本发明涉及一种饲料添加剂，尤其涉及一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂及其制备方法和应用。
背景技术：
：鳊鱼(parabramispekinensis)，又名鳊，亦称长身鳊、鳊花、油鳊，具有生长迅速、适应能力强、食性广等特点，肉质嫩滑，味道鲜美，是我国主要淡水养殖鱼类之一。实践发现，鳊鱼发生赤皮的现象非常普遍，主要表现为鱼体局部或大部分发红，体表与鳍条局部性或大部分不同程度充血，处理不及时或处理不当时，鳊鱼赤皮的症状将继续恶化，赤皮部位将逐渐演化成脓性病灶或溃疡性病灶，继而极易引发败血症而引起鳊鱼死亡。从发生机理上分析，鳊鱼首先在受到环境应激、微生物局部性感染等因素的持续作用下，外周毛细血管出现炎性充血，甚至是炎性出血病变，最后因继发感染导致病情恶化而致死。因此，通过安全高效的措施来防治鳊鱼赤皮病病变对降低因赤皮恶化造成的死亡有积极意义。技术实现要素：本发明通过免疫增强、炎症消除和血液循环改善等各方面协同作用，可以有效的防治赤皮病变的发生，也可有效缓解赤皮病情的恶化，促进鳊鱼机体健康。在第一方面，本发明提供一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂，所述饲料添加剂包含以下重量百分比的组分：车前草40-55％，紫苏叶5-15％，甘草提取物3-7％，五加皮提取物15-20％，a-淀粉10-20％，膨润土3-6％，大蒜素0.3-0.5％。本发明基于鳊鱼赤皮病发生机理及症状修复筛选具有防治功效的饲料添加剂，对鳊鱼及类似鱼类的赤皮病具有良好的防治效果。优选的，一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂，所述饲料添加剂包含以下重量百分比的组分：车前草45-52％，紫苏叶12-15％，甘草提取物3-5％，五加皮提取物15-20％，a-淀粉10-12％，膨润土4.5-5.5％，大蒜素0.4-0.5％。在一个优选的实施例中，一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂，所述饲料添加剂由以下重量百分比的组分组成：车前草45％，紫苏叶15％，甘草提取物5％，五加皮提取物20％，a-淀粉10％，膨润土4.5％，大蒜素0.5％。在另一个优选的实施例中，一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂，所述饲料添加剂由以下重量百分比的组分组成：车前草52％，紫苏叶12％，甘草提取物3％，五加皮提取物15％，a-淀粉12％，膨润土5.5％，大蒜素0.5％。本发明的饲料添加剂的车前草和紫苏叶组合，既可增强鳊鱼血液白细胞含量与提升鱼体免疫机能，又可促进鱼体全身血液循环通畅与改善外周血液循环，是防治鳊鱼赤皮病变发生的主要成分；五加皮提取物和甘草提取物，对赤皮病变部位具有良好的修复作用，对车前草和紫苏叶具有协同增效功能，是用于治疗赤皮病变的增效成分；而膨润土可以延长饲料添加剂的作用时间。其中，所述车前草优选为车前草粉，进一步优选经300目以上的粉碎机粉碎得到。在一个优选的实施例中，所述车前草粉为将车前草经过60目以上的粉碎机粉粹后，再采用300目以上的粉碎机二次粉碎得到。其中，所述甘草提取物为甘草的醚类有机物回流后，再采用醇类有机物提取得到的提取物。进一步的，所述甘草提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将甘草：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流，收集残渣，残渣加水溶解，并用醇类有机物提取，蒸干，得到甘草提取物。其中，所述甘草提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将甘草：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流，收集残渣，并按残渣与水进行充分溶解，接着按水与醇类有机物按体积比1：1-2进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中蒸干，得到的固状物即为甘草提取物。