一种哥伦比亚血琼脂基础培养基的制作方法
【专利摘要】本发明为微生物领域，特别涉及一种哥伦比亚血琼脂基础培养基，所述培养基的组分包括32.1g/L肉浸液肉汤、10.0g/L酪蛋白胰酶消化物、4.0g/L心胰酶消化物、1.2g/L玉米淀粉、4.5g/L肉胃酶消化物、4.5g/L酵母浸出粉、0.18g/L叠氮化钠、13.0g/L琼脂，pH值为7.1-7.5。所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、胰酪蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。
【专利说明】一种哥伦比亚血琼脂基础培养基
【技术领域】
[0001] 本发明为微生物领域，特别涉及一种哥伦比亚血琼脂基础培养基。
【背景技术】
[0002] 微生物培养（microculture)是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病 毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基，根据微生物的不同种类和生活习性 来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作，如果培养器具和培养基不能 彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。
[0003] 肠球菌（Enterococcus)属肠球菌属，是人类和动物肠道正常菌群的一部分，通常 在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现，既往认为肠球菌是对人类无害的共栖 菌，但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中，它是仅次于葡萄球菌的 重要院内感染致病菌，肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织 感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。
[0004] 溶血性链球菌，需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补 充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素 B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为 37°C，在20-42°C能生长，最适pH为7. 4-7. 6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒 状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0. 5-0. 75mm的细 小菌落，不同菌株溶血不一。
[0005] 粪肠球菌，根据最新分类原则，粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰 氏（Lancefield)血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠 球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌（S. faecalis)、屎链球菌（S. faecium)和坚忍链 球菌（S. durans),后者有牛链球菌（S. bovis)和马肠链球菌（S. equinus)。
[0006] 其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在KTC或45°CpH9. 6或含6. 5% NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65°C 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发 酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNA-DNA杂交结果显示，肠球菌与链球菌属 同源程度低，故有学者建议另立肠球菌属，与人类有关者为粪肠球菌（E.faecalis)和屎肠 球菌（E. faecium) 〇
[0007] 培养基（Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料， 一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养 基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变 质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培 养基），较长时间的贮存，必须放在3?6°C的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在 均改制成粉末。
[0008] 培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类 为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
【发明内容】
[0009] 本发明克服现有技术中的不足，提供一种哥伦比亚血琼脂基础培养基。
[0010] 本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不 同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基 的PH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了 本发明的培养基。
[0011] 本发明所采用的技术方案为：
[0012] 一种哥伦比亚血琼脂基础培养基，所述培养基的组分包括32. lg/L肉浸液肉汤、 10. Og/L酪蛋白胰酶消化物、4. Og/L心胰酶消化物、I. 2g/L玉米淀粉、4. 5g/L肉胃酶消化 物、4. 5g/L酵母浸出粉、0. 18g/L叠氮化钠、13.0g/L琼脂，pH值为7. 1-7. 5。
[0013] 在以上方案的基础上，所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3. 0g、 氯化钠5. 0g、胰酪蛋白胨12. 0g、磷酸氢二钾2. 0g。
[0014] 酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生 素和氨基酸；淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性；氯化钠维持均衡的渗 透压；琼脂是培养基的凝固剂。
[0015] 称取本品39克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121 °C高压灭菌15分钟，冷至 45-50°C左右时，加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾入无菌平皿。 [0016] 本发明的有益效果：
[0017] 1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；
[0018] 2、菌生长迅速，变异率低；
[0019] 3、便于观察，分析。
【具体实施方式】
[0020] 实施例1 :
[0021] 一种哥伦比亚血琼脂基础培养基，所述培养基的组分包括32. lg/L肉浸液肉汤、 10. 0g/L酪蛋白胰酶消化物、4. 0g/L心胰酶消化物、I. 2g/L玉米淀粉、4. 5g/L肉胃酶消化 物、4. 5g/L酵母浸出粉、0. 18g/L叠氮化钠、13. 0g/L琼脂，pH值为7. 1-7. 5。
[0022] 所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3. 0g、氯化钠5. 0g、胰酪蛋白 胨12. 0g、磷酸氢二钾2. 0g。
[0023] 酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生 素和氨基酸；淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性；氯化钠维持均衡的渗 透压；琼脂是培养基的凝固剂。
[0024] 称取本品39克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121°C高压灭菌15分钟，冷至 45-50°C左右时，加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾入无菌平皿。
[0025] 在 30_35°C培养 18-24 小时。
[0026]
【权利要求】
1. 一种哥伦比亚血琼脂基础培养基，其特征在于所述培养基的组分包括32. lg/L肉浸 液肉汤、10. 〇g/L酪蛋白胰酶消化物、4. Og/L心胰酶消化物、I. 2g/L玉米淀粉、4. 5g/L肉胃 酶消化物、4. 5g/L酵母浸出粉、0. 18g/L叠氮化钠、13. Og/L琼脂，pH值为7. 1-7. 5。
2. 根据权利要求1所述的种哥伦比亚血琼脂基础培养基，其特征在于所述的肉浸液 肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3. 0g、氯化钠5. 0g、胰酪蛋白胨12. 0g、磷酸氢二钾 2. Og0
【文档编号】C12Q1/04GK104313116SQ201410521486
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年9月30日 优先权日:2014年9月30日
【发明者】王玉静, 高玉成 申请人:青岛康合伟业商贸有限公司