一种生产亚环己基二氧基庚烯醇的产朊酵母催化法
【专利摘要】一种生产亚环己基二氧基庚烯醇的产朊酵母催化法。以产朊酵母细胞为催化剂，直接催化制备光活性(2S,3S)-1,2-（亚环己基二氧基）庚-6-烯-3-醇，反应罐中加入磷酸盐缓冲液，加入白土调控底物、产物浓度，用产朊假丝酵母细胞进行生物催化反应，产品收率高，对映体过量率高，充分发挥了生物催化的优势。
【专利说明】一种生产亚环己基二氧基庚烯醇的产朊酵母催化法
【技术领域】
[0001] 本发明属于制药工程【技术领域】，特别涉及到产朊假丝酵母细胞生物催化制备手性 医药中间体（2S，3S)-1，2-(亚环己基二氧基）庚-6-烯-3-醇的技术。
【背景技术】
[0002] (2S, 3S) _1，2-(亚环己基二氧基）庚_6_烯_3_醇是合成手性药物、精细化学品、 农药品和其他特殊材料的重要中间体。生物催化不对称合成具有环境友好、条件温和、选择 性高等优点，作为绿色高效制备手性化合物的优先途径，被越来越多地应用于生产一些高 附加值的手性化合物。生物催化制备（2S，3S) -1，2-(亚环己基二氧基）庚-6-烯-3-醇具 有很好的应用前景。
[0003] 生物催化具有催化效率高、选择性强、条件温和、环境友好等突出优点，是可持续 发展过程中替代和拓展传统有机化学合成的重要方法。其中手性拆分和不对称合成是生物 催化最具吸引力的应用领域。在作为生物催化剂的六大类酶中，水解酶能够催化动力学拆 分外消旋体得到手性产品，在工业生物催化中一直扮演着重要角色。近几年来，氧化还原 酶在工业上的应用得到了迅速增长。目前，采用水解酶动力学拆分法、生物还原法和生物 氧化法工业制备光学活性手性化合物的比例为4:2:1。
[0004] (2S, 3S) _1，2-(亚环己基二氧基）庚_6_稀_3_醇是合成手性药物、精细化学品、 农药品的重要手性砌块，由于有2个手性中心，使得化学合成较为困难，成本高。本发明将 米用生物催化制备（2S，3S) _1，2_ (亚环己基二氧基）庚_6_烯_3_醇。
【发明内容】
[0005] 本发明采用产朊假丝酵母细胞催化制备（2S，3S)-1，2_ (亚环己基二氧基） 庚-6-烯-3-醇，反应式如下：
【权利要求】
1. 一种产朊假丝酵母细胞生物催化制备（2S，3S)-1，2-(亚环己基二氧基） 庚-6-烯-3-醇的方法，其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0. 6-0. 7, pH 为6. 2,加入吸附了底物S-亚环己基甘油醛与4-溴-1- 丁烯的白土，使底物S-亚环己基甘 油醛添加量为80-90 g/L，底物S-亚环己基甘油醛与底物4-溴-1-丁烯摩尔比为1，麦芽 浸膏25-30 g，木糖14-16 g/L，支链化13碳格尔伯特醇聚氧乙烯醚为13-18g/L，121°C高压 灭菌30分钟；冷却至30-31°C时，加入湿酵母细胞使浓度为25-28g/L，通气比为0. 10-14V/ (V分钟)，进行生物催化反应，反应时间为82-90小时；反应结束后，分别滤出细胞、白土，用 乙酸乙酯萃取反应液、萃取白土，合并乙酸乙酯萃取液和萃取白土的乙酸乙酯，蒸出乙酸乙 酯，得到产物（2S，3S)-1，2-(亚环己基二氧基)庚-6-烯-3-醇，反应转化率94-96%，产品 收率92-94 %，对映体过量率（ee%) 97-98 %。
2. 权利要求1所述的方法，其特征在于湿酵母细胞制备过程如下：产朊假丝酵母经斜 面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，装料系数为〇. 6-0. 7,121°C高压灭 菌30分钟，冷却至27-28°C，将产朊假丝酵母种子液接种至发酵罐，接种比例为6-6. 5%，通 气比为1. 4-1. 6V/ (V分钟)，27-28°C培养18-20小时，用过滤式离心机离心得到湿酵母细 胞，用作生物催化反应催化剂。
3. 权利要求1所述的方法，其特征在于种子培养基成份为：酵母提取物10 g/L，葡萄 糖20 g/L，蛋白胨20 g/L，pH6;配制固体培养基时添加15g/L的琼脂粉； 培养液成份为：葡萄糖18-22 g/L，麦芽浸膏25-30 g/L，木糖8-10 g/L，（NH4)2S04 4.8-5.3 g/L，KH2P04 9-11 g/L，MgS04.7H20 0.3-0.4 g/L，CaCl2 0.35-0.4 g/L,硫酸铵 0· 2-0. 25g/L，硫酸镁 0· 3-0. 4g/L, ρΗ5· 6。
4. 权利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附了底物的白土制作方法为，将底物 S-亚环己基甘油醛和4-溴-1- 丁烯混溶，R-亚环己基甘油醛与4-溴-1- 丁烯摩尔比为1， 用白土吸收此溶液，即得到吸附了底物的白土，调节底物与白土用量，使得底物与白土的质 量比率为0. 35-0. 38。
【文档编号】C12P17/04GK104293847SQ201410537232
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月13日 优先权日:2014年10月13日
【发明者】刘均洪, 李 杰 申请人:青岛科技大学