益生菌婴儿产品的制作方法

专利名称：：益生菌婴儿产品的制作方法
技术领域：
：本发明一般涉及益生菌婴儿配制食品(infantformulas)和儿童营养产品。
发明内容简言之，本发明在一个实施方案中涉及包含蛋白质来源、脂肪来源、碳水化合物来源和长双歧杆菌(汉Longum)AHl205的婴儿配制食品或儿童营养产品。在另一个实施方案中，本发明涉及在婴儿或儿童中降低炎症的方法，所述方法包括对婴儿或儿童施用长双歧杆菌AHl205。为了更全面的理解本发明，现提及以下说明，其结合附图进行理解。图1是长双歧杆菌AH1205的BOX聚合酶链式反应(BOXPCR)(生物分析仪)条码谱(barcodeprofile)。使用Agilent2100软件测定碱基对大小;图2为图，其显示了在8天喂食期间长双歧杆菌AH1205的粪便回收，其证明AH1205通过鼠胃肠道的能力；图3为条形图，其显示了长双歧杆菌AH1205对人外周血单核细胞(PBMC)的白介素(IL)-10细胞因子产生的影响。结果表示为平均值土测量标准误(SEM)(n=6)；图4A和4B为图，其显示了(A)长双歧杆菌AH1205和(B)安慰剂对用卵清蛋白(OVA)攻击后的敏化小鼠支气管肺泡灌洗(BAL)液中的总细胞数的影响(n=10/组，*=p<0.05相比仅用OVA攻击)；图5A和5B为图，其显示了(A)长双歧杆菌AHl205和(B)安慰剂对乙酰甲胆碱的气道反应性的影响，通过在用OVA或盐水鼻内攻击后M小时的OVA敏化小鼠的增强的呼气间歇(Penh)的改变来进行评定。各个数据点代表平均值土SEM(n=10/组，*p=<0.05相比仅用0VA)；图6A至6E为图，其显示了来自于OVA敏化小鼠的BAL液中的(A)IL-10、(B)干扰素(IFN)-Y、(C)肿瘤坏死因子(TNF)、(D)IL-6和(E)趋化因子(C-C基序)配体2(CCL2)水平。各个柱代表平均值土SEM(n=10,*p=<0.05相比OVA攻击的、盐水处理的对照)；图7为图，其显示了喂食AH1205的小鼠的⑶4+⑶25+细胞显著降低效应⑶4+Tcell增殖(所有组n=7)；图8为图，其显示了在⑶4+群中同时为⑶25+的派伊尔斑细胞百分比，通过流式细胞术评定；图9A和9B为图，其显示了表达转录因子R)xP3的⑶47⑶25+细胞百分比。图显示在喂食长双歧杆菌AH1205的无菌小鼠中R)xP3被显著上调。(A)=脾细胞，(B)=肠系膜淋巴结细胞(MLNC)(n=4/组用于脾测定，n=2/3用于MLNC测定)；图10是图，其显示了当用长双歧杆菌AH1205喂食无菌小鼠时，CD3/CD28刺激的MLNC培养物分泌的细胞因子IL-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和IFN-Y的水平降低。结果表现为每组平均值+SEM(n=4/组)；图11是图，其显示了当用长双歧杆菌AH1205喂食无菌小鼠时，CD3/CD28刺激的脾细胞培养物分泌的细胞因子IL-6和TNF-α的水平降低。结果表现为每组平均值+SEM(n=4/组)；和图12为图，其显示了与鼠李糖乳杆菌(Lacio^ciBw1Srhamnosus)GG(LGG)比较，长双歧杆菌AHl205在3个月中的稳定性。实施发明的最佳方式现在将详细涉及本发明的实施方案，以下阐明其中的一个或多个实施例。提供各个实施例以解释本发明而不是限制本发明。事实上，对本领域技术人员而言显而易见的，可以在本发明中进行各种修改和改变而不背离本发明的范围或精神。例如，作为一个实施方案的部分说明或描述的特征可用于另一个实施方案以获得更进一步的实施方案。因此，本发明旨在包含在所附权利要求及其等同范围内的这些修改和改变。本发明的其他目的、特征和方面在以下详细描述中公开或在以下详细描述中是显而易见的。本领域普通技术人员应当理解本说明仅仅描述示例性实施方案，而无意限制本发明的更广泛方面。如上所述，本发明一般涉及益生菌婴儿配制食品和儿童营养产品。益生菌婴儿配制食品和儿童营养产品相关参考可包括Dermen等人的美国专利号7，179，460和Luchansky等人的美国专利号5，922，375。