本发明属于水产生物营养化强化剂领域，尤其涉及一种石斑鱼营养强化剂的制备方法。
技术背景
石斑鱼，属鲈形目，体长椭圆形稍侧扁，口大，具辅上颌骨，牙细尖，有的扩大成犬牙，体被小栉鳞，有时常埋于皮下，背鳍和臀鳍棘发达，尾鳍圆形或凹形，体色变异甚多，常呈褐色或红色，并具条纹和斑点，为暖水性的大中型海产鱼类。石斑鱼体椭圆形，侧扁，头大，吻短而钝圆，口大，有发达的铺上骨，体披细小栉鳞，背鳍强大，体色可随环境变化而改变。成鱼体长通常在20～30厘米。石斑鱼营养丰富，肉质细嫩洁白，类似鸡肉，素有“海鸡肉”之称。石斑鱼是一种低脂肪、高蛋白的上等食用鱼，被港澳地区推为中国四大名鱼之一。石斑鱼蛋白质的含量高，而脂肪含量低，除含人体代谢所必须的氨基酸外，还富含多种无机盐和铁、钙、磷以及各种维生素。鱼皮胶质的营养成分，对增强上皮组织的完整生长和促进胶原细胞的合成有重要作用，被称为美容护肤之鱼，尤其适合妇女产后食用。石斑鱼营养价值很高，富含蛋白质、维生素a、维生素d、钙、磷、钾等营养成分。
关于石斑鱼的饲料的制备技术有很多方法，现有技术如申请公众号为
cn101803673b的中国发明专利，公开了一种石斑鱼配合饲料及其制备方法，该发明方法将鱼粉、豆粕、小麦高筋面粉、面粉、酵母粉、复合维生素、复合矿物质、胆碱、磷酸二氢钙、明胶、vc、虾皮粉混合制备饲料，具有制备简单、营养全面的优点，但是其主要原料鱼粉价格昂贵，规模化应用提高了饲料的成本，而且饲料中缺乏脂肪成分与提高石斑鱼的药物成分，未经发酵的豆粕含有抗营养成分，影响了石斑鱼对饲料营养的吸收消化。
技术实现要素：
本方法的目的在于提供一种石斑鱼营养强化剂的制备方法，该制备方法简单易控，营养强化剂营养丰富，可以有效提高石斑鱼机体免疫力，促进其生长发育。
本发明针对
背景技术：
中提到的问题，采取的技术方案为：石斑鱼营养强化剂的制备方法，包括：中药制剂的配制、脂质体的制备、提取鱼内脏油、鱼油改性、复配强化剂，具体包括以下步骤：
中药制剂的配制：将10-15份黄连、3-5份何首乌、5-8份黄柏和10-15份桅子分别用粉碎机粉碎，过80-100目筛，制成中药复方制剂，称取10-12份中药复方制剂，用脱脂棉纱包好，加入100-120份水中，浸泡1-2小时后烧开，文火煎煮30-40分钟，用纱布进行过滤，滤渣再进行煎煮，将滤液混合，低温浓缩至含水量为40-50%，于3-4℃保存备用；中药制剂可以增强石斑鱼的抗病抗菌能力，提高机体免疫力，增强体质；
脂质体的制备：称取0.4-0.5mol/l、ph为7.5-7.8的磷酸二氢钠与磷酸氢二钠混合溶液80-85份，缓慢加入茶多酚7.5-8.0份，强力搅拌下加热至50-52℃并保持恒温；称取蛋黄卵磷脂200-250份、胆固醇30-32份、ve5-10份，加入到300-350份无水乙醇中，加热至50-52℃搅拌溶解，溶解完全后将混合溶液加入茶多酚溶液中，保持温度强力搅拌30-45分钟后，在50-55℃温度、0.2-0.3mpa真空下旋转蒸发30-45分钟除去残留乙醇，然后超声处理，超声功率为200-230w，频率为23-25khz，以超声3-4秒间隔4-5秒的频率超声处理3-4分钟，超声结束后将茶多酚脂质体置于3-4℃保存；此方法制备的茶多酚脂质体包封率高，易于吸收，并且制备方法简单，制备过程中避免了含有乙醚等潜在有害物质的理化处理，非常适合工业化大规模生产；