在一个优选的实施例中，所述甘草提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将甘草：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：16-40体积比进行充分溶解，接着按水与醇类有机物体积比1：1-2进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为甘草提取物。其中，所述的醚类有机物包括但不限于甲醚、乙醚。其中，所述的醇类有机物包括但不限于乙醇、丁醇。在一个优选的实施例中，所述甘草提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将甘草：乙醚以1：8-14的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：16-40体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：1-2进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为甘草提取物。在一个优选的实施例中，所述甘草提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将甘草：乙醚以1：10的重量体积比混合，加热回流45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：20体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：1进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为甘草提取物。其中，上述醇类有机物溶解的次数可以为1-3次，例如2次。其中，所述五加皮提取物为五加皮的醚类有机物回流后，再采用醇类有机物提取得到的提取物。其中，所述五加皮提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将五加皮：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流，残渣加水溶解，并用醇类有机物提取，蒸干，得到五加皮提取物。在一个优选的实施例中，所述五加皮提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将五加皮：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流，收集残渣，并按残渣与水进行充分溶解，接着将其与醇类有机物进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将溶解成分蒸干，得到的固状物即为五加皮提取物。在一个优选的实施例中，所述五加皮提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将五加皮：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流，收集残渣，并按残渣与水以1：16-40体积比进行充分溶解，接着将其与醇类有机物溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为五加皮提取物。在一个优选的实施例中，所述五加皮提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将五加皮：醚类有机物以1：8-20的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：16-40体积比进行充分溶解，接着按水与醇类有机物体积比1：1-2进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为五加皮提取物。其中，所述的醚类有机物包括但不限于甲醚、乙醚。其中，所述的醇类有机物包括但不限于乙醇、丁醇。