本发明要解决的技术问题是提供包含新益生菌的婴儿配制食品和儿童营养产品。因此，在一个实施方案中，本发明涉及包含长双歧杆菌(Mifidobeicteriumlongm^M瓶AH1205的婴儿配制食品或儿童营养产品。长双歧杆菌菌株AH1205已于2006年5月11日在英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(NationalCollectionsofIndustrial,Marine,andFoodBacteria(NCIMB),苏格兰，英国)保藏,授予的登记号为NCIMB41387。NCIMB是布达佩斯条约确认的国际培养物保藏单位(InternationalDepositoryAuthority)。菌株是耐酸和耐胆汁的并通过胃肠道。在本发明的一个具体的实施方案中，长双歧杆菌AH1205从婴儿粪便中分离。在另一个实施方案中，婴儿配制食品或儿童营养产品包含长双歧杆菌AH1205或其突变体或变体。突变体可为遗传修饰的突变体。变体可为双歧杆菌的天然发生变体。在一些实施方案中，菌株可为益生菌。在其他实施方案中，菌株可为生物纯培养物形式。在还其他实施方案中，菌株为分离的菌株。如本文所用，术语“突变体”、“变体”和“遗传修饰的突变体”包括双歧杆菌菌株，与亲本菌株相比，其遗传和/或表型特性发生改变。长双歧杆菌的天然发生变体包括选择性分离的靶特性的自发改变。亲本菌株特性的故意改变(deliberatealteration)通过传统(体外)遗传操纵技术例如基因破坏和接合转移完成。遗传修饰包括将外源和/或内源DNA序列引入双歧杆菌菌株的基因组，例如通过载体，包括质粒DNA或噬菌体，插入细菌菌株的基因组。天然或诱导的突变包括至少单碱基改变例如缺失、插入、转换或其他可导致DNA序列编码的氨基酸序列改变的DNA修饰。术语“突变体”、“变体”和“遗传修饰的突变体”也包括下述双歧杆菌菌株，其经历以与所有微生物本质上一致的速率在基因组中积累的遗传改变，和/或经历通过自发突变4和/或基因获得和/或基因丢失而发生的，不是由故意的(体外)基因组操纵获得而是通过变体和/或突变体的自然选择获得的遗传改变；当暴露于环境压力例如抗生素时，所述遗传改变提供了支持细菌存活的选择优势。突变体可通过将特定基因故意的(体外)插入基因组产生，所述基因并不根本性地改变生物的生化功能，但其产物可用于细菌的鉴定或选择，例如抗生素抗性。本领域技术人员理解，可通过与亲本菌株的DNA序列同源性分析鉴定双歧杆菌突变体或变体菌株。与亲本菌株具有接近的序列同一性的双歧杆菌菌株被认为是突变体或变体菌株。与亲本DNA序列具有96%或更多，例如97%或更多，或98%或更多，或99%或更多的序列同一性(同源性)的双歧杆菌菌株可被认为是突变体或变体。序列同源性可使用在线的同源性算法“BLAST”程序测定，所述程序在http://WWW.ncbi.nlm.nih,gov/BLAST/上可公开获得。亲本菌株的突变体也包括与亲本菌株的16s-23s基因间间隔区多核苷酸序列具有至少85%序列同源性，例如至少90%序列同源性，或至少95%序列同源性的衍生双歧杆菌菌株。这些突变体可进一步包含在细菌基因组中的其它DNA序列中的DNA突变。在本发明的一个实施方案中，双歧杆菌菌株为活细胞的形式。可选地，双歧杆菌菌株可为失活细胞的形式。术语“失活”(“inactivated”)指菌株的代谢活性或繁殖能力已被降低或破坏。可通过本领域目前已知的或还待发展的任意方法完成失活。例如可通过热处理、冻干、紫外光、γ辐射、压力、化学破坏、机械破坏或改变ρΗ进行失活。例如，可使用热处理通过在80°C至100°C范围内储存10分钟来使益生菌失活。还可使用紫外光通过在距离30瓦特UVC灯5厘米距离处辐射5分钟来使益生菌失活。可选地，可使用Y辐射通过使用在距离钴-60源20厘米处以2千克-戈瑞(kGy)辐射来使益生菌失活。如本文所用，术语“失活”与“非存活”("non-viable")同义。在一个实施方案中，长双歧杆菌AH1205可添加至儿童或婴儿制品中。术语“婴儿”指小于约1岁大的出生后的人。