本发明涉及饲料添加剂领域，具体是一种高效抑菌复合精油及其制备方法。
背景技术：
：出于对动物健康和提高生长性能的考虑，畜牧业系统中在饲料及养殖过程中使用各种抗生素，造成抗生素滥用及细菌产生耐药性，食品品质下降，环境污染严重，人民健康受到空前威胁。所以人们对健康的食品和良好的环境有迫切需求。欧美及其他很多国家已经禁止或将陆续禁止在饲料中添加抗生素，减小各种抗生素在养殖场的使用范围。在饲料和养殖场中禁抗和减抗是世界畜牧业的必然趋势，中国的禁抗减抗措施也在循序渐进地推行。精油因精具有杀菌抑菌、促生长、提高免疫等作用，在禁抗减抗的过程中扮演着重要角色。植物精油的主要作用有：（1）抗菌作用；精油对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、水产动物中的弧菌、嗜水气单胞菌、链球菌等致病菌有很强的抑制或杀灭作用，对动物肠道细菌性腹泻、生殖系统炎症及呼吸道疾病有很好的预防和缓解作用，同时对霉菌及寄生虫具有较强抑制作用。（2）促生长作用；维护肠道菌群平衡，激活消化道平滑肌，促进消化液的分泌及提高消化酶的活性，提高动物对营养物质的吸收，改善料肉比，起到促生长的作用。（3）提高动物机体免疫力；在一定剂量范围内，精油可促进机体免疫器官的生长发育，明显增加畜禽免疫器官的重量，提高畜禽体内巨噬细胞的吞噬能力，增强机体抗炎症作用，提高机体内的抗体水平。（4）抗氧化作用；精油成分含有酚羟基，且多为萜类化合物，具有很强的抗氧化作用。其通过脱氢反应产生比较稳定的苯氧自由基终止链式反应，也可使细胞膜和线粒体中的不饱和脂肪酸不被氧化，进而保护膜的结构和维持细胞功能。既能激活机体的內源性抗氧化剂，又可调节抗氧化防御酶系活性。（5）改善肉质风味及系水力；作为香料型精油，其对动物肌肉中与鲜味和甜味有关的谷氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸和丙氨酸等氨基酸的含量都有不同程度的提高，提高肌肉中多种不饱和脂肪酸的含量，增加肉质风味和系水力。（6）减少废气排放；精油减少家禽氨气和硫化氢的排放，净化圈舍空气，改善养殖环境。（7）促进食欲；有特殊的精油香味，刺激动物的食欲，增加采食量。可以刺激舌咽神经和嗅觉器官，促进唾液、胃液及肠道消化酶的分泌，增加营养物质的消化率。（8）协同作用；与饲料添加剂中的酶制剂、有机酸、氨基酸螯合物、抗生素共同使用时存在协同效应，增强其作用效果。由上可知，精油具有包括抗菌、促生长等多种功能，作为一种绿色、高效、不产生耐药性及药残的新型饲料添加剂有广阔的应用前景。但是现有的精油型饲料添加剂依然存在抗菌能力较差的缺点。因此，本发明提供一种高效抑菌复合精油及其制备方法。技术实现要素：本发明为了提高精油的抗菌能力，从各种单体精油的复配比例入手，通过抑菌试验选择最佳复配比例，添加增效剂提高杀菌能力，通过调整口感和气味提高其适口性，最后精油特殊包被工艺处理，掩盖气味，提高精油的抗氧化及抗挥发能力。本发明生产的产品是一种抗菌促生长能力强、抗逆性强、绿色高效的新型饲料添加剂。为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高效抑菌复合精油，所述高效抑菌复合精油包括以下组分：香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油、辛癸酸、乳酸、特丁基对苯二酚、纽甜溶液、白炭黑、棕榈油。作为本发明进一步的方案：辛癸酸与乳酸的重量比为3:1，辛癸酸与乳酸的总重量占高效抑菌复合精油的4%。作为本发明进一步的方案：香芹酚与百里香酚的重量比为3:2；丁香酚与肉桂醛的重量比为1:9。作为本发明进一步的方案：香芹酚、百里香酚的总重量与丁香酚、肉桂醛的总重量之比为1:1。作为本发明进一步的方案：茴香油与紫苏油的重量比为1:1，茴香油与紫苏油的总重量占高效抑菌复合精油的4%。作为本发明进一步的方案：所述纽甜溶液采用纽甜与无水乙醇按照1：50的重量比混合而成。作为本发明进一步的方案：所述高效抑菌复合精油包括以下组分：香芹酚1.5-6份、百里香酚1-4份、肉桂醛2.25-9份、丁香酚0.25-1份、茴香油0.5-2份、紫苏油0.5-2份、辛癸酸0.75-3份、乳酸0.25-1份、特丁基对苯二酚0.01-0.04份、纽甜溶液0.35-1.4份、白炭黑5.49-21.96份、棕榈油37-148份。