一种益生菌脂性混悬液滴剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种益生菌脂性混悬液滴剂及其制备方法，特别用于偏厌氧性益生菌 活菌在脂性混悬液中的分散性和稳定的活菌数的制备方法。
【背景技术】
[0002] 益生菌己经是被国际所公认的一类具有特定保健功能的肠道微生物，益生菌因其 特有的保健功能在食品和临床应用中日益广泛，其作用主要有：调节人体肠道微生物的生 存环境，促进肠内乳酸菌的发育和提高乳糖利用率等功效，起整肠作用;对慢性肠炎、肠易 激综合征、腹泻、便秘等胃肠道疾病均有一定的预防和治疗效果；更具有调节人体免疫系 统、保护肝脏、降低血液中胆固醇、防止细胞老化和调节人体机能等多种作用。
[0003] 益生菌也日益广泛的应用于治疗婴幼儿疾病中。婴幼儿时期是发病率和死亡率都 较高的特殊阶段，此时期胃肠功能、免疫功能尚不完善，机体抵抗力较弱，极易发生消化功 能紊乱、肠吸收不良及感染性疾病。此阶段维持肠道菌丛平衡，保持益生菌的优势地位，对 婴幼儿健康影响极大。
[0004] 益生菌能增强婴幼儿肠道的抵抗力，预防腹泻的发生;并分泌消化酶，增进食物在 体内的消化吸收。在调节免疫功能、治疗小儿腹泻病、治疗小儿过敏性疾病、治疗坏死性小 肠结肠炎、治疗炎症性肠病等疾病都有较显著效果。
[0005] 因益生菌制剂是用以对机体及其内环境提供有益的活菌，改善人体微生态平衡。 因此，单位制剂所含活菌数是评价益生菌制剂的重要标准之一。益生菌制剂中活菌数及其 存活时间与制剂剂型、储存条件有非常密切的关系。由于绝大部分益生菌是厌氧或偏厌氧 活菌，一般怕光、怕热、怕湿。温度越高，湿度越大，活菌生存时间越短，尤其是液体制剂，处 于其中的微生物新陈代谢活跃.容易导致制剂腐败变质，导致活菌数损失殆尽。
[0006] 有研究表明，制剂中水分含量与益生菌存活时间成反比。各种剂型中，冻干粉制剂 所含益生菌存活时间最长，其次为颗粒剂、片剂，凝胶剂、胶囊剂以及水液体制剂，而水液体 剂的益生菌存活时间最短。
[0007] 目前市场上各种益生菌制剂产品中，大多大多添加不同益生菌及各种功能性果蔬 食品发酵而制成的饮料、糖果制品、冰淇淋甜点等。
[0008] 为达到对人体的保健效果，益生菌需要在代谢中稳定并能以活体形式到达产品成 肠道中，能起到维护肠道健康的最低的益生菌的数量水平为IO 6~IO7CFlVml。液体产品中的 益生菌活菌浓度低，尚无法在常温下长时间保藏，也制约其产业化进程。
[0009] 现有的各种益生菌制剂中，固体制剂其活菌相对较稳定，但其不适用与婴幼儿服 用。而比较适用于婴幼儿服用的液体制剂，国内现有的益生菌液体制剂绝大部分都为发酵 水制剂，其益生菌活菌数量很低，特别是非密封室温环境中很难保证其稳定的活菌数。且由 于益生菌制剂的治疗效果主要依赖其中的活体微生物，摄入足量的益生菌是此类制剂充分 发挥疗效的保证之一，由于液体水制剂活菌数量很低，因此其服用量较大。
[0010] 现有研究资料报道，益生菌用微胶囊技术包埋后再制备成水液体制剂，可提高益 生菌在液体制剂中存活率。
[0011]微囊技术包埋益生菌可用的包材有各类蛋白、能形成胶体的各类大分子聚合纤维 材料、各类多糖等。主要包埋手段有：
[0012] 喷雾干燥，其主要问题是干燥时65 ' C的温度以上，核糖体和/或蛋白质变性以及细 胞壁损伤是可引起大量益生菌热死亡。喷雾干燥产品其本身益生菌含量就较低，且制备产 品时复水困难。
[0013] 冷冻干燥，主要问题是很高的能耗成本、冷冻干燥法制备微囊的生产成本比喷高 30~50倍。且生产过程时间过长，微囊产品是多孔结构不利于保护囊核益生菌活性。
[0014] 乳化法，油的损耗和不可回收是个很大的问题，而且在乳化过程中，激烈的均质环 境会造成菌体的大量死亡，且制备出来的微胶囊益生菌在模拟胃液中对益生菌所提供的保 护十分有限。
[0015] 挤压法。因为微球的形成速度缓慢，这种方法很难扩大生产规模。
[0016] 相分离法，乳化过程会使大量菌死亡，且相分离法操作复杂，很难形成在大规模工 业化生产，特别是制备油包水型的微胶囊尚存在许多工艺上的困难，难以获得千燥的粉末 产品。
[0017] 复凝聚法，很难保证益生菌能包埋进入两种带相反电荷的壁材物质的其中一种 中，包埋率很低。因此包埋过程中，益生菌损失很大。
[0018] 基于上述种种原因，微囊技术制备的益生菌液体制剂国内尚未有生产规模的产 品。
