专利名称：：甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法
技术领域：
：本发明涉及一种农作物病虫害抗扩展性鉴定方法，具体的说就是一种甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法，属农业植保领域。
背景技术：
：甘薯茎线虫病Z^j^/7c/^ofe"r""or由马铃薯腐烂线虫所引起，在山东、江苏、安徽和河南等地发生严重。该病害在甘薯IC藏期导致烂窖，在育苗期引起烂床，大田期甘薯受害后，薯块出现糠心，一般发病田块减产20%-50%，严重的甚至绝产。连作重茬使线虫日益积累，病情逐年加重，已成为北方薯区甘薯生产上最严重的病害。抗病品种的选育和推广是控制该病害的主要手段。准确评价品种的抗性显得尤其重要。甘薯品种对茎线虫病的抗性有抗侵入和抗扩展的区别，抗侵入性鉴定是用病地自然诱发鉴定，而抗扩展是对鉴定品种进行室内接种，鉴定方法一直采用林茂松等提出的方法，引用文献资料为林茂松.室内人工接种测定甘薯品种对马铃薯腐烂线虫的抗性.南京农业大学学报，1989，12(3):44-47，以接种后薯块横切面的防效评价品种的抗性。但多年抗扩展鉴定工作实践表明线虫在薯块中横向和纵向扩展不一致，仅以品种横切面的防效评价品种对茎线虫病抗扩展特性有欠缺，不能有效应用于甘薯育种研究中对甘薯茎线虫病的抗扩展性鉴定。
发明内容本发明的目的是为克服上述现有技术的不足之处，提供一种甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法，取几块经严格消毒过的薯块，采用直径5mm的打孔器在每薯块中部打？L,用消毒过的移液器将200条线虫打入孔中，再切下一小段薯条放置于孔口，用石蜡将孔口密封，放入消毒过的塑料箱中，置于25。C室温下培养45天，然后将鉴定薯块取出，从打孔处切开，量取薯块横切面上薯块的直径和线虫扩展大小，计算薯块横切面的面积与病斑面积的比值，再将薯块沿中心点纵切，量取薯块纵切面上薯块的长度和线虫扩展的长度，计算薯块纵切面的长度与病斑长度的比值，分别计算横切面和纵切面的防效，以横切和纵切面平均防效进行分级，评价品种的抗感特性。本发明是以如下技术方案实现的一种甘薯基线虫病抗扩展性鉴定方法，其特征是按如下步骤进行(1)参试品种准备，从田间取回被感染茎线虫病的带虫薯块，用浅盘法将线虫分离出来备用；(2)将需进行鉴定的品种，每品种准备三块中等大小的薯块，清洗后用75%的酒精进行表面消毒，消毒后置于消毒过的塑料箱中备用，用高感品种栗子香做对照；(3)线虫消毒，将分离出的线虫用400目筛网过滤，用无菌水清洗三次，放入预先配好的青霉素+链霉素的消毒液中，消毒5min，再用无菌水清洗三次，配成200条/lml线虫的悬浮液备用；(4)接种鉴定，采用直径5rnrn的打孔器在每薯块中部打孔，用消毒过的移液器将200条线虫打入孔中，再切下一小段薯条放置于孔口，用石蜡将孔口密封，放入消毒过的塑料箱中，置于25。C室温下培养45天；(5)当25'C室温下培养45天时将鉴定薯块取出，从打孔处切开，量取薯块横切面上薯块的直径和线虫扩展大小，计算薯块横切面的面积与病斑面积的比值，再将薯块沿中心点纵切，量取薯块纵切面上薯块的长度和线虫扩展的长度，计算薯块纵切面的长度与病斑长度的比值，分别计算横切面和纵切面的防效，以横切和纵切面平均防效进行分级，评价品种的抗感特性；(6)防效计算对照横(纵)切面比-品种横(纵)切面比防治效果=-X100%对照横(纵)切面比分级标准高抗平均防效》80%;抗病平均防效在60.1%-80%;中抗平均防效40.1%-60%;感病平均防效20.1%-40%;高感平均防效《201本发明的优点是该鉴定方法科学，操作过程简单，以每块经严格消毒的薯块在室内接种200条线虫，25'C室温下培养45天，用薯块的横切和纵切面平均防效进行评价最为有效。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步说明小说加一种甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法，按如下步骤进行(1)参试品种准备，从田间取回被感染茎线虫病的带虫薯块，用浅盘法将线虫分离出来备用；(2)将需进行鉴定的品种，每品种准备三块中等大小的薯块，清洗后用75%的酒精进行表面消毒，消毒后置于消毒过的塑料箱中备用，用高感品种栗子香做对照；(3)线虫消毒，将分离出的线虫用400目筛网过滤，用无菌水清洗三次，放入预先配好的青霉素+链霉素的消毒液中，消毒5min，再用无菌水清洗三次，配成200条/lml线虫的悬浮液备