发明的一些实施方式也可以应用在孵化期间的胚胎的成像，例如在0-5天内。本发明的一些实施方式不局限于定位禽蛋内的胚盘。fflil本发明的一些实施方式可以监测胚胎的发育。根据本发明的一些实施方式，可确定特殊血管的位置以利于运送蛋白或载体进入循环系统。根据本发明的一些实施方式，成像技术可以应用于确定蛋是否可育。根据本发明的一些实施方式，成像技术可以与胚胎操作或定位技术联合使用。胚胎操作和定位技术在美国专利申请号No.10/216,427中描述，该专利申请为本专利申请受让人拥有。胚层(blastodisc)(—般仅仅一两个细胞)是位于蛋黄表面的区域，是胚胎形成的发生位置，与蛋是否已经受精无关。一旦受精，胚层最终将变盘(即，胚层将从一两个细胞增殖成数以万计细胞)。因此，非受精卵不会具有胚盘。根据本发明的一些实施方式，确定禽蛋是否能育的方法包括在蛋壳的一部分内形成开口，并获取暴露内壳膜及其下物质的影像。处理获得的影像以确定影像中胚盘的存在。基于探测在影像中胚盘的存在来确定蛋的孵化率。如果胚盘没有被检出或如果影像中的糊犬不能与胚盘的特征匹配(例如，形状、大小等钩，那么认为蛋是不能育的。实施例实施例1通过内壳膜向胚盘注射的主要障碍是M:膜难以看清胚盘，因为膜虽然有些透光，但一般是不透明的。为了解决这个困难，我们试图通过在膜上涂上一些液体物质而使膜变得，明。在操作之前，蛋依照标准工业实践(75%相対湿度，16C,8天)存储。移去在气室位置的壳和外部的壳膜，暴露完整的内壳膜。4顿棉签将内壳膜分别用4种不同的液恢7]C，矿物油，甘油，或二甲基亚砜)涂覆。4OT7jC和矿物油对内壳膜的透明度没有实际效果。甘油和二甲基亚砜则都能使内壳膜变得清晰。虽然膜没有表现出完，明，但透明度有了明显的改善。如果本可隐约看见胚盘，添加甘油或二甲基亚砜可增加胚盘的可视性和景深感觉。在一些实例中，胚盘的位置完全看不见，添加甘油或二甲基亚砜后通常能够看到胚盘，可增加判别未受精卵的能力(见图4A4D)。图4A-4D显示使用二甲基亚砜提高了蛋内胚盘的可视性。图4A和4C显示的是未经处理的蛋，图4B和4D显示的是用二甲基亚砜^/g的相同蛋。在图4B和4D中的胚盘由箭头A指示。注意图4A中的胚盘表现为一片模糊，用二甲基亚砜处理后则大大的增加了胚盘在影像中的锐利度。在图4C中，胚盘完，不见，加上二甲基亚砜后影像中可清楚看到胚盘，如图4D所示。二甲基亚砜似乎能比甘油造成更好一些的可视性。甘油的操作也比较困难(粘稠并在内壳膜上留下液滴)。二甲基亚砜能腿的蒸发或:iffl:膜扩散，不留下痕迹。对提高胚盘的可见性以进行人工注射来说，用二甲基亚砜处理内壳膜可能是一种很有用的技术。实施例2为了评价二甲基亚砜对胚胎发育的毒性，如实施例1中描述用二甲基亚砜处理胸台并进行孵化，然后与没有i顿二甲基亚砜处理的胚胎相比较。为了更进一步评价二甲基亚砜使内壳膜清晰的效果，使用存储仅4天的蛋。使用了三个实验组A)开窗+二甲基亚砜蛋在钝端开窗，不破坏内壳膜。用二甲基亚抹内壳膜。本实验组仅保留看得见胚盘的蛋。胚盘用装满KRB培养基的Humagenma吸移管穿刺以模拟注射。蛋用硅树脂+胶纸带封口。N=42(即该组有42枚蜀。B)开窗+无二甲基亚砜在蛋的钝端开窗，不破坏内壳膜。蛋用硅树脂+胶纸带封口。忖=39(即本组有39枚蛋)。C)未处理蛋完全未处理并进行孵化。N:54(即本组有54枚蛋)。孵化结果:<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>应注意孵育箱中有腐坏的蛋(来自于另一研究)，在试验组A上有泄漏的细菌，可能导欽'腐坏"分类和雏鸡的后期死亡。相对于仅开窗并封口的蛋来说，用二甲基亚砜处理的蛋有孵化量的减少。这些减少的部分原因也许是由于从孵化箱中其它蛋上的细菌污染所弓胞。