一种用于防治猪腹泻的饲料添加剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及饲料领域，具体设及一种家畜饲料添加剂及其应用。
【背景技术】
[0002] 畜类饲料添加剂是指在畜类饲料生产加工、使用过程中添加的少量或微量物质， 在畜类饲料中用量很少但作用显著。畜类饲料添加剂是现代畜类饲料工业必然使用的原 料，对强化基础畜类饲料营养价值，提高动物生产性能，保证动物健康，节省畜类饲料成本， 改善畜类产品品质等方面有明显的效果。
[0003] 猪腹泻病是因猪感染病毒产生的，各种年龄的猪都能感染发病。哺乳猪、架子猪或 肥育猪的发病率很高，尤W哺乳猪受害最为严重，母猪发病率变动很大，约为15-90%。病猪 是主要传染源。病毒存在于肠绒毛上皮细胞和肠系膜淋己结，随粪便排出后，污染环境、饲 料、饮水、交通工具及用具等而传染。如果一个猪场陆续有不少窝仔猪出生或断奶，病毒会 不断感染失去母源抗体的断奶仔猪，使本病呈地方流行性，在运种繁殖场内，猪流行性腹泻 可造成5-8周龄仔猪的断奶期顽固性腹泻。猪腹泻病潜伏期一般为5-8天，人工感染潜伏期 为8-24小时。主要的临床症状为水样腹泻，或者在腹泻之间有呕吐。呕吐多发生于吃食或吃 奶后。症状的轻重随年龄的大小而有差异，年龄越小，症状越重。一周龄内新生仔猪发生腹 泻后3-4天，呈现严重脱水而死亡，死亡率可达50%，最高的死亡率达100%。病猪体溫正常 或稍高，精神沉郁，食欲减退或废绝。断奶猪、母猪常呈精神萎顿、厌食和持续性腹泻大约一 周，并逐渐恢复正常。少数猪恢复后生长发育不良。肥育猪在同圈饲养感染后都发生腹泻， 一周后康复，死亡率成年猪症状较轻，有的仅表现呕吐，重者水样腹泻3-4天可自 愈。
[0004] 抗生素是治疗猪腹泻病的主要饲料添加剂，其在防病治病的同时，还具有促进动 物生长、提高饲料转化率的功效。除此之外，还有提高动物产品的品质，减少动物的粪臭，从 而改善饲养环境等功效。不同种类的抗生素用于饲料添加的剂量及所具有的促进生长效果 不尽相同。但总体来说，用量一般在每吨饲料中添加10~50g抗生素之间。效果上一般来说 可提高猪鸡生产速率和饲料利用率10%~15%，降低死亡率5%，其中对鸡的作用要稍低于 对猪的作用。W盐霉素为例，其对肉鸡的育成率可提高37~76个百分点，平均增重可提高 5%~38%，饲料消耗降低2%~37%。在W盐霉素进行的产蛋鸡饲料添加试验结果显示，其 平均初产日龄增加13天，产卵重量提高8.1 %，产卵率提高3.5%。由此可见，抗生素作为饲 料添加剂应用的效果是非常明显的。
[0005] 随着抗生素作为饲料添加剂使用的日益增加，也出现了反对将抗生素作为饲料添 加剂使用的意见，而且运种反对意见在近年愈加强烈。持反对意见的主要是从事医用抗生 素研究和应用的人员。他们认为对食用动物长时间低剂量地使用抗生素，无论用作饲料添 加剂还是预防用药，都比短时间大剂量治疗用药更会引起生态环境对耐药菌的筛选，并且 细菌中耐药基因可W在人群中细菌、动物群中细菌和生态系统中细菌间互相传递，由此可 导致致病菌产生耐药性，从而引起人类和动物感染疾病治疗的失败。事实上，自从抗生素被 发现w来，其使用寿命确实变得越来越短。在青霉素刚进入临床应用时，其使用剂量仅为 几，十个单位，到60~70年代，青霉素在医用临床上的一般肌肉注射治疗剂量为10万单位， 随着青霉素应用的更加普及，其使用剂量不得不迅速增大。到目前，临床上使用80万单位的 肌肉注射剂量进行治疗，效果甚至还不如从前。在不断出现的新抗生素中，临床使用寿命均 变得越来越短。运种现象的出现，使得临床上对新抗生素的需求越来越大。由于发现一种新 抗生素所需的投入非常巨大，运种现象造成了经济上的极大损失。况且，随着新抗生素的增 加，发现新抗生素的难度已变得越来越大。
