专利名称：一种节水型的海水鱼育苗方法
技术领域：
本发明属于海水鱼类育苗技术领域，特别涉及一种提高大菱鲆育苗率和免疫力， 促进大菱鲆快速生长、改善水质、节水节能、绿色低碳的无公害的海水鱼育苗新方法。
背景技术：
大菱鲆(Scophthalmus maximus)是一种原产于欧洲的名贵经济鱼，属于海水底栖 肉食类鲆鲽鱼类。欧洲已达到产业化养殖水平，它性格温顺，很少互相残咬，适应低水温生 活，生长迅速，易接受配合饲料，易于集约化养殖。1999年人工育苗成功，目前国内在山东、 河北、辽宁沿渤海地区已形成养殖高潮，人工苗种需求量很大，目前育苗成活率普遍偏低， 即使在欧洲国家商业育苗场，育苗成活率也只有20 30%。国内厂家育苗成活率更低，严 重制约着大菱鲆养殖业的发展。大菱鲆在仔鱼期非常脆弱，而且苗种存在严重的质量问题白化率、畸形率、变态 死亡率极高，病害频繁发生。大菱鲆对细菌很敏感，细菌病是仔鱼期危害最大的疾病，大菱 鲆育苗的困难点主要是开口初期和仔鱼“开鳔”。开鳔期间会有较大损失，死亡率在50%以 上。苗期的细菌病传染速度快，一般从发现患病个体到大规模发病仅要2 3天。病 苗死亡率高，如果没有及时采取适当的预防措施，有时死亡率可达90%以上。目前，主要靠 抗生素类药物来进行防治。一般在仔鱼期主要用青霉素、四环素、氯霉素，在稚鱼期用呋喃 唑酮、四环素等来预防治疗和治疗，不但容易形成抗药性，而且易在鱼体内残存，使鱼苗质 量下降。“温室+深井水育苗”是目前大菱鲆育苗最普遍的模式。这种育苗模式需要大量的 水循环，地下井水的过度开采使用，不仅浪费资源和能源，导致水资源枯竭，还会严重影响 地质概况，为地质灾害埋下隐患。大量的养殖废水排放，也造成海洋水体的严重污染。蛭弧菌是一类具有裂解能力的细菌。一方面能够裂解水体中的致病或潜在致病 菌，净化水体，另一方面蛭弧菌能改善养殖生物肠道环境，提高免疫力，促进幼苗变态发育 和生长，提高苗种成活率。已有的研究表明，作为一种有益微生物制剂，无论是在食品工业还是在(海洋) 水产养殖等领域，蛭弧菌的应用均是安全的。例如在国外，Lenz and Hespell (1978) 研究发现，蛭弧菌及对动物及人的细胞不具侵染性[Lenz R. W. , Hespell R. B. Attempts to grow bedellovibrios micurgically-injected into animal cells. Archives of Microbiology, 1978,119(3) =245-248] 在国内，林茂等(2006)研究了蛭弧菌对鱼类细 胞的作用，发现它对鱼类细菌没有侵染作用[林茂，杨先乐，薛晖，曹海鹏，邱军强。蛭弧菌 BDH21 02对鱼类细胞及病原菌的作用。微生物学通报，2006，33(1) :7_11]。到目前为止，国际上还没有对大菱鲆幼体发育过程中使用蛭弧菌游泳体的研究报 道。
发明内容
为克服上述现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种节水型的海水鱼 育苗方法；该育苗方法有效地降低了大菱鲆发病率、畸形率和白化率，成活率高，苗种质量 好，改善水质，节水节能，绿色低碳。本发明的目的通过下述技术方案来实现一种节水型的海水鱼育苗方法，包括以 下操作步骤(1)亲鱼的选择从养殖的2龄大菱鲆成鱼中选择体形完整、色泽正常、健康活泼、体表光亮、生长 速度快和体重在1. 7 2. 2kg的亲体作为亲鱼；(2)亲鱼强化培养将亲鱼按雌雄2 1的比例，在亲鱼培育池中进行培育；在培育池中加入蛭弧菌游 泳体菌液，使池水中的蛭弧菌游泳体的浓度达10 IO7PfuAiL ；饵料在投入培育池前用浓 度为10 107pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡15 30min ；(3)采卵、受精和孵化大菱鲆经强化培养达到性成熟后，采集卵子和精液，进行人工受精；将受精卵放入 装有海水的育苗池中；在育苗池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使池水中的蛭弧菌游泳体的起 始浓度达10 107pfu/mL ；受精卵经过3 5天孵化出初孵仔鱼；(4)布池在培苗池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使池水中的蛭弧菌游泳体浓度达10 