r>[0060] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P< 0? 05)。
[0061] 以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡生产性能的影响结果见表9。由 表可知，与对照组平均日增重相比，蛋白粉I各试验组鸡的日增重显著性提高，提高的幅度 分别为6. 06%、9. 31%、5. 34%(P< 0. 05)。表明蛋白粉在肉仔鸡上具有促进其生长的作用。 [0062] 2.以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡营养物质表观代谢率的影响 结果
[0063] 表10添加剂对肉仔鸡营养物质表观代谢率的影响
[0065] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0066] 蛋白粉对肉仔鸡营养物质表观代谢率的影响结果见表10。由表可知，对照组干 物质、粗灰分、钙和磷表观代谢率与各试验组间均无显著性差异（P> 0.05)。蛋白粉I2% 处理组肉仔鸡粗蛋白质表观代谢率显著性高于对照组，升高的幅度分别为6. 85%、7. 06%和 8. 25% (P〈0. 05)。说明2. 0%蛋白粉的用量有利于营养物质的消化吸收，在肉仔鸡饲料中可 以提1?营养物质的利用效率。
[0067] 3.以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡免疫器官指数的影响结果
[0068] 表11添加剂对肉仔鸡免疫器官指数的影响(单位：g/kg)
[0070] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0071] 蛋白粉对肉仔鸡免疫器官指数的影响结果见由表11。由表可知，对照组脾脏指 数、胸腺指数、法氏囊指数显著低于蛋白粉组，下降幅度脾脏指数分别为14. 72%、17. 75%、 14. 72% (P〈0. 05);胸腺指数分别为15. 79%、17. 95%、11. 46%、（P〈0. 05);法氏囊指数分别为 27. 71%、31. 031%、20. 00% (P〈0. 05)，表明蛋白粉对肉仔鸡具有非常好的免疫活性。
[0072] 4.以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡十二指肠、空肠、回肠消化酶 活性的影响结果
[0073] 表12添加剂对肉仔鸡十二指肠消化酶活性的影响(单位：U/mg)
[0076] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0077] 表13添加剂对肉仔鸡空肠消化酶活性的影响(单位：U/mg)
[0079] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0080] 表14添加剂对肉仔鸡回肠消化酶活性的影响(单位：U/mg)
[0082] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0083] 由表12,表13和表14可知，蛋白粉I各处理浓度组胰蛋白酶活性增加显著。家禽 对以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂的消化是一个由胃蛋白酶、肠肽酶、糜蛋白酶和 胰蛋白酶等多种酶共同参与协作的过程，其中胰蛋白酶在家禽蛋白质的水解过程中起主要 作用，饲料氨基酸消化主要取决于胰蛋白酶。因此，相较于鱼粉，蛋白粉可以促进家禽对各 种营养物质的消化作用。
[0084] 5.以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡盲肠微生物数量的影响结果
[0085] 表15添加剂对肉仔鸡盲肠微生物数量的影响(单位：cfu/g)
[0087] 注：①表中相同栏或列中数值具不同上标者差异显著（P〈0. 05)。
[0088] ②大肠杆菌与沙门氏菌数量表示为平均值土标准误X104cfu/g，双歧杆菌和乳 酸菌为平均值土标准误X107cfu/g。
[0089] 动物消化系统对养分的消化吸收能力，部分依赖于肠道中寄生的微生物菌群分布 及其总量。微生物菌群数量在很大程度上依赖于日粮作为最终代谢底物的来源，日粮成分 和养分浓度的变化对肠道微生物菌群数量具有显著的影响。盲肠是消化道微生物活动最多 和最适宜的器官，其中，厌氧菌占主导地位（主要是双歧杆菌、乳酸杆菌等）。本研究结果表 明，蛋白粉12%处理组乳酸菌和双歧杆菌的数量均高于其他组，而大肠杆菌和沙门氏菌的 数量却最低。与鱼粉相比，蛋白粉更有利于提高肉仔鸡盲肠内有益菌的数量及改善肠道内 微生态环境。
[0090] 6、以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡小肠形态结构的影响结果