[0019] 益生菌脂类液体产品是最近发展起来的一种益生菌剂型，是益生菌在油脂类溶剂 中分散形成的一种滴剂产品，国内外都未见相关研究资料报道，国内未见有市售相应产品。 有市售的国外产品，但这类产品主要存在的问题是：
[0020] 1.生产过程中容易污染。灌装过程中益生菌在储罐中易沉淀与底部，导致每个制 剂单位包装益生菌含量不均匀。
[0021] 2.益生菌在脂性混悬液中都沉淀于液体产品包装底部，存储时间较长的产品，底 部益生菌沉淀结块，很难摇匀。
[0022] 3.配方不合理，在保质期内，益生菌存活率快速下降。
【发明内容】
[0023] 本发明的目的在于提供一种益生菌脂性混悬液滴剂及其制备方法，主要解决益生 菌液体产品中活菌存活率低。本发明产品和方法能保持产品在保质期内其活菌含量的相对 稳定。产品中的益生菌在脂性混悬液中能有相对动力稳定性，货架期内，益生菌能较均匀松 散分布于包装容器下半部。反转包装容器，悬浮益生菌就能在溶剂中均匀分布，便于滴出服 用。且服用量小，该产品特别适用于婴幼儿服用。
[0024] 为实现上述目的，本发明的技术方案是：
[0025] 一种益生菌脂性混悬液滴剂，其特征在于:每100mL产品中各组分用量为：
[0027] 所述的益生菌脂性混悬液滴剂，其特征在于:所述的植物油是葵花籽油，大豆油、 橄榄油、玉米油和亚麻籽油。
[0028] 所述的益生菌脂性混悬液滴剂，其特征在于:所述的中链酸甘油酯可以是辛癸酸 甘油酯，癸酸甘油酯或月桂酸甘油酯。
[0029] -种如上所述的益生菌脂性混悬液滴剂的制备方法，其特征在于：它包括如下制 备步骤：
[0030] (1)配料前先将配料锅及与灌装机相连的管道、菌粉锅及与配料锅相连的软管灭 菌，并先后用经HEAP过滤装置无菌过滤的热风，冷风干燥，冷至室温到30°C以下；
[0031] (2)按比例称量中链酸甘油酯、植物油、蔗糖單甘酯、维生素 E、菌粉，备用；
[0032] (3)将按方称量的中链酸甘油酯和蔗糖單甘酯(蔗糖單甘酯也可不加)投入带搅拌 受压夹套锅配料锅中，将按方称量的植物油投入另一个带搅拌受压夹套锅配料锅中，分别 加盖密封，夹套蒸汽加热；
[0033] (4)分别将两个灭菌锅夹套蒸汽加热升温，稍开放气阀放掉锅内空气后关闭阀门， 使温度升至121°C，保持20分钟后，关闭夹套蒸汽，夹套通入冷却水冷，边冷却，边搅拌，冷却 至室温；
[0034] (5)在活动无菌室内的层流罩下，将按方称量的菌粉和维生素 E(维生素 E也可不 加)加入菌粉锅中，加盖密封并与配料锅软管以及中链酸酯灭菌配料锅连接；
[0035] (6)用经无菌过滤的压缩空气将菌粉锅中的菌粉全部压入中链酸酯灭菌配料锅 中，同时快速搅拌，加菌完成后，降低搅拌速度，慢慢搅拌，直至菌粉在中链酸酯或蔗糖單甘 酯中链酸酯溶液中全部均匀分散；
[0036] (7)将已按配方称量并按上述步骤(4)灭菌冷却的植物油慢慢加入中链酯灭菌配 料锅中，边加边搅拌，加完后持续搅拌，直至中链酸酯、植物油和菌粉全面均匀分散混合，准 备灌装；
[0037] (8)打开通向灌装机的阀门，配料锅内边搅拌，边灌装，搅拌速度以始终保持菌粉 在配料锅内整体均匀分散为度，以确保每瓶产品中菌粉含量均匀。
[0038]配方的选择
[0039]从益生菌性质看，由于益生菌是一种活性微生物体，其直径一般都大于IOOnm，不 可能完全溶解与任何溶液液中形成透明真溶液，或有丁达尔效应的胶体，它在任何性质的 溶液中只能形成一种混悬体。
[0040] 大部分益生菌能与水形成相对稳定的混悬体，但由于益生菌在水溶液中新陈代谢 活跃.存活率会快速下降，且大部分益生菌都是厌氧或偏厌氧性质，而水相对于其他脂性液 体其溶解氧或通氧量都较高，更加速其存活率下降。一般在水溶液制剂中，益生菌最高存活 约 IO5 ~IO6CFlVml。
[0041] 我们首先考虑提高益生菌存活率，因此选择益生菌新陈代谢不活跃的、溶解氧低 且氧密封性高的脂性溶剂作为益生菌制剂主要分散介质。因本发明所涉及的产品主要是用 于婴幼儿，安全是必须要重点考虑的，因此我们在众多脂性溶剂中选用普通食用植物油作 为本发明的主要溶媒，在大豆油、玉米油、葵花籽油、橄榄油、亚麻籽油等多种植物油中，其 中葵花籽油、橄榄油和亚麻籽油相对于其它种类植物油，有较强的抗氧化性，有研究表明， 抗氧化剂环境能提高益生菌存活率。同时从成本考虑