107pfU/mL ；将初孵仔鱼放入培苗池内进行培育，初孵仔鱼的布池密度为2 3万粒/m3 ；(5)投饵投喂的饲料包括轮虫、卤虫无节幼虫、卤虫和颗粒饲料；饲料在投入培苗池前用浓 度为10 107pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡15 30min ；(6)每隔5 40天换掉池水(全池)一次，换(全池)水后重新添加蛭弧菌游泳体 和蛭质体的混合体菌液，使池水中蛭弧菌游泳体和蛭质体的混合体的浓度达10 IO7Pfu/ mL ；鱼苗经过80 90天的饲养，进入养成阶段。步骤(2)所述亲鱼优选从进口鱼苗的养殖过程中优选健康、生长快速的鱼苗作为亲鱼。步骤(2)所述培育池中的水经过精细过滤，紫外线杀菌；所述饵料每日投喂3次； 所述亲鱼池中水温控制在19 20°C，光照调控在1500 25001UX，光照时间是前2周每 天9 11小时，两周后每天19 20小时，经过2 3个月的温光调控，亲鱼达到性成熟。步骤(3)所述育苗池为是长为4m，宽为3m，深为1. 5m的长方形水泥池，池内设置 6个气石，微充气。步骤(4)所述培苗池中培育苗种过程中的水温为18 20°C，盐度为26 28%。，pH 为8. 0 8. 2，溶解氧5. 0 7. Omg/L ；苗种培育期间不断充气，前10天充气量控制在20 40L/h/m2，仔鱼开鳔后逐渐增加充气量至50 70L/h/m2。步骤(5)所述投饵是第9 15日龄投喂轮虫，投喂密度为10个/mL ；第10 25 日龄投喂卤虫无节幼虫，投喂密度为由0. 2个/mL ；第20 35日龄投喂卤虫，投喂密度为 到1个/mL ；第35日龄以后投喂颗粒饲料，颗粒饲料的投喂量为lg/mL。
步骤⑵ (5)所述蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp. )BDFM05，所述蛭弧菌于 2009年8月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO =M 209172。对所述蛭弧菌BDFM05进行负染后于电子显微镜下进行形态观察BDFM05呈单细 胞，椭圆形，大小为1. 43X0. 53um，端生鞭毛，鞭毛长度至少2um所述蛭弧菌BDFM05以双层 平板法于28°C培养三天可形成直径2 3mm的透明圆形噬菌斑。所述蛭弧菌游泳体菌液按照以下方法制备得到接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物所菌种保藏中心，编号GIM1. 172)于营养肉汤液体培养基 中，26 30°C培养20h，培养液经5000 8000rpm离心10 20min后，沉淀加入至DNB液 体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，28°C培养36 48h，培养液经6000 8000rpm离心15 20min后，得到沉淀和上清液；再将上清液经16000 18000rpm离心15 20min后，沉淀 用DNB液体培养基、水、生理盐水或0. 2mol/L pH值为7. 2 7. 6的磷酸盐缓冲液悬浮，得 到蛭弧菌游泳体菌液。所述DNB液体培养基是将营养肉汤0. Sg、酪蛋白酸水解物0. 5g和酵母精提物 0. Ig溶于IOOOmL蒸馏水中，调节pH值至7. 2 7. 6。本发明相对于现有技术，具有如下的优点及效果(1)蛭弧菌游泳体是指蛭弧菌侵入宿主细菌前的生长形式。蛭弧菌游泳体侵入宿 主细菌的过程非常快，一般几秒钟内即可完成。相对于蛭弧菌蛭质体而言，虽然存在着制备 繁琐、不易保存的弱点，但用蛭弧菌游泳体杀灭致病菌具有起效快、活力强的优点。(2)本发明亲鱼培育时在水中和饵料中添加蛭弧菌游泳体菌液，促进了亲鱼的营 养吸收和快速生长，保证性腺发育正常、培育出优良的受精卵。(3)本发明采用蛭弧菌游泳体预防和调节、环境调控相结合的方案，平均育苗成活 率达到48 %以上，白化率降至3 %，畸形率降至2 %，最长可40天换(全池)水一次，节约了 育苗成本，提高了经济效益。(4)本发明在仔鱼阶段加强水质、水温、光照等环境因素的调控，并在水中和饲料 中投放一定浓度的蛭弧菌游泳体菌液，改善了水质，提高了育苗成活率和种苗的免疫力，降 低了白化率和畸形率，防止了病害的发生。