本发明涉及海带生产酶解液技术领域，具体是指一种海带酶解液的制备工艺。
背景技术：
中国的海带养殖已经发展成为一个大型工业，从辽宁直到广东沿海，产量约占全球海藻的50％。目前，海带可以加工成许多相关的副食品，主要包括海带酱、海带蛋糕、海带豆腐、海带饮料等。然而，这些利用海带生产的食品在我国并不常见，没有形成产业化的规模，大多数海带产品主要是以海带干、海带结等初加工产品为主。近年来，海洋技术在中国不断发展，人们日益关注海洋中各种生物资源的有效利用。海带中有效的成分很多，包括碘、多糖、甘露醇、膳食纤维、海藻酸等。如何提取这些成分是能否有效利用海带价值的关键。海带酶解物具有显著的降血压、抗氧化等生理活性。而海带酶解液常带有浅黄色，不仅给后续相关成分的测定和分离纯化带来了困难，且若将其深加工制成功能食品添加剂，其明显的浅黄色和腥味也使其在食品工业中的应用受到限制。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服传统海带深加工方法所制备的海带酶解液色泽不清、气味腥臭的缺陷，提供一种新的海带酶解液的制备工艺。
一种海带酶解液的制备工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将原料干海带粉碎，得到海带粉末；
(2)酶解：按料液比为1：45～55的比例向海带粉末中加入磷酸缓冲溶液，得到混合料；向混合料中加入混合料质量的0.2～0.5％比例的复合蛋白酶，水浴5～8h，得到海带粗酶解液；
(3)灭酶：将海带粗酶解液置于70℃～90℃的环境下灭酶10～20min，得到灭酶海带粗酶解液；
(4)过滤离心：将灭酶海带粗酶解液进行过滤，并在4500～5500r/min条件下离心10～20min，提取上清液；
(5)脱色：调节上清液的ph值为6～7，向上清液中加入活性炭后水浴40～60min，得到脱色海带酶解液；
(6)脱腥：调节脱色海带酶解液的ph值为5～6，向脱色海带酶解液中加入0.3～0.5g/100ml的酵母菌，并在20℃～40℃的环境下水浴40～60min，得到一次脱腥海带酶解液；向一次脱腥海带酶解液中加入1～3g/100ml的活性炭，并在35℃～50℃的环境下水浴40～60min，过滤、离心除去残留活性炭，得到脱色脱腥海带酶解液。
进一步的，所述步骤(2)之前还包括步骤(1.1)：
(1.1)过滤：采用200目的筛网对海带粉末进行过滤。
所述步骤(6)之后还包括步骤(7)：
(7)灭菌：将脱色脱腥海带酶解液在100℃～140℃环境下灭菌3～8min，得到海带酶解液。
所述步骤(2)中加入的磷酸缓冲溶液的ph值为7，水浴温度为45℃～55℃。
所述步骤(4)中采用100目的筛网对灭酶海带粗酶解液进行过滤。
所述步骤(5)中向上清液中加入0.05mol/l的naoh溶液来调节上清液的ph值，活性炭的添加量为1.0～2.0g/100ml，水浴温度为35℃～50℃。
所述步骤(6)中向脱色海带酶解液中加入0.05mol/l的磷酸缓冲溶液和0.05mol/l的柠檬酸溶液来调节脱色海带酶解液的ph值。
本发明较现有技术相比，具有以下优点及有益效果：本发明的制备工艺简单、操作易行，处理过程温和、安全性高、经济实用；通过本发明的制备工艺所生产的海带酶解液色泽及气味较好，适用于工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式并不限于此。
实施例1
本实施例的海带酶解液的制备工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：采用粉碎机将原料干海带粉碎，得到海带粉末。
