用于增强学习技能和记忆功能的包含唾液酸乳糖的组合物的制作方法

本发明涉及包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物，并涉及所述组合物用于增强个体的学习技能和记忆功能的用途。这种增强尤其是通过本发明的营养组合物提高所述个体大脑中唾液酸(neu5ac)浓度和/或增强所述个体的大脑的神经可塑性来实现的。

背景技术：

婴儿神经发育的早期阶段对建立影响以后生活中(包括成年期)脑生化功能健康的神经结构和突触连接至关重要。此出生后的神经快速生长期对细胞迁移、神经突增生、突触可塑性和轴突成束非常重要。这些过程因此对细胞内营养物质和生化前体库提出了非常高的要求。因此，早期营养可永久性地影响大脑结构和功能。

通常认为母乳是人类生命早期阶段的最佳营养来源，因为它为正常生长和发育提供所有必需营养物质。它含有婴儿健康成长所需的各种营养素，诸如蛋白质、脂质、碳水化合物、矿物质、维生素和微量元素。它还含有免疫相关组分，诸如iga、白细胞、低聚糖、溶菌酶、乳铁蛋白、干扰素-γ、核苷酸、细胞因子等。这些化合物中的若干种在胃肠道中并且在一定程度上在上呼吸道中提供被动保护，防止病原体粘附到粘膜上，从而保护母乳喂养的婴儿免受侵入性感染。人乳还含有必需脂肪酸、酶、激素、生长因子、多胺和其它生物活性化合物，其可能在与母乳喂养相关的健康益处中起重要作用。

然而，在一些情况下，母乳喂养并不够，或者不成功，或者出于医学理由而不可取，或者母亲选择完全放弃母乳喂养、或只母乳喂养几周以上。鉴于这些情况已经开发出了婴儿喂养配方。如今，婴儿配方食品常常用于提供生命早期阶段的营养的补充来源或唯一来源。它们可用来代替母乳或作为母乳的补充。因此，婴儿配方食品在组成和功能上的设计一般都尽可能类似母乳。同样已经开发了乳强化剂(包括人乳强化剂)和补充剂以向婴儿、尤其是具有特殊营养需求的那些(诸如早产婴儿、小于胎龄(sga)婴儿和/或低出生体重(lbw)婴儿)提供特定健康益处。

最近，越来越多证据证实相比于配方食品喂养，母乳喂养可提供长期的认知优势。然而，解释母乳喂养和认知发育之间的关系的内在机制仍不清楚。

已知人乳尤其富含基于乳糖的低聚糖。这些通常不可消化的低聚糖是通过一系列糖基转移酶(诸如那些转移的n-乙酰基-葡糖胺、半乳糖、唾液酸或岩藻糖)的作用产生的乳糖的延伸。

最近，唾液酸被认为在婴儿大脑发育中有着重要作用(wang等人，1998；comparativebiochemistryandphysiologyparta:molecular&integrativephysiology,vol.119,435-439)。此前，morgan等人发现腹膜内注射n-乙酰神经氨酸作为单一成分增强了成年大鼠学习速度，并提出大脑中n-乙酰神经氨酸浓度对行为具有一定影响(morgan等人，1980,journalofnutrition,vol.110,416-424)。另外，认为通过补充膳食cgmp(酪蛋白糖巨肽)形式的蛋白质结合唾液酸作为单一成分促进了学习和记忆功能(wang等人，2007,americanjournalofclinicalnutrition,vol.85,no.2,561-569)。

唾液酸(sia)是一类九碳糖酸，其大量存在于人乳低聚糖中，是大脑神经节苷脂和唾液酸化糖蛋白的基本组分，尤其作为用于合成聚唾液酸(聚sia)聚糖的前体，翻译后修饰细胞膜相关神经细胞粘附分子(ncam)。

新生儿从头内源性合成唾液酸的能力有限，而众所周知人母乳包含非常高含量的唾液酸糖复合物。人母乳中唾液酸的主要形式为n-乙酰神经氨酸(neu5ac)。唾液酸因此在大脑快速生长阶段期间可为条件营养素。然而，与成熟人母乳(约0.7g/l)相比，常见婴儿配方食品提供的唾液酸很少或不提供唾液酸(0至0.2g/l)。

因此，仍然需要为大脑发育提供最佳营养支持，诸如用于促进大脑发育的改善的营养组合物，要牢记大脑是具有多个区域的非常复杂的器官。

具体地讲，仍然需要提供可增强个体诸如婴儿的学习技能并且尤其是学习速度的改善的营养组合物。

另外，还需要提供可增强个体的记忆功能并且优选短期记忆功能和长期记忆功能两者的改善的营养组合物。

此外，仍然需要提供改善的营养组合物，用于增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

这些需要通过如下所公开的本发明的主题来满足。

技术实现要素：

本发明人惊讶地发现，向个体提供唾液酸乳糖形式的唾液酸化低聚糖可通过增加个体的大脑中，尤其是所述个体的海马体和/或额皮质中唾液酸(neu5ac)浓度来特别增强所述个体的学习技能和记忆功能。此特定身体部分/这些特定身体部分中唾液酸增多可看作一种全新治疗方式，继而开创全新的临床技术领域。

因此，在第一方面，本发明提供了营养组合物，其包含重量比介于10:1和1:10之间的3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)，用于尤其是通过增加个体的大脑中唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或增强所述个体的记忆功能。

在该营养组合物的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第一方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在第一方面的营养组合物中。

在第一方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间或在出生后前2个月期间施用给个体。

在第一方面的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在第一方面的营养组合物的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在第一方面的另一个优选的实施方案中，增加个体大脑中唾液酸(neu5ac)浓度包括增加选自海马体、额皮质或它们的组合，优选地选自海马体的大脑区域中唾液酸(neu5ac)浓度。

在第一方面的另一个优选的实施方案中，增强个体的记忆功能的用途包括增强长期记忆功能。

在第一方面的另一个优选的实施方案中，增强个体的记忆功能的用途包括增强短期记忆功能。

在第一方面的另一个优选的实施方案中，增强个体的记忆功能的用途包括增强短期记忆功能和长期记忆功能两者。

在第一方面的另一个优选的实施方案中，个体为哺乳动物，更优选地为宠物或人，并且最优选地为人。

在第一方面的又一个优选的实施方案中，个体选自由下列组成的列表：婴儿、幼儿、儿童、青少年或成人。尤其优选的是，个体为婴儿或幼儿。

在第一方面的另一个具体实施方案中，个体为配方食品喂养婴儿。

在第一方面的另一个具体实施方案中，个体是早产、小于胎龄(sga)和/或具有低出生体重(lbw)的，优选地个体为早产婴儿、小于胎龄(sga)婴儿和/或低出生体重(lbw)婴儿。

在第一方面的一个特定实施方案中，营养组合物作为唯一喂养源或除母乳喂养之外的喂养源施用给个体。

在根据第一方面的营养组合物的另一个优选的实施方案中，所述组合物为婴儿配方食品，诸如1段婴儿配方食品、2段婴儿配方食品(或较大婴儿配方食品)或早产婴儿配方食品、乳强化剂(优选地人乳强化剂)、成长乳、婴孩食物配方食品、用于临床营养的医疗食物产品、增补剂、补充剂、酸奶、果汁或谷物棒。甚至更优选的是，所述组合物为婴儿配方食品、人乳强化剂或补充剂。

另一个具体实施方案涉及根据第一方面的营养组合物用于通过增强个体大脑的神经可塑性来增强个体的学习技能和/或增强个体的记忆功能。

另一个实施方案涉及根据第一方面的营养组合物用于通过增强个体大脑的神经发育、髓鞘形成、神经形成、轴突生长和/或成熟来增强个体的学习技能和/或增强个体的记忆功能。

另一个具体实施方案涉及根据第一方面的营养组合物用于增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

在第二方面，本发明涉及包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物用于增强个体的学习技能和/或记忆功能的用途，其中3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和1:10之间的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第二方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在第二方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间或在出生后前2个月期间施用给个体。

在第二方面的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体，另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在第二方面的营养组合物的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在第二方面的一个优选的实施方案中，通过增加个体大脑中唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能。优选地，选自海马体、额皮质或它们的组合的大脑区域中唾液酸(neu5ac)浓度有所增加。在一个特别优选的实施方案中，通过增加个体海马体中唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能。

在第二方面的另一个优选的实施方案中，增强个体的记忆功能的用途包括增强长期记忆功能。

在第二方面的另一个优选的实施方案中，增强个体的记忆功能的用途包括增强短期记忆功能。

在第二方面的另一个优选的实施方案中，增强个体的记忆功能的用途包括增强短期记忆功能和长期记忆功能两者。

在一个具体实施方案中，根据第二方面的用途还包括向个体施用作为唯一喂养源或除母乳喂养之外喂养源的营养组合物。

在第二方面的另一个具体实施方案中，通过增强个体大脑的神经可塑性和/或通过增强所述个体大脑的神经发育、髓鞘形成、神经形成、轴突生长和/或成熟来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能。

