专利名称：一种改良巧克力琼脂培养基及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种培养基，具体是涉及一种改良巧克力琼脂培养基及其制备方法。
背景技术：
冃前，市场上很多微生物试剂厂家生产的培养基，由于培养基营养成分低，各成分配比 没有统一规定，实验过程中嗜血杆菌在这种培养基中不能很好的生长，甚至不能生长，给临 床微生物检验带来了很多困难，也给临床医生诊断带来了很多麻烦，很容易造成漏诊或误诊。
发明内容
发明目的本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种改良巧克力琼脂培养基， 本发明另一个目的是提供一种制备改良巧克力琼脂培养基的方法。
技术方案为实现以上目的，本发明提供的改良巧克力琼脂培养基由下列重量百分比的
原料药制成CM375 3~5%、脱纤维羊血3~10%、其余为蒸馏水。
作为优选方案，本发明提供的改良巧克力琼脂培养基由下列重量百分比的原料制成
CM375 4~5°/。、脱纤维羊血6~8%、万古霉素0.0030-0.0050°/。、其余为蒸馏水。
作为另一优选方案，本发明提供的改良巧克力琼脂培养基由下列重量百分比的原料制成
CM375 4.5~4.7%、脱纤维羊血7~8%、万古霉素0.0040~0.0045%、其余为蒸馏水。
作为另一优选方案，本发明提供的改良巧克力琼脂培养基也可以由下列重量百分比的原
料制成
CM375 4.7%、脱纤维羊血8%、万古霉素0.0045%、其余为蒸馏水。 本发明提供的制备改良巧克力琼脂培养基的方法包括以下步骤；
(1) 取CM375加入蒸馏水溶解，高压消毒30分钟至40分钟，冷却到45至60°C;
(2) 取歩骤(1)得到的CM375消毒液，于超净工作台内加入脱纤维羊血，取出再放入震荡 摇床，在60~70°C,频率为100~110次/分钟震荡30分钟至1小时；
(3) 取步骤(2)得到的培养基置于45 50'C水箱内，水浴30分钟至1小时，即得。
本发明提供的制备改良巧克力琼脂培养基的方法，在步骤(3)水浴后还加入了万古霉素， 加入抗生素万古霉素可以有效的抑制细菌，尤其是阳性菌的生长，使检测结果更准确。
本发明提供的制备改良巧克力琼脂培养基的方法中，步骤(l)高压消毒时间为30分钟， 消毒后冷却至50'C。
本发明提供的制备改良巧克力琼脂培养基的方法中，步骤(2)震荡摇床的温度为70°C，频率为110次/分钟，震荡时间为30分钟。
本发明提供的制备改良巧克力琼脂培养基的方法中，步骤(3)水浴温度为5(TC，水浴时间 为1小时。
有益效果:本发明根据大量实验研究，对原来培养基进行了改进，增加了培养基的营养 成分，并科学的制定了各成分的百分比例，经临床实验研究表明，尤其培养基由重量百分比 为CM375 4.7%、脱纤维羊血8%、万古霉素0.0045%、其余为蒸馏水组成时，细菌能很好 的生长。同时经临床实验研究表明嗜血杆菌等菌种在本发明提供的改良培养基中能很好的生 长，成活率高，给临床微生物检验和临床医生的诊断带来了方便，保证了检测结果的正确性， 且本发明提供的改良巧克力琼脂培养基的原料易得，其制备方法工艺简单，可操作性强，适 合工业化大生产。
具体实施例方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例 所描述的具体的物料配比及其实验结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书 中所详细描述的本发明。 实施例1
取CM375 (BRAIN HEART INFUSION AGAR) 47克加入1000克蒸馏水溶解，高压消 毒30分钟，冷却到5(TC，于超净工作台内加入73克脱纤维羊血，取出后再放入震荡摇床， 在7(TC,频率为110次/分钟震荡30分钟，然后放置于50'C水箱内，水浴30分钟，无菌分装 即得。 实施例2
取CM375 (BRAIN HEART INFUSION AGAR) 47克加入1000克蒸馏水溶解，高压消 毒35分钟，冷却到45。C，于超净工作台内加入83.7克脱纤维羊血，取出后再放入震荡摇床， 在65'C,频率为110次/分钟震荡40分钟，然后放置于5(TC水箱内，水浴40分钟，加入万古 霉素45mg无菌分装即得。 实施例3