(2)酶解：取10g海带粉末，按料液比为1:45的比例向海带粉末中加入450ml磷酸缓冲溶液，制备混合料；其中，加入的磷酸缓冲溶液的ph值为7。
混合料制备好后，向混合料中加入混合料质量的0.2％比例的复合蛋白酶，并在温度为45℃的环境下水浴5h，制得海带粗酶解液。
(3)灭酶：将海带粗酶解液置于70℃的环境下灭酶10min，得到灭酶海带粗酶解液。
(4)过滤离心：采用100目的筛网对灭酶海带粗酶解液进行过滤，将过滤后的灭酶海带粗酶解液在4500r/min条件下离心10min，去除海带滤渣，提取上清液；通过离心可以去除灭酶海带粗酶解中的微粒物质。
(5)脱色：向上清液中加入0.05mol/l的naoh溶液，以调节上清液的ph值，使上清液的ph为6。上清液的ph值调节好后，向上清液中加入活性炭，然后将加入了活性炭的上清液在温度为35℃的水浴环境中水浴40min，并过滤去除残留的活性炭，得到脱色海带酶解液。在此步骤中，活性炭的添加量为1.0g/100ml。
(6)脱腥：向脱色海带酶解液中加入0.05mol/l的磷酸缓冲溶液和0.05mol/l的柠檬酸溶液来调节脱色海带酶解液的ph值，使脱色海带酶解液的ph值为5。脱色海带酶解液的ph值调节好后，向脱色海带酶解液中加入酵母菌，并在20℃的环境下水浴40min，得到一次脱腥海带酶解液；其中，该酵母菌的加入量为0.3g/100ml。
对一次脱腥海带酶解液进行二次脱腥，具体的，向一次脱腥海带酶解液中加入活性炭，并在35℃的环境下水浴40min，水浴后进行过滤、离心处理，以除去残留活性炭，得到脱色脱腥海带酶解液。在二次脱腥中，活性炭的加入量为1g/100ml。
作为一种优选，在步骤(2)之前还可以执行步骤(1.1)；具体的，步骤(1.1)为采用200目的筛网对海带粉末进行过滤。
作为一种优选，所述步骤(6)之后还包括步骤(7)；具体的，该步骤(7)为将脱色脱腥海带酶解液在100℃环境下灭菌3min，得到海带酶解液。
通过感官评价对采用本实施例的制备工艺所制备的海带酶解液进行分析，经过活性炭脱色后，脱色率为到54.06％。其中，经过酵母菌发酵脱腥后得到的一次脱腥海带酶解液的感官值为6.1，该一次脱腥海带酶解液的颜色较浅，发酵味较重。经过活性炭二次脱腥后得到的脱色脱腥海带酶解液的感官值为8.9，溶液澄清透明，腥味较小。
通过hs-spme-gc-ms技术对采用本实施例的制备工艺所制备的海带酶解液进行分析；其中，酵母菌脱腥前的脱色海带酶解液检测到26种挥发性成分，经酵母菌发酵一次脱腥后的一次脱腥海带酶解液检测到35种挥发性成分，经活性炭二次脱腥后的脱色脱腥海带酶解液检测到21种挥发性成分，多肽损失率为29.38％。
脱腥步骤只采用活性炭来脱腥进行实验，实验结果为：酵母菌脱腥前的脱色海带酶解液检测到26种挥发性成分，经活性炭脱腥后酶解液检测到21种挥发性成分，但是多肽损失率为64.8％。
由上述可见，单纯的用活性炭脱腥，会造成较大的多肽损失率，用酵母先发酵，挥发性成分虽然增加，但经活性炭二次脱腥后，可以去掉较重的发酵味，同时降低多肽损失率。
实施例2
本实施例的海带酶解液的制备工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：采用粉碎机将原料干海带粉碎，得到海带粉末。
(2)酶解：取10g海带粉末，按料液比为1:50的比例向海带粉末中加入500ml磷酸缓冲溶液，制备混合料；其中，加入的磷酸缓冲溶液的ph值为7。
混合料制备好后，向混合料中加入混合料质量的0.3％比例的复合蛋白酶，并在温度为52.6℃的环境下水浴7.64h，制得海带粗酶解液。