在第三方面，本发明涉及包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物用于增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验的用途，其中优选地，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和1:10之间的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第三方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在第三方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间施用给个体。

在第三方面的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体，另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在根据第三方面的用途的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在根据第三方面的用途的一个优选的实施方案中，通过增加个体大脑中岛叶皮质、躯体感觉皮质、海马旁、优势颞叶区和/或小脑小叶区域中的灰质体积来增强所述个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

在另一个优选的实施方案中，根据第三方面的用途还包括向个体施用作为唯一喂养源或除母乳喂养之外喂养源的营养组合物。

在第四方面，本发明涉及包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物用于增加个体大脑中的唾液酸(neu5ac)浓度的用途，优选地其中选自海马体、额皮质或它们的组合的大脑区域中唾液酸(neu5ac)浓度有所增加。在一个特别优选的实施方案中，个体海马体中的唾液酸(neu5ac)浓度有所增加。

在本方面的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和1:10之间的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的一个特别优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该营养组合物的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第四方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在第四方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间施用给个体。

在第四方面的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体，另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在根据第四方面的用途的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在第四方面的另一个优选的实施方案中，增加个体大脑中唾液酸(neu5ac)浓度增强了个体的记忆功能，优选地长期记忆功能和/或短期记忆功能。

在另一个优选的实施方案中，根据第四方面的用途还包括向个体施用作为唯一喂养源或除母乳喂养之外喂养源的营养组合物。

在第五方面，本发明涉及尤其是通过增加个体大脑中唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或增强所述个体的记忆功能的方法，所述方法包括向所述个体施用包含重量比在介于10:1和1:10之间的3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物。

在该方法的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该方法的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第五方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在第五方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间施用给个体。

在根据第五方面的方法的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体，另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在根据第五方面的方法的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在第五方面的一个优选的实施方案中，通过增加选自海马体、额皮质或它们的组合的大脑区域中唾液酸(neu5ac)浓度来增强个体的学习技能和/或记忆功能。在一个特别优选的实施方案中，通过增加个体海马体中唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能。

在第五方面的另一个优选的实施方案中，用于增强个体的记忆功能的方法包括增强长期记忆功能。

在第五方面的另一个优选的实施方案中，用于增强个体的记忆功能的方法包括增强短期记忆功能。

在第五方面的另一个优选的实施方案中，用于增强个体的记忆功能的方法包括增强短期记忆功能和长期记忆功能两者。

在根据第五方面的方法的另一个优选的实施方案中，营养组合物作为唯一喂养源或除母乳喂养之外的喂养源施用给个体。

在第六方面，本发明涉及通过增强个体大脑的神经可塑性、和/或通过增强所述个体大脑的神经发育、髓鞘形成、神经形成、轴突生长和/或成熟来增强所述个体的学习技能和/或增强所述个体的记忆功能的方法，所述方法包括向所述个体施用包含重量比在介于10:1和1:10之间的3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物。

在该方法的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该方法的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第六方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在第六方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间施用给个体。

在根据第六方面的方法的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体，另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在根据第六方面的方法的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在第六方面的一个优选的实施方案中，通过增强个体大脑中、优选地选自海马体、额皮质或它们的组合的大脑区域中的神经可塑性来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能。在一个特别优选的实施方案中，通过增强个体海马体的神经可塑性来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能。

在第六方面的另一个优选的实施方案中，用于增强个体的记忆功能的方法包括增强长期记忆功能。

在第六方面的另一个优选的实施方案中，用于增强个体的记忆功能的方法包括增强短期记忆功能。

在第六方面的另一个优选的实施方案中，用于增强个体的记忆功能的方法包括增强短期记忆功能和长期记忆功能两者。

在根据第六方面的方法的另一个优选的实施方案中，营养组合物作为唯一喂养源或除母乳喂养之外的喂养源施用给个体。

在第七方面，本发明涉及用于增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验的方法，所述方法包括向所述个体施用包含重量比在介于10:1和1:10之间的3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物。

在该方法的一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间或在4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在该方法的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在第七方面的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在第七方面的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间施用给个体。

在根据第七方面的方法的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体，另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在根据第七方面的方法的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在第七方面的一个优选的实施方案中，通过增加个体大脑中岛叶皮质、躯体感觉皮质、海马旁、优势颞叶区和/或小脑小叶区域中的灰质体积来增强所述个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

在根据第七方面的方法的另一个优选的实施方案中，营养组合物作为唯一喂养源或除母乳喂养之外的喂养源施用给个体。

在上述用途或方法(即，本发明的第二方面、第三方面、第四方面、第五方面、第六方面和第七方面中的任一方面)中的任一个的优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和2:1之间，优选地介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，并且最优选地以4.4:1的重量比包含在营养组合物中。

在上述用途或方法中的任一个的另一个优选的实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间，优选地介于5.9:1和1.5:10之间，更优选地介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在营养组合物中。

在上述用途或方法中的任一个的一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，优选地60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，更优选地80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物，并且最优选地87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物的量包含在营养组合物中。

在上述用途或方法中的任一个的一个特定实施方案中，营养组合物在个体的早龄阶段期间，优选地在所述个体的婴儿阶段期间施用给所述个体。

另外还优选的是，在上述用途或方法中的任一个中，营养组合物在出生后前12个月期间、在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，更优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间施用给个体。

在上述用途或方法中的任一个的另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日有效提供110mg至180mg、优选地120mg至170mg、更优选地125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，并且最优选地以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

优选的是，在上述用途或方法中的任一个中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、优选地150mg至170mg、更优选地160mg至165mg并且最优选地162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

另外还优选的是，在上述用途或方法中的任一个中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、优选地120mg至140mg、更优选地125mg至135mg并且最优选地131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

在上述用途或方法中的任一个的又一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、优选地380mg至500mg、更优选地390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，并且最优选地以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

优选的是，在上述用途或方法中的任一个中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、优选地480mg至500mg、更优选地485mg至490mg并且最优选地487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

另外还优选的是，在上述用途或方法中的任一个中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)从出生后两周直至出生后12个月、直至出生后8个月、或直至出生后6个月，并优选地从出生后两周直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、优选地380mg至400mg、更优选地390mg至395mg并且最优选地393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在上述用途或方法(即，本发明的第二方面至第七方面)中的任一个的另一个优选的实施方案中，个体为哺乳动物，更优选地为宠物或人，并且最优选地为人。

在这些用途或方法中的任一个的又一个优选的实施方案中，个体选自婴儿、幼儿、儿童、青少年或成人。尤其优选的是，个体为婴儿或幼儿。

在上述用途或方法中的任一个的另一个具体实施方案中，个体为配方食品喂养婴儿。

在上述用途或方法中的任一个的又一个优选的实施方案中，个体是早产、小于胎龄(sga)和/或具有低出生体重(lbw)的，优选地个体为早产婴儿、小于胎龄(sga)婴儿和/或低出生体重(lbw)婴儿。

在上述用途或方法中的任一个的另一个优选的实施方案中，营养组合物为婴儿配方食品，诸如1段婴儿配方食品、2段婴儿配方食品(或较大婴儿配方食品)或早产婴儿配方食品、乳强化剂(优选地人乳强化剂)、成长乳、婴孩食物配方食品、用于临床营养的医疗食物产品、增补剂、补充剂、酸奶、果汁或谷物棒。甚至更优选的是，所述组合物为婴儿配方食品、人乳强化剂或补充剂。

在下文中描述本发明的其它方面和实施方案。

附图说明

图1示出了根据实施例2的八臂迷宫学习区域和用于评估学习和记忆功能的视觉提示的示意图。

图2a和图2b示出了实施例2的有关在膳食补充唾液酸之后学习速度的结果，其中分析了八臂迷宫测试中每日出错的总次数。

图3a和图3b示出了实施例2的有关在膳食补充唾液酸之后学习速度的结果，其中分析了八臂迷宫测试中每日出错的平均次数。

图4示出了实施例2的有关八臂迷宫测试在简单任务后半部分(试验21-40)中出错次数和在困难任务所有40次试验中出错次数的结果。

图5示出了实施例2的有关八臂迷宫测试的简单任务和困难任务的所有40次试验中成功的总次数的结果。

图6a和图6b示出了实施例3的有关短期记忆(stm，图6a)和长期记忆功能(ltm，图6b)的结果。

图7a至图7d示出了实施例4的有关在膳食补充唾液酸之后不同大脑区域中的唾液酸浓度的结果。图7a示出了大脑海马体中的n-乙酰神经氨酸浓度。图7b示出了大脑海马体中的n-羟乙酰神经氨酸浓度。图7c示出了大脑额皮质中的n-乙酰神经氨酸浓度。图7d示出了大脑额皮质中的n-羟乙酰神经氨酸浓度。

图8示出了从实施例2和实施例3获得的结果的汇总。

具体实施方式

本发明人惊讶地发现，营养补充唾液酸乳糖形式的低聚糖结合唾液酸可通过增加个体大脑中、尤其是所述个体海马体和/或额皮质中唾液酸(neu5ac)浓度来提高所述个体的学习技能和记忆功能。

