抑制成年唐氏综合症患者认知退化的方法

专利名称：抑制成年唐氏综合症患者认知退化的方法
技术领域：
本发明涉及对药剂的发现，该药剂可抑制糖皮质激素受体的生物作用，并可用于预防、逆转或抑制成年唐氏综合症(Down’s syndrome)患者认知退化的方法中。
背景技术：
唐氏综合症(DS)是最常见的与弱智有关的遗传原因，并且可能是最早被鉴定的与弱智相关的疾病(Pulsifer，J Int Neuropsychol Soc 2159-76(1996))。DS起源于三种染色体异常中的一种。最常见(95％的病例)的唐氏综合症是第21对染色体三体性的结果，或是在其它的双倍体细胞中出现多余的21号染色体的结果。第21对染色体三体性通常是在配子的减数分裂时期21号染色体不分离造成的，并导致成年后代的染色体总数达到47条。DS也可能是当21号染色体片段依附于另一条染色体上，最常见的是依附于14号染色体上时而发生染色体易位的结果(约2-4％的病例)。最少见的DS情况是在胚胎形成早期21号染色体不分离造成的(约1-4％的病例)，这样的个体是既有正常细胞又有三染色体细胞的嵌合体。尽管DS个体可能具有正常范围内的IQ值，但是DS个体几乎都遭受到认知损伤，大多数的IQ值为40～60(Epstein，in Scriver et al.eds.，Themetabolic basis of inherited diseases，New YorkMcGraw-Hill(1989))。通常，DS儿童在婴儿期和幼儿期明显有显著的发育迟缓现象(参见Pulsifer，supra)。然而，在这种早期认知损伤基础上，成长到DS发病年龄的个体开始出现更为严重的认知退化。成年DS患者发展为临床痴呆症的可能性很高，这与在阿滋海默氏症(Alzheimer’s症)中观察到的相似。在25-30％的40岁DS个体和75％的60岁DS个体中可观察到临床痴呆症(Lai &Williams，Arch Neuro 46849-53(1989)；Johanson er al.，Dementia 2159-168(1991))。其它个体表现出显著的认知退化但没有达到临床痴呆症的诊断标准(Johannsen et al.，Dementia 7221-5(1996)；Burt et al.，Am JMent Retard 103140-45(1998))。已报道成年DS患者的认知退化现象包括记忆力丧失、命名障碍、失语及自救技能下降(Lott & Lai，AnnalsNeurology 12210-215(1982)；Young & Kramer，Mental Retard 2975-9(1991)；Haxby & Shapiro，in Nadel & Epstein eds.，Alzheimer’s disease andDown syndrome，New YorkWiley-Liss(1992))。通过现代医学治疗，超过一半的DS个体能活到50几岁，13.5％的DS个体能活到68岁(Baird &Sadovnick，Hum Genet 82291-2(1989))。综上所述，在成年DS患者中的认知退化问题十分严重并且有升高的趋势。目前对于DS个体的认知损伤和使DS个体数量下降没有有效的治疗手段。尽管已报道了多种治疗DS个体认知退化的尝试，但是没有一个能够取得显著的成功。Geldmacher等(J Geriatr Psychiatry Neurol1099-104(1997))通过使用选择性5-羟色胺再吸收抑制剂(SSRIs)来治疗DS成年个体，但是仅有在非认知性的行为症状方面取得进步的报道。基于在DS患者中观察到的认知缺陷可能与类胆碱功能系统紊乱相关的理论，已报道了对多奈哌齐(donepezil)(Kishani et al.，Lancet 3531064(1999))和尼古丁(Seidl et al.，Lancet 3561409-10(2000))小规模试验的有希望结果。然而，这些研究还有待随机化临床试验的证实，并且多奈哌齐和尼古丁作为治疗药剂都有缺点。吡拉西坦(Piracetam)是一种作用于谷氨酸能神经传导的药物，并且报道称其能够增强认知功能，已在DS儿童中评估了该药物，但是其没有增强认知功能(Lobaugh et al.，Arch Peduatr AdolescMed 155442-8(2001))。因此，需要一种有效的治疗方法，此方法可预防、抑制、或逆转在成年DS患者身上已见的认知退化症状。皮质醇是响应ACTH(促肾上腺皮质激素)而分泌的糖皮质激素，并表明生理节律变化，而且还是响应许多身体和心理压力的重要成分。