术语“儿童”指在约1岁至12岁年龄范围内的人。在某些实施方案中，儿童是在约1岁至6岁年龄范围内。在其它实施方案中，儿童是在约7岁至12岁年龄范围内。添加至本发明制品中的长双歧杆菌AH1205的量可相当于每克制品约IxlO4至约IxlO12菌落形成单位(cfu)的范围。在另一个实施方案中，添加至本发明制品中的量可相当于每克制品约IxlO6至约IxlO9cfu的范围。在另一个实施方案中，添加至本发明制品中的量可相当于每克制品约IxlO9至约IxlO12cfu的范围。在另一个实施方案中，添加至本发明制品中的量可相当于每克制品至少约Ix106Cfu。本发明中的长双歧杆菌AH1205的施用形式不是关键的，只要以有效量对儿童或婴儿施用。在一些实施方案中，通过片剂、丸剂、封装剂(encapsulations)、囊片、软胶囊、胶囊、油滴、药囊(sachets)、液体、浓缩液、粉末、酏剂、溶液、悬浮液、乳剂、锭剂、小珠和其组合对儿童或婴儿施用长双歧杆菌AH1205。在另一个实施方案中，在糖、脂肪或多糖中封装长双歧杆菌AH1205。还在另一个实施方案中，将长双歧杆菌AH1205加入食物或饮料产品并供食用。食物或饮料产品可为营养添加剂或儿童营养产品例如较大婴儿配制食品(follow-onformula)、成长奶、饮料、奶、酸奶、果汁、基于水果的饮料、可咀嚼片剂、曲奇饼、脆点心或奶粉。在其他实施方案中，产品可为婴儿营养产品，例如婴儿配制食品或人奶增强剂。如本文所用，术语“婴儿配制食品，，指满足婴儿营养需要的替代人奶的组合物。术语“人奶增强剂”指可加入人奶以增强人奶营养价值的组合物。在一些实施方案中，组合物为酸化的产品(如某些医用食品规定要求的)。营养产品可为用于足月婴儿、早产婴儿、低出生体重婴儿或极低出生体重婴儿的产品。如本文所用，术语“早产”或“早产婴儿”可包括低出生体重婴儿或极低出生体重婴儿。低出生体重婴儿为在约32周至约37周孕期出生的婴儿或出生时体重在约3.25磅至约5.5磅的婴儿。极低出生体重婴儿为在约32周孕期前出生的婴儿或出生时体重低于约3.25磅的婴儿。因此，早产婴儿可包括在约37周孕期前出生的婴儿和/或出生时体重低于约5.5磅的婴儿。在某些实施方案中，制品可经肠内或胃肠外施用。如本文所用，“肠内”指通过或在胃肠或消化道内，“肠内施用”包括口服喂食、胃内喂食、经幽门施用或任意其他至消化道的引入。术语“胃肠外”指以消化道以外的方式摄入体内或施用，例如通过静脉内或肌肉内注射。本发明的制品可提供最低、部分或全部营养支持。组合物可为营养添加剂或代餐。在一些实施方案中，组合物可与食物或营养组合物组合施用。在此实施方案中，组合物可在被受试者消化前与食物或营养组合物混和，或者可在消化食物或营养组合物之前或之后对受试者施用。组合物可对接受婴儿配制食品、母乳、人奶增强剂或其组合的早产婴儿施用。组合物可以是，但不需要是营养完全的。术语“营养完全”指组合物包含足够的营养以维持持续期的健康人生活。在一些实施方案中，本发明可包含供怀孕女性食用的出生前饮食添加剂，由此将长双歧杆菌AH1205提供给子宫内的胎儿。在其他实施方案中，本发明可包含供哺乳母亲食用的出生后饮食添加剂，由此将长双歧杆菌AH1205经母乳提供给出生后的婴儿。如果将长双歧杆菌AH1205经婴儿配制食品或儿童营养产品施用，制品可为营养完全的并包含合适类型和量的脂、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。脂质或脂肪的量一般可在约3至约7克/100千卡中变化。脂质来源可为任意本领域已知或使用的脂质来源，例如奶脂肪、蛋黄脂质、鱼油、蔬菜油例如棕榈油、大豆油、棕榈油精、棕榈油、棕榈坚果油、椰子油、中链甘油三酯油、高油酸向日葵油、橄榄油、高油酸红花油和脂肪酸酯。蛋白质的量一般可从约1至约5克/100千卡变化。蛋白质来源可为任意本领域已知或使用的蛋白质来源，例如奶蛋白、脱脂奶固体、脱脂奶、乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、动物蛋白、谷类蛋白、蔬菜蛋白或其组合。