个体

在本发明的上下文中，术语“个体”是指哺乳动物诸如人或动物，并优选地指人或宠物。在一个特别优选的实施方案中，个体是人。

另外，所述个体可为婴儿优选地人类婴儿、幼儿、儿童、青少年或成人。优选地，个体为人类婴儿或幼儿。

在本发明的上下文中，术语“婴儿”是指年龄未满12个月的儿童。另外，在本发明的上下文中，术语“幼儿”意指在一岁和三岁之间的儿童。

在一个具体实施方案中，个体是配方食品喂养婴儿，也就是说，婴儿完全用配方食品(尤其是婴儿配方食品或用例如强化剂补充/强化的配方食品)喂养，更优选地婴儿完全用婴儿配方食品喂养。

此外，个体可以是早产、小于胎龄(sga)和/或具有低出生体重(lbw)的，并且个体尤其可为早产婴儿、小于胎龄(sga)婴儿和/或低出生体重(lbw)婴儿。

“早产儿”是指不足月生产的婴儿或幼儿。通常是指在妊娠满36周之前出生的婴儿或幼儿。

表述“小于胎龄”或”“sga”表示个头小于同胎龄出生的正常标准(最常被定义为体重在同胎龄的第10个百分位以下)的婴儿或幼儿。在一些实施方案中，sga可能与子宫内生长受限(iugr)相关联，其中iugr是指胎儿无法达到其潜在个头的病症。

表述“低出生体重”应理解为出生时不足2500g的任何体重。因此其涵盖：

-出生时体重为1800g至2500g的婴儿或幼儿(通常称为“低出生体重”或lbw)

-出生时体重为1000g至1800g的婴儿或幼儿(称为“极低出生体重”或vlbw)

-出生时体重不足1000g的婴儿或幼儿(称为“超低出生体重”或elbw)

低出生体重的婴儿或幼儿可能是或可能不是早产儿，类似地，胎龄偏小的婴儿或幼儿可能是或可能不是早产儿。

在一个实施方案中，个体也可为中老年人或中老年动物，优选地中老年宠物。在本发明的上下文中，中老年人为至少60岁，并优选地至少65岁。中老年动物或宠物的起始年龄可根据动物或宠物的物种而改变。例如，中老年猫或狗可为至少7岁，优选地至少8岁。

个体也可为怀孕人类或怀孕动物，优选地怀孕宠物。

唾液酸乳糖及其用途

唾液酸乳糖(sl)属于酸性人乳低聚糖。三糖唾液酸乳糖由还原末端处的乳糖和非还原端处的一个唾液酸残基组成，经由α-2,3结合或α-2,6结合，分别产生3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)。

因此，如本文所用，术语“唾液酸乳糖”、“唾液酸乳糖(sl)”和“sl”是等同的，均是指3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)两者。另外，术语“总唾液酸乳糖”、“总唾液酸乳糖(sl)”和“总sl”是等同的，均是指3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)两者的总量。

本发明人首次证明，向个体提供3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)两者显著增强了个体的学习技能和记忆功能。因此，本发明涉及3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)用于增强个体的学习技能和/或记忆功能的用途。

在本公开的上下文中，“3’-唾液酸乳糖”(3’-sl、3-sl、3’sl或3sl)是指(6r)-5-乙酰氨基-3,5-二脱氧-6-[(1r,2r)-1,2,3-三羟基丙基]-β-l-苏-己-2-吡喃酮糖基-(2->3)-β-d-吡喃半乳糖基-(1->4)-d-吡喃葡萄糖

(iupac)，并且“6’-唾液酸乳糖”(6’-sl、6-sl、6’sl或6sl)是指(6r)-5-乙酰氨基-3,5-二脱氧-6-[(1r,2r)-1,2,3-三羟基丙基]-β-l-苏-己-2-吡喃酮糖基-(2->6)-β-d-吡喃半乳糖基-(1->4)-d-吡喃葡萄糖(iupac)。

可采用层析技术或过滤技术从天然来源(诸如动物乳汁)中分离出3'和6'形式的唾液酸乳糖。或者，它们也可利用特殊的唾液酸转移酶或唾液酸酶、神经氨酸苷酶，采用生物技术手段制得，其中生物技术手段包括基于酶(重组酶或天然酶)的发酵技术、化学合成或微生物发酵技术。在后一种情况下，微生物可表达其天然酶和底物，也可经工程改造产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物或混合培养物。可以最初具有任意聚合度(dp)的受体底物为起始物，逐步聚合(从dp＝1开始)形成唾液酸化低聚糖。或者，可由乳糖和游离n’-乙酰神经氨酸(唾液酸)通过化学合成制得唾液酸乳糖。唾液酸乳糖也可从例如kyowahakkokogyo(japan)或genechem(republicofkorea)商购获得。

如本文所用，表述“学习技能”应理解为是指个体的信息处理能力，包括感知、学习、记忆、判断和问题解决能力。“学习技能”也包括个体获取新的知识、行为、技能、价值观或偏好，或者修改和加强现有的知识、行为、技能、价值观或偏好，并且可能涉及产生不同类型的信息。

在本发明的一个优选的实施方案中，表述“学习技能”涵盖表述“学习速度”。“学习速度”应理解为是指个体处理信息，包括感知、学习、记忆、判断和解决问题需要的时间。“学习速度”也包括个体获取新的知识、行为、技能、价值观或偏好，或者修改和加强现有的知识、行为、技能、价值观或偏好需要的时间，或者产生不同类型的信息需要的时间。

在本发明的上下文中，表述“记忆功能”应理解为是指短期记忆功能或长期记忆功能，或者优选地是指短期记忆功能和长期记忆功能两者。

另外还发现，如本文所公开的在膳食补充唾液酸乳糖之后个体的学习技能和记忆功能有所提高具体地讲是因为这些个体大脑中的唾液酸(neu5ac)浓度增加。更具体地讲，发现膳食补充唾液酸乳糖增加了特定大脑区域(诸如大脑海马体和额皮质)中、尤其是海马体中的唾液酸(neu5ac)浓度。这些发现进一步表明，本发明的膳食补充唾液酸乳糖也增强了个体大脑的神经可塑性。

因此，本发明具体地讲涉及3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)用于通过增加个体大脑中的唾液酸(neu5ac)浓度和/或通过增强所述个体大脑的神经可塑性来增强所述个体的学习技能和/或记忆功能的用途。

此外，本发明人发现，根据本公开的膳食补充唾液酸乳糖显著增加了大脑若干区域(包括岛叶皮质、躯体感觉皮质、海马旁、优势颞叶区和/或小脑小叶区域)中的灰质体积，因此增强了个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

根据这些发现，本发明还涉及3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)用于增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验的用途。

上述效果可通过向个体施用3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的任何组合而在所述个体中实现。但是，在本发明的上下文中，3’-sl和6’-sl优选地以介于10:1和1:10之间，更优选地介于10:1和2:1之间、介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比，诸如以4.4:1的重量比使用或施用。

在另一个具体实施方案中，3’-sl和6’-sl优选地以介于6:1和1:10之间、介于5.9:1和1.5:10之间、或介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比使用或施用。在该实施方案中，个体优选地为人类，诸如人类婴儿或幼儿。

另外，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)优选地在个体的早龄阶段期间诸如在所述个体的婴儿阶段期间用于或施用给所述个体。在本发明的上下文中，术语“婴儿阶段”是指婴儿生命的头一年，也就是说，是指所述婴儿出生后的前12个月。

更优选地，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，并优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间用于或施用给个体。

此外，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)优选地以每日有效提供110mg至180mg、120mg至170mg、或125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，诸如以每日有效提供131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，或以每日有效提供162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量用于或施用给个体。

在一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、150mg至170mg、或160mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，诸如以每日162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)优选地从所述个体出生后两周直至出生后12个月，诸如直至出生后8个月、直至出生后6个月，优选直至所述个体出生后4个月以每日有效提供110mg至150mg、120mg至140mg、或125mg至135mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，诸如以每日有效提供131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用。

另外还优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日对应于350mg至530mg、380mg至500mg、或390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，诸如以每日对应于393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量、或以每日对应于487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、480mg至500mg、或485mg至490mg/kg体重的量，诸如以每日对应于487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)优选地从出生后两周直至出生后12个月，诸如直至出生后8个月、直至出生后6个月、或优选地直至出生后4个月以每日有效提供350mg至430mg、380mg至400mg、或390mg至395mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，诸如以每日有效提供393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用。

3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的日剂量可分成至少两部分，优选地至少三部分，并且最优选地分成四部分，使得3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以每日至少两次，优选地每日至少三次，并且最优选地每日四次用于或施用给个体。尤其优选的是，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的日剂量分成等份，和/或其使用或施用在一天内均匀地分布。例如，如果3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的日剂量分成四等份并在一天内均匀地分布，则25％的所述剂量在0小时、4小时、8小时和12小时之后用于或施用给个体。