作为本发明进一步的方案：所述高效抑菌复合精油包括以下组分：香芹酚3份、百里香酚2份、肉桂醛4.5份、丁香酚0.5份、茴香油1份、紫苏油1份、辛癸酸1.5份、乳酸0.5份、特丁基对苯二酚0.02份、纽甜溶液0.7份、白炭黑10.98份、棕榈油74份。一种高效抑菌复合精油的制备方法，包括以下步骤：（1）将香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油加入到反应釜中搅拌混合，充分溶解混匀后备用；（2）然后将辛癸酸、乳酸、特丁基对苯二酚、纽甜溶液依次加入到反应釜中搅拌混合；混匀后将白炭黑投入到反应釜中迅速吸附混匀；（3）先将棕榈油提前融化，然后再加入到反应釜中充分混合均匀；之后用喷雾设备，将以上混合液喷雾到密闭冷却装置内，形成冷却细小颗粒，过筛，即得成品。作为本发明进一步的方案：包括以下步骤：（1）将香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油加入到反应釜中搅拌混合，反应釜温度为50℃，搅拌转速为40rpm/min，充分溶解混匀后备用；（2）然后将辛癸酸、乳酸、特丁基对苯二酚、纽甜溶液依次加入到反应釜中，在40rpm/min的转速下搅拌混合5min；混匀后将白炭黑投入到反应釜中迅速吸附混匀；（3）先将棕榈油提前在70℃温度下融化，然后再加入到反应釜中，50℃下充分混合均匀；之后用喷雾设备，将以上混合液喷雾到密闭冷却装置内，形成冷却细小颗粒，过筛，即得成品。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的高效抑菌复合精油具有良好的抗菌能力，通过抑菌试验证实了多种原料的配比下具有更强的抑菌效果：例如香芹酚和百里香酚的最佳复配重量比为3:2，肉桂醛和丁香酚的最佳复配重量比为9:1；香芹酚、百里香酚的总重量与丁香酚、肉桂醛的总重量之比为1:1；本发明的高效抑菌复合精油经过合理配比，同时改进制备工艺，增加辛癸酸和乳酸作为增效剂和螯合剂，使复合精油的抗菌能力大幅提高，且具有较好的抗氧化性能，有效提高动物生长性能；本发明加工工艺简单、成本低廉、绿色安全，使该抑菌复合精油作为饲用抗生素替代品能更好的推广应用。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。实施例1一种高效抑菌复合精油，所述高效抑菌复合精油包括以下组分：香芹酚1.5份、百里香酚1份、肉桂醛2.25份、丁香酚0.25份、茴香油0.5份、紫苏油0.5份、辛癸酸0.75份、乳酸0.25份、特丁基对苯二酚0.01份、纽甜溶液0.35份、白炭黑5.49份、棕榈油37份。所述纽甜溶液采用纽甜与无水乙醇按照1：50的重量比混合而成。一种高效抑菌复合精油的制备方法，包括以下步骤：（1）将香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油加入到反应釜中搅拌混合，反应釜温度为40℃，搅拌转速为30rpm/min，充分溶解混匀后备用；（2）然后将辛癸酸、乳酸、特丁基对苯二酚、纽甜溶液依次加入到反应釜中，在30rpm/min的转速下搅拌混合3min；混匀后将白炭黑投入到反应釜中迅速吸附混匀；（3）先将棕榈油提前在60℃温度下融化，然后再加入到反应釜中，40℃下充分混合均匀；之后用喷雾设备，将以上混合液喷雾到密闭冷却装置内，形成冷却细小颗粒，过筛，即得成品。实施例2一种高效抑菌复合精油，所述高效抑菌复合精油包括以下组分：香芹酚6份、百里香酚4份、肉桂醛9份、丁香酚1份、茴香油2份、紫苏油2份、辛癸酸3份、乳酸1份、特丁基对苯二酚0.04份、纽甜溶液1.4份、白炭黑21.96份、棕榈油148份。所述纽甜溶液采用纽甜与无水乙醇按照1：50的重量比混合而成。一种高效抑菌复合精油的制备方法，包括以下步骤：（1）将香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油加入到反应釜中搅拌混合，反应釜温度为55℃，搅拌转速为50rpm/min，充分溶解混匀后备用；（2）然后将辛癸酸、乳酸、特丁基对苯二酚、纽甜溶液依次加入到反应釜中，在40rpm/min的转速下搅拌混合8min；混匀后将白炭黑投入到反应釜中迅速吸附混匀；（3）先将棕榈油提前在75℃温度下融化，然后再加入到反应釜中，55℃下充分混合均匀；之后用喷雾设备，将以上混合液喷雾到密闭冷却装置内，形成冷却细小颗粒，过筛，即得成品。