(5)本发明所述蛭弧菌游泳体在大菱鲆的应用中安全性好蛭弧菌游泳体通过裂 解而消除致病菌的方法是生物方法，绿色、安全、无污染。蛭弧菌可侵染、裂解宿主细菌的特 性使之适合作为抑止或清除生物体及其环境中致病菌的生物净化因子，且其在裂解完宿主 细菌后，会因饥饿而自动消亡，从而克服了抗生素滥用带来的副作用。现有的研究表明蛭弧 菌对鱼类无毒性作用，对人类无致病性。用蛭弧菌游泳体来育种是一种有发展前景的新方法。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。实施例1 提高大菱鲆育苗成活率的新养殖方法，具体步骤如下1、亲鱼选择山东省某养殖场，从60000只养殖的2龄大菱鲆(Scophthalmus maximus)成鱼 中选择体形完整、色泽正常、健康活泼、体表光亮、生长速度快、体重在1. 5 2. Okg的亲体1000条作为亲鱼。雌雄合理搭配，以避免近亲授精，防止种质退化。2、亲鱼强化培育亲鱼按照雌雄2 1比例进行优选。亲鱼在35m2的培育池中进行强化培养，平均4 条/m2。培育池中的水先经过二级砂滤后，剧烈曝气后使用的。加入蛭弧菌游泳体菌液，使水 体中蛭弧菌游泳体浓度分别达到10、103、105、107pfu/mL。所用配合饲料中同时添加亲鱼性 腺发育所必须的卵磷脂和不饱和脂肪酸。投饵前，所用饲料要用浓度为10、103、105、107pfu/ mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡30min，分批投饵，每日投喂3次。温度和光照控制亲鱼池中水温控制在19 20°C，光照调控在20001UX，光照时间 是前2周每天9 11小时，两周后每天19 20小时，在合适的光照调控和营养强化培育 条件下，加上蛭弧菌游泳体的作用，亲鱼性腺发育加快，经过2个月的温光调控，亲鱼即可 达到成熟产精产卵。蛭弧菌游泳体促进了亲鱼的营养吸收和快速生长，保证性腺发育正常、 培育出优良的受精卵。3、进行采卵、受精、孵化大菱鲆在上述条件下培育至性成熟以后，将雌雄分开，分别采集精液和卵子，人工 受精。受精后，将沉浮卵分开，将孵卵(受精卵)1000g移入孵化箱内进行孵化。受精卵在 14°C进行孵化，经过3天的时间完成孵化，获得初孵仔苗。4、育苗用水的处理在育苗池中注入经砂滤、沉降的海水，达到有效水位后，加入适量的蛭弧菌游泳体 菌液，并加大曝气，混合均勻，使水体中蛭弧菌游泳体浓度分别达到10、ΙΟ3、105、107pfu/mL。5、布池将初孵仔鱼放入培苗池内进行培育，初孵仔鱼的布池密度为2万粒/m3，苗种培育 过程中的水温为18 20°C，盐度为26 28%。，pH为8. 0 8. 2，溶解氧5. 0 7. Omg/L, 苗种培育期间不断充气，前10天充气量控制在20-40L/h/m2，仔鱼开鳔后逐渐增加充气量至 50 70L/h/m2。6、投饵投喂的饲料包括轮虫、卤虫无节幼虫、卤虫和颗粒饲料。9 15日龄投喂轮虫，投 喂密度为10个/mL，10 25日龄投喂卤虫无节幼虫，投喂密度为0. 2个/mL ;20 35日龄 投喂卤虫，投喂密度为1个/mL ；第35日龄以后投喂颗粒饲料，颗粒饲料的投喂量为lg/mL ； 要少投勤投，吃饱即可。投饵前，饵料都分别用浓度为10、103、105、107pfU/mL的蛭弧菌游泳 体菌液浸泡30min。7、管理育苗期间的温度、光照可控，随时观察，及时清除池底部的沉淀物及水表面的杂 物，及时分苗。试验设置不同的换全池池水频率5天换水一次、10天换水一次、15天换水 一次、20天换水一次、25天换水一次、30天换水一次、35天换水一次、40天换水一次，每次 换(全池)水后加蛭弧菌游泳体菌液，使水体中的菌体浓度达到10 107pfu/mL。加菌方 法为用相应的池水稀释菌液后，均勻泼洒全池，并加大曝气，从而使菌液混合均勻。鱼苗经 过80-90天的饲养，即可进入养成阶段。8、试验结果分析试验按以下方式分组，在试验结束时分别测量各组的成活率、白化率、畸形率及免疫活性指标和水质情况；平均分为A-D 4个试验组，B、C、D每个试验组有8个小组，分别为Bi、Cl、Dl ；B2、 C2、D2 ；、B3、C3、D3 ；B4、C4、D4 ；B5、C5、D5 ；B6、C6、D6 ；B7、C7、D7 ；B8、C8、B8 ；B1-D8 每小组 再分为4组，即Bl-I Bl-4··· D8-1 D8-4，每组2个重复。