以本文规定量和时间段向个体提供3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)尤其满足了给定年龄婴儿的需要，并有利地模仿泌乳期期间母乳不断改变的营养品质和组成。

更具体地讲，本文所述的剂量方案有利地随时间推移向婴儿提供唾液酸乳糖和n-乙酰神经氨酸(neu5ac)形式的唾液酸的最佳供应。因此，所述方案为婴儿大脑的发育提供了最佳营养支持。

通过优化所述个体大脑中，尤其所述个体海马体和/或额皮质中唾液酸(neu5ac)浓度，本文所述的剂量方案进一步确保最优化的大脑发育，包括婴儿的学习技能和记忆功能的发育，以及感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

在本发明的上下文中，3’-sl和6’-sl可优选地以如本文所公开的营养组合物的形式用于或施用给个体。

因此，本发明也涉及在营养组合物的制备中3’-sl和6’-sl用于通过增加个体大脑中，尤其是所述个体海马体和/或额皮质中唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或增强所述个体的记忆功能的用途。所述营养组合物优选地对应于如本文所公开的本发明的营养组合物。

同样，表述“膳食施用唾液酸乳糖”和“膳食补充唾液酸乳糖”优选地是指以如本文所公开的营养组合物的形式向个体施用3’-sl和6’-sl。

营养组合物

本发明的营养组合物以干重计每100g组合物可包含0.05g至5g唾液酸乳糖，例如以干重计每100g组合物可包含0.1g至2g或0.2g至1g唾液酸乳糖。

在具体示例中，该组合物包含50mg至2500mg总唾液酸乳糖/l营养组合物、60mg至2000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物、或80mg至1000mg总唾液酸乳糖/l营养组合物。在一个具体实施方案中，该组合物包含2090mg总唾液酸乳糖/l组合物。在另一个具体实施方案中，该组合物包含87.5mg至735mg总唾液酸乳糖/l营养组合物。

本发明的营养组合物优选地包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的组合形式的唾液酸低聚糖。

因此，如本文所用，“唾液酸乳糖”是指3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)两者。表述“总唾液酸乳糖”意指营养组合物中3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)两者的总量。

优选地，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于10:1和1:10之间，诸如介于10:1和2:1之间、介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或介于4.7:1和4.1:1之间的重量比包含在所述营养组合物中。在一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以4.4:1的重量比包含在本发明的营养组合物中。

在另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间、介于5.9:1和1.5:10之间或介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比包含在本发明的营养组合物中。在该实施方案中，个体优选地为人类，诸如人类婴儿或幼儿。

另外，在一个实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)可以每日有效提供110mg至180mg、120mg至170mg、或125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量包含在营养组合物中。在一个实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)可以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量包含在营养组合物中。

另外，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)可以每日对应于350mg至530mg、380mg至500mg、或390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量包含在营养组合物中。在一个实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)可以每日对应于393mg或487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量包含在营养组合物中。

如本文所用，表述“组合物”和“营养组合物”旨在指用于本发明的营养组合物。

在本发明的上下文中，营养组合物可以是向个体提供营养益处并且可以由人或动物安全食用的任何种类的组合物。它可为固体、半固体或液体形式，并且可包含一种或多种宏量营养素、微量营养素、食品添加剂、水等。

通常，营养组合物可以呈营养产品，优选地食物产品、营养补充剂、全餐、全营养配方食品、药物制剂、功能性食物产品、饮料产品以及它们的组合的形式。

在本发明的上下文中，“营养产品”涵盖向个体提供营养益处的任何种类的即食营养组合物(诸如食物产品)，但任何种类的营养组合物均用液体(例如水、乳…)重构。在一个具体实施方案中，营养产品为酸奶、果汁或谷物棒。

如本文所用，术语“食物产品”可以是固体、半固体或液体形式，并且可包含一种或多种营养物质、食物或营养补充剂。例如，食物产品可另外包含以下营养物质和微量营养素：蛋白质源、脂质源、碳水化合物源、维生素和矿物质。该产品还可包含抗氧化剂、稳定剂(以固体形式提供时)或乳化剂(以液体形式提供时)。

如本文所用，术语“营养补充剂”应理解为是指向个体提供所述个体可能无法以其它方式足量摄入的营养物质的营养产品。例如，营养补充剂可包括维生素、矿物质、纤维、脂肪酸或氨基酸。

在本发明的上下文中，术语“功能性食物产品”应理解为向个体提供附加的改善健康功能或预防疾病功能的食物产品。可将任何种类的已知生物活性化合物添加到本发明的食物产品中，以便提供附加的健康益处。

“药物制剂”应理解为涵盖与药用载体结合的任何药物活性物质。该术语可包括任何肠道给药或肠胃外给药制剂，诸如片剂、胶囊、口服液和注射剂。除活性物质之外，药物制剂还可包含增溶剂、稳定剂、缓冲剂、张力调节剂、增量剂、增粘剂/降粘剂、表面活性剂、螯合剂和佐剂。

优选的是，本发明的营养组合物为婴儿配方食品(诸如1段婴儿配方食品、2段婴儿配方食品或早产婴儿配方食品)、乳强化剂(诸如人乳强化剂)、婴孩食物配方食品、成长乳、婴儿谷物组合物、用于临床营养的医疗食物产品或补充剂。

在一个特别优选的实施方案中，营养组合物是婴儿配方食品、人乳强化剂或补充剂。

如本文所用，术语“婴儿配方食品”是指旨在用于出生后前几个月期间的婴儿的特定营养用途，而且本身可满足这类人群的多种营养需求的食品(符合欧盟委员会2006年12月22日颁发的针对婴儿配方食品和2段婴儿配方食品的第91/321/eec2006/141/ec号指令中第2(c)条的规定)。也涉及旨在用于婴儿的营养组合物，如在食品法典委员会(法典stan72-1981)和婴儿特殊品(包括针对特殊医学目的的食品)中所定义的那样。表述“婴儿配方食品”涵盖“1段婴儿配方食品”和“2段婴儿配方食品”或“较大婴儿配方食品”两者。

一般来讲，“1段婴儿配方食品”旨在用作初生婴儿的母乳替代品。

“较大婴儿配方食品”或“2段婴儿配方食品”从第6个月开始提供。婴儿配方食品构成了这类人群的逐渐多样化饮食中的主要液体元素。

术语“早产婴儿配方食品”是指旨在用于早产婴儿的婴儿配方食品。

术语“乳强化剂”是指适宜与母乳(对于人乳强化剂而言，其为人乳)或婴儿配方食品混合的液体或固体营养组合物。它用于增加喂给具有低出生体重的早产婴儿或婴儿的母乳中的卡路里、蛋白质、矿物质和维生素。术语“母乳”应理解为母亲的乳汁或母亲的初乳，或者供奶者的乳汁或供奶者的初乳。

术语“婴孩食物配方食品”是指旨在供婴儿或儿童(诸如幼儿)在其出生后的头几年期间用于特定营养用途的食品。

“成长乳”(或gum)从一岁开始使用。其通常为适合幼儿的特殊营养需求的乳基饮料。

表述“婴儿谷物组合物”意指旨在用于婴儿或儿童(诸如幼儿)在其出生后的头几年期间的特定营养用途的食品。

“用于临床营养的医疗食物产品”或“医疗食物”应理解为配制成在医生监督下经肠摄入或经肠施用并旨在用于疾病或病症(根据公认的科学原理通过医学评估为该疾病或病症建立了不同的营养需求)的特定膳食管理的食物。

“补充剂”(或“增补剂”)通常在住院期间使用和/或在出院后使用。补充剂可用于早产婴儿或儿童或成人。所述补充剂优选地是用于早产婴儿喂食的产品，诸如早产婴儿配方食品、人乳强化剂或早产婴儿补充剂。所述补充剂可以是例如，散剂、片剂、胶囊剂、锭剂或液体形式。补充剂还可包含保护性水性胶体(诸如，胶类、蛋白质、改性淀粉)、粘结剂、成膜剂、包囊剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、包衣、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油类、脂肪类、蜡类、卵磷脂类等)、吸附剂、载体、填充剂、共化合物、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、流动剂、掩味剂、增重剂、胶凝剂和凝胶形成剂。补充剂还可包含常规的药物添加剂和佐剂、赋形剂和稀释剂，包括但不限于：水、任何来源的明胶、植物胶、木质素磺酸盐、滑石、糖类、淀粉、阿拉伯树胶、植物油、聚亚烷基二醇、风味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、润滑剂、着色剂、润湿剂、填充剂等。

在一个优选的实施方案中，可以将补充剂加入天然来源于婴儿母亲的人母乳。

可将补充剂分别添加到婴儿可接受的产品(诸如，可摄入的载体或承载物)中。此类载体或承载物的示例是药物组合物、食物组合物或宠物食物组合物。此类组合物的非限制性示例为牛奶、酸奶、凝乳、奶酪、发酵乳、乳基发酵产品、基于发酵谷物的产品、乳基粉、人乳、婴儿配方食品、早产婴儿配方食品、1段婴儿配方食品、2段婴儿配方食品、婴孩食物配方食品，用于临床营养的医疗食物产品、口服补充剂和管饲剂。此外，根据政府机构诸如usrda的建议，补充剂可含有适于肠内或肠胃外给药的有机或无机载体材料以及维生素、矿物质痕量元素和其它微量营养素。