制品可包含富含谷氨酰胺/谷氨酸的蛋白质和/或肽。蛋白质来源可为完整的、部分水解的或大量水解的。在一些实施方案中，蛋白质来源可为完整蛋白质和水解蛋白质的组合。蛋白质来源可为分离物或浓缩物。在某些实施方案中，本发明的组合物可包含氮来源(即氨基酸和/或蛋白质)，从而使氨基酸或蛋白质总量占总组合物的约1克/100千卡(kcal)至约10克/100千卡，在一些实施方案中为约2克/100千卡至约6克/100千卡。每100千卡总组合物中的脂质来源的量可高于0克直至约6克，在一些实施方案中约0.5克至约5.5克，在其他实施方案中约2克至约5.5克；每100千卡总组合物中的非纤维碳水化合物来源的量可为约5克至约20克，在一些实施方案中可为约7.5克至约15克。在营养完全组合物中的维生素和矿物质的量可足够满足100%的美国推荐的每日摄取量(RDI)，为约500至约3，000千卡，在一些实施方案中约1，000至约3，000千卡。在一个具体的实施方案中，组合物可不含蛋白质。在这样的实施方案中，组合物可含有包含100%游离氨基酸的蛋白质等同来源。碳水化合物的量一般可从约8至约12克/100千卡变化。碳水化合物来源可为任意本领域已知或使用的碳水化合物来源，例如乳糖、果糖、葡萄糖、玉米糖浆、玉米糖浆固体、麦芽糊精、蔗糖、淀粉、大米糖浆固体、大米淀粉、修饰的玉米淀粉、修饰的木薯淀粉、米粉、豆粉和其组合。制品可包括任一种或多种佐剂、细菌成分、药物实体或生物化合物。方便地，可在本发明的实施中使用市售的婴儿配制食品和其他制品。例如，可在Enfamil、EnfamilPrematureFormula、Enfami1withIron、Lactofree、Nutramigen、Pregestimil禾口ProSobee(可获自MeadJohnson&Company,EvansvillejIN,U.S.A.)中添加合适水平的长双歧杆菌AH1205并用于本发明的实施。本发明的制品可任选地包括一种或多种以下维生素或其衍生物，包括但不限于生物素、维生素B1、硫胺素、焦磷酸硫胺素、维生素4、核黄素、黄素单核苷酸、黄素腺嘌呤二核苷酸、盐酸吡多辛、单硝酸硫胺素、叶酸、维生素B3、尼亚新、烟酸、烟酰胺(nicotinamide)、烟酰胺(niacinamide)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、色氨酸、生物素、泛酸、维生素、维生素B12、钴胺素、甲钴胺、脱氧腺苷钴胺、氰钴胺、泛酸钙、泛酸、维生素C、抗坏血酸、维生素A、视黄醇、视黄醛、视黄酸、β-胡萝卜素、维生素D、维生素D3、钙化醇、胆钙化醇、二羟维生素D、1，25-二羟胆钙化醇、7-脱氢胆固醇、胆碱、维生素Ε、乙酸维生素Ε、维生素K、甲萘醌、甲基萘醌类、叶绿醌、萘醌和其混合物。本发明的制品可任选地包括一种或多种以下矿物质或其衍生物，包括但不限于磷、钾、硫、钠、多库酯钠、氯、锰、镁、硬脂酸镁、碳酸镁、氧化镁、氢氧化镁、硫酸镁、铜、硫酸铜、碘、硼、锌、氧化锌、铬、钼、铁、羰基铁、三价铁、延胡索酸亚铁、多糖铁、氟、硒、钼、磷酸钙或醋酸钙、磷酸钾、硫酸镁或氧化镁、氯化钠、氯化钾或醋酸钾、正磷酸铁、醋酸α-生育酚、硫酸锌或氧化锌、葡萄糖酸铜、氯化铬或吡啶甲酸铬、碘化钾、硒酸钠、钼酸钠、叶绿醌、氰钴胺、亚硒酸钠、硫酸铜、肌醇、碘化钾、钴和其混合物。矿物质化合物的非限制性示例衍生物包括任意矿物质化合物的盐、碱性盐、酯和螯合物。本发明组合物还可包含乳化剂和稳定剂例如大豆卵磷脂、角叉胶和其组合。本发明组合物可任选地包含其他可具有益作用的物质例如乳铁蛋白、核苷酸、核苷、免疫球蛋白和其组合。在本发明的一个实施方案中，长双歧杆菌ΑΗ1205可与一种或多种益生菌组合施用。术语“益生菌”指对宿主健康发挥有益作用的微生物。只要能够达到预期的结果，在此实施方案中可接受本领域已知的任意益生菌。在一个具体的实施方案中，益生菌可选自LGG、长双歧杆菌物种和动物双歧杆菌乳亚种(Mifidobacteriumanimalissubsp.Iactis)BB-12。在一个实施方案中，另外的益生菌可为活的或非存活的。