一种胆硫乳琼脂培养基及其应用
【专利说明】
[0001]
技术领域 本发明为微生物领域，特别涉及一种胆硫乳琼脂培养基及其应用。
[0002]
【背景技术】 沙门氏菌病的病原体。属肠杆菌科，革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种(或菌 株)。按其抗原成分，可沙门氏菌分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。其中与人体疾病有关的 主要有甲组的副伤寒甲杆菌，乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌，丙组的副伤寒丙杆菌和 猪霍乱杆菌，丁组的伤寒杆菌和肠炎杆菌等。除伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌和副伤寒乙杆菌引 起人类的疾病外，大多数仅能目引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病，但有时也可污染人类 的食物而引起食物中毒。沙门氏菌在水中不易繁殖，但可生存2-3周，冰箱中可生存3-4个 月，在自然环境的粪便中可存活1-2个月。沙门氏菌最适繁殖温度为37°C，在20°C以上即 能大量繁殖，因此，低温储存食品是一项重要预防措施。
[0003] 志贺氏菌属是一类革兰氏阴性杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称 痢疾杆菌。大小为0.5~0.7X2~3 iim，无芽孢，无荚膜，无鞭毛。多数有菌毛。革兰氏阴 性杆菌。为兼性厌氧菌，能在普通培养基上生长，形成中等大小，半透明的光滑型菌落。在 肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。生化反应分解葡萄糖，产酸不产气。VP试验阴性， 不分解尿素，不形成硫化氢，不能利用枸橼酸盐作为碳源。宋内氏志贺氏菌能迟缓发酵乳糖 (37。。3~4天)。
[0004] 培养基（Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料， 一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养 基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变 质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养 基)，较长时间的贮存，必须放在:T6°C的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改 制成粉末。
[0005] 培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类 为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
【发明内容】
[0006] 本发明克服现有技术中的不足，提供一种胆硫乳琼脂培养基及其应用。
[0007] 本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不 同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基 的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了 本发明的培养基。
[0008] 本发明所采用的技术方案为： 一种胆硫乳琼脂培养基，所述培养基的组分包括20. lg/L GN增菌液、8. Og/L乳糖、 2. 8g/L硫代硫酸钠、1. 5g/L柠檬酸钠、1. 5g/L柠檬酸铁铵、0. 023g/L中性红、16. 5g/L琼 月旨，pH值为7. 1-7. 3。
[0009] 所述GN增菌液为每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡萄糖2. 0g、磷酸氢二 钾1. 5g、甘露醇3g、枸橼酸钠5. 8g、去氧胆酸钠0. 33g、氯化钠5. Og、磷酸氢二钾2. Og。
[0010] 本发明还公开了所述的胆硫乳琼脂培养基的应用，用于沙门氏菌的选择性分离。
[0011] 蛋白胨、葡萄糖提供碳源、氮源、维生素和矿物质；乳糖为可发酵的糖类；去氧胆 酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌，但不影响沙门氏菌的 生长；硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；中性红为pH 指示剂，发酵糖产酸的菌落呈红色，不发酵糖的菌落为无色；琼脂是培养基的凝固剂。
[0012] 称取本品65. 2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，待冷至60 °C，倾入无菌平皿。无 需高压灭菌。 本发明的有益效果： 1、 培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用； 2、 菌生长迅速，变异率低； 3、 便于观察，分析。
[0013]
【具体实施方式】 实施例1 : 一种胆硫乳琼脂培养基，所述培养基的组分包括20. lg/L GN增菌液、8. Og/L乳糖、 2. 8g/L硫代硫酸钠、1. 5g/L柠檬酸钠、1. 5g/L柠檬酸铁铵、0. 023g/L中性红、16. 5g/L琼 月旨，pH值为7. 1-7. 3。
[0014] 所述GN增菌液为每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡萄糖2. 0g、磷酸氢二 钾1. 5g、甘露醇3g、枸橼酸钠5. 8g、去氧胆酸钠0. 33g、氯化钠5. 0g、磷酸氢二钾2. 0g。
[0015] 蛋白胨、葡萄糖提供碳源、氮源、维生素和矿物质；乳糖为可发酵的糖类；去氧胆 酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌，但不影响沙门氏菌的 生长；硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；中性红为pH 指示剂，发酵糖产酸的菌落呈红色，不发酵糖的菌落为无色；琼脂是培养基的凝固剂。
[0016] 称取本品65. 2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，待冷至60 °C，倾入无菌平皿。无 需高压灭菌。 在36±1°C培养18-24小时_
【主权项】
1. 一种胆硫乳琼脂培养基，其特征在于所述培养基的组分包括20. lg/L GN增菌液、 8. Og/L乳糖、2. 8g/L硫代硫酸钠、I. 5g/L柠檬酸钠、I. 5g/L柠檬酸铁铵、0. 023g/L中性红、 16. 5g/L 琼脂，pH 值为 7. 1-7. 3。
2. 根据权利要求1所述的胆硫乳琼脂培养基，其特征在于所述GN增菌液为每升GN增 菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氢二钾1.5g、甘露醇3g、枸橼酸钠5.8g、去 氧胆酸钠33g、氯化钠5. 0g、磷酸氢二钾2. 0g。
3. -种根据权利要求1所述的胆硫乳琼脂培养基的应用，其特征在于用于沙门氏菌的 选择性分离。
【专利摘要】本发明为微生物领域，特别涉及一种胆硫乳琼脂培养基，所述培养基的组分包括20.1g/LGN增菌液、8.0g/L乳糖、2.8g/L硫代硫酸钠、1.5g/L柠檬酸钠、1.5g/L柠檬酸铁铵、0.023g/L中性红、16.5g/L琼脂，pH值为7.1-7.3。所述的胆硫乳琼脂培养基，所述GN增菌液为每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氢二钾1.5g、甘露醇3g、枸橼酸钠5.8g、去氧胆酸钠0.33g、氯化钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。
【IPC分类】C12R1-42, C12N1-20
【公开号】CN104651252
【申请号】CN201310599730
【发明人】刘汉斌
【申请人】刘汉斌
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2013年11月25日