提取鱼内脏油：取新鲜鲢鱼内脏，去除内脏中的消化残留物，洗净沥干，在匀浆机中匀浆，称取200-210份鱼内脏匀浆到容器中，加入60-65份蒸馏水，搅拌下水浴升温至30-34℃，调节ph到8-9，继续搅拌升温至45-55℃，保温25-35分钟，加入鱼内脏重8-10%的氯化钾搅拌溶解后盐析20-30分钟后趁热离心，分离得粗鱼油；钾法提取鱼内脏油以除去杂质，为进一步改性做准备；本方法鱼油得率高，操作简单，废水、废渣可制成绿色高效肥料完全综合利用，还可以作为提取核酸的原料进一步高值化，达到了废弃物综合利用的目的；
鱼油改性：称取粗鱼油100-110份、维生素c0.07-0.08份放于密闭容器中混合均匀，将反应容器置于超声仪中，加热至70-73℃并保持，持续通入氧气5-8分钟，然后加入脱饱和酶0.3-0.4份、还原型辅酶ⅱ0.05-0.06份、功能性多肽0.02-0.04份，在功率为400-500w、频率为80-90khz的高超声波作用下反应60-80秒后待用；虹吸酶促鱼油并用热水洗3-4次，趁热离心，取上层液体，用真空干燥箱干燥即得改性鱼内脏油；功能性多肽的氨基酸序列为：scasrcksrcrarrcrarrcgiiyfgkrcickcfrc；酶促反应能将饱和脂肪酸的中间位置碳碳双键的氢被氧夺去生成水，从而使长链饱和脂肪酸失去氢转化为对应的不饱和脂肪酸，从而使鱼内脏油中富含dha、epa等多不饱和脂肪酸；功能性多肽能够对酶促反应的反应物与产物的空间结构产生影响，增加产物中顺式不饱和脂肪酸的占比，降低产物中反式不饱和脂肪酸的含量，从而增强不饱和脂肪酸的营养价值，使其非常适合作为石斑鱼的营养强化成分；
复配强化剂：称取中药制剂0.2-0.25份、茶多酚脂质体5-10份、改性鱼油30-50份、氟苯尼考0.02-0.03份、柠檬酸0.2-0.5份、复合核苷酸1.0-2.0份、复合酶制剂1.0-2.0份、玉米蛋白粉20-25份、谷朊粉4.0-6.0份、花生粕5.0-8.0份、聚β-羟基丁酸酯0.5-0.8份、氯化胆碱0.3-0.5份、牛磺酸1.0-1.5份、乙氧基喹琳0.05-0.06份、海藻酸钠0.6-0.7份、胆固醇0.8-1.0份、诱食剂2.0-3.0份混合均匀后粉碎，过100-120目筛，筛出物继续粉碎直至全部过筛，即得石斑鱼营养强化剂；强化剂中含有丰富的中药成分、磷脂、不饱和脂肪酸、蛋白质、复合酶、矿物元素等营养成分，配合诱食剂与抗养化成分，适合作为石斑鱼的营养强化剂，与饲料配合食用后，能够增强石斑鱼的应激能力、免疫能力、抗病抗菌能力，促进其对营养物质的消化吸收，加快石斑鱼的生长发育。
作为优选，所用的复合核苷酸为腺嘌呤核苷酸二钠与鸟嘌呤核苷酸二钠与胞嘧啶核苷酸二钠与尿嘧啶核苷酸二钠与次黄嘌呤核苷酸二钠的混合物；核苷酸可以作为蛋白质激酶使代谢酶活性增强，诱导激素或酶的合成，促进幼鱼体内蛋白质的合成，从而使增加体重，促进生长。
作为优选，所用的复合酶制剂为蛋白酶与淀粉酶与纤维素酶与糖化酶与脂肪酶与果胶酶的混合物；复合酶制剂可以提高石斑鱼对营养成分的消化吸收，促进其生长发育。
作为优选，所用的诱食剂为甜菜碱或二甲基丙酸噻亭或甘氨酸或酵母粉或丙氨酸或5-磷酸肌苷或陈皮或啤酒糟或蚕蛹粉；复合诱食剂能够增强饲料的适口性，从而促进幼鱼进食。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）石斑鱼营养强化剂中的中药制剂可以增强石斑鱼的抗病抗菌能力，提高机体免疫力，增强体质；2）通过对鱼内脏油进行改性，使鱼内脏油中富含dha、epa等多不饱和脂肪酸，非常适合作为石斑鱼的营养强化剂，当被石斑鱼进食后，改性鱼油会改善石斑鱼体内的脂肪结构；3）强化剂中含有丰富的中药成分、磷脂、不饱和脂肪酸、蛋白质、复合酶、矿物元素等营养成分，配合诱食剂与抗养化成分，适合作为石斑鱼的营养强化剂，与饲料配合食用后，能够增强石斑鱼的应激能力、免疫能力、抗病抗菌能力，促进其对营养物质的消化吸收，加快石斑鱼的生长发育。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