在一个优选的实施方案中，本发明的营养组合物是合成营养组合物(即，不是母乳)。表述“合成营养组合物”是指采用化学和/或生物手段获得的合成混合物，该混合物的化学性质可能与哺乳动物乳汁中天然存在的混合物相同。

本文所述的营养组合物可在个体中作为唯一喂养源或除母乳喂养之外的喂养源使用。

另外，本文所述的营养组合物也可为用于儿童或成人的产品(诸如酸奶或医疗食物)，以及宠物食物产品。

一般来讲，如本文所述的营养组合物可包含下列宏量营养素：蛋白质源、脂质源、碳水化合物源以及它们的任意组合。

此外，营养组合物可包含以下微量营养素：维生素、矿物质、纤维、植物化学物质、抗氧化剂、益生元、益生菌以及它们的任何组合。该组合物还可包含食品添加剂，诸如稳定剂(以固体形式提供时)或乳化剂(以液体形式提供时)。

营养组合物可含有蛋白质源。

蛋白质的量可为1.2至3g/100kcal，诸如1.5至2.0g/100kcal，诸如低于2.0g/100kcal，例如介于1.8至2g/100kcal之间，或者蛋白质的量低于1.8g/100kcal，诸如1.4至1.7g/100kcal。

只要满足必需氨基酸含量的最低要求并确保有利生长，蛋白质的类型被认为对本发明无关紧要。因此，可使用基于乳清、酪蛋白以及它们的混合物的蛋白质源，也可使用基于大豆的蛋白质源。就所关注的乳清蛋白质而言，蛋白质源可基于酸乳清或甜乳清或它们的混合物，并且可包含任何所需比例的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。在一些有利的实施方案中，蛋白质源以乳清为主(即多于50％的蛋白质来自乳清蛋白质，诸如60％或70％)。

该蛋白质可为完整的或水解的，或为完整蛋白质和水解蛋白质的混合物。所谓的术语“完整的”是指蛋白质的主要部分是完整的，即分子结构未发生改变，例如至少80％的蛋白质未发生改变，诸如至少85％的蛋白质未发生改变，优选地，至少90％的蛋白质未发生改变，甚至更优选地，至少95％的蛋白质未发生改变，诸如至少98％的蛋白质未发生改变。在一个具体实施方案中，100％的蛋白质未发生改变。

术语“水解的”是指在本发明的上下文中，蛋白质被水解或分解成它的组成氨基酸。

该蛋白质可以是完全水解或部分水解的。例如，对于被认为处于发生牛乳变应性风险的婴儿或幼儿而言，提供部分水解的蛋白质(水解度在介于2％和20％之间)可能是可取的。如果需要水解的蛋白质，则可根据需要并且如本领域已知的那样进行水解过程。例如，可通过在一个或多个步骤中对乳清级分进行酶法水解来制备乳清蛋白质水解产物。如果用作原料的乳清级分基本上不含乳糖，则发现该蛋白质在水解过程中经受少得多的赖氨酸封闭。这使得能够将赖氨酸封闭的程度从约15重量％的总赖氨酸降至低于约10重量％的赖氨酸；例如约7重量％的赖氨酸，这大大地提高了蛋白质源的营养质量。

在本发明的一个实施方案中，至少70％的蛋白质被水解，优选地，至少80％的蛋白质被水解，诸如至少85％的蛋白质被水解，甚至更优选地，至少90％的蛋白质被水解，诸如至少95％的蛋白质被水解，尤其是至少98％的蛋白质被水解。在一个具体实施方案中，100％的蛋白质被水解。在一个具体的实施方案中，组合物的蛋白质是水解的、完全水解的或部分水解的。蛋白质的水解度(dh)可介于8和40之间、或介于20和60之间、或介于20和80之间，或大于10、20、40、60、80或90。

营养组合物还可含有碳水化合物源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别优选的。在这种情况下，尽管碳水化合物的优选来源之一是乳糖，但可使用婴儿配方食品中常见的任何碳水化合物源，诸如乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉以及它们的混合物。

营养组合物还可含有脂质源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别相关的。在这种情况下，脂质源可以是适合用于婴儿配方食品中的任何脂质或脂肪。一些合适的脂肪源包括棕榈油、高油酸向日葵油和高油酸红花油。也可加入必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸，以及少量的包含大量预先形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油，诸如鱼油或微生物油。脂肪源中n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的比率可为约5:1至约15:1，例如约8:1至约10:1。

营养组合物还可包含据悉日常饮食中必不可少并且营养显著量的所有维生素和矿物质。已确定某些维生素和矿物质的最低需求量。矿物质、维生素和任选地存在于本发明组合物中的其它营养物质的示例包括维生素a、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、维生素e、维生素k、维生素c、维生素d、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和左旋肉碱。矿物质通常以盐的形式添加。特定矿物质和其它维生素的存在和量将根据适用人群而有所不同。

如果需要，营养组合物可含有乳化剂和稳定剂，诸如大豆卵磷脂、柠檬酸单甘油酯和双甘油酯等。

营养组合物还可含有益生菌。术语“益生菌”是指对宿主的健康或良好状态具有有益效果的微生物细胞制剂或微生物细胞成分。(salminens,ouwehanda.bennoy.etal.“probiotics:howshouldtheybedefined”trendsfoodsci.technol.1999:10107-10)。微生物细胞一般为细菌或酵母。

最常用的益生菌微生物主要是以下属的细菌和酵母：乳酸杆菌属物种(lactobacillusspp.)、链球菌属物种(streptococcusspp.)、肠球菌属物种(enterococcusspp.)、双歧杆菌属物种(bifidobacteriumspp.)和酵母属物种(saccharomycesspp.)。在一些具体实施方案中，益生菌是益生菌菌株。在一些具体实施方案中，其具体为双歧杆菌和/或乳酸杆菌。

合适的益生细菌菌株包括得自芬兰瓦利奥公司(valiooy,finland)的商标为lgg的鼠李糖乳酸杆菌(lactobacillusrhamnosus)atcc53103、新西兰blis科技有限公司(blistechnologieslimited,newzealand)以商品名ki2销售的鼠李糖乳酸杆菌cgmcc1.3724、副干酪乳酸杆菌(lactobacillusparacasei)cncmi-2116、约氏乳酸杆菌(lactobacillusjohnsonii)cncmi-1225、唾液链球菌(streptococcussalivarius)dsm13084、丹麦科汉森公司(christianhansencompany,denmark)以商标bb12特别销售的乳酸双歧杆菌(bifidobacteriumlactis)cncm1-3446、日本森永乳业株式会社(morinagamilkindustryco.ltd.,japan)以商标bb536销售的长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)atccbaa-999、丹尼斯克公司(danisco)以商标bb-03销售的短双岐杆菌(bifidobacteriumbreve)、森永(morinaga)以商标m-16v销售的短双岐杆菌、宝洁公司(procter&gambieco.)以商标bifantis销售的婴儿双歧杆菌(bifidobacteriuminfantis)，以及rosell生物研究所(institutrosell,lallemand)以商标r0070销售的短双岐杆菌。

以干重计，营养组合物每g组合物可包含10e3至10e12cfu的益生菌菌株，更优选地介于10e7和10e12cfu之间、诸如介于10e8和10e10cfu之间的益生菌菌株。

在一个实施方案中，益生菌是活的。在另一个实施方案中，益生菌是非复制的或失活的。在一些其它实施方案中，可同时存在活的益生菌和失活的益生菌。

除此前提到的唾液酸化低聚糖外，营养组合物还可包含至少一种非消化性低聚糖(例如，益生元)。益生元的示例包括某些低聚糖，诸如低聚果糖(fos)、低聚半乳糖(gos)、岩藻糖基化低聚糖(诸如2’-岩藻糖基乳糖、3’-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-n-岩藻五糖i、乳糖-n-岩藻五糖ii、乳糖-n-岩藻五糖iii、乳糖-n-岩藻五糖v、乳糖-n-岩藻己糖、乳糖-n-二岩藻己糖i、岩藻糖基乳糖-n-己糖、岩藻糖基乳糖-n-新己糖i、岩藻糖基乳糖-n-新己糖ii、二岩藻糖基乳糖-n-己糖i、二岩藻糖基乳糖-n-新己糖i、二岩藻糖基乳糖-n-新己糖ii、岩藻糖基-半乳糖-n-己糖以及它们的任何组合)、n-乙酰化低聚糖(诸如乳糖-n-四糖(lnt)、n-新四糖(lnnt)以及它们的任何组合)。其量通常可介于组合物重量的0.3％和10％之间。