(3)灭酶：将海带粗酶解液置于85℃的环境下灭酶15min，得到灭酶海带粗酶解液。
(4)过滤离心：采用100目的筛网对灭酶海带粗酶解液进行过滤，将过滤后的灭酶海带粗酶解液在5000r/min条件下离心15min，去除海带滤渣，提取上清液；通过离心可以去除灭酶海带粗酶解中的微粒物质。
(5)脱色：向上清液中加入0.05mol/l的naoh溶液，以调节上清液的ph值，使上清液的ph为6.5。上清液的ph值调节好后，向上清液中加入活性炭，然后将加入了活性炭的上清液在温度为45℃的水浴环境中水浴50min，并过滤去除残留的活性炭，得到脱色海带酶解液。在此步骤中，活性炭的添加量为1.0g/100ml。
(6)脱腥：向脱色海带酶解液中加入0.05mol/l的磷酸缓冲溶液和0.05mol/l的柠檬酸溶液来调节脱色海带酶解液的ph值，使脱色海带酶解液的ph值为5.5。脱色海带酶解液的ph值调节好后，向脱色海带酶解液中加入酵母菌，并在30℃的环境下水浴50min，得到一次脱腥海带酶解液；其中，该酵母菌的加入量为0.4g/100ml。
对一次脱腥海带酶解液进行二次脱腥，具体的，向一次脱腥海带酶解液中加入活性炭，并在45℃的环境下水浴50min，水浴后进行过滤、离心处理，以除去残留活性炭，得到脱色脱腥海带酶解液。在二次脱腥中，活性炭的加入量为1.5g/100ml。
作为一种优选，在步骤(2)之前还可以执行步骤(1.1)；具体的，步骤(1.1)为采用200目的筛网对海带粉末进行过滤。
作为一种优选，所述步骤(6)之后还包括步骤(7)；具体的，该步骤(7)为将脱色脱腥海带酶解液在121℃环境下灭菌5min，得到海带酶解液。
通过感官评价对采用本实施例的制备工艺所制备的海带酶解液进行分析，该海带酶解液色泽及气味较好，经过活性炭脱色后，其脱色率达到56.34％。其中，经过酵母菌发酵脱腥后得到的一次脱腥海带酶解液的感官值为6.75，该一次脱腥海带酶解液的颜色较浅，发酵味较重。经过活性炭二次脱腥后得到的脱色脱腥海带酶解液的感官值为9.5，溶液澄清透明，腥味较小。
通过hs-spme-gc-ms技术对采用本实施例的制备工艺所制备的海带酶解液进行分析；其中，酵母菌脱腥前的脱色海带酶解液检测到26种挥发性成分，经酵母菌发酵一次脱腥后的一次脱腥海带酶解液检测到35种挥发性成分，经活性炭二次脱腥后的脱色脱腥海带酶解液检测到20种挥发性成分，多肽损失率为28.29％。
2-乙基己醇、1-辛烯-3-醇、壬醛、庚醛、己醛、(e)-2-辛烯醛、(z)-2-庚烯醛、2-戊酮、2-庚酮、1-辛烯-3-酮、2-壬酮等是主要的腥味挥发性成分，由上述可见，经酵母菌一次脱腥后溶液增加了发酵味，但经过活性炭二次脱腥后，溶液中的2-戊酮、2-庚酮、1-辛烯-3-酮、2-壬酮等酮类全部脱除。
在脱腥步骤时只采用活性炭来脱腥进行实验，实验结果为：酵母菌脱腥前的脱色海带酶解液检测到26种挥发性成分，经活性炭脱腥后酶解液检测到20种挥发性成分，但是多肽损失率为64.25％。
由上述可见，单纯的用活性炭脱腥，会造成较大的多肽损失率，用酵母先发酵，挥发性成分虽然增加，但经活性炭二次脱腥后，可以去掉较重的发酵味，同时降低多肽损失率。
本实施例通过采用复合蛋白酶对海带进行酶解，用活性炭对酶解液进行脱色，用酵母菌发酵联合活性炭脱腥处理，将酶解液中的色素类物质及醛类、醇类、酮类等腥味物质有效地吸附分离，不仅脱色效果非常好，而且在很大程度上保护了营养成分。
实施例3