已经提出，随着年龄的增长皮质醇调节体系在某些个体内极度活化，而导致超皮质醇现象。而且推测出高水平的皮质醇可毒害神经，尤其是在海马神经元、被认为是复杂信息和记忆处理中心和临时存储中心的大脑结构中(例如参见，Sapolsky et al，Ann.NY Acad.Sci.746294-304，1994；Silva，Annu.Rev.Genet.31527-546，1997；de Leon et al.，J.Clin.Endocrinol & Metab.823251，1997；Maeda et al.，supra)。对于接受治疗水平的外糖皮质激素治疗的人类个体的研究表明，糖皮质激素对短期可逆的记忆损伤起作用。(例如参见，Wolkowitz et al.，Am J.Psychiatry 1471297-1303，1990；Keenan et al.，Neurology471396-1402，1996；Newcomer et al.，Arch Gen.Psychiatry 56527-533，1999)。此外，皮质醇基本水平是在正常范围的高端处延伸较长的值，即相应于生理峰值或接近于受压力期间所观察到的值，已证实皮质醇基本水平有助于在成年人中观察到的受损伤的认知性能和由海马元介导的记忆功能损失(例如参见，Lupien et al.，J.Neurosci.142893-2903，1994；Lupien et al.，Nat.Neurosci 169-73，1998)。DS和非DS个体中的基本皮质醇水平相似(Murdoch et al.，J MentDefic Res 23157-62(1979)；Ramunni et al.，J Endocrinol Invest 22S105708(1999))。据报道在DS个体中与ACTH响应的HPA轴的活性受到损伤(Murdoch et al.，supra)，但是这种结果的意义还不清楚。因此，在本发明之前没有证据表明糖皮质激素受体拮抗剂是预防或逆转成年DS患者认知退化的有效药剂，尤其是对于皮质醇水平在正常范围内的患者而言。皮质醇的许多作用是通过在生理皮质醇水平上，结合I型(盐皮质激素)受体而介导的，I型(盐皮质激素)受体相对于II型(糖皮质激素)受体而言优先被占据。随着皮质醇水平的提高，更多的糖皮质激素受体被占据和激活。然而，由于在新陈代谢中皮质醇起关键作用，所以全部皮质醇介导活动的抑制是至关重要的。因此，可特别阻止II型糖皮质激素受体功能但不对抗I型盐皮质激素受体功能的拮抗剂在本发明中尤其有用。RU486和相似的拮抗剂是这类受体拮抗剂的例子。本发明人已测得糖皮质激素受体拮抗剂，如RU486，是预防或逆转具有正常、升高或下降皮质醇水平的DS成年患者认知退化的有效药剂。因此，本发明通过将糖皮质激素受体拮抗剂给药以提高DS患者认知功能的方法满足了对于DS患者认知退化进行有效的预防性措施的需要。
发明概述[11]本发明提供一种抑制或逆转成年唐氏综合症患者认知退化的方法。本方法包括将治疗有效量的糖皮质激素受体拮抗剂给药至该患者，条件是该患者尚未需要用糖皮质激素受体拮抗剂进行治疗。在本发明的另一个实施方案中，糖皮质激素受体拮抗剂含有甾族化合物骨架，在甾族化合物骨架的11β位置处至少含有一个苯基部分。在甾族化合物骨架的11β位置处含有的苯基部分可以是二甲基氨基苯基部分。在可选择的实施方案中，糖皮质激素受体拮抗剂包括米非司酮，或者糖皮质激素受体拮抗剂选自RU009和RU044。在其它实施方案中，糖皮质激素受体拮抗剂是4a(S)-苄基-2(R)-丙炔-1-基-1，2，3，4，4a，9，10，10a(R)-八氢-菲-2，7-二醇、4a(S)-苄基-2(R)-氯乙炔基-1，2，3，4，4a，9，10，10a(R)-八氢-菲-2，7-二醇或(11b，17b)-11-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)-17-羟基-17-(1-丙炔基)雌甾-4，9-二烯-3-酮。在其它的实施方案中，糖皮质激素受体拮抗剂按每日每千克体重约0.5～20mg、每日每千克体重约1～10mg、或每日每千克体重约1～4mg的日剂量给药。可以每天一次给药。在可选择的实施方案中，糖皮质激素受体拮抗剂的给药方式是口服给药，或透皮敷用、喷雾悬浮给药、或气雾式给药。本发明也提供一种抑制或逆转人类DS患者认知退化的药盒，该药盒包括糖皮质激素受体拮抗剂，及一种用于说明糖皮质激素受体拮抗剂的适应症、给药剂量和给药时间的指导性材料。在可选择的实施方案中，该指导性材料表明糖皮质激素受体拮抗剂可以按每日每千克体重约0.5～20mg、每日每千克体重约1～10mg、或每日每千克体重约1～4mg的日剂量给药。该指导性材料表明皮质醇有助于DS患者的认知退化，及糖皮质激素受体拮抗剂可用于预防或逆转这种退化。在一个实施方案中，在药盒中的糖皮质激素受体拮抗剂是米非司酮。米非司酮可以是片剂型的。通过参照说明书余下部分和权利要求书可进一步理解本发明的特性和优点。此处引用的所有出版物、专利和专利申请在此明确地为全部目的引为参考。