石斑鱼营养强化剂的制备方法，包括以下步骤：
1）将10份黄连、3份何首乌、5份黄柏和10份桅子分别用粉碎机粉碎，过80目筛，制成中药复方制剂，称取10份中药复方制剂，用脱脂棉纱包好，加入100份水中，浸泡1小时后烧开，文火煎煮30分钟，用纱布进行过滤，滤渣再进行煎煮，将滤液混合，低温浓缩至含水量为40%，于3℃保存备用；中药制剂可以增强石斑鱼的抗病抗菌能力，提高机体免疫力，增强体质；
2）称取0.4mol/l、ph为7.5的磷酸二氢钠与磷酸氢二钠混合溶液80份，缓慢加入茶多酚7.5份，强力搅拌下加热至50℃并保持恒温；称取蛋黄卵磷脂200份、胆固醇30份、ve5份，加入到300份无水乙醇中，加热至50℃搅拌溶解，溶解完全后将混合溶液加入茶多酚溶液中，保持温度强力搅拌30分钟后，在50℃温度、0.2mpa真空下旋转蒸发30分钟除去残留乙醇，然后超声处理，超声功率为200w，频率为23khz，以超声3秒间隔4秒的频率超声处理3分钟，超声结束后将茶多酚脂质体置于3℃保存；
3）取200份新鲜鲢鱼内脏匀浆到容器中，加入60份蒸馏水，搅拌下水浴升温至30℃，调节ph到8，继续搅拌升温至45℃，保温25分钟，加入16份氯化钾搅拌溶解后盐析20分钟后趁热离心，分离得粗鱼油；钾法提取鱼内脏油以除去杂质，为进一步改性做准备；
4）称取粗鱼油100份、维生素c0.07份放于密闭容器中混合均匀，将反应容器置于超声仪中，加热至70℃并保持，持续通入氧气5分钟，然后加入脱饱和酶0.3份、还原型辅酶ⅱ0.05份、功能性多肽0.02份，在功率为400w、频率为80khz的高超声波作用下反应60秒后待用；虹吸酶促鱼油并用热水洗3次，趁热离心，取上层液体，用真空干燥箱干燥即得鱼内脏油；酶促反应能将饱和脂肪酸的中间位置碳碳双键的氢被氧夺去生成水，从而使长链饱和脂肪酸失去氢转化为对应的不饱和脂肪酸，从而使鱼内脏油中富含dha、epa等多不饱和脂肪酸；
5）称取中药制剂0.2份、茶多酚脂质体5份、改性鱼油30份、氟苯尼考0.02份、柠檬酸0.2份、复合核苷酸1.0份、复合酶制剂1.0份、玉米蛋白粉20份、谷朊粉4.0份、花生粕5.0份、聚β-羟基丁酸酯0.5份、氯化胆碱0.3份、牛磺酸1.0份、乙氧基喹琳0.05份、海藻酸钠0.6份、胆固醇0.8份、甜菜碱1.0份、二甲基丙酸噻亭1.0份混合均匀后粉碎，过100目筛，筛出物继续粉碎直至全部过筛，即得石斑鱼营养强化剂；强化剂中含有丰富的中药成分、磷脂、不饱和脂肪酸、蛋白质、复合酶、矿物元素等营养成分，配合诱食剂与抗养化成分，适合作为石斑鱼的营养强化剂，与饲料配合食用后，能够增强石斑鱼的应激能力、免疫能力、抗病抗菌能力，促进其对营养物质的消化吸收，加快石斑鱼的生长发育。
实施例2：
石斑鱼营养强化剂的制备方法，包括以下步骤：
1）中药制剂的配制：将15份黄连、5份何首乌、8份黄柏和15份桅子分别用粉碎机粉碎，过100目筛，制成中药复方制剂，称取12份中药复方制剂，用脱脂棉纱包好，加入120份水中，浸泡2小时后烧开，文火煎煮40分钟，用纱布进行过滤，滤渣再进行煎煮，将滤液混合，低温浓缩至含水量为50%，于4℃保存备用；中药制剂可以增强石斑鱼的抗病抗菌能力，提高机体免疫力，增强体质；