本实施例的海带酶解液的制备工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：采用粉碎机将原料干海带粉碎，得到海带粉末。
(2)酶解：取10g海带粉末，按料液比为1:55的比例向海带粉末中加入550ml磷酸缓冲溶液，制备混合料；其中，加入的磷酸缓冲溶液的ph值为7。
混合料制备好后，向混合料中加入混合料质量的0.5％比例的复合蛋白酶，并在温度为55℃的环境下水浴8h，制得海带粗酶解液。
(3)灭酶：将海带粗酶解液置于90℃的环境下灭酶20min，得到灭酶海带粗酶解液。
(4)过滤离心：采用100目的筛网对灭酶海带粗酶解液进行过滤，将过滤后的灭酶海带粗酶解液在5500r/min条件下离心20min，去除海带滤渣，提取上清液；通过离心可以去除灭酶海带粗酶解中的微粒物质。
(5)脱色：向上清液中加入0.05mol/l的naoh溶液，以调节上清液的ph值，使上清液的ph为7。上清液的ph值调节好后，向上清液中加入活性炭，然后将加入了活性炭的上清液在温度为50℃的水浴环境中水浴60min，并过滤去除残留的活性炭，得到脱色海带酶解液。在此步骤中，活性炭的添加量为2.0g/100ml。
(6)脱腥：向脱色海带酶解液中加入0.05mol/l的磷酸缓冲溶液和0.05mol/l的柠檬酸溶液来调节脱色海带酶解液的ph值，使脱色海带酶解液的ph值为6。脱色海带酶解液的ph值调节好后，向脱色海带酶解液中加入酵母菌，并在40℃的环境下水浴60min，得到一次脱腥海带酶解液；其中，该酵母菌的加入量为0.5g/100ml。
对一次脱腥海带酶解液进行二次脱腥，具体的，向一次脱腥海带酶解液中加入活性炭，并在50℃的环境下水浴60min，水浴后进行过滤、离心处理，以除去残留活性炭，得到脱色脱腥海带酶解液。在二次脱腥中，活性炭的加入量为3g/100ml。
作为一种优选，在步骤(2)之前还可以执行步骤(1.1)；具体的，步骤(1.1)为采用200目的筛网对海带粉末进行过滤。
作为一种优选，所述步骤(6)之后还包括步骤(7)；具体的，该步骤(7)为将脱色脱腥海带酶解液在140℃环境下灭菌8min，得到海带酶解液。
通过感官评价对采用本实施例的制备工艺所制备的海带酶解液进行分析，该海带酶解液色泽及气味较好，其脱色率达到56.34％。其中，经过酵母菌发酵脱腥后得到的一次脱腥海带酶解液的感官值为6.75，该一次脱腥海带酶解液的颜色较浅，发酵味较重。经过活性炭二次脱腥后得到的脱色脱腥海带酶解液的感官值为9.5，溶液澄清透明，腥味较小。
通过hs-spme-gc-ms技术对采用本实施例的制备工艺所制备的海带酶解液进行分析；其中，酵母菌脱腥前的脱色海带酶解液检测到26种挥发性成分，经酵母菌发酵一次脱腥后的一次脱腥海带酶解液检测到35种挥发性成分，经活性炭二次脱腥后的脱色脱腥海带酶解液检测到20种挥发性成分，多肽损失率为28.43％。。2-乙基己醇、1-辛烯-3-醇、壬醛、庚醛、己醛、(e)-2-辛烯醛、(z)-2-庚烯醛、2-戊酮、2-庚酮、1-辛烯-3-酮、2-壬酮等是主要的腥味挥发性成分，由上述可见，经酵母菌一次脱腥后溶液增加了发酵味，但经过活性炭二次脱腥后，溶液中的2-戊酮、2-庚酮、1-辛烯-3-酮、2-壬酮等酮类全部脱除。
脱腥步骤只采用活性炭来脱腥进行实验，实验结果为：酵母菌脱腥前的脱色海带酶解液检测到26种挥发性成分，经活性炭脱腥后酶解液检测到20种挥发性成分，但是多肽损失率为65.36％。
由上述可见，单纯的用活性炭脱腥，会造成较大的多肽损失率，用酵母先发酵，挥发性成分虽然增加，但经活性炭二次脱腥后，可以去掉较重的发酵味，同时降低多肽损失率。
如上所述，便可很好的实现本发明。