在一个优选的实施例中，所述五加皮提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：将五加皮：乙醚以1：(8-14)的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：(16-40)体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：(1-2)进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为五加皮提取物。其中，上述醇类有机物溶解的次数可以为1-3次，例如2次。其中，所述紫苏叶为含水量在8％以内的紫苏叶。其中，所述a-淀粉为玉米a-淀粉。其中，所述的大蒜素是矫味剂，优选为烯丙基硫代亚磺酯丙酯含量大于55％的大蒜素。其中，本发明的上述添加剂的技术特征可以任意结合。在本发明的第二方面，本发明提供一种制备上述的一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂的方法，将所述原料组分混合，烘干至含水量8-9.5％，得到所述饲料添加剂。其中，在上述方法中，烘干采用35℃恒温烘干。在本发明的第三方面，本发明提供一种上述的防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂的应用，所述添加剂按照饲料重量的0.3-0.5％使用。在使用本发明的饲料添加剂中，本发明的添加剂可以通过添加到饲料中投喂的方式完成；也可以通过单独投喂的方式完成。本发明的饲料添加剂既可增强鳊鱼血液白细胞含量与提升鱼体免疫机能，又可促进鱼体全身血液循环通畅与改善外周血液循环，对赤皮病变部位具有良好的修复作用，对鳊鱼赤皮具有良好的预防和治疗效果。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。实施例1：一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂，由以下重量百分比的组分组成：车前草粉45％，紫苏叶15％，甘草提取物5％，五加皮提取物20％，a-淀粉10％，膨润土4.5％，大蒜素0.5％。其中，甘草提取物通过以下步骤的方法制备得到：将甘草：乙醚以1：10的重量体积比混合，加热回流45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：20体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：1进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为甘草提取物。其中，五加皮提取物通过以下步骤的方法制备得到：将五加皮：乙醚以1：(8-14)的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：(16-40)体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：(1-2)进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为五加皮提取物。制备该饲料添加剂的方法为：将各原料组分混合，35℃恒温烘干至混合物水分含量为8.5％，得到该饲料添加剂。实施例2：一种防治鳊鱼赤皮病变的饲料添加剂，由以下重量百分比的组分组成：车前草粉52％，紫苏叶12％，甘草提取物3％，五加皮提取物15％，a-淀粉12％，膨润土5.5％，大蒜素0.5％。其中，甘草提取物通过以下步骤的方法制备得到：将甘草：乙醚以1：8-14的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：16-40体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：1-2进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为甘草提取物。其中，五加皮提取物通过以下步骤的方法制备得到：将五加皮：乙醚以1：(8-14)的重量体积比混合，加热回流40-45分钟，收集残渣，并按残渣与水以1：(16-40)体积比进行充分溶解，接着按水与正丁醇体积比1：(1-2)进行溶解，使油相与水相分开，过滤收集油相，弃除水相，将油相装入旋转蒸发仪进行处理，直到油相中的液相蒸干，得到的固状物即为五加皮提取物。