[0006] 为解决上述问题，科研人员不断探索家畜饲料添加剂新品种W代替抗生素。一些 学者开始从免疫学角度对家畜病害防治进行研究，认为在饲料中添加免疫增强剂是增强家 畜免疫功能，抵抗腹泻病的一种有效实用的方法。但是，动物的免疫系统是相对稳定的，在 正常情况下免疫系统会将机体的免疫功能整合在一个适宜的水平。免疫增强剂只可能较大 幅度地提高免疫功能低下的家畜的免疫水平，而对于免疫功能正常的家畜会因机体自身免 疫系统的调节阻止其免疫水平过高而影响免疫增强剂的真实效果，况且免疫水平也并非越 高越好，免疫水平过高会导致免疫亢进，引起各种类型的超敏反应、炎症和自身免疫性疾 病。在众多的免疫增强剂中，溶菌酶和多糖类成分因其低药残、生物毒性小的优点而引起了 学者们重视。
[0007] 溶菌酶（lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酷基胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohy化lase)，是一种能破坏致病菌细胞壁中黏多糖的水溶性蛋白 酶。它是由Fleming在1922年在人唾液和眼泪中发现的存在溶解细菌细胞壁的酶，故命名为 溶菌酶。此后，在鸟类、家禽的蛋清和哺乳动物泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘W及体液、组织 细胞内等发现了溶菌酶，其中W蛋清中含量最丰富（约0.3%);在一些植物体如卷屯、菜、萝 l·、无花果和微生物体内也存在溶菌酶。研究发现枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)中的 溶解子就是溶菌酶的前身。
[0008] 溶菌酶本身是一种碱性蛋白质，在酸性环境下，溶菌酶的热稳定性很强:抑值3.0 时96°C加热处理15min仍能保持87%的酶活性。在自然条件下，大多数溶菌酶化学性质稳 定，即使当pH值在1.2-11.3范围内剧烈变化，溶菌酶的空间结构仍可W保持不变，酶活性的 变化也不显著。但碱性环境很容易使溶菌酶的空间结构破坏，此时对热的稳定性较差，当处 于碱性pH值范围时，溫度会使酶活力损失非常快。
[0009] 溶菌酶能有效水解细菌细胞壁肤聚糖，其水解位点是N-乙酷氨基葡萄糖胺(NAM) 的1位碳原子和N-乙酷胞壁酸(NAG)的4位碳原子间的β-1，4糖巧键，可使细菌细胞壁变得松 弛，失去对细胞的保护作用，细菌内容物溢出而使细胞壁溶解，最后细胞溶解死亡。溶菌酶 之所W会对革兰阳性细菌有很强杀伤力，就是因为革兰阳性菌的细胞壁主要是由胞质壁和 憐酸质组成的，其主要成分胞质壁又是杂多糖与多肤组成的糖蛋白，而杂多糖正是由ΝΑΜ和 NAGWi3-l，4糖巧键联结的，溶菌酶催化水解该糖巧键使细菌细胞壁破裂而死亡。而革兰阴 性菌内壁层为肤聚糖，因此溶菌酶只能破坏革兰阳性菌细胞壁，而对革兰阴性菌作用不大。
[0010] 溶菌酶在中性体液环境下带有大量正电荷，可与带有负电荷的病毒蛋白直接作 用，与DNA、RNA、脱附基蛋白相结合形成复盐，使病毒失活。在被瘤疹病毒感染的化la细胞培 养液中加溶菌酶后有抑制细胞变性作用。溶菌酶也可抑制腺病毒生长，可用于带状瘤疹、腮 腺炎、鸡水痘、肝炎及流感等病毒性疾患治疗。
[0011] 溶菌酶可保持机体生理平衡，参与体内多种免疫反应，是机体内重要的非特异性 免疫因子之一。溶菌酶本身具有T细胞表位，能诱导2型(Th2)T辅助细胞反应。口服溶菌酶能 诱导小鼠产生全身性化1和化2免疫反应，增强免疫功能，因此，口服溶菌酶具有控制上呼吸 道感染和治疗频疾的功能。此外，溶菌酶还具有激活血小板的功能，可改善组织局部血液循 环障碍，分解脈液，增强局部防卫功能，从而体现其止血、消肿及加快机体损伤组织的修复 作用。它还可作为一种宿主抵抗因子，对组织局部起保护作用。
[0012] 溶菌酶还可与各种诱发炎症的酸性物质结合，减少细菌内毒素释放，从而减轻内 毒素血症发生，减缓炎症发生过程，并对抗生素有一定增效作用，改善组织基质的黏多糖代 谢，起到抗菌消炎、修复组织的作用。经试验证明，用巧中纤维素共聚物将人溶菌酶和蛋白水 解酶偶联，可显著提高溶菌酶抗菌能力，加速伤口愈合。
[0013] 近年来，随着研究的深入，人们不仅对溶菌酶的作用机制有更进一步了解，且根据 其溶菌特性，已将其广泛应用于医疗、食品