在本发明的另一个实施方案中，长双歧杆菌AH1205可与一种或多种益生素组合。术语“益生素”指刺激益生菌生长和/或活性的不能消化的食物成分。只要能够达到预期的结果，在此实施方案中可接受本领域已知的任意益生素。在本发明中有用的益生素可包括寡糖、多糖和其他益生素，包括果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。更具体地，在本发明中有用的益生素可包括乳果糖、寡葡萄糖、菊粉、聚葡萄糖、寡半乳糖、寡果糖、寡异麦芽糖、大豆寡糖、乳果糖、寡木糖和寡龙胆糖。还在本发明的另一个实施方案中，制品可包含其他活性剂例如长链聚不饱和脂肪酸(LCPUFA)。合适的LCPUFA包括但不限于α-亚油酸、γ-亚油酸、亚油酸、亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、花生四烯酸(ARA)和/或二十二碳六烯酸(DHA)。还在一个实施方案中，长双歧杆菌ΑΗ1205与DHA组合施用。在另一个实施方案中，长双歧杆菌ΑΗ1205与ARA组合施用。在还另一个实施方案中，长双歧杆菌ΑΗ1205与DHA和ARA二者组合施用。可在包含DHA、ARA或其组合的市售婴儿配制食品中添加长双歧杆菌ΑΗ1205并用于本发明。例如，包含有效DHA和ARA水平的EnfamilLIPIL是市售的，可在其中添加长双歧杆菌AH1205并用于本发明。在一个实施方案中，DHA和ARA同时与长双歧杆菌AH1205组合施用。在此实施方案中，ARA:DHA的重量比可为约1:3至约9:1。在本发明的一个实施方案中，此比值为约12至约4:1。在还另一个实施方案中，此比值为约2:3至约2:1。在一个具体的实施方案中此比值为约2:1。在本发明的另一个具体的实施方案中，此比值为约1:1.5。在其他实施方案中，此比值为约1:1.3。在还其他实施方案中，此比值为约1:1.9。在一个具体的实施方案中，此比值为约1.5:1。在另一个实施方案中，此比值为约1.47:1。在本发明的某些实施方案中，DHA水平为脂肪酸的以重量计约0.0%至1.00%范围内。DHA水平可为以重量计约0.32%。在一些实施方案中，DHA水平可为以重量计约0.33%。在另一个实施方案中，DHA水平可为以重量计约0.64%。在另一个实施方案中，DHA水平可为以重量计约0.67%。还在另一个实施方案中，DHA水平可为以重量计约0.96%。在另一个实施方案中，DHA水平可为以重量计约1.00%。在本发明的实施方案中，ARA水平为脂肪酸的以重量计约0.0%至0.67%范围内。在另一个实施方案中，ARA水平可为以重量计约0.67%。在另一个实施方案中，ARA水平可为以重量计约0.5%。还在另一个实施方案中，DHA水平可为以重量计约0.47%至0.48%范围内。如果包含，在本发明的一个实施方案中的DHA有效量一般为每公斤体重每天约3mg至每公斤体重每天约150mg。在本发明的一个实施方案中，所述量为每公斤体重每天约6mg至每公斤体重每天约100mg。在另一个实施方案中，所述量为每公斤体重每天约10mg至每公斤体重每天约60mg。还在另一个实施方案中，所述量为每公斤体重每天约15mg至每公斤体重每天约30mg。如果包含，在本发明的一个实施方案中的ARA有效量一般为每公斤体重每天约5mg至每公斤体重每天约150mg。在此发明的一个实施方案中，所述量在每公斤体重每天约10mg至每公斤体重每天约120mg中变化。在另一个实施方案中，所述量在每公斤体重每天约15mg至每公斤体重每天约90mg中变化。还在另一个实施方案中，所述量在每公斤体重每天约20mg至每公斤体重每天约60mg中变化。如果使用婴儿配制食品，婴儿配制食品中的DHA量可在约5mg/100kcal至约80mg/100kcal中变化。在本发明的一个实施方案中，DHA从约10mg/100kcal至约50mg/100kcal中变化；在另一个实施方案中，从约15mg/100kcal至约20mg/100kcal。在本发明的一个具体的实施方案中，DHA量为约17mg/100kcal。