2）脂质体的制备：称取0.5mol/l、ph为7.8的磷酸二氢钠与磷酸氢二钠混合溶液85份，缓慢加入茶多酚8.0份，强力搅拌下加热至52℃并保持恒温；称取蛋黄卵磷脂250份、胆固醇32份、ve10份，加入到350份无水乙醇中，加热至52℃搅拌溶解，溶解完全后将混合溶液加入茶多酚溶液中，保持温度强力搅拌45分钟后，在55℃温度、0.3mpa真空下旋转蒸发45分钟除去残留乙醇，然后超声处理，超声功率为230w，频率为25khz，以超声4秒间隔5秒的频率超声处理4分钟，超声结束后将茶多酚脂质体置于4℃保存；此方法制备的茶多酚脂质体包封率高，易于吸收，并且制备方法简单；
3）提取鱼内脏油：取新鲜鲢鱼内脏，去除内脏中的消化残留物，洗净沥干，在匀浆机中匀浆，称取210份鱼内脏匀浆到容器中，加入65份蒸馏水，搅拌下水浴升温至34℃，调节ph到9，继续搅拌升温至55℃，保温35分钟，加入21份氯化钾搅拌溶解后盐析30分钟后趁热离心，分离得粗鱼油；本方法鱼油得率高，操作简单，废水、废渣可制成绿色高效肥料完全综合利用，还可以作为提取核酸的原料进一步高值化，达到了废弃物综合利用的目的；
4）鱼油改性：称取粗鱼油110份、维生素c0.08份放于密闭容器中混合均匀，将反应容器置于超声仪中，加热至73℃并保持，持续通入氧气8分钟，然后加入脱饱和酶0.4份、还原型辅酶ⅱ0.06份、功能性多肽0.04份，在功率为500w、频率为90khz的高超声波作用下反应80秒后待用；虹吸酶促鱼油并用热水洗4次，趁热离心，取上层液体，用真空干燥箱干燥即得鱼内脏油；功能性多肽的氨基酸序列为：scasrcksrcrarrcrarrcgiiyfgkrcickcfrc；酶促反应能将饱和脂肪酸的中间位置碳碳双键的氢被氧夺去生成水，从而使长链饱和脂肪酸失去氢转化为对应的不饱和脂肪酸，从而使鱼内脏油中富含dha、epa等多不饱和脂肪酸；
5）复配强化剂：称取中药制剂0.25份、茶多酚脂质体10份、改性鱼油50份、氟苯尼考0.03份、柠檬酸0.5份、复合核苷酸2.0份、复合酶制剂2.0份、玉米蛋白粉25份、谷朊粉6.0份、花生粕8.0份、聚β-羟基丁酸酯0.8份、氯化胆碱0.5份、牛磺酸1.5份、乙氧基喹琳0.06份、海藻酸钠0.7份、胆固醇1.0份、丙氨酸1.0份、5-磷酸肌苷1.0份、蚕蛹粉1.0份混合均匀后粉碎，过120目筛，筛出物继续粉碎直至全部过筛，即得石斑鱼营养强化剂。
实施例3：
石斑鱼营养强化剂的制备方法，包括：中药制剂的配制、脂质体的制备、提取鱼内脏油、鱼油改性、复配强化剂，具体包括以下步骤：
中药制剂的配制：将12份黄连、4份何首乌、6份黄柏和14份桅子分别用粉碎机粉碎，过80目筛，制成中药复方制剂，称取12份中药复方制剂，用脱脂棉纱包好，加入120份水中，浸泡2小时后烧开，文火煎煮40分钟，用纱布进行过滤，滤渣再进行煎煮，将滤液混合，低温浓缩至含水量为45%，于4℃保存备用；中药制剂可以增强石斑鱼的抗病抗菌能力，提高机体免疫力，增强体质；