试验的处理如下A组工厂流水育苗模式，投喂正常饲料；B组在水体中泼洒蛭弧菌游泳体菌液，使其浓度分别达到10、103、105、107pfu/ mL，投喂的颗粒饲料未经蛭弧菌浸泡；C组水体中不泼洒蛭弧菌，但投喂的颗粒饲料为经浓度为10、103、105、107pfu/mL 的蛭弧菌游泳体菌液浸泡后的；D组在水体中泼洒蛭弧菌游泳体菌液，使菌体浓度分别达到10、103、105、107pfu/ mL,同时分别投喂经浓度为10、103、105、107pfU/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡后的颗粒饲
料；
Bi、Cl、Dl组每5天换(全池)水一-次，换水后重新加菌；
B2、C2、D2组每10天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
B3、C3、D3组每15天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
B4、C4、D4组每20天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
B5、C5、D5组每25天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
B6、C6、D6组每30天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
B7、C7、D7组每35天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
B8、C8、D8组每40天换(全池)水--次，换水后]■新加菌；
Bl-1、Cl-I、Dl-I...D8-1 投放的菌液浓度为 10pfu/mL ；
Bl-2、C1-2、D1_2…D8-2投放的菌液浓度为103pfu/mL ；
Bl-3、C1-3、D1_3…D8-3投放的菌液浓度为105pfu/mL ；
Bl-4、C1-4、D1_4…D8-4投放的菌液浓度为107pfu/mL ；
鱼体免疫指标的测定方法如下
U&菌酶活力测定血清溶菌酶活性通过浊度比色法测定(Ellis A Ε. Lysozymeassays.[M]/'/Stolen J S, Fletcher T C, Anderson DP, etal. Techniques in Fish
Immunology I. USA SOS Publications，1990 101-103.)实验条件下，每 mL 血清每 min 吸 光值减少0. 001为1个酶活性单位(U)。2、酚氧化酶(PO)活力的测定酚氧化酶活性测定采用Hern0ndez-L0pez 等(Hern0ndez-L0pez J, Gollas-Galvan Τ. Vargas-Albores F. Activation of the prophenoloxidase system ofthe brown Penaeus californiensis Holmes [J]. Comp Biochem Physiol, 1996. 113C 61-66.)的方 法。以实验条件下，每mL血清每min吸光增加0. 001，定义为1个酶活性单位(U)。3、超氧化物歧化酶(SOD)活力超氧化物歧化酶(SOD)活力按邓碧玉等改进的连苯三酚自氧化法进。(邓碧玉，袁 勤生，李文杰.改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法[J].生物化学与生 物物理进展，1991，18 (2) 163 163)成活率、白化率、畸形率及免疫活性指标的测定结果见表一 表四从表中可以看