用；(4)接种鉴定，采用直径5mm的打孔器在每薯块中部打孔，用消毒过的移液器将200条线虫打入孔中，再切下一小段薯条放置于孔口，用石蜡将孔口密封，放入消毒过的塑料箱中，置于25'C室温下培养45天；(5)当25'C室温下培养45天时将鉴定薯块取出，从打孔处切开，量取薯块横切面上薯块的直径和线虫扩展大小，计算薯块横切面的面积与病斑面积的比值，再将薯块沿中心点纵切，量取薯块纵切面上薯块的长度和线虫扩展的长度，计算薯块纵切面的长度与病斑长度的比值，分别计算横切面和纵切面的防效，以横切和纵切面平均防效进行分级，评价品种的抗感特性；(6)防效计算对照横(纵)切面比-品种横(纵)切面比防治效果=-^-X100%对照横(纵)切面比分级标准高抗平均防效》80%;抗病平均防效在60.1%-80%;中抗:平均防效40.1%_60%;感病平均防效20.1°/。_40%;高感平均防效《20%。薯块横切面与纵切面调查对抗性评价的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*HR:高抗，highresistance;R:抗，resistance;MR:中抗，middleresistance;HS:高感，highsusceptibility;S:感，susceptibility;MS:中感，middlesusceptibility结论从上述列举的鉴定结果可以看出品种的横切面抗性与平均抗性有差异。如徐01-2-22其横切面防效为抗，平均防效则为感；徐273横切面防效为高抗，而平均防效为抗；徐03-3-4横切面防效为中抗，而平均防效为高感；因此，仅以横切面防效确定品种的抗扩展性是不全面的，以室内接种200条线虫，25。C室温下培养45天，用薯块的横切和纵切面平均防效进行评价最为有效。权利要求1.一种甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法，其特征是按如下步骤进行(1)参试品种准备，从田间取回被感染茎线虫病的带虫薯块，用浅盘法将线虫分离出来备用；(2)将需进行鉴定的品种，每品种准备三块中等大小的薯块，清洗后用75％的酒精进行表面消毒，消毒后置于消毒过的塑料箱中备用，用高感品种栗子香做对照；(3)线虫消毒，将分离出的线虫用400目筛网过滤，用无菌水清洗三次，放入预先配好的青霉素+链霉素的消毒液中，消毒5min，再用无菌水清洗三次，配成200条/1ml线虫的悬浮液备用；(4)接种鉴定，采用直径5mm的打孔器在每薯块中部打孔，用消毒过的移液器将200条线虫打入孔中，再切下一小段薯条放置于孔口，用石蜡将孔口密封，放入消毒过的塑料箱中，置于25℃室温下培养45天；(5)当25℃室温下培养45天时将鉴定薯块取出，从打孔处切开，量取薯块横切面上薯块的直径和线虫扩展大小，计算薯块横切面的面积与病斑面积的比值，再将薯块沿中心点纵切，量取薯块纵切面上薯块的长度和线虫扩展的长度，计算薯块纵切面的长度与病斑长度的比值，分别计算横切面和纵切面的防效，以横切和纵切面平均防效进行分级，评价品种的抗感特性；(6)防效计算id="icf0001"file="S2008100236042C00011.gif"wi="118"he="12"top="189"left="42"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>分级标准高抗平均防效≥80％；抗病平均防效在60.1％-80％；中抗平均防效40.1％-60％；感病平均防效20.1％-40％；高感平均防效≤20％。全文摘要本发明涉及一种农作物病虫害抗扩展性鉴定方法，具体的说就是一种甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法。该方法科学，操作过程简单，取几块经严格消毒过的薯块，采用直径5mm的打孔器在每薯块中部打孔，用消毒过的移液器将200条线虫打入孔中，再切下一小段薯条放置于孔口，用石蜡将孔口密封，放入消毒过的塑料箱中，置于25℃室温下培养45天，然后将鉴定薯块取出，从打孔处切开，量取薯块横切面上薯块的直径和线虫扩展大小，计算薯块横切面的面积与病斑面积的比值，再将薯块沿中心点纵切，量取薯块纵切面上薯块的长度和线虫扩展的长度，计算薯块纵切面的长度与病斑长度的比值，分别计算横切面和纵切面的防效，以横切和纵切面平均防效进行分级，评价品种的抗感特性。文档编号C12Q1/02GK101260422SQ20081002360公开日2008年9月10日申请日期2008年4月10日优先权日2008年4月10日发明者强李,李洪民,李秀英,欣王,谢逸萍,马代夫申请人:江苏徐州甘薯研究中心