脂质体的制备：称取0.4mol/l、ph为7.6的磷酸二氢钠与磷酸氢二钠混合溶液80份，缓慢加入茶多酚8.0份，强力搅拌下加热至52℃并保持恒温；称取蛋黄卵磷脂240份、胆固醇32份、ve8份，加入到350份无水乙醇中，加热至50℃搅拌溶解，溶解完全后将混合溶液加入茶多酚溶液中，保持温度强力搅拌35分钟后，在52℃温度、0.2mpa真空下旋转蒸发45分钟除去残留乙醇，然后超声处理，超声功率为200w，频率为23khz，以超声4秒间隔5秒的频率超声处理3分钟，超声结束后将茶多酚脂质体置于4℃保存；此方法制备的茶多酚脂质体包封率高，易于吸收，并且制备方法简单，制备过程中避免了含有乙醚等潜在有害物质的理化处理，非常适合工业化大规模生产；
提取鱼内脏油：取新鲜鲢鱼内脏，去除内脏中的消化残留物，洗净沥干，在匀浆机中匀浆，称取200份鱼内脏匀浆到容器中，加入65份蒸馏水，搅拌下水浴升温至32℃，调节ph到8，继续搅拌升温至55℃，保温35分钟，加入16份氯化钾搅拌溶解后盐析20分钟后趁热离心，分离得粗鱼油；钾法提取鱼内脏油以除去杂质，为进一步改性做准备；本方法鱼油得率高，操作简单，废水、废渣可制成绿色高效肥料完全综合利用，还可以作为提取核酸的原料进一步高值化，达到了废弃物综合利用的目的；
鱼油改性：称取粗鱼油110份、维生素c0.08份放于密闭容器中混合均匀，将反应容器置于超声仪中，加热至73℃并保持，持续通入氧气8分钟，然后加入脱饱和酶0.4份、还原型辅酶ⅱ0.05份、功能性多肽0.02份，在功率为400w、频率为90khz的高超声波作用下反应65秒后待用；虹吸酶促鱼油并用热水洗4次，趁热离心，取上层液体，用真空干燥箱干燥即得鱼内脏油；功能性多肽的氨基酸序列为：scasrcksrcrarrcrarrcgiiyfgkrcickcfrc；酶促反应能将饱和脂肪酸的中间位置碳碳双键的氢被氧夺去生成水，从而使长链饱和脂肪酸失去氢转化为对应的不饱和脂肪酸，从而使鱼内脏油中富含dha、epa等多不饱和脂肪酸；功能性多肽能够对酶促反应的反应物与产物的空间结构产生影响，增加产物中顺式不饱和脂肪酸的占比，降低产物中反式不饱和脂肪酸的含量，从而增强不饱和脂肪酸的营养价值，使其非常适合作为石斑鱼的营养强化成分；
复配强化剂：称取中药制剂0.2份、茶多酚脂质体8份、改性鱼油32份、氟苯尼考0.02份、柠檬酸0.4份、复合核苷酸2.0份、复合酶制剂1.5份、玉米蛋白粉24份、谷朊粉6.0份、花生粕6.5份、聚β-羟基丁酸酯0.6份、氯化胆碱0.3份、牛磺酸1.2份、乙氧基喹琳0.05份、海藻酸钠0.6份、胆固醇0.8份、甜菜碱0.5份、丙氨酸0.5份、陈皮1.0份混合均匀后粉碎，过120目筛，筛出物继续粉碎直至全部过筛，即得石斑鱼营养强化剂；强化剂中含有丰富的中药成分、磷脂、不饱和脂肪酸、蛋白质、复合酶、矿物元素等营养成分，配合诱食剂与抗养化成分，适合作为石斑鱼的营养强化剂，与饲料配合食用后，能够增强石斑鱼的应激能力、免疫能力、抗病抗菌能力，促进其对营养物质的消化吸收，加快石斑鱼的生长发育。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110>浦江县协盈动物饲料技术开发有限公司
<120>石斑鱼营养强化剂的制备方法
<130>3
<160>1
<170>siposequencelisting1.0
<210>2
<211>36
<212>prt
<213>人工合成(mytiluscoruscus)
<400>2
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151015
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35