如果使用婴儿配制食品，婴儿配制食品中的ARA量可在约10mg/100kcal至约8100mg/100kcal中变化。在本发明的一个实施方案中，ARA量从约15mg/100kcal至约70mg/100kcal中变化。在另一个实施方案中，ARA量在从约20mg/100kcal至约40mg/100kcal中变化。在本发明的一个具体的实施方案中，ARA量为约34mg/100kcal。如果使用婴儿配制食品，可使用本领域已知的标准技术在婴儿配制食品中添加含有DHA和ARA的油。例如，可通过等量替换配制食品中通常存在的油例如高油酸向日葵油来将DHA和ARA加入配制食品。在另一个示例中，可通过等量替换配制食品中通常存在的不含DHA和ARA的剩余全部脂肪混合物来将DHA和ARA加入配制食品。如果使用，DHA和ARA来源可为本领域已知的任意来源例如海兽油(marineoil)、鱼油、单细胞油、蛋黄脂和脑脂。在一些实施方案中，DHA和ARA来源于单细胞Martek油、DHASC0或其变种。如果LCPUFA来源的剩余物对婴儿不产生任意实质性有害作用，DHA和ARA可为天然形式。可选地，DHA和ARA可以精炼的形式使用。在本发明的一个实施方案中，DHA和ARA来源为单细胞油，如在美国专利号5，374，567;5，550，156和5，397，591中所教导的，这些公开在此以其整体引入作为参考。但是，本发明不仅仅局限于这些油。在一个实施方案中，包含EPA的LCPUFA来源与长双歧杆菌AH1205组合使用。在另一个实施方案中，基本上不含有EPA的LCPUFA来源与长双歧杆菌AH1205组合使用。例如，在本发明的一个实施方案中，在含有少于约16mgEPA/100kcal的婴儿配制食品中添加长双歧杆菌AH1205并用于本发明的方法。在另一个实施方案中，在含有少于约10mgEPA/100kcal的婴儿配制食品中添加长双歧杆菌AH1205并用于本发明的方法。还在另一个实施方案中，在含有少于约5mgEPA/100kcal的婴儿配制食品中添加长双歧杆菌AH1205并用于本发明的方法。本发明的另一个实施方案包括甚至不含痕量EPA的添加长双歧杆菌AH1205的婴儿配制食品。应当理解双歧杆菌AH1205和益生菌、益生素、LCPUFA或其他活性成分的组合可以单一制剂施用或以分散的制剂在相同或不同时间施用并使用相同或不同的施用途径。在本发明的一个实施方案中，制剂可用于免疫和接种方案。使用益生菌作为载体的口服免疫不仅能保护宿主免受感染，还可替代致病原正常引发的免疫刺激，因此有助于宿主的免疫培养(immunologicaleducation)。在本发明的一个实施方案中，制剂在治疗、减轻和/或预防炎症中有作用。如本文所用，术语“治疗”指改善、改进或补救疾病、紊乱或疾病或病症的症状。术语“减轻”指在范围、量或程度上减少。术语“预防”指通过某种作用终止或阻碍疾病、紊乱或疾病或病症的症状。在一个具体的实施方案中，本发明包含长双歧杆菌AH1205在制造用于减轻或预防婴儿或儿童中的炎症的组合物中的用途。实施例2-5每个显示施用长双歧杆菌AH1205可减轻婴儿或儿童中的炎症。可在胃肠道、呼吸道中降低炎症，或可系统地减轻炎症。减轻炎症可改善过敏或气喘。在此实施方案中，炎症可为呼吸系统炎症，例如气喘、过敏性鼻炎、鼻窦炎、气道组织炎症、上呼吸道感染、流感、喉炎、呼吸道合胞病毒、气管炎、支气管炎、肺炎或气道腔炎症。类似地，炎症可为胃肠系统炎症，例如腹泻、炎性肠病、克罗恩病(Crohn’sdisease),肠炎、溃疡性结肠炎、过敏性结肠炎、肠易激综合症、憩室炎、感染后结肠炎、艰难梭菌(.Chlostridiumdifficile)相关性腹泻、轮状病毒相关性腹泻、或感染后腹泻，或由于感染原(infectiousagent)例如大肠杆菌引起的腹泻疾病。在其他实施方案中，炎症可为系统性的，例如风湿性关节炎。如本文所用，术语“系统性的”指涉及或影响整个身体。在一些实施方案中，炎症的减轻或预防可改善或预防特应性病症或疾病。例如，炎症的减轻或预防可改善或预防特应性皮炎。在一个具体的实施方案中，炎症的减轻或预防可改善或预防常见婴儿或儿童期疾病。例如，炎症的减轻或预防可改善或预防腹泻或急性中耳炎。