8出，A组成活率、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、酚氧化酶活力最高分别达到26. 38%, 1. 666U/mL、100. 06U/mL、l. 867U/mL,白化率和畸形率最低分别为9. 52%和9. 14%。与工业 生产的A组相比，B、C、D组的成活率、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、酚氧化酶活力明显 的提高，白化率、畸形率明显降低。说明在常规的育苗方式下，不换水会影响大菱鲆的成活 率、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、酚氧化酶活力。在相同的换水周期下，随着蛭弧菌游 泳体浓度升高，成活率、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、酚氧化酶活力都在逐渐升高，白 化率、畸形率明显降低；说明蛭弧菌游泳体的浓度越高，大菱鲆的免疫力越强，成活率越高， 患病机率越小。B 1-1 B8-1…D1-4 D8-4之间的成活率、溶菌酶活力、超氧化物歧化酶 活力、酚氧化酶活力、白化率、畸形率无明显差异，说明在水中或者是在饲料中添加浓度为 10 107pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液，5 40天换(全池)水一次，对育苗成活率、溶菌酶活 力、超氧化物歧化酶活力、酚氧化酶活力、白化率、畸形率影响不明显，均可提高成活率和免 疫力。试验结果表明，B、C、D组的育苗方式均可提高育苗成活率和种苗的免疫力、促进摄 食和快速生长，且D组效果最佳。即无论在水中还是在饲料中添加浓度为10 107pfU/mL 蛭弧菌游泳体菌液，长达40天不换水，均能明显提高大菱鲆的育苗成活率、溶菌酶活力、超 氧化物歧化酶活力、酚氧化酶活力等免疫指标，降低白化率和畸形率；在水中和饲料中同时 添加，效果更佳。5 40天换(全池)水一次，对溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、酚氧化 酶活力、白化率、畸形率均无明显影响。A组的细菌总数和弧菌总数分别高达1. 63X 103cfu/mL和1. 13X 102cfu/mL。B、 C、D 组的细菌总数分别为 1. 58X 102cfu/mL、l. 64X 102cfu/mL、1. llX102cfu/mL ；弧菌总数 6. 5X10cfu/mL、7. 3X 10cfu/mL、4. 2X 10cfu/mL，与 A 组比，都降低了 1 个数量级。A、B、C、 D组的PH都在7. 79 8. 10之间，变化不大。由此可见，无论在水中还是在饲料中添加浓度为10 107pfu/mL的蛭弧菌游泳体 菌液，均能够提高种苗的免疫力和育苗成活率，且能控制水中细菌数量，改善水质。在水中 和在饲料中同时添加，效果更佳。即能够节约地下水资源，保护环境，又能够节省成本，提高 经济效益，促进养殖业的快速发展。表一成活率、白化率、畸形率及免疫活性指标
权利要求
一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于包括以下操作步骤(1)亲鱼的选择从养殖的2龄大菱鲆成鱼中选择体重在1.5～2.0kg的亲体作为亲鱼；(2)亲鱼强化培养将亲鱼按雌雄2∶1的比例，在亲鱼培育池中进行培育；在培育池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使池水中的蛭弧菌游泳体的浓度达10～107pfu/mL；饵料在投入培育池前用浓度为10～107pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡15～30min；(3)采卵、受精和孵化大菱鲆经强化培养达到性成熟后，采集卵子和精液，进行人工受精；将受精卵放入装有海水的育苗池中；在育苗池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使池水中的蛭弧菌游泳体的浓度达10～107pfu/mL；受精卵经过3～5天孵化出初孵仔鱼；(4)布池在培苗池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使池水中的蛭弧菌游泳体的浓度达10～107pfu/mL；将初孵仔鱼放入培苗池内进行培育，初孵仔鱼的布池密度为2～3万粒/m3；(5)投饵投喂的饲料包括轮虫、卤虫无节幼虫、卤虫和颗粒饲料；饲料在投入培苗池前用浓度为10～107pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡15～30min；(6)每隔5～40天换掉池水一次，换水后重新添加蛭弧菌游泳体菌液，使池水中蛭弧菌游泳体的浓度达10～107pfu/mL；鱼苗经过80～90天的饲养，进入养成阶段。