定义[18]术语“治疗”指对于损伤、反常或疾病的治疗或改善的任何成功现象，包括任何客观或主观参数变化，如症状的消除、缓解、减小，或使患者更可忍受损伤、反常或疾病，减缓恶化或衰退的速率，使恶化终点不太虚弱，提高患者的身体或精神健康，或在某些情况下预防痴呆症的发作。症状的治疗或改善可以以客观或主观参数为依据，包括身体检查、神经精神测试、和/或精神评估结果。例如，本方明的方法通过提高记忆任务测试的性能和/或降低或预防认知下降的速度或程度，成功地治疗了DS患者的认知退化。术语“唐氏综合症”指由人类第21对染色体部分或完全地非整倍性、或第21对染色体基因表达异常所引起的病症。第21对染色体三体性、易位或嵌合可引起唐氏综合症。术语“成年人”指年龄为18岁或更大的人。术语“认知退化”指记住具体事实(名字或事物)或解决逻辑问题的能力的损失。术语“痴呆症”在广义上指精神性疾病，其被定义在美国精神医学协会出版的精神疾病诊断与统计手册，第四版，华盛顿，1994(“DSM-IV”)中。DSM-IV定义“痴呆症”以包括记忆损伤在内的多种认知缺乏为特征，并根据假设的病源列出了各种痴呆症。DSM-IV提出用于诊断、分类及治疗痴呆症及相关精神性疾病的通常可接受的标准。术语“皮质醇”指也被称为氢化可的松、及其任何合成或天然的类似物的一族成分。术语“糖皮质激素受体”(“GR”)指也被称为皮质醇受体的一族细胞内受体，特别地其可与皮质醇和/或皮质醇类似物结合。此术语包括GR、重组GR和变异GR的变体。术语“米非司酮”指一族成分，其也被称为RU486、或RU38.486、或17β-羟基-11β-(4-二甲基-氨基苯基)-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮、或11β-(4-二甲基-氨基苯基)-17β-羟基-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮、或其类似物，其通常可与GR以较高亲合力结合并可抑制由任何皮质醇或皮质醇类似物与GR受体的结合引起的/介导的生物作用。RU486的化学名称可以变化，例如RU486也可以是11B-[p-(二甲氨基)苯基]-17B-羟基-17-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮、11B-(4-二甲基-氨基苯基)-17B-羟基-17A-(丙基-1-炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮、17B-羟基-11B-(4-二甲基氨基苯基-1)-17A-(丙炔基1-)-雌甾-4，9-二烯-3-酮、17B-羟基-11B-(4-二甲基氨基苯基-1)-17A-(丙炔基1-)-E、(11B，17B)-11-[4-(二甲氨基)苯基]-17-羟基-17-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮、及11B-[4-(N，N-二甲氨基)苯基]-17A-(丙基-1-炔基)-D-4，9-雌甾二烯-17B-醇-3-酮。术语“特效糖皮质激素受体拮抗剂”指任何可部分或完全抑制(对抗)糖皮质激素受体(GR)激动剂(如合成或天然的皮质醇或皮质醇类似物)与GR结合的组合物或化合物。“特效糖皮质激素受体拮抗剂”也指任何可抑制与GR和激动剂的结合相关的任何生物反应的组合物或化合物。至于“特效”，我们指药物优选以至少100倍通常是1000倍的亲合力与GR结合而不是与盐皮质激素受体(MR)结合。“尚未需要用糖皮质激素受体拮抗剂进行治疗”的患者是指没有患本领域公知的可用糖皮质激素受体拮抗剂有效治疗的疾病的患者。本领域公知的可用糖皮质激素受体拮抗剂有效治疗的疾病包括柯兴氏病(Cushing’s disease)、停药症、精神病、痴呆、压力症及精神重郁病。