还在另一个实施方案中，炎症的减轻或预防可改善或预防食物过敏。认为长双歧杆菌AH1205通过拮抗和排除来自胃肠道或炎症部位的促炎性微生物起作用。还认为长双歧杆菌AH1205通过降低促炎性细胞因子的水平起作用。在一个具体的实施方案中，菌株可改变受试者的IL-10水平。IL-10由T细胞、B细胞、单核细胞和巨噬细胞产生。此细胞因子增加B细胞的增殖及B细胞至抗体分泌细胞的分化。IL-10主要展示了抗炎症活性。其通过单核细胞上调IL-IRA的表达，并抑制大部分的单核细胞炎症活性。IL-10通过反馈机制抑制单核细胞产生的细胞因子、活性氧和氮中间体、II类主要组织相容性复合物(MHC)的表达、杀死寄生物(parasitekilling)和IL-10的产生。还已显示此细胞因子通过干预前列腺素E2-环腺苷单磷酸(PGE2-CAMP)依赖途径来阻断单核细胞产生肠胶原酶和IV型胶原酶，因此其可能是在慢性炎症疾病中所见的结缔组织破坏的重要调节子。因此，在一个实施方案中，菌株可在食用菌株的婴儿或儿童中上调IL-10水平或诱导IL-10的分泌。在其他实施方案中，长双歧杆菌AH1205下调或降低TNF-α、IL-6、MCP-I和/或IFN-Y或其他促炎性细胞因子或趋化因子的分泌。促炎性细胞因子TNF-α起始引起炎症状态的细胞因子和生物效应的级联反应。在一些实施方案中，本发明的制剂对维持免疫系统的体内稳态有作用。在其他实施方案中，本发明的制剂对改善或增强受试者的免疫力有作用。在一些实施方案中，免疫力的增强或炎症的抑制可包括刺激肠完整性；降低肠渗透性；改善粘蛋白的合成、分泌和/或质量；改善肠上皮的成熟和分化；改善营养吸收；增加传递抗微生物活性的可溶因子的产生；刺激、改善或支持对感染的抵抗力；支持针对病毒或细菌感染的细胞或体液反应；提高的细胞毒性(抗病毒和抗肿瘤);支持系统和/或粘膜的接种反应；提高或支持细胞和/或体液免疫；提高或支持天然免疫(包括嗜中性粒细胞、吞噬细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞活性);提高或支持适应性T和B细胞免疫力；刺激辅助性T细胞1(Thl)的细胞因子模式(提高的IL-l、IL-2、IFN-Y、IL-12、TNF-a；人白细胞抗原-Dr(HLA-Dr)表达)；抑制炎症或产生系统和粘膜的炎症介质(mediator)(包括细胞因子和/或趋化因子)；通过降低总的和/或过敏原-特异性的IgE来降低致敏；降低过敏性细胞因子的产生；降低Th2支持的免疫球蛋白谱；及其组合。遍及广泛肿瘤类型范围的多功能细胞因子的产生提示在癌症患者中发生了显著的炎症反应。因此，在本发明的一个实施方案中，长双歧杆菌AH1205可在治疗癌症症状中有作用。由于长双歧杆菌AH1205的抗炎症性能，此细菌菌株可降低恶性细胞转化的速率。此外，肠细菌可从膳食化合物中产生具有基因毒性的、致癌的和促肿瘤活性的物质，肠细菌可将原致癌物活化为DNA反应剂。一般地，与其他肠内种群例如类杆菌、真细菌和梭菌相比，双歧杆菌物种具有低的异生物质代谢酶活性。因此，在肠内提高双歧杆菌细菌的数量可10有益地改变这些酶的水平。在具体的实施方案中，长双歧杆菌AH1205可与抗炎症疗法例如非类固醇抗炎症药物(NSAID)或英夫利昔单抗组合施用。婴儿肠微生物群在出生后最初几周内迅速建立。该肠内定居的特性最初由早期暴露于环境微生物源和婴儿的健康决定。经剖宫手术出生的婴儿、早产或其他在无菌保育箱中度过生命最初部分的婴儿，和/或在生命早期施用抗生素的婴儿可能在健康肠微生物群的发育上显著延迟。因为这些婴儿没有机会从他们的母亲或环境处获得健康的肠微生物群，食用长双歧杆菌AH1205可对肠免疫系统的适当发育和功能起有益作用。在本发明的一些实施方案中，婴儿或儿童需要治疗、减轻或预防炎症。由于遗传倾向、饮食、生活方式、疾病或紊乱，受试者可能具有患炎症的风险。例如，早产或免疫抑制的婴儿可能具有患炎症的风险，因此可能需要这些治疗、减轻或预防。本发明的组合物可包装进本领域已知的用于贮存营养产品的任意种类容器，例如玻璃、带内衬的纸板(linedpaperboard)、塑料和带涂层的金属罐。