2.根据权利要求1所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于步骤(2)所 述培育池中的水经过精细过滤；所述饵料每日投喂3次；所述亲鱼池中水温控制在19 20°C，光照调控在1500 25001uX，光照时间是前2周每天9 11小时，两周后每天19 20小时，经过2 3个月的温光调控，亲鱼达到性成熟。
3.根据权利要求1所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于步骤(3)所述 育苗池是长为4m，宽为3m，深为1. 5m的长方形水泥池，池内设置6个气石，微充气。
4.根据权利要求1所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于步骤(4)所述 培苗池中培育苗种过程中的水温为18 20°C，盐度为26 28%。，pH为8. 0 8. 2，溶解氧 5. 0 7. Omg/L ；苗种培育期间不断充气，前10天充气量控制在20 40L/h/m2，仔鱼开鳔后 逐渐增加充气量至50 70L/h/m2。
5.根据权利要求1所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于步骤(5)所述 投饵是第9 15日龄投喂轮虫，投喂密度为10个/mL;第10 25日龄投喂卤虫无节幼虫， 投喂密度为由0. 2个/mL ；第20 35日龄投喂卤虫，投喂密度为到1个/mL ；第35日龄以 后投喂颗粒饲料，颗粒饲料的投喂量为lg/mL。
6.根据权利要求1所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于步骤(2) (5) 所述蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，所述蛭弧菌于2009年8月7日保藏于中 国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO =M 209172。
7.根据权利要求1所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于所述蛭弧菌游 泳体菌液按照以下方法制备得到接种嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)于营养肉汤 液体培养基中，26 30°C培养20h，培养液经5000 8000rpm离心10 20min后，沉淀加入至DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，28°C培养36 48h，培养液经6000 8000rpm 离心15 20min后，得到沉淀和上清液；再将上清液经16000 18000rpm离心15 20min 后，沉淀用DNB液体培养基、水、生理盐水或0. 2mol/L pH值为7. 2 7. 6的磷酸盐缓冲液 悬浮，得到蛭弧菌游泳体菌液。
8.根据权利要求7所述的一种节水型的海水鱼育苗方法，其特征在于所述DNB液体 培养基是将营养肉汤0. Sg、酪蛋白酸水解物0. 5g和酵母精提物0. Ig溶于IOOOmL蒸馏水 中，调节PH值至7. 2 7.6。
全文摘要
本发明公开了一种节水型的海水鱼育苗方法。该方法包括步骤(1)亲鱼的选择；(2)亲鱼强化培养；(3)采卵、受精和孵化；(4)布池；(5)投饵；(6)养成。本发明采用蛭弧菌游泳体预防和调节、环境调控相结合的方案，在育苗池中添加浓度为10～107pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液，同时饲料用10～107pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡15～30min，平均育苗成活率≥50％，白化率降至4.1％，畸形率降至2.3％，并且能裂解中体中的致病或者潜在的致病菌，改善水质，长达40天不换水，节约了成本，大大提高了经济效益，是一种绿色低碳的新型无公害育苗新方法。
文档编号C12N1/20GK101933480SQ20101027093
公开日2011年1月5日 申请日期2010年8月31日 优先权日2010年8月31日
发明者何伟杰, 蔡俊鹏 申请人:华南理工大学