实施例3一种高效抑菌复合精油，所述高效抑菌复合精油包括以下组分：香芹酚3份、百里香酚2份、肉桂醛4.5份、丁香酚0.5份、茴香油1份、紫苏油1份、辛癸酸1.5份、乳酸0.5份、特丁基对苯二酚0.02份、纽甜溶液0.7份、白炭黑10.98份、棕榈油74份。所述纽甜溶液采用纽甜与无水乙醇按照1：50的重量比混合而成。一种高效抑菌复合精油的制备方法，包括以下步骤：（1）将香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油加入到反应釜中搅拌混合，反应釜温度为50℃，搅拌转速为40rpm/min，充分溶解混匀后备用；（2）然后将辛癸酸、乳酸、特丁基对苯二酚、纽甜溶液依次加入到反应釜中，在40rpm/min的转速下搅拌混合5min；混匀后将白炭黑投入到反应釜中迅速吸附混匀；（3）先将棕榈油提前在70℃温度下融化，然后再加入到反应釜中，50℃下充分混合均匀；之后用喷雾设备，将以上混合液喷雾到密闭冷却装置内，形成冷却细小颗粒，过筛，即得成品。实验例将香芹酚与百里香酚分别以1:2，2:3，1:1，3:2，2:1的比例配成混合液；将肉桂醛与丁香酚分别以1:3，1:6，1:9，1:1，9:1，6:1，3:1的比例配成混合液；将获得的混合液做抑菌试验，观察不同比例的抑菌效果，选择抑菌效果最好的复配比例。将获得的香芹酚和百里香酚的最佳比例与肉桂醛和丁香酚最佳比例再按两种混合物的不同比例混合，选择最佳抑菌比例。（香：百）最佳：（肉：丁）最佳的复配比例为：1:2，1:4，1:8，1:1，8:1，4:1，2:1。试验一：1、精油处理准确称取1g的复合精油，加入到含有20g二甲基亚砜的具塞三角瓶中混匀，放在超声波清洗器上超声15-20min，使精油成分充分析释出来。或用粉碎机粉碎，然后超声6-8分钟。用二甲基亚砜稀释到合适浓度。2、营养琼脂平板制备按说明将营养琼脂用蒸馏水充分溶解，在高压灭菌锅中121℃下灭菌20min。灭好菌的营养琼脂冷却至50-55℃倾注平板，冷却后放置在37℃恒温箱中12小时后取出备用。3、细菌菌悬液的制备分别挑取大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌单菌落于装有100ml的营养肉汤中，恒温摇床培养（37℃下培养过夜），用无菌生理盐水分别将细菌稀释到浓度约为106-107cfu/ml的菌悬液，待用。或挑取2-3个大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌单菌落于含有1ml0.9%生理盐水的1.5ml离心管中，用移液枪充分吸打8-10次，使菌落充分打匀，待用。4、滤纸片的制备选择质地均匀、吸水力强的定性滤纸，用打孔机从滤纸上打出直径为6mm大小的圆形纸片，高压灭菌，置于超净台备用。5、抑菌圈的测定滤纸片法：取制备好的三种菌悬液各100微升加入到营养琼脂平板上，涂菌棒涂匀。放置一段时间后，用无菌镊子夹取灭过菌的6mm圆形滤纸片放在营养琼脂平板上，同时做3个平行，然后用移液枪吸取5微升精油产品稀释液于滤纸片上，放入恒温培养箱中，37℃下培养12-18小时。观察并用游标卡尺测量各实验样品的抑菌圈直径（mm），计算其平均值。表1香芹酚与百里香酚不同比例的抑菌圈对比不同比例大肠杆菌沙门氏菌金葡菌1:21013112:31115121:11214123:21316142:1101211表2肉桂醛与丁香酚不同比例的抑菌圈对比通过以上抑菌试验可知，香芹酚和百里香酚的最佳复配比例为3:2，肉桂醛和丁香酚的最佳复配比例为9:1。将两个组合的最佳复配比例再按不同比例复配，选择最低抑菌浓度法获得最佳抑菌组合。（香：百）最佳：（肉：丁）最佳的复配比例为：1:2，1:4，1:8，1:1，8:1，4:1，2:1。试验二：1、菌种：大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌2、试剂：二甲基亚砜、营养琼脂、营养肉汤3、试验仪器及用品：试管若干、或96孔板、高压灭菌锅、超净工作台、超声波清洗器、混匀器、恒温培养箱、恒温摇床、电热恒温鼓风干燥箱4、试验步骤4.1、复合精油处理准确称取1.28g的复合精油，加入到含有100ml二甲基亚砜的具塞三角瓶中混匀，放在超声波清洗器上超声15-20min，使精油成分充分析释出来。