在组A中也有比B或C更早期的死蛋。因为在组A中几乎没有或没有未受精卵，这些早期死亡的增加可能是由二甲基亚砜的毒性弓跑。提高胚盘的可视性和注射能力应更重于二甲基亚砜毒性弓胞的较小危险。上述内容是为了对本发明进行描述，而不应被认为是对其进行限定。虽然已经描述本发明的一些典型实施方式，本领域技术人员应该容易理解在典型实施方式中可能有许多修改并没有实质地偏离本发明的新教导和优点。因此，如权禾腰求所限定，所有这些修改被认为包括在本发明的范围之内。本发明由以下权利要求限定，并包括了同等的权禾腰求。权利要求1.一种定位禽蛋内的胚盘的方法，包括在胚盘位置上方的蛋壳上形成开口以暴露内壳膜；获取暴露的内壳膜和其下方物质的影像；处理获得的影像以增强影像中胚盘的可视性；和在影像中定位胚盘。2.如权利要求1所述的方法，该方法进一步包括在获，像之前对蛋应用物质至内壳膜以增强其透明度。3.如权利要求1所述的方法，其中在影像中定位胚盘包括确定胚盘在影像中的位置坐标，并进一步包括传送胚盘的位置坐标到蛋品加工装备。4.如权利要求3所述的方法，进一步包括响应于所接收的位置坐标M装置M蛋壳上的开口并进入胚盘。5，如权利要求4所述的方法，其中所述装置是释放物质iJA胚盘的输送装置。6.如权利要求4所述的方法，其中所述装置是从胚盘中移出试样材料的取样装置。7.如权利要求4所述的方法，其中所述装置是从蛋内部探测信息的检测器装置。8.如权利要求l所述的方法，其中的蛋选自于由家鸡、妇鸟、鸭、鹅、鹌鸫、雉、长尾小鹦鹉、鹦鹉、美冠鹦鹉、澳洲鹦鹉、鸵鸟和鹂鹋的蛋组成的组。9.如权利要求l所述的方法，进一步包括在获取影像后封闭蛋壳上的小开□。10.如权利要求所述1的方法，进一步的包括孵育蛋直到孵化。11.如权利要求5所述的方法，其中的装置是多重注射输送装置。12.如权利要求6所述的方法，其中从蛋中取出的样品物质包括胚盘细胞。13.如权利要求7所述的方法，其中检测器装置选自于由电学传感器、光学传感器、化学传感器、温度传感器、声音传和压力传组成的组。14.一种定位禽蛋内的胚盘的方法，包括在胚盘位置上方的蛋壳上形成开口，以暴露内壳膜；对内劑莫应用物质增强其透明度；获取暴露的内壳膜和其下方物质的影像；处理获得的影像以增强影像中胚盘的可视性；确定胚盘在影像中的位置坐标；和传送位置坐标至蛋品加工装备。15.如权利要求14所述的方法装置Mil蛋壳上的开口并iSA胚盘。16.如权利要求15所述的方法装置。17.如权利要求15所述的方法取样装置。18.如权利要求15所述的方法器装置。19.如权利要求15所述的方法开口。20.—种确定禽蛋是否能育的方法，包括在胚盘可能所处的位置上方的蛋壳上形成开口，以暴露内壳膜;获取暴露的内壳M^其下方物质的影像；处理获得的影像以确定影像中是否存在胚盘；禾口基于影像中胚盘的存在与否评估所述禽蛋的生育力。，进一步包括响应于所接收的位置坐标,，其中所述装置是释放物质进入胚盘的输送，其中所述装置是从胚盘中移出i^材料的，其中所述體是从蛋内部探测信息的检测，进一步包括在获取影像后封闭蛋壳上的小全文摘要本发明提供非侵入定位禽蛋内胚盘的方法。根据蛋的方向，在胚盘所处位置上方的蛋壳上形成开口；获取暴露的内壳膜及其下方物质的影像；处理所获影像以增强影像中胚盘的可视性；在影像中定位胚盘。在获取影像前，可能对蛋应用物质以增强内壳膜的透明度。在影像中定位胚盘可以包括确定影像中胚盘的位置坐标。这些位置坐标可以被送到蛋品加工装备以用于蛋的后续加工。文档编号C12N5/00GK101283087SQ200680034356公开日2008年10月8日申请日期2006年9月20日优先权日2005年9月20日发明者D·马哈托,N·门杜,P·L·小赖巴茨克,S·P·沃尔夫申请人:恩布里克斯公司