[0091] 表16添加剂对肉仔鸡十二指肠形态结构的影响(单位：iim)
[0093] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0094] 表17以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡空肠形态结构的影响(单 位：Um)
[0096]注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0097]表18以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂对肉仔鸡回肠形态结构的影响(单 位：Um)
[0099] 注：同行肩标字母相同者差异不显著（P> 0.05)，字母相邻者差异显著（P < 0? 05)。
[0100] 由于隐窝深度反映了细胞生成率，细胞不断从隐窝基部向绒毛端部迁移、分化，以 补充绒毛上皮的正常脱落。如果此过程减慢，基部的细胞生成率降低，使隐窝变浅，隐窝变 浅表明肠上皮细胞成熟率上升，吸收功能增强。隐窝变深说明组织代谢加快，这意味着所需 维持营养增加，动物生产效率下降。实验结果表明，蛋白粉12%处理组均可使鸡的十二指 肠、空肠和回肠的隐窝变浅，说明其可促进肉仔鸡的吸收功能。
[0101] 由于肠绒毛是消化道内营养物质消化吸收的主要部位，绒毛的高度一定程度上反 映了肠壁的消化吸收功能。大量研究表明肠粘膜的变化程度与日粮类型有关。因此本试验 结果说明：蛋白粉12%处理组对肉仔鸡的十二指肠、回肠和回肠绒毛损伤最小，从而有利于 肠绒毛对营养物质的吸收利用，促进了肉仔鸡的生长发育。
[0102] 以上试验结果表明，在肉仔鸡日粮中，以上述制备所得水解蛋白粉作为添加剂的 最佳添加水平为2. 0%，且蛋白粉对肉仔鸡的生长性能的作用显著优于鱼粉。
【主权项】
1. 一种功能蛋白饲料添加剂，其特征在于：添加剂为经蛋白酶的酶法水解贝类加工下 脚料所得分子量为〇. 8-25KDa的产物。2. 按权利要求1所述的功能蛋白饲料添加剂，其特征在于：所述蛋白酶为枯草杆菌中 性蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或几种的混合。3. -种权利要求1所述的功能蛋白饲料添加剂的制备方法，其特征在于： 以贝类加工下脚料为原料经粉碎后在40-55°C下调节原料pH至4. 5-8,而后加入蛋白 酶搅拌均匀后再次调节PH至4.5-8(即蛋白酶的适宜pH值)下进行酶解，酶解后在95-KKTC 加热10-30min钝化蛋白酶，蛋白酶失活后酶解液离心收取上清液，上清液浓缩干燥即为添 加剂。4. 按权利要求3所述的功能蛋白饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述添加剂为 经蛋白酶的酶法水解贝类加工下脚料所得分子量为〇. 8-25KDa的产物。5. 按权利要求3所述的功能蛋白饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述蛋白酶为 枯草杆菌中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或几种的 混合。6. 按权利要求3所述的功能蛋白饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述酶解液在 3000-6000rpm下离心5-20分钟，分出的上清液过截留分子量< 25KDa的超滤膜系统，然后 喷雾干燥即为添加剂。7. 按权利要求1所述的功能蛋白饲料添加剂的应用，其特征在于：所述添加剂可应用 于畜禽饲料中。8. 按权利要求7所述的功能蛋白饲料添加剂的应用，其特征在于：所述添加剂的加入 量为饲料的质量百分比为1-3%。9. 按权利要求7所述的功能蛋白饲料添加剂的应用，其特征在于：所述的畜禽饲料为 猪或鸡饲料。
【专利摘要】本发明属于饲料添加剂领域，具体的说是一种功能蛋白饲料添加剂及其制备方法。添加剂为经蛋白酶的酶法水解贝类加工下脚料所得分子量为0.8-25KDa的产物。具体制备，以贝类加工下脚料为原料经粉碎后在40-55℃下调节原料pH至4.5-8，而后加入蛋白酶搅拌均匀后再次调节pH至4.5-8（即蛋白酶的适宜pH值）下进行酶解，酶解后在95-100℃加热10-30min钝化蛋白酶，蛋白酶失活后酶解液离心收取上清液，上清液浓缩干燥即为添加剂。本发明获得了作为饲料添加剂的新型功能蛋白肽粉，将废弃的下脚料变废为宝，充分利用了海洋贝类资源，提高了企业经济效益，减少了环境污染。
【IPC分类】A23K1/18, A23K1/165, A23K1/10
【公开号】CN104970192
【申请号】CN201410148862
【发明人】邢荣娥, 刘松, 秦玉坤, 陈晓琳, 李克成, 于华华, 李荣锋, 胡林峰, 李鹏程
【申请人】中国科学院海洋研究所
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2014年4月14日