发明详细说明[29]本发明令人惊讶地发现，可以抑制由糖皮质激素介导的生物反应的药剂对于治疗唐氏综合症个体的认知退化是有效的。目标患者是没有开始与年龄相关的认知退化的患者或者是刚开始从年轻的成年人基线水平退化的患者。在认知退化的治疗中，优选本发明的方法可预防记忆损伤和/或记忆功能进一步下降的速度或程度。在一个实施方案中，本发明的方法使用作为GR拮抗剂的药剂抑制皮质醇和GR的相互作用，以治疗或改善认知退化。本发明的方法对于在DS个体患者中提高记忆性能、或预防或降低进一步的记忆损伤或认知功能是有效的，此患者是指受正常的、提高的天然或合成的皮质醇或其它糖皮质激素折磨的患者。皮质醇通过与细胞内的糖皮质激受体(GR)结合起作用。在人体中，糖皮质激素受体以两种形式存在777个氨基酸长度的配体结合的GR-α，及仅最后15个氨基酸不同的GR-β变体。这两种类型的GR对于特定的配体具有较高的亲合力，并被认为是通过相同的转导途径起作用。皮质醇的生物作用，包括由皮质醇增多症引起的失常和障碍，可使用受体拮抗剂在GR水平上调节和控制。几种不同类的药剂可用作GR拮抗剂，即阻碍GR-激动剂(天然的激动剂是皮质醇)结合的生理作用。这些拮抗剂包括一种成分，通过该成分与GR的结合可有效地抑制激动剂与GR结合的能力、和/或激动剂活化GR的能力。公知的一族GR拮抗剂、米非司酮和相关的化合物对人类是有效和强力的抗糖皮质激素药剂(Bertagna，J.Clin.Endocrinol.Metab.5925，1984)。米非司酮和GR以较高亲合力结合，其解离常数K＜10-9M(Cadepond，Annu.Rev.Med.48129，1997)。这样在本发明的一个实施方案中，可使用米非司酮和相关的化合物预防成年DS患者的认知退化。本发明的方法包括使用任何方式抑制与激动剂结合的GR的生物作用，也提出可用于治疗DS患者认知退化的示例性化合物和组合物。也说明了在本发明的方法实施中，可用于进一步识别能够阻碍由GR-激动剂的相互作用引起的生物反应的化合物和组合物的常规程序。本发明将这些化合物和组合物作为药物给药，同时在下面给出在本发明的方法实施中检测GR拮抗剂药物方案和制剂的常规方式。
1.成年唐氏综合症患者认知退化的诊断a.鉴定唐氏综合症患者[33]由于具有与第21对染色体三体性相关的特定生理特征，所以唐氏综合症患者通常在出生时就能够被诊断出来。DS的生理表现型包括头小畸形、眼上斜、脖子粗、手小且第五指向内弯曲及只有一条猿线穿过手掌。DS个体与非DS群体相比身材明显矮小，成年男性平均身高约为5英尺，女性约为4.5英尺。在神经心理学方面，DS个体非比例性的表现出言语和语言表达技能方面受到损伤，尤其在清晰度、语音和表达措辞方面(Fowler，inCicchetti & Beeghly eds.，Children with Down SyndromeA developmentalperspective(pp.302-328)New YorkCambridge University Press，1990)，并且缺乏口头短期记忆(Marcell & Armstrong，Am J Mental Deficiency8786-95(1982)；Varnhagen et al.，Am J Mental Deficiency 91398-405(1987))。DS患者的透视显像表明他们通常大脑较小(大约是正常人的76％)，且脑叶复杂度降低(Coyle et al.，Brain Res Bull 16773-87(1986)；Wisniewski，Am J Med Genet 7274-81(1990))。通常前叶小，叶盖小，颞上回狭窄，海马体体积、小脑和脑干减小。尽管DS的特征在出生时是明显的，但是在50岁以下的DS患者中在认知和适应性行为方面的显著衰退与其它类型的成年弱智患者相比不是更常见的。相比而言，50岁以上的DS个体更可能表现出明显的认知退化(Zigman et al.，Am J Ment Retard 100403-12(1996))。因此，在本发明一个实施方案中向约50岁发病的DS患者提供抗糖皮质激素疗法，以预防认知退化发作。然而，由于在认知退化症状明显表现之前认知退化的神经病理学机制可能已经开始了，所以GR拮抗剂疗法可在更为年轻的年龄开始，例如大约在45岁、40岁、35岁或30岁时。在DS患者中可以观察到早熟变化的过程(即头发、皮肤弹性、动作技能和骨骼结构的变化；参见Oliver & Holland，Psychological Medicine 16307-12(1986))，并可以用来判断何时对特定的DS个体开始GR拮抗剂疗法。有多种诊断DS患者开始认知退化的方法和多种评估本发明方法治疗功效的方法。这些方法包括使用精神病学测试来确定CDR，使用记忆测试，及使用关于痴呆症方面的精神病学测试。这些测试结果可以与如下所述的其它客观测试结合起来分析。这些方法对于评估本发明方法在提高DS患者记忆、降低或消除DS患者进一步的记忆损伤或认知下降方面的功效也是有用的。尽管医生可以使用科学和专利文献中所定义的任一组规定或经验的标准以诊断DS的存在，从而为实施本发明方法作出指示，但是下面将说明相关症状和病情的某些说明性诊断指导和例子。主观和客观标准都能够用于测量和评估特定GR拮抗剂、药物制剂、剂量、治疗方案或疗法的成功。
