专利名称：一种观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种涉及的是一种观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置，属于生物防治领域。
背景技术：
在植物根系与土壤中微生物互作的领域，文献报道的研究主要集中于利用分子生物学等技术了解病原菌或非病原菌在根系表面或者侵入根系之后的情况。而在研究植物根系与病原菌互作的过程中，很难直观的观察到植物根系与病原菌的互作过程，在这一方面研究较少，且没有系统的研究方法。高等植物根尖能产生出大量的根边缘细胞或类似根边缘细胞，这些细胞遇水迅速分散，具有非常高的生活力，对植物根系的生长起到非常重要的作用，同时也具有调节土壤理化性质的作用，改善土壤环境使更适于植物根系的生长。在国内，对这类细胞的研究较少。但在国际上，由于这类细胞的特殊性，已经具有了非常悠久的研究历史。在研究植物根系与病原菌互作的过程中，植物根尖产生的根边缘细胞或类似根边缘细胞与病原菌的互作也是研究中非常重要的组成部分。目前植物根系与疫霉菌游动孢子互作的宏观研究，主要采用凹玻片法。由于凹玻片特殊的构造，在观察植物根系与疫霉菌游动孢子互作的过程中，游动孢子容易积聚在凹玻片的中心，很难在整个范围内均匀分散，且在凹玻片中插入植物根系时，根尖等主要部位很难完全浸入凹玻片的凹槽中，使得植物根系与疫霉菌游动孢子不能充分接触。若在凹玻片上加盖盖玻片，一方面会给植物根系造成损伤，另外盖玻片由于植物根系的原因不能平整的放置在根系上方，给观察带来了很大的不便。在观察植物根边缘细胞或类似根边缘细胞时，凹玻片法更是不适用。而普通的载玻片也因加盖盖玻片困难，导致观察极为不便。因此，需要一种更简洁、方便的装置，能更好的研究植物根系与疫霉菌游动孢子的互作过程。
实用新型内容本实用新型所要解决的技术问题是针对现有技术的不足提供一种观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置。观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置，包括载玻片(I)、U型槽
(2)、盖玻片(3) ;U型槽(2)置于载玻片(I)上，用盖玻片(3)盖上，左端留有开口作为加液口⑷。所述的装置，所述U型槽(2)采用直径Imm的毛细管。所述的装置，所述加液口⑷长50mm、宽15mm、高1mm。利用该装置可以有效观察植物根系的根边缘细胞的分散过程，或者观察植物根系与疫霉菌游动孢子互作过程。
图1为本实用新型装置的结构示意图；I载玻片，2U型槽，3盖玻片，4加液口，5植物根系，6去离子水或孢子悬浮液。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本实用新型进行详细说明。参考图1，观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置，包括载玻片1，U型槽2，盖玻片3，加液口 4，待测植物根或毛细管5，去离子水或孢子悬浮液6 ;用直径Imm的毛细管(根据植物根系直径选择不同外径的毛细管)制成一个U型管，两端加热封闭即成U型槽2，然后将U型槽2置于载玻片I上，用盖玻片3盖上，左端留有开口作为加液口 4。利用该装置可以有效观察植物根系5的根边缘细胞的分散过程，或者观察植物根系5与疫霉菌游动孢子互作过程。所述装置的制作方法为用直径1_的毛细管在酒精灯火焰上加热后制成一个U型管，两端加热封闭即成U型槽2，然后将U型管置于载玻片上，用盖玻片盖上变成一个一端开口的槽作为加液口 4，加液口 4长50mmX宽15mmX高1mm。利用该装置观察植物根系边缘细胞分散过程的方法为:选择无损伤植物根系，放置在该装置U型槽2中，使根尖约位于U型槽2中央，盖上盖玻片；盖玻片并不完全封闭U型槽封口，空出约5_距离，从该空隙给U型槽加满去离子水，在显微镜下观察根尖释放根边缘细胞的过程。从去离子水接触根尖开始计时，选择不同的时间间隔进行拍照。一般植物根尖的根边缘细胞在Imin内能快速分散，因此可以间隔几十秒进行拍照，最终得到植物根边缘细胞分散的动态过程。利用该装置观察植物根系与疫霉菌游动孢子互作的方法为:选择无损伤植物根系，放置在该装置U型槽2中，使根尖约位于U型槽2中央，盖上盖玻片；盖玻片并不完全封闭U型槽2封口，空出约5mm距离即加液口 4，从该空隙给U型槽2加满I X 106个/ml疫霉菌游动孢子悬浮液，以封口的直径Imm毛细管插入作为对照；在显微镜下观察根围孢子的分布情况，并每隔5min拍照一次，比较不同部位(根冠区、分生区、伸长区、根外围)不同时间孢子聚集的数量，按照下列公式计算CR值，从而表示出疫霉菌孢子的趋化性，具体计算方法如下:根冠区:计数显微镜下以根尖顶点为中心的一个视野的孢子数量。分生区:计数根尖向上根冠区视野的下一个视野的孢子数量。伸长区:计数根尖向上与分生区视野隔一视野的下一个视野的孢子数量。根外围:计数与U型槽弯角视野对角相连的视野的孢子数量。CR =处理孢子总量+对照孢子总量(当CR > I时表示为吸引增多趋势，当CR<I时表示为排斥减少趋势)植物根系对疫霉菌游动孢子抑菌活性的评价方法为:选择完整无损伤的根系，插入刚释放的浓度为I X IO6个/ml的疫霉菌孢子悬浮液中，在显微镜下每隔5min观察拍照一次，计算不同时间不同部位(根冠区、分生区、伸长区、根外围)疫霉菌游动孢子游动、休止、萌发和裂解状况。同样，在U型槽2中插入受损植物根系，观察疫霉菌游动孢子在受损根系伤口处的活动情况，可以比较受损根系与无损伤根系对疫霉菌游动孢子行为活动的影响。应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本实用新型所附权利要求的保护范围。
权利要求1.一种观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置，其特征在于，包括载玻片(I)、U型槽(2)、盖玻片(3) ;U型槽⑵置于载玻片⑴上，用盖玻片(3)盖上，左端留有开口作为加液口(4)。
2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述U型槽(2)采用直径Imm的毛细管。
3.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述加液口⑷长50mm、宽15mm、高1mm。
专利摘要本实用新型公开了一种观察根系及根边缘细胞与疫霉菌游动孢子互作的装置，包括载玻片(1)、U型槽(2)、盖玻片(3)；U型槽(2)置于载玻片(1)上，用盖玻片(3)盖上，左端留有开口作为加液口(4)。所述U型槽(2)采用直径1mm的毛细管。所述加液口(4)长50mm、宽15mm、高1mm。利用该装置可以有效观察植物根系的根边缘细胞的分散过程，或者观察植物根系与疫霉菌游动孢子互作过程。
文档编号C12M1/34GK202954042SQ2012207223
公开日2013年5月29日 申请日期2012年12月15日 优先权日2012年12月15日
发明者杨敏, 朱书生, 廖静静, 刘屹湘, 张彧, 梅馨月, 何霞红, 李成云, 朱有勇 申请人:云南农业大学