或用粉碎机粉碎，然后超声6-8分钟。用二甲基亚砜稀释到合适浓度。4.2、细菌菌悬液的制备分别挑取大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌单菌落于装有100ml的营养肉汤中，恒温摇床培养（37℃下培养过夜），用营养肉汤分别将细菌稀释到浓度约为106cfu/ml的菌悬液，待用。4.3、加样将以上处理的为1.28g/100ml精油样品溶液将按以下顺序添加：96孔板平放，每个孔中添加100μl的营养肉汤，将100μl精油混加入到第一支试管中，充分混匀，取1ml混合液加入到第二只试管中，以此类推，最后一管弃去。精油浓度为：6400μg/ml，3200μg/ml，1600μg/ml，800μg/ml，400μg/ml，200μg/ml，100μg/ml，50μg/ml，25μg/ml，12.5μg/ml。后每个试管中再加入1ml肉汤菌液，试管放在37℃温箱过夜，观察结果。同时做100μl精油混合液+100μl营养肉汤，100μl营养肉汤+100μl肉汤菌液。表3（香：百）最佳：（肉：丁）最佳不同复配比例的抑菌圈对比复配比例大肠杆菌沙门氏菌金黄色葡萄球菌1:24002002001:42002001001:8200100501:1100501008:11002004004:11001002002:1200100200从表3可以得出复合精油对三种致病菌的复配比例最佳为：1:1。以（香：百）最佳：（肉：丁）最佳的比例为1:1的复合精油为产品一；以（香：百）最佳：（肉：丁）最佳的比例为1:1的复合精油与辛癸酸、乳酸、茴香油和紫苏油混合后制成产品二；采用等量的产品一与产品二按试验一的方法做抑菌试验。其抑菌圈对比如表4。表4抑菌试验对比结果不同比例大肠杆菌沙门氏菌金葡菌产品一：（香：百）最佳：（肉：丁）最佳=1:1192320产品二：（香：百）最佳：（肉：丁）最佳=1:1+茴香油：紫苏油+辛癸酸：乳酸混合液262926经以上试验得知，按一定比例复配香芹酚、百里香酚、肉桂醛、丁香酚、茴香油、紫苏油及辛癸酸和乳酸制得的复合精油产品具有较强的抑菌效果。试验三测试复合精油产品对白羽肉鸡生长性能的影响。试验动物：aa白羽肉鸡。分组：对照组、试验1组和试验2组。对照组：不添加牛至香酚和任何抗生素，按正常程序使用疫苗。试验1组：普通精油组，香芹酚与百里香酚比例为1:1，总有效含量为12%，1号料添加量为350ml/t全价料，2、3号料添加量为300ml/t全价料，全程使用。按正常程序使用疫苗。试验2组：复合精油组，香芹酚与百里香酚比例为3:2，肉桂醛与丁香酚比例为9:1，茴香油与紫苏油比例为1:1，总有效含量为1.2%，1号料添加量为350ml/t全价料，2、3号料添加量为300ml/t全价料，全程使用。按正常程序使用疫苗。试验时间：9日龄-40日龄，共32天。表5试验结果从表5可以了解到，试验2组中在白羽肉鸡饲料中添加复合精油后，其料肉比、腹泻率及死亡率都有显著改善。说明本发明经过合理配比、加辛癸酸和乳酸作为增效剂和螯合剂，使复合精油的抗菌能力大幅提高，有效提高动物生长性能，使复合精油作为饲用抗生素替代品能更好的推广应用。本发明的工作原理是：香芹酚与百里香酚的比例约为3:2时抑菌效果最好；丁香酚与肉桂醛的比例约为1:9时抑菌效果最好。两组配合杀菌效果更佳；配方中添加茴香油和紫苏油除了增强杀菌效果外，还具有增香、提高食欲的作用；本配方通过试验获得精油的最佳抑菌比例，大幅提高产品抑菌效果。在配方中添加用于调节酸度的辛癸酸和乳酸，可以提供h+，降低ph值，维持精油的疏水性，提高其抗菌能力；同时能螯合金属离子，避免其对精油作用基团的破坏。添加一定量的tbhq（特丁基对苯二酚），减少精油成分的氧化，保证精油的抗菌活性。添加一定量的纽甜溶液，降低精油辛辣口感，提高产品的适口性。本发明步骤（3）采用低温溶化混合，防止精油成分挥发及氧化。本发明中选用棕榈油作为包被材料，起到抗氧化抗挥发的作用，使复合精油易于储存。在肠道中其经脂肪酶的作用下可使精油分子缓慢释放，起到持续杀菌的作用。上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下作出各种变化。当前第1页12