lOmin，取上清液 过滤，得到对虾蛋白酶解液； 4) 对虾蛋白酶解液中重金属的脱除 取对虫下蛋白酶解液IOmL于生物试管中，用0. 50mol/L的NaOH和饱和梓檬酸溶液调节pH为6,加入步骤2)制备的聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球150粒，盖紧试管， 在35°C温度、120r/min下恒温振荡16h。
[0027] 按照中华人民共和国国家标准，对重金属脱除前后酶解液中重金属含量进行检 测，考察重金属脱除率；对酶解液中的CcUPb、Zn和Ni进行了检测，检测结果见表4(ND为 未检出）； 表4对虾酶解液中重金属脱除检测结果
对虾酶解液中Cd的脱除率为92. 3%，Pb和Zn全部脱除，Ni未检出。
[0028] 实施例5 1) 聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸（PAAS-SA-PASP)溶液的制备 称取2gPAAS(分子量为5万~10万），溶于IOOmL去离子水中，完全溶解后分5次加 入IgSA，SA每次加入量均为0. 2g，避免一次加入过多溶胀后成团不易分开，充分混合均 匀后，按照每次加入量为0.2g~0.4g分3次加入PASP(分子量为1000~5000)，使PASP 浓度为〇. 〇30mol/L，充分溶解后，继续搅拌30min，使上述物质充分反应。反应结束后；在 200W功率下超声波处理2min以除去气泡，然后静置12h使其进一步充分反应，得到聚丙烯 酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸溶液； 2) 聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸（PAAS-SA-PASP)凝胶球的制备 先配制饱和硼酸溶液，再加入固体CaCl2，固体CaCl2的加入量占溶液总质量的2%，得 到CaCl2质量浓度为2%的饱和H3B03溶液； 将配制的聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸溶液置于5ml注射器内，经注射器逐滴 加入到CaCl2质量浓度为2%的饱和H3B03溶液中，控制每滴体积为0. 0060mL~0.OlmL，不 断搅拌成为凝胶球，静置24h固定后，去离子水反复清洗3次，得到直径为2mm~3mm的聚 丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球，置于去离子水中保存备用； 3) 扇贝蛋白酶解液的制备 将扇贝去壳取肉匀浆8min得到匀浆液，取匀浆液与去离子水按照质量比1:3混合，在 550r/min转速下电动搅拌40min，用I.Omol/L的NaOH和饱和柠檬酸溶液调节pH为8,得到 待酶解的匀浆稀释液，加入占匀浆稀释液质量分数为〇. 44%的胰蛋白酶，在50°C恒温条件 下酶解4h，煮沸IOmin终止酶解反应后冷却至室温，于1200r/min离心lOmin，取上清液过 滤，得到扇贝蛋白酶解液； 4) 扇贝蛋白酶解液中重金属的脱除 取扇贝蛋白酶解液IOmL于生物试管中，用I.Omol/L的NaOH和饱和饱和柠檬酸溶液调 节pH为6,加入步骤2)制备的聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球100粒，盖紧试 管，在35°C温度、150r/min下恒温振荡24h。
[0029] 按照中华人民共和国国家标准，对重金属脱除前后酶解液中重金属含量进行检 测，考察重金属脱除率；对酶解液中的CcUPb、Cu和Co进行了检测，检测结果见表5(ND为 未检出）； 表5扇贝酶解液中重金属脱除检测结果
扇贝酶解液中Cd的脱除率为92. 7%，Pb的脱除率为94. 4%，Cu的脱除率为90. 9%，Co未检出。
[0030] 以上仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人 员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、 等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是： 具体步骤如下： 1) 聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸（PAAS-SA-PASP)溶液的制备 称取2g~3g聚丙烯酸钠，溶于IOOmL~200mL去离子水中，完全溶解后，分3次~5 次加入Ig海藻酸钠，充分混合均匀后，分3次~5次加入聚天冬氨酸，使聚天冬氨酸浓度为 0. 030mol/L~0. 