制备该饲料添加剂的方法为：将各原料组分混合，35℃恒温烘干至混合物水分含量为8.5％，得到该饲料添加剂。试验例1：对池塘养殖鳊鱼赤皮的预防效果江苏常州某养殖基地选取9口鳊鱼养殖池塘作为试点，鳊鱼体重规格100±15g/尾，日常投喂的商品饲料为相同饲料品牌和相同营养档次。将9口试点池塘随机分成a、b、c三组，每组下设三个平行，按饱食投喂的方式，日投喂分早中晚三餐进行，其中a组三个平行池塘投喂含实施例1制备的饲料添加的商品饲料，b组三个平行池塘投喂实施例2制备的饲料添加剂的商品饲料，c组三个平行池塘投喂不含任何添加剂的商品饲料，三组投喂的商品饲料喂相同饲料，试验周期20周。试验组详细信息如表1所示。表1：试验期间，分别在试验的第5周、10周、15周和20周在各试点池塘进行局部拉网，每塘随机挑取100尾鳊鱼，装吊桶离心1分钟，供氧水体环境中静养30分钟，观察鳊鱼赤皮的数量，以判断添加了各组池塘饲料对降低鳊鱼赤皮发生率的效果，结果如表2所示。表2：从表2可以看出，连续使用含有实施1和实施例2所制备的饲料添加剂的商品饲料，鳊鱼赤皮发生率呈明显的递减变化，而对照组投喂不含本发明饲料添加剂的商品饲料的鳊鱼，赤皮发率依然明显高于a组和b组。由上述结果可知，在鳊鱼商品饲料中添加本发明制备的饲料添加剂，对于由拉网或操作应激引起的鳊鱼赤皮有明显的预防效果。试验例2：对养殖操作应激造成的鳊鱼赤皮的预防效果江苏常州某养殖户选择相邻的两口鳊鱼精养池塘，两口池塘鳊鱼和套养鱼类的放养密度相同，投喂的饲料品牌和营养档次相同。存塘鳊鱼平均体重规格为8-9两/尾，在鳊鱼上市销售的前20天，选取其中一口池塘连续投喂含有实施例1制备的饲料添加剂的商品饲料，添加剂的添加剂量为0.35％，而另一口池塘则连续投喂不添加添加剂的商品饲料，作为对照。20天的投喂周期结束，停喂1天，敛网暂养1天，第3天出鱼，经现场结合市场选靓鱼的标准和运输过程观察，计算不同节点的鳊鱼赤皮发生率，结果如表3所示。表3：从表3可以看出，连续投喂含有实施例1制备的饲料添加剂的商品饲料的鳊鱼，鱼体光洁度明显比对照组好，鳊鱼红身、赤皮的发生率都比对照组明显降低。从上表可知，敛网、过称、上鱼车和下鱼车等操作均可引起鳊鱼体表赤皮的症状表现，从统计结果来分析，本发明的添加剂经饲料添加连续使用一定周期，对鳊鱼赤病的发生具有良好的预防效果。试验例3对鳊鱼赤皮的治疗效果湖北东西湖地区选择草鱼鳊混养池塘2口，其中草鱼为混养品种，鳊鱼为主养品种，鳊鱼亩均放养数量1500-1800尾之间，池塘面积为5-8亩之间。鳊鱼体重规格85±8g/尾，日常投喂的商品饲料为相同饲料品牌和相同营养档次。(1)鳊鱼赤皮病理模型的构建试验前2天，2口池塘停止投喂饲料，试验第1天，从每个池塘中通过敛网随机捞取各300尾鳊鱼，接着通过将鱼装框起吊20秒，过秤15秒，持续加氧运输15分钟，过持续加氧暴氯自来水清洗，转入含有0.1％十二烷基磺酸钠去垢剂的持续加氧溶液中处理1分钟，再转入持续加氧暴氯自来水清洗，去除体表变性脱落的粘液，最后按每100尾1组分别分放入9个试验网箱中，共三组，每组三个平行，分别标为a组、b组、c组。在放入试验网箱过程中，快速观察记录鳊鱼体表异常情况，若观察到鳊鱼体表出现不规则或弥散性斑状、点状发红，则可认定为赤皮病变。各个网箱进箱时初始赤皮发生率参照以下公式计算，其统计结果如表4。赤皮发生率(％)＝认定为赤皮的鳊鱼的数量/100×100表4：如表4所示，按照相同的操作要求，各组鳊鱼初始赤皮发生率都比较接近。(2)添加剂对鳊鱼赤皮的治疗效果试验第2天，分别在鳊鱼商品饲料中添加实施例1制备的添加剂、实施例2制备的添加剂和不添加任何外源物质的方式，配制2种试验料和一种空白对照组用料，其中试验料和空白对照组用料通过随机抽签的方式与试验网箱匹配，详细匹配结果如表5：表5：组别添加剂添加剂的使用剂量a组实施例1制备的饲料添加剂0.4％b组无0c组实施例2制备的饲料添加剂0.5％按表5试验料与试验网箱匹配的结果进行投喂，投喂率为饱食为主。各网箱连续投喂7天后，对各网箱进行起网捞鱼，记录不同网箱中鳊鱼仍然存在赤皮的数量，按以下公式计算赤皮治疗效果。治愈率(％)＝(赤皮初始发生率-赤皮终末发生率)/赤皮初始发生率×100表6：如表5所示，对经人工诱发赤皮病变的鳊鱼连续投喂拌有本发明添加剂的饲料和零添加本发明添加剂的饲料7天，经提网捞鱼进行赤皮统计时发现，不同组之间鳊鱼赤皮的恢复情况存在较大差异，其中投喂添加有本发明实施例1、实施例2制备的添加剂的饲料，鳊鱼赤皮病变恢复情况十分良好，而投喂不添加本发明添加剂的饲料，鳊鱼赤皮恢复进行缓慢。