一种获取肿瘤微栓的装置制造方法
【专利摘要】本实用新型涉及一种获取肿瘤微栓的装置，尤其是能获取癌症患者外周血中循环肿瘤微栓的装置，包括有用于盛血的血样容器，血样容器的下方连接一带有过滤膜的过滤器，所述过滤膜上均匀布满直径为10-25微米的滤孔。本方法设备、技术要求不高，易于掌握，价格便宜；可以分离获取癌症患者外周血中的循环肿瘤微栓，且不改变其形态学及免疫学特征，便于后续的检测和科学研究；本技术方法不依靠肿瘤特异性抗原或分子，故所有肿瘤均通用。
【专利说明】一种获取肿瘤微栓的装置
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种获取肿瘤微栓的装置，尤其是能获取癌症患者外周血中循环肿瘤微栓的装置。
【背景技术】
[0002]循环肿瘤细胞(Circulating tumor cell, CTC)是从实体肿瘤脱落而进入外周血液循环的肿瘤细胞，它存在于多种恶性肿瘤中，对于早期发现肿瘤微转移、评估预后以及选择合适的个体化治疗具有重要的临床意义。最近研究证实，由若干个循环肿瘤细胞聚集而形成的循环肿瘤微栓(Circulating tumor microemboli, CTM),较循环肿瘤细胞具有更高的侵袭力，更能反映肿瘤的发生发展及转移。而目前包括CellSearch系统、免疫磁性细胞分选仪(MACS)系统、AdnaTest癌细胞检测系统、莱尔系统等在内的大多数循环肿瘤细胞检测技术无法检测循环肿瘤微栓(CTM)，是因为这些检测技术在样本处理过程中破坏或改变了循环肿瘤微栓(CTM)的形态学或免疫学特征。
【发明内容】
[0003]为了克服循环肿瘤微栓(CTM)被破坏的不足，本实用新型提供一种简易的分离装置，能够分离获取外周血中存在的循环肿瘤微栓(CTM)，并通过MEG染色证实其形态学未受破坏。
[0004]本实用新型是通过以下措施来实现的:
[0005]本实用新型还公开了一种获取循环肿瘤微栓的装置，包括有用于盛血的血样容器，血样容器的下方连接一带有过滤膜的过滤器，所述过滤膜上均匀布满直径为10-25微米的滤孔。
[0006]上述本实用新型的获取循环肿瘤微栓的装置，所述过滤膜微孔直径优选为13-20微米；更优选为15-18微米。
[0007]上述装置的使用方法采用以下步骤:
[0008]a.采集获取癌症患者外周血，盛于血样容器中；
[0009]b.血样容器的下方连接一带有过滤膜的过滤器，将外周血经过滤器过滤；所述过滤膜上均匀布满直径为10-25微米的微孔；所述微孔直径优选为13-20微米；更优选为15-18微米；所述的滤膜为最好为疏水滤膜，所述血样容器的体积为50-100毫升；
[0010]C.过滤完成后，进行瑞氏液染色，PBS缓冲液冲洗干净，取下滤膜，在显微镜下观察有无循环肿瘤微栓。
[0011]本实用新型通过分离获取癌症患者外周血中的CTM;采用瑞氏光学染色证实CTM的存在。CTM由三个以上的肿瘤细胞聚集形成，细胞体积较大，直径多在20微米以上，细胞核质比大，而血细胞(包括红细胞、白细胞)直径一般小于10微米，对于循环肿瘤细胞，其直径一般为10-20微米，由于具有变形的特性，循环肿瘤细胞也能够通过本实用新型的过滤膜。因此当含有循环肿瘤微栓的外周血经本实用新型的方法及装置过滤后，循环肿瘤微栓会被截留在滤膜上，血细胞和循环肿瘤细胞能够被滤过。
[0012]本实用新型的有益效果是:本方法设备、技术要求不高，易于掌握，价格便宜；可以分离获取癌症患者外周血中的循环肿瘤微栓，且不改变其形态学及免疫学特征，便于后续的检测和科学研究；本技术方法不依靠肿瘤特异性抗原或分子，故所有肿瘤均通用。
【专利附图】
【附图说明】
[0013]下面结合附图和实施例对本实用新型进一步说明。
[0014]图1是本实用新型的总体结构示意图。
[0015]图2是图1中滤器3的剖视分解示意图。
[0016]图中1.铁架台2.血样容器3.滤器4.输液器5.废液缸6.滤器上口 7.滤膜8.滤孔9.载滤膜平台10.滤器下口
【具体实施方式】
[0017]实施例1:
[0018]本实用新型的过滤装置如图1-2所示，包括有铁架台1，铁架台I的上方固定有血样容器2，血样容器2的下方连接有滤器3，滤器3内固定有滤膜7，滤膜7上均匀布满直径为13微米的滤孔8。滤器3的下方分别有输液器4和废液缸5。
[0019]滤器3的具体结构如图2，包括有滤器上口 6，滤膜7，载滤膜平台9，滤器下口 10。
[0020]获取循环肿瘤微栓的方法，具体采用以下步骤:分离获取癌症患者外周血5毫升，将外周血经过滤器过滤，过滤完成后，从过滤装置中取下滤器，打开并移走滤器上口，将瑞氏染色液加入到滤器中，A、B染液各染色2min，PBS缓冲液冲洗干净，用眼科镊子取下滤膜，放置在载玻片上，直接在显微镜下观察CTM形态特征，分离出长约40微米、宽约12微米的循环肿瘤微栓。因血样是依靠重力自然滤过，所以分离获得的循环肿瘤微栓形态及免疫特征均不受破坏。
[0021]实施例2:
[0022]采用均匀布满直径为16微米的滤孔的滤膜，进行过滤外周血，分离出长约35微米、宽约20微米的循环肿瘤微栓。
[0023]其它条件与实施例1基本相同。
[0024]实施例3:
[0025]采用均匀布满直径为22微米的滤孔的滤膜，进行过滤外周血，分离出长约55微米、宽约25微米的循环肿瘤微栓。
[0026]其它条件与实施例1基本相同。
【权利要求】
1.一种获取循环肿瘤微栓的装置，其特征在于:包括有用于盛血的血样容器，血样容器的下方连接一带有过滤膜的过滤器，所述过滤膜上均匀布满直径为10-25微米的滤孔。
2.根据权利要求1所述的获取循环肿瘤微栓的装置，其特征在于:所述过滤膜的孔径为13-20微米。
3.根据权利要求1所述的获取循环肿瘤微栓的装置，其特征在于:所述过滤膜的孔径为15-18微米。
【文档编号】C12M1/12GK204162708SQ201420094916
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年3月4日 优先权日:2014年3月4日
【发明者】李胜, 王振丹, 高杰, 李庞, 崔凯, 王焕昇, 邹本奎 申请人:李胜, 王振丹