在一些实施方案中，组合物经吹瓶-灌装-封口(blow-fill-seal)包装技术包装。在其他实施方案中，在单剂量容器中提供组合物。组合物的包装可在无菌条件下进行。在一些实施方案中，制备组合物以使其可接受用于经鼻饲管、鼻十二指肠管或鼻空肠管直接递送至早产婴儿。本发明的组合物可为耐贮存(shelfstable)的。“耐贮存”指可即食形式的组合物维持单一均相(即在肉眼检查下不分离为多于1相)，和/或在冰箱中贮存过夜后在肉眼检查下没有出现沉淀物。以下实施例描述了本发明的各种实施方案。在考虑了如本文公开的说明书或本发明的实施后，在本文的权利要求范围内的其他实施方案对本领域技术人员来说是显而易见的。说明书和实施例旨在被认为是仅示例性的，本发明的范围和精神在实施例部分之后的权利要求书中指明。在实施例中，除非另外说明，所有百分比均基于重量给出。实施例1此实施例说明从婴儿粪便中分离的细菌的表征。益生菌的分离从3天大母乳喂养的男婴处取得新鲜粪便，将连续稀释液在添加0.05%半胱氨酸和莫匹罗星的TPY(胰蛋白酶解酪蛋白、蛋白胨和酵母提取物)和MRS(deMann,Rogosa和Siarpe)培养基上涂板。平板在厌氧培养罐(BBL，Oxoid)中使用CO2生成试剂盒(AnaerocultA,Merck)在37°C孵育2_5天。对革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性的杆状或二分叉/多形细菌分离物在复合非选择性培养基(MRS和TPY)上划线纯化。除非另外说明，分离物在MRS或TPY培养基上于37°C在厌氧条件下进行常规培养。在40%甘油中储存推测的双歧杆菌并贮存于_20°C和-80°C。在分离了纯双歧杆菌菌株后，将其命名为AH1205，评估了其微生物特征并总结于下表1。AH1205为革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性的多形细菌，其果糖-6-磷酸磷酸酮酶阳性证明其身份为双歧杆菌。使用添加单一碳源的最低限度培养基，AH1205能够在所有检测的碳源(葡萄糖、乳糖、核糖、阿拉伯糖、半乳糖、蜜三糖、果糖、麦芽提取物、甘露糖、麦芽糖、蔗糖)上生长。表1.长双歧杆菌AH1205的物化特征权利要求1.婴儿配制食品，其包含蛋白质来源、脂肪来源、碳水化合物来源和长双歧杆菌(aZo順ffl)AHl205ο2.权利要求1的婴儿配制食品，其中所述婴儿配制食品包含每克婴儿配制食品约IXlO4cfu至约IXIOiqcfu范围的长双歧杆菌AH1205。3.权利要求1的婴儿配制食品，其中所述长双歧杆菌AH1205为存活的。4.权利要求1的婴儿配制食品，其中所述长双歧杆菌AH1205为非存活的。5.权利要求1的婴儿配制食品，其还包含另外的益生菌。6.权利要求5的婴儿配制食品，其中所述另外的益生菌包含LGG。7.权利要求1的婴儿配制食品，其还包含益生素。8.权利要求7的婴儿配制食品，其中所述益生素选自乳果糖、寡葡萄糖、菊粉、聚葡萄糖、寡半乳糖、寡果糖、寡异麦芽糖、大豆寡糖、乳果糖、寡木糖和寡龙胆糖。9.权利要求1的婴儿配制食品，其还包含至少一种LCPUFA。10.权利要求1的婴儿配制食品，其还包含ARA和DHA。11.儿童营养产品，其包含蛋白质来源、脂肪来源、碳水化合物来源和长双歧杆菌AH1205。12.减轻或预防婴儿或儿童中的炎症的方法，其包括对所述婴儿或儿童施用长双歧杆菌AH1205。13.权利要求12的方法，其中所述炎症的减轻或预防改善过敏。14.权利要求12的方法，其中所述炎症的减轻或预防改善气喘。15.权利要求12的方法，其中所述炎症的减轻或预防改善选自腹泻、呼吸道感染和中耳炎的疾病。全文摘要包含蛋白质来源、脂肪来源、碳水化合物来源和长双歧杆菌(B.Longum)AH1205的婴儿配制食品或儿童营养产品。文档编号A23C9/00GK102159085SQ200980136147公开日2011年8月17日申请日期2009年9月18日优先权日2008年9月19日发明者切迪亚M.,M.拉塞尔W.申请人:美赞臣营养品公司