由此可见，在饲料中添加本发明添加剂，对于鳊鱼赤皮病变具有良好的治疗效果，治愈率可达96％左右。试验例4活性成分对鳊鱼赤皮预治的协同增效作用湖北东西湖地区选择草鱼鳊混养池塘4口，其中草鱼为混养品种，鳊鱼为主养品种，鳊鱼亩均放养数量1500-1800尾之间，池塘面积为5-8亩之间。鳊鱼体重规格95±12g/尾，日常投喂的商品饲料为相同饲料品牌和相同营养档次。(1)鳊鱼赤皮病理模型的构建试验前2天，4口池塘停止投喂饲料，试验第1天，从每个池塘中通过敛网随机捞取各300尾鳊鱼，接着通过将鱼装框起吊20秒，过秤15秒，持续加氧运输15分钟，过持续加氧暴氯自来水清洗，转入含有0.1％十二烷基磺酸钠去垢剂的持续加氧溶液中处理1分钟，再转入持续加氧暴氯自来水清洗，去除体表变性脱落的粘液，最后按每100尾1组分别分放入24个试验网箱中，共8组，每组3个平行，分别标为a1、a2、a3、b1、b2、b3、c1、c2、c3、d1、d2、d3、e1、e2、e3、f1、f2、f3、g1、g2、g3、h1、h2、h3。在放入试验网箱过程中，快速观察记录鳊鱼体表异常情况，若观察到鳊鱼体表出现不规则或弥散性斑状、点状发红，则可认定为赤皮病变。各个网箱进箱时初始赤皮发生率参照以下公式计算，其统计结果如表7。赤皮发生率(％)＝认定为赤皮的鳊鱼的数量/100×100表7：组别初始赤皮发生率(％)a组32b组31.7c组31.3d29.7e32.3f29.7g30h31如表7所示，按照相同的操作要求，各组鳊鱼初始赤皮发生率都比较接近。(2)添加剂对鳊鱼赤皮的治疗效果试验第2天，分别在鳊鱼商品饲料中添加实施例1制备的添加剂和不添加任何外源物质的方式，配制1种试验料和一种空白对照组用料；以实施例1添加配方为基础配方，配制车前草微粉、紫苏叶、甘草提取物和五加皮提取物单独缺失的添加剂，缺失部分以等量面粉替换；再以实施例1配方为基础配方，配制车前草微粉和紫苏叶同时缺失、甘草提取物和五加皮提取物同时缺失的两组添加剂，缺失部分以等量面粉替换。将上述配制完成的添加剂分别按重量百分比0.4％添加比例拌入饲料中制备用于不同组的试验料。其中试验料和空白对照组用料通过随机抽签的方式与试验网箱匹配，详细匹配结果如表8：表8：(下表数据省略单位：％)*注：h为空白对照组，即在鳊鱼商品饲料中不添加任何外源添加剂，作为空白对照组用料。按表8试验料与试验网箱匹配的结果进行投喂，投喂率为饱食为主。各网箱连续投喂7天后，对各网箱进行起网捞鱼，记录不同网箱中鳊鱼仍然存在赤皮的数量，按以下公式计算赤皮治疗效果。治愈率(％)＝(赤皮初始发生率-赤皮终末发生率)/赤皮初始发生率×100表6：如表8所示，鳊鱼经人工诱发赤皮病变后，在连续7天投喂空白饲料的条件下，鳊鱼能够通过自身修复能力使赤皮发生率自动恢复57.6-69％，而添加了本发明饲料添加的饲料鳊鱼赤皮恢复进展十分良好，赤皮修复率高达97％。因此，在饲料中添加本发明预混料，可以有效的治疗鳊鱼赤皮。另一方面，当车前草微粉、紫苏叶单独缺失时，单独缺失上述两种添加剂对鳊鱼赤皮的修复作用有所减弱，然而当车前草微粉和紫苏叶同时缺失时，对应的添加剂对鳊鱼赤皮的修复明显减弱。由此就明，车前草微粉、紫苏叶单独缺失时，对添加剂修复鳊鱼赤皮病变的功效有减弱效应，当车前草微粉和紫苏叶同时缺失时，对添加修复鳊鱼赤皮病变的功能有更明显的减弱效应。可见，车前草微粉、紫苏叶对本发明添加剂修复鳊鱼赤皮功效具有协同增效作用。同时，当甘草发酵液、五加皮发酵液单独缺失时，单独缺失上述两种添加剂对鳊鱼赤皮的修复作用有所减弱，然而当甘草发酵液和五加皮发酵液同时缺失时，对应的添加剂对鳊鱼赤皮的修复明显减弱。由此就明，甘草发酵液、五加皮发酵液单独缺失时，对添加剂修复鳊鱼赤皮病变的功效有减弱效应，当甘草发酵液和五加皮发酵液同时缺失时，对添加修复鳊鱼赤皮病变的功能有更明显的减弱效应。可见，甘草发酵液、五加皮发酵液对本发明添加剂修复鳊鱼赤皮功效具有协同增效作用。以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
技术领域：
的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。当前第1页12