b.通过测试证据评估和诊断认知退化和功能[37]成年DS患者如果不治疗经常会发展成认知退化，认知退化可能发展成或也可能不发展成临床痴呆症。由此，成年DS患者的认知退化可以通过评估认知损伤的测试来测定。认知损伤能够通过使用可确定个体是否受到认知损伤折磨的主观和客观测试标准所进行的正规精神分析来诊断。优选在与DS相关的认知退化的早期(在早期阶段)实施本发明的方法，最优选是在成年患者的认知退化开始之前实施。这对于发展为Alzheimer症具有较高可能性的DS患者尤为关键，例如对于具有阿朴脂蛋白ε4基因型的患者而言(例如参见Tierney et al.，Neurology 45149-154，1996)。认知功能可以通过在心理学或精神病学领域中公知的或可接受的客观测试或标准中的任一种来诊断和评估。客观测试可以用来确定个体是否患有记忆功能损伤或痴呆症，并且能够测量和评估特定GR拮抗剂、药物制剂、剂量、治疗方案或疗法的成功。例如，测试认知能力和记忆的变化有助于患有或可能患有认知退化的DS患者的诊断和治疗分析。可以使用本领域公知的任何测试方法。文兰适应行为量表(Vineland A daptive B ehavior S cales，VABS)是一组测量认知功能和社会适应性的测试(Sparrow et al，Vineland AdaptiveBehavior Scales-Interview Edition(Psychological Measure).Circle Pines，MNAmerican Guidance Service，1984)。患者按三种小分数进行评分(交流能力，日常生活能力，和社交能力)，同时也采纳适应性行为的复合分数。尽管在VABS中相对于交流能力而言，个体在日常生活和社交能力方面表现出明显的优势，但是VABS分数经常用于评估对DS可能治疗的疗效(例如参见，Kishani et al.，Lancet 3531064(1999))。任何VABS标准分数的下降都可以是与DS相关的认知退化的指示；反之，任何VABS小分数或适应性行为复合分数的提高都是认知或适应性功能提高的指示。DS患者认知退化的一种测量方式是临床失智评分量表(ClinicalDemential Rating，CDR；参见Hughes et al.，Brit.J.Psychiat.140566-572，1982，及Morris，Neurology 432412-2414，1993)。在确定CDR时，患者通常按如下六类认知和行为中的每一类进行评估和评分记忆，定向，判断和解决问题，集体事务，家庭和兴趣，个人爱好。评估包括由患者或优选由熟悉患者的证人提供的患者病史。患者在这些方面中的每个方面被评估和评分，并确定总分数(0，0.5，1.0，2.0或3.0)。0分被认为是正常的，1.0分认为是轻度痴呆。CDR为0.5的患者以轻度持续性健忘、对事件只能部分回忆、及“良性”健忘为特征。这种患者具有完全的方向感，在确定相似性和区别性方面及其它解决问题技能方面表现出很小的损伤，或在集体、家庭或个人方面表现出很小的损伤。认知退化的另一种特征是记忆任务测试方面的损伤性表现。记忆可通过本领域公知的测试进行测量，如韦氏记忆量表(Wechsler MemoryScale)或与成对相关的记忆任务方法。如果对于此种测试而言分数低于受教育和年龄调节的门槛值，那么对于此测试患者被认为是受损伤的表现。认知退化通常以延迟性回忆功能的损伤为特征，这种损伤具体表示为记忆任务测试的因素。例如，受损伤的记忆功能可以通过得分是处于逻辑记忆II亚量表(延迟片段回忆)教育门槛值或在其之下来证实，逻辑记忆II亚量表是从韦氏记忆量表修订得来的，其最高分数是25。使用本领域公知的方法可确定受年龄和教育调节的门槛值(例如参见，Ivnik et al.，Clinc.Neuropsychol 6(Suppl)1-30 and 49-82，1992；Ivnik et al.，J.Consult Clin.Psychol 31991；