营养组合物的用途

本发明的营养组合物可用于通过增加个体大脑中的唾液酸(neu5ac)浓度来增强所述个体的学习技能和/或增强所述个体的记忆功能。本发明的营养组合物可用于增加所述个体大脑中的唾液酸(neu5ac)浓度，尤其用于增加海马体和/或额皮质中的唾液酸(neu5ac)浓度。所述增强个体的记忆功能的用途优选地包括增强短期记忆功能或长期记忆功能，更优选地，增强短期记忆功能和长期记忆功能两者。

更具体地讲，所述营养组合物可用于通过增加选自海马体、额皮质或它们的组合的大脑区域中，优选地海马体中的唾液酸(neu5ac)浓度来增强个体的学习技能和/或增强个体的记忆功能。

此外，本发明的营养组合物可用于通过增强个体大脑的神经可塑性来增强个体的学习技能和/或增强个体的记忆功能。本发明的营养组合物可用于增强个体大脑的神经可塑性。

此外，本发明的营养组合物可用于通过增强个体大脑的神经发育、髓鞘形成、神经形成、轴突生长和/或成熟来增强所述个体的学习技能和/或增强所述个体的记忆功能。

它也可用于增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

它也可用于增加所述个体大脑中岛叶皮质、躯体感觉皮质、海马旁、优势颞叶区和/或小脑小叶区域中的灰质体积。

优选地，本发明的营养组合物用于哺乳动物，优选地用于宠物或人类，并且更优选地用于人类。

在一个特别优选的实施方案中，本发明的营养组合物用于婴儿、幼儿、儿童、青少年或成人，更优选地用于婴儿或幼儿。在一个具体实施方案中，本发明的营养组合物用于婴儿配方食品喂养的婴儿。

本发明的营养组合物还可用于早产、小于胎龄(sga)和/或低出生体重(lbw)的个体，诸如用于早产婴儿、小于胎龄(sga)婴儿和/或低出生体重(lbw)婴儿。

优选地，本发明的营养组合物可在个体的早龄阶段期间，尤其在所述个体的婴儿阶段期间，也就是说在出生后前12个月期间用于所述个体。甚至更优选地，营养组合物在出生后前8个月期间、或在出生后前6个月期间，并优选地在出生后前4个月期间、或在出生后前2个月期间用于个体。表述“出生后前x个月”、“出生x月龄”和“x月龄”可互换使用。本发明的营养组合物可在整个时间窗口(例如，从出生直至2、4或6个月)或仅其一部分(例如，从出生后1、2、3或4周直至1、3或5个月)期间施用(提供，喂给…)。此外，可连续施用营养组合物(即，在婴儿/幼儿每次用餐时)，也可不连续施用。在本发明的一些有利的实施方案中，营养组合物在其整个具体时间窗内和/或连续地施用。

营养组合物可以每日有效提供110mg至180mg、120mg至170mg、或125mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。在一个实施方案中，营养组合物可以每日有效提供131mg或162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用。

在一个具体实施方案中，营养组合物在出生后前两周期间以每日有效提供140mg至180mg、150mg至170mg、或160mg至165mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，诸如以每日162mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用给个体。

营养组合物优选地从出生后两周直至出生后12个月，诸如直至出生后8个月、直至出生后6个月，或优选地直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供110mg至150mg、120mg至140mg、或125mg至135mg总唾液酸乳糖/kg体重的量，诸如以每日有效提供131mg总唾液酸乳糖/kg体重的量施用。

另外还优选的是，营养组合物以每日对应于350mg至530mg、380mg至500mg、或390mg至490mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，诸如以每日对应于393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，或以每日对应于487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

在一个具体实施方案中，营养组合物在出生后前两周期间以每日对应于450mg至530mg、480mg至500mg、或485mg至490mg/kg体重的量，诸如以每日对应于487mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用给个体。

营养组合物优选地从出生后两周直至出生后12个月，诸如直至出生后8个月、直至出生后6个月，或优选地直至出生后4个月、或直至出生后2个月以每日有效提供350mg至430mg、380mg至400mg、或390mg至395mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量，诸如以每日有效提供393mgn-乙酰神经氨酸(neu5ac)/kg体重的量施用。

另外，本发明的营养组合物可以一定方式施用使得3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的日剂量可分成至少两部分，优选地至少三部分，并且最优选地分成四部分，由此使得营养组合物以每日至少两次，优选地每日至少三次，并且最优选地每日四次用于或施用给个体。尤其优选的是，本发明的营养组合物以一定方式施用使得3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的日剂量分成等份，和/或本发明的营养组合物的使用或施用在一天内均匀地分布。例如，如果3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的日剂量分成四等份并在一天内均匀地分布，则包含或对应于3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的25％所述日剂量的营养组合物的量在0小时、4小时、8小时和12小时之后用于或施用给个体。

以本文规定量和时间段施用本发明的营养组合物有利地随时间推移向婴儿提供唾液酸乳糖和n-乙酰神经氨酸(neu5ac)形式的唾液酸的最佳供应。因此，为婴儿大脑发育提供了最佳营养支持，因为所述婴儿大脑中，尤其所述婴儿的海马体和/或额皮质中的唾液酸(neu5ac)浓度得以优化。

因此，以本文规定量和时间段施用本发明的营养组合物进一步促进了婴儿的大脑发育、学习技能和记忆功能，以及感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

一般来讲，本发明的营养组合物可作为唯一喂养源或除母乳喂养之外的喂养源诸如以婴儿配方食品、早产婴儿配方食品、人乳强化剂、1段婴儿配方食品、2段婴儿配方食品、婴孩食物配方食品、成长乳、婴儿谷物组合物、用于临床营养的医疗食物产品或补充剂的形式用于个体。

用于制备营养组合物的方法

营养组合物可以本领域中已知的任何合适的方式制备。

例如，该营养组合物可通过将蛋白质源、碳水化合物源(不同于本发明的低聚糖组合)和脂肪源以合适的比例共混在一起而制备。如果使用乳化剂，则可在此时加入。此时可加入维生素和矿物质，但为了避免热降解，通常在稍晚一点的时候加入。在共混前，可先将任何亲脂性维生素、乳化剂等溶解到脂肪源中。然后可混入水(优选地已经受反渗透的水)，形成液体混合物。便利地，水温在介于约50℃和约80℃之间的范围内，有助于分散成分。可使用可商购获得的液化剂来形成液体混合物。如果最终产物是液体形式，则在此阶段加入3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)。如果最终产物是粉末形式，则可根据需要同样在此阶段加入3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)。然后，例如分两个阶段匀化液体混合物。

然后，可对液体混合物进行热处理以减少细菌载量，例如通过将液体混合物快速加热至介于约80℃和约150℃之间的范围内的温度并持续介于约5秒和约5分钟之间的时间。这可通过蒸汽注入、高压灭菌器或热交换器(例如，板式热交换器)来进行。然后，可以例如通过快速冷却将液体混合物冷却至介于约60℃和约85℃之间的温度。然后再次例如分两个阶段均化液体混合物，其中第一阶段的压力在介于约10mpa和约30mpa之间，第二阶段的压力在介于约2mpa和约10mpa之间。然后可进一步冷却均化的混合物，以便添加任何热敏组分，诸如维生素和矿物质。此刻便于调节均化混合物的ph和固形物含量。将均化的混合物转移至合适的干燥装置(诸如喷雾干燥器或冷冻干燥器)，并将其转化成粉末。该粉末的含水量应小于约5重量％。

3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)可以在该阶段通过干混或通过将它们共混成糖浆形式的晶体并喷雾干燥(或冷冻干燥)而加入。

在本发明的方法中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)优选地以介于10:1和1:10之间，诸如介于10:1和2:1之间、介于8:1和3:1之间、介于6:1和3:1之间、介于5:1和3:1之间、介于5:1和4:1之间、或在4.7:1和4.1:1之间的重量比添加。在一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以4.4:1的重量比添加。

在另一个具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)以介于6:1和1:10之间、介于5.9:1和1.5:10之间、或介于5.86:1和1.53:10之间的重量比，并且最优选地以1:1的重量比添加。在该实施方案中，营养组合物优选地用于人类，诸如人类婴儿或幼儿。

如果优选液体组合物，可对该均化的混合物进行杀菌，然后在无菌条件下将其装入合适的容器中，或可以先将其装入容器中再进行灭菌。

本文通过以下非限制性实施例进一步说明本发明。

实施例

实施例1：包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物

包含3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的营养组合物示于下表1中。该组合物仅以举例的方式给出。

表1：

实施例2：膳食补充唾液酸对学习技能的影响

进行下面的研究来调查蛋白质结合和低聚糖结合两种形式的膳食唾液酸以及唾液酸和乳铁蛋白的组合对新生小猪的学习能力的影响。

动物模型

三日龄足月健康雄性家养小猪(野猪(susscrofa)，长白猪×大白猪杂交)购自商业猪舍。选择猪模型，因为早在40多年前就已认识到用猪来进行小儿大脑研究的可能性，这是由于猪与人在出生时期的全脑生长、大体解剖以及新生儿大脑生长模式都具有相似性。猪消化系统与人类婴儿具有相似的生理和解剖结构，并且猪具有与人相当的营养需求。这些使得小猪非常适合用于协同营养、代谢和分子研究。猪具有弥补啮齿动物临床前研究和人类临床试验之间的空白的潜力。