取CM375 (BRAIN HEART INFUSION AGAR) 30克加入1000克蒸馏水溶解，高压消 毒40分钟，冷却到60。C，于超净工作台内加入50.9克脱纤维羊血，取出后再放入震荡摇床， 在6(TC,频率为100次/分钟震荡50分钟，然后放置于50。C水箱内，水浴1小时，加入万古 霉素30mg,无菌分装即得。 实施例4
取CM375 (BRAIN HEART INFUSION AGAR) 50克加入1000克蒸馏水溶解，高压消 毒30分钟，冷却到5(TC，于超净工作台内加入105克脱纤维羊血，取出后再放入震荡摇床，在6(TC,频率为110次/分钟震荡30分钟，然后放置于45'C水箱内，水浴1小时，加入万古
霉素50mg,无菌分装即得。
实施例5
取CM375 (BRAIN HEART INFUSION AGAR) 45克加入1000克蒸馏水溶解，高压消 毒30分钟，冷却到50。C，于超净工作台内加入83.6克脱纤维羊血，取出后再放入震荡摇床， 在60。C,频率为110次/分钟震荡30分钟，然后放置于45。C水箱内，水浴1小时，加入万古 霉素45mg，无菌分装即得。 实施例6
取CM375 (BRAIN HEART INFUSION AGAR) 40克加入1000克蒸馏水溶解，高压消 毒30分钟，冷却到55。C，于超净工作台内加入52克脱纤维羊血，取出后再放入震荡摇床， 在65。C,频率为110次/分钟震荡60分钟，然后放置于50。C水箱内，水浴30分钟，加入万古 霉素40mg,无菌分装即得。
权利要求
1、一种改良巧克力琼脂培养基，其特征在于，它由下列重量百分比的原料制成CM375 3～5％、脱纤维羊血3～10％、其余为蒸馏水。
2、 根据权利要求l所述的改良巧克力琼脂培养基，其特征在于，它由下列重量百分比的 原料制成CM375 4~5%、脱纤维羊血6 8%、万古霉素0.0030~0.0050%、其余为蒸馏水。
3、 一种改良巧克力琼脂培养基，其特征在于，它由下列重量百分比的原料制成-CM375 4.5~4.7%、脱纤维羊血7 8%、万古霉素0.0040-0.0045%、其余为蒸馏水。
4、 一种改良巧克力琼脂培养基，其特征在于，它由下列重量百分比的原料制成 CM375 4.7%、脱纤维羊血8%、万古霉素0.0045%、其余为蒸馏水。
5、 一种制备权利要求1所述的改良巧克力琼脂培养基的方法，其特征在于包括以下步骤(1) 取CM375加入蒸馏水溶解，高压消毒30分钟至40分钟，冷却到45至60°C;(2) 取步骤(1)得到的CM375消毒液，于超净工作台内加入脱纤维羊血，取出再放入震荡 摇床，在60 70。C，频率为IO(MIO次/分钟震荡30分钟至1小时；(3) 取步骤(2)得到的培养基置于45 5(TC水箱内，水浴30分钟至1小时，即得。
6、 一种制备权利要求2至4任一项所述的改良巧克力琼脂培养基的方法，其特征在于包 括以下步骤(1) 取CM375加入蒸馏水溶解，高压消毒30分钟至40分钟，冷却到45至60°C;(2) 取步骤(1)得到的CM375消毒液，于超净工作台内加入脱纤维羊血，取出再放入震荡 摇床，在60~70°C，频率为100~110次/分钟震荡30分钟至1小时；(3) 取步骤(2)得到的培养基置于45 5(TC水箱内，水浴30分钟至1小时，然后加入万古霉 素，即得。
7、 根据权利要求5或6所述的改良巧克力琼脂培养基的制备方法，其特征在于，步骤(l) 高压消毒时间为30分钟，消毒后冷却至5(TC。
8、 根据权利要求5或6所述的改良巧克力琼脂培养基的制备方法，其特征在于，步骤(2) 震荡摇床的温度为7(TC,频率为110次/分钟，震荡时间为30分钟。
9、 根据权利要求5或6所述的改良巧克力琼脂培养基的制备方法，其特征在于，步骤(3) 水浴温度为50°C，水浴时间为1小时。
全文摘要
本发明公开了一种改良巧克力琼脂培养基及其制备方法，该培养基由下列重量百分比的原料制成CM375 4～5％、脱纤维羊血6～8％、万古霉素0.0030～0.0050％、其余为蒸馏水。根据药理实验和临床实验表明本发明提供的改良巧克力琼脂培养基营养成分丰富，各成分的配比科学合理，嗜血杆菌等菌种能在培养基中很好的生长，存活率高，为临床微生物检验和临床医生的诊断带来了方便，保证了检测结果的正确性，同时本发明提供的改良巧克力琼脂培养基的原料易得，其制备方法工艺简单，可操作性强，适合工业化大生产。
文档编号C12N1/20GK101550404SQ20091002635
公开日2009年10月7日 申请日期2009年4月21日 优先权日2009年4月21日
发明者张爱华, 飞 徐, 王惠云, 迟富丽, 钟天鹰, 黄松明 申请人:王惠云;张爱华;钟天鹰