050mol/L，充分溶解后，继续搅拌20min~40min，在160W~240W功率下 超声波处理Imin~3min，然后静置8h~16h，使其进一步充分反应，得到聚丙烯酸钠-海 藻酸钠-聚天冬氨酸溶液； 2) 聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸（PAAS-SA-PASP)凝胶球的制备 将配制的聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸溶液滴加入到CaCl2质量浓度为2%~ 5 %的饱和H3BO3溶液中，不断搅拌形成凝胶球，静置24h~48h固定后，去离子水清洗3次~ 5次，得到聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球，置于去离子水中保存备用； 3) 海洋动物蛋白酶解液的制备 将新鲜海洋动物肉匀浆3min~8min，取匀浆液与去离子水按照质量比1:2~1:3混 合，在500r/min~600r/min转速下电动揽拌40min~60min，调节pH 2~8,得到待酶解的 匀浆稀释液，然后加入占匀浆稀释液质量分数为〇. 44%~1. 30 %的蛋白酶，在37°C~60°C 酶解3h~5h，酶解反应后在100°C下灭酶5min~lOmin，冷却后离心处理，取上清液过滤， 得到海洋动物蛋白酶解液； 4) 海洋动物蛋白酶解液中重金属的脱除 取步骤3)制备的海洋动物蛋白酶解液，调节pH 3~6,加入步骤2)制备的聚丙烯酸 钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球40粒~200粒，在30°C~40°C温度、120r/min~200r/ min转速下恒温振荡12h~24h。2. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：滴 加聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸溶液时，控制每滴体积为〇. 0060mL~0.0 lmL。3. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：所 述的蛋白酶为木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中的一种。4. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：步 骤4)海洋动物蛋白酶解液中重金属的脱除时，IOmL~50mL海洋动物蛋白酶解液加入40 粒~200粒聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸（PAAS-SA-PASP)凝胶球。5. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：所 述聚天冬氨酸的加入量为〇. 4g~I. 4g。6. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：所 述聚丙稀酸钠分子量为5万~10万，所述海藻酸钠的每次加入量为0. 2g~0. 4g ;所述聚 天冬氨酸分子量为1000~5000,每次加入量为0.1 g~0. 5g。7. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：步 骤3)和步骤4)调pH值时，使用柠檬酸溶液或浓度为0? 50mol/L~1.0 mol/L的NaOH08. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：步 骤3)离心处理时，离心转速为1000r/min~1500r/min，离心时间为5min~15min。9. 根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：所 述的海洋动物为贝类、鱼类、虾蟹甲壳类、棘皮类动物中的一种。10.根据权利要求1所述的从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，其特征是：所 述的海洋动物为牡蛎、文蛤、杂色蛤、马氏珠母贝、扇贝、蚬子、鳕鱼、黄鱼、带鱼、鱿鱼、对虾、 毛虾、青蟹、梭子蟹、海胆、海参、鲍鱼中的一种。
【专利摘要】一种从海洋动物蛋白酶解液中去除重金属的方法，步骤是：首先制备聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球，然后提取海洋动物蛋白酶解液，检测酶解液中重金属阳离子浓度，取酶解液于生物试管中，调节pH，加入聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球，在30℃～40℃恒温振荡12h～24h，脱除酶解液中重金属阳离子。优点是：制备凝胶球的原料海藻酸钠、聚天冬氨酸均为天然绿色原料，聚丙烯酸钠为食品级，安全无毒，可确保食品安全性；聚丙烯酸钠-海藻酸钠-聚天冬氨酸凝胶球吸附容量大，选择性强，可高效脱除酶解液中重金属，有效保护酶解液中的营养成分，凝胶球弹性和机械性能优良，易于再生，可重复使用。
【IPC分类】A23L1/015
【公开号】CN104970274
【申请号】CN201510290510
【发明人】励建荣, 何蒙, 陈宏 , 赵刚, 密更
【申请人】渤海大学
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年5月29日