研究设计

所有小猪均购自中国厦门的商业猪舍。雄性家养小猪(野猪，长白猪×大白猪f1代)在3日龄时获得。对于每次试验，生活在一个住处栏圈中的2只小猪来自不同窝仔畜。将来自同一窝的小猪随机平均分布至每一组中。所有动物以12h光照(08:00-20:00)和12h黑暗(20:00-08:00)循环圈养在温度受控环境中。住处栏圈包含“窝”(覆盖有干净毛巾的橡胶轮胎)、窝上方的加热灯以及悬在住处栏圈中的相同木制玩具。将所有设施(包括住处栏圈和行为观察室)监控24h。喂养时间固定为08:00、13:00、18:00和22:30，在最后一次喂养中向每只猪额外提供了50ml乳。

从3日龄至38日龄喂给小猪包含来自大豆/乳清/酪蛋白(50:38:12)的蛋白的标准母猪奶代用品(乳1)和测试乳(乳2-4)。对于每种测试乳，180g乳粉用水重构，以提供1l(1000ml)测试乳。

“唾液酸核心1”处理组的测试乳补充有3.84g酪蛋白-糖巨肽(cgmp)/100g乳粉(乳2)。

“唾液酸乳糖”处理组的测试乳每100g乳粉包含1.16g3’-唾液酸乳糖(3’-sl)和6’-唾液酸乳糖(6’-sl)的混合物，所述混合物包含浓度为81.6％每单位重量所述混合物(0.95g3’sl/100g粉末)的3’sl和浓度为18.4％每单位重量所述混合物(0.21g6’sl/100g粉末)的6’sl，以使得3’sl/6’sl比率为4.4:1(乳3)。

“唾液酸核心1+唾液酸乳糖+乳铁蛋白”处理组的测试乳每100g乳粉补充有1.12g酪蛋白-糖巨肽(cgmp)、0.58g3’-唾液酸乳糖和0.28g乳铁蛋白(lf)(乳4)。

对照组和处理组的乳中n-乙酰神经氨酸和n-羟乙酰神经氨酸的最终浓度示于下表2中。表2中提供的数据是通过分析容易制备的测试乳产品，即对照(乳1)和在补充酪蛋白-糖巨肽(cgmp)(乳2：“唾液酸核心1”)、3’-唾液酸乳糖/6’-唾液酸乳糖(乳3：“唾液酸乳糖”)和cgmp/3’-唾液酸乳糖/乳铁蛋白(lf)(乳4：“唾液酸核心1+唾液酸乳糖+乳铁蛋白”)之后的对照得到的。

表2：

猪乳代用品被配制成使得总碳水化合物摄入量，在不考虑添加的n-乙酰神经氨酸的量时保持相同。为了保持正常的生长速率，小猪在研究的最初2周内接受的乳量为285ml乳/kg体重/天，剩下几周内为230ml乳/kg体重/天。每天记录小猪的体重、乳摄入量和健康状态。对照组和处理组中的所有小猪都经过学习测试。

使用八臂迷宫进行学习和记忆测试

将所有小猪逐一引入八臂迷宫中。对每组执行两次测试：“简单”任务和较“困难”任务(图1)。两种测试均仅在一个臂中放有可触及的乳，而在其余7个臂中放有不可触及的乳，从而所有臂都具有相同的气味，防止嗅觉学习(图1)。在两种测试中，将由3个黑点组成的视觉提示随机放置在臂中有可触及的乳(与该组的乳相对应)的门上。在简单任务中，将1个黑点的视觉提示放置在具有不可触及乳(与可触及乳的量和类型相同的乳)的其余7个门上。在困难任务中，将具有2个黑点的视觉提示放置在其余7个门上。3个黑点的视觉提示的位置在不同试验之间按预定的随机顺序变化。所有小猪均单独进入迷宫。从小猪22日龄开始的10天内执行有关简单任务和困难任务的80次试验(每项任务各40次)。

根据成功学会视觉提示所用的试验次数来确定对学习能力的评估。使用在各次试验中寻找可触及乳臂时的错误数和成功数来量化学习。每当小猪进入错误的门或者将其整个头部穿过错误的门时，即记录为错误。当小猪进入正确的门时则记录为成功。学会视觉提示的标准是：(a)3次连续试验中最多出现1次错误，(b)3次连续试验中未出现错误，(c)4次连续试验中最多出现1次错误，(d)4次连续试验中未出现错误，(e)5次连续试验中最多出现1次错误，(f)在5次连续试验中未出现错误。在学习和记忆测试期间，头顶摄像机连续进行记录，同时，训练有素的观察者手动记录结果。由训练有素的工作人员进行所有测试，这些工作人员对干预情况不知情。通过对视频资料进行独立分析来证实结果。为了减轻压力并使小猪熟悉测试规程，我们允许来自同一窝的两只小猪进入迷宫，以在学习测试前学习如何开门和关门(8次试验)。

八臂迷宫的学习能力结果

学习速度

3次连续试验中最多出现1次错误用作学习标准。已发现，在简单任务和困难任务中，唾液酸乳糖组(即乳3)明显比其它组(即乳1、乳2和乳4组)学习视觉提示的速度快。使用出错总次数作为用于分析的协方差来分析数据(在简单任务和困难任务两者中p<0.01，cox-回归，图2a和图2b)。

因为在训练过程中小猪的学习和记忆功能将有所提高，因此同样分析了每日平均出错次数(图3a和图3b)。尤其在训练第4日，在各试验的简单任务和困难任务中唾液酸乳糖组(乳3)的平均出错次数低于对照组(p<0.05，重复测量)。第1天的简单任务总出错次数(p<0.05，单因素方差分析，图3a)和第4天的困难任务总出错次数(p<0.05，单因素方差分析，图3b)之间存在显著的差异。

出错和成功的次数作为学习的量度

另外，总出错次数也被视为学习的协方差量度，因为在前20次简单任务试验中学习可能主要是“试误”。因此，前20次试验作为协方差分析了简单任务的学习速度。分别确定第21-40次试验的简单任务出错次数和总出错次数。唾液酸乳糖组(乳3)的小猪在简单任务(p＝0.164，对于第21-40次试验)和困难任务(p＝0.002，单因素方差分析，图4)中显示比其它组(乳1、乳2和乳4组)小猪出错少。

总成功次数也被视为学习的量度。唾液酸乳糖组(乳3)小猪在简单任务(p＝0.34)和困难任务(p＝0.061，图5)两者中比其它组(对照、乳1、乳2和乳4组)小猪成功次数多。

因此，膳食补充本发明的重量比为4.4:1的3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的组合再次证实能提高发育中的小猪的学习能力。

在简单学习任务和困难学习任务中的不同学习阶段期间的出错次数

另外，分别分析了每10次试验的总出错次数。四组中所有小猪在40次试验训练中学习能力均有所提高。但是，唾液酸乳糖组(乳3)的小猪的出错次数明显比其它组(乳1、乳2和乳4组)(p<0.05，重复测量)的小猪低，尤其在困难任务的第31-40次试验(p<0.05，一般线性模型方差分析)中。因此，膳食补充唾液酸化低聚糖(唾液酸乳糖)显示出减少了学习期间的总出错次数。

结论

上述结果表明，膳食补充3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖尤其以本发明重量比4.4:1的组合显著提高了发育中的小猪的学习能力并提高其学习速度。另外，还表明，低聚糖结合形式的唾液酸(唾液酸乳糖)在提高学习能力和增强学习速度方面比蛋白质结合形式的唾液酸(唾液酸核心1)更有效。此外表明，如存在于人母乳中的3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的组合在提高学习能力和增强学习速度方面比3’-唾液酸乳糖更有效，即使3’-唾液酸乳糖与蛋白质结合形式的唾液酸(唾液酸核心1)和乳铁蛋白组合。

实施例3：膳食补充唾液酸对记忆功能的影响

继评估实施例2中所述的学习技能之后，测试了膳食补充唾液酸对小猪短期记忆(stm)和长期记忆(ltm)的影响。

记忆测试

在完成每组试验之后两天，作为“记忆测试”执行实施例2中所述的相同任务。根据试验之间的时间间隔，评估了小猪的“短期记忆”(stm)和“长期记忆”(ltm)。每天早上四次试验，下午四次试验。每只小猪在两次连续试验中进行测试。改变视觉提示并在两次试验之间放置鲜乳的干预时间间隔为5分钟(对应于5分钟短期记忆)。在这5分钟内，小猪位于测试区之外的等候区。40分钟之后(对应于40分钟长期记忆)，再次将小猪引入迷宫中，进行另外两次连续试验。将寻找可触及乳时的错误数记录为记忆指标。

记忆测试的结果

根据试验之间的时间间隔，评估了小猪的短期记忆(stm)和长期记忆(ltm)。试验之间小于5min和多于5min的时间间隔分别被定义为stm和ltm。因此，膳食补充唾液酸乳糖(乳3)显示出明显提高了简单任务和困难任务中的stm和ltm(p<0.05，单因素方差分析，图6a和图6b)。

结论

上述结果表明，膳食补充3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖尤其是以本发明重量比4.4:1的组合显著提高了发育中的小猪的学习能力、短期记忆(stm)和长期记忆(ltm)。另外，还表明，低聚糖结合形式的唾液酸(唾液酸乳糖)在提高学习能力和增强小猪的短期记忆(stm)和长期记忆(ltm)功能方面比蛋白质结合形式的唾液酸(唾液酸核心1)更有效。此外表明，如存在于人母乳中的3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的组合在提高学习能力和增强短期记忆(stm)和长期记忆(ltm)方面比3’-唾液酸乳糖更有效，即使3’-唾液酸乳糖与蛋白质结合形式的唾液酸(唾液酸核心1)和乳铁蛋白组合。

实施例4：大脑额皮质和海马体中的唾液酸浓度

为了确定膳食补充唾液酸是否可增加大脑中的唾液酸含量，分析了实施例2的对照组(乳1)和唾液酸乳糖组(乳3)的大脑海马体和额皮质中唾液酸家族成员n-乙酰神经氨酸(neu5ac)、n-羟乙酰神经氨酸(neu5gc)和尤罗索尼克酸(ketodeoxynonulosonicacid)(kdn)的浓度和分布。

方法

采用如由wang等人，sialicacidconcentrationofbraingangliosides:variationamongeightmammalianspecies.compbiochemphys119a,1998；1:435-439；或wang等人，braingangliosideandglycoproteinsialicacidininfantsfedhumanmilkvsinfantformula.amjclinnutr2003；78:1024-9公布的常用方法分别分析了神经节苷脂结合的唾液酸和蛋白质结合的唾液酸。简而言之，将实施例2的小猪的大脑额皮质和海马体(50mg)与150μl蒸馏水均化，并在连续振荡下加入525μl甲醇中。加入氯仿(270μl)，然后将混合物离心(2000*g，30min，4℃)并除去上清液。用100μl水和400μl氯仿:甲醇(1:2体积/体积)重新提取大脑残留物，并在4℃下以3000*g离心30min。合并两份大脑提取物，加入313μl水，从而得到1:2:1.4的氯仿:甲醇:水(约组织)值，然后将该混合物离心(3000*g，10min，4℃)。分离上层相，将150μl甲醇和100μl0.01molkcl慢慢加入下层相并混合2min，然后离心(3000*g，15min，4℃)。合并两个上层相，并加入1-丁醇(10μl)以防止发泡。然后将该混合物蒸发并冷冻干燥。将干燥后的材料重新溶解在200μl氯仿:甲醇(1:1，体积/体积)中，并超声处理。在80℃下分别用0.1m三氟乙酸和0.05mh2so4水解样品150min和60min，释放了神经节苷脂结合的唾液酸和蛋白质结合的唾液酸。神经节苷脂和蛋白质两种级分中的唾液酸浓度使用hplc-ms/ms测定。

结果

与对照组相比，唾液酸乳糖组中的海马体和额皮质中的神经节苷脂结合neu5ac和总neu5ac含量明显更高(参见图7a至图7d)。neu5ac是大脑中唾液酸的主要形式(图7a和图7c)，并且neu5gc在大脑海马体中只占据总唾液酸的约0.01％，在额皮质中占据总唾液酸的0.1％(图7b和图7d)，在海马体和额皮质中均未检测到kdn。

实施例5：使用磁共振成像(mri)技术分析体内大脑结构

通过非侵入式mri测量实施例2的唾液酸乳糖组(乳3)和对照组(乳1)之间胼胝体(白质纤维束)中各向异性分数(fa)差值。胼胝体分成膝部、体干和压部三个区域。使用dtistudio软件(http://dsi-studio.labsolver.org)，将感兴趣区域(roi)置于cc的矢状平面处这些区域较明亮处。膝部、体干和压部的roi尺寸分别为约4-6体素、6-8体素和4-6体素。

各组之间灰质和白质的vbm分析

将大脑mri扫描数据归一化、分段、平滑化，并将其进行统计数据分析。简而言之，将各个猪mri配准到标准空间中，并手动对齐至在spm8显示模块(wellcometrustcentreforneuroimaging,uclinstituteofneurology,london,uk)中制作的整个大脑模板(tf)。原点(0,0,0)设在正中矢状平面内后连合(pc)弯曲的底部部分上，左侧、后部、内部取向与整个大脑模板相匹配。然后，将对齐的图像归一化至整个大脑模板，其中由于小猪间的较大个体差异而无仿射正则化，体素大小保持为0.5×0.5×1，边界框(三维空间)涵盖下列x、y、z维度(-35,35；-60,50；-20,40)。利用我们制作的组织概率图(pf)将所有归一化图像分段成灰质(gm)、白质(wm)和脑脊液(csf)。在spm8中的“区段”工具采用混合高斯消去法(ashburner和friston，2005年)将全部大脑图像分成gm、wm和csf图像。施加了2mm高斯平滑内核并进行统计分析：两样品t检验；协方差为整个大脑体积。

结果

如表3所示，与对照组(乳1)相比，唾液酸乳糖组(乳3)的岛叶皮质、躯体感觉皮质、海马旁、优势颞叶区和小脑小叶区域中存在明显更大的灰质体积。表3示出唾液酸乳糖组(乳3)相对于对照组(乳1)具有明显不同的灰质体积的区域。

表3：

结论

躯体感觉皮质是大脑处理来自机体中对触摸敏感的各个系统的输入的区域。大脑岛叶皮质是在外侧沟内部深处折叠的大脑皮质的一部分，其涉及感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和人际关系体验。因此，3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖尤其以本发明重量比4.4:1的组合同样显示出显著增强个体的感知功能、运动控制、自我意识、认知功能和/或人际关系体验。

实施例6：有关健康母亲母乳中3’-唾液酸乳糖/6’-唾液酸乳糖比率的临床试验

研究设计

进行开放、单中心、单组研究，其中包括50名受试者(母亲)并且持续8个月。仅包括健康志愿者。

所有受试者均符合以下所有入选标准：1.胎龄在介于37周至不超过42周之间，2.婴儿在出生后与v1之间入选，3.母亲不小于18岁且不大于40岁，4.母亲的孕前bmi在介于18.5-29之间。5.母亲愿意在产后前8个月进行母乳喂养。

表示下列标准中的一个或多个的受试者被排除参与研究：1.妊娠期糖尿病，2.hta>140/90，3.母亲是吸烟者且母乳喂养，4.预期不能符合研究规程的受试者，5.目前正在参与另一项临床试验，或者已经在本研究开始之前的最后12周内参与了另一项临床试验。

sl样品制备和分析

对1ml对应于整个哺乳过程的全母乳样品进行一式两份的唾液酸乳糖(sl)分析，并在婴儿出生后(产后)第11天、30天、60天、120天和240天进行。

样品制备

将1ml充分混合的全母乳在1700×g下离心20分钟。将约0.1ml脱脂乳上清液用水稀释10倍，并将0.01ml如此稀释的上清液作为样品进行分析。

分析

通过高效离子交换色谱仪(hpaec；thermo,dionex,ca)分析样品，该色谱仪装配有用于分离的carbopacpa1柱(thermo,dionex,ca)和用于检测碳水化合物的脉冲安培检测器(pad)。根据与真实标准物比较保留时间来鉴定3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖。使用经真实纯3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖制作的外标曲线分别定量3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖，并计算3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的重量比。

结果

因此，据发现，人母乳中3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的重量比随着时间而升高，如婴儿出生后11天、30天、60天、120天和240天的测定所示。虽然在泌乳期刚开始时，3’sl/6’sl比率为约1.53:10，其中6’sl作为人母乳中唾液酸乳糖的主要部分，但所述比率随时间朝约5.86:1变化，在产后8个月之后3’sl成为人母乳中唾液酸乳糖的主要部分。另外，据发现，在泌乳期期间人母乳中3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的平均重量比为约1:1。

结论

实施例6清楚表明，本发明的营养组合物提供了在匹配随时间变化的母乳生理水平的范围内的3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖。

汇总

上述结果表明，根据本发明补充唾液酸乳糖明显增强了个体的学习速度、短期记忆和长期记忆。同样首次表明，这样补充唾液酸乳糖明显提高了个体的大脑海马体和额皮质中的唾液酸(neu5ac)浓度。这些结果的汇总示于图8中。

此外，体内mri结果还表明，与其对照组相比，膳食唾液酸乳糖显著增加了所有处理组的许多重要大脑区域的灰质体积。

总之，这些结果显著地支持膳食唾液酸乳糖作为必需营养物质对小猪(作为人类婴儿的动物模型)的早期神经发育和认知功能的益处。

因此，已经详细描述了本发明及其优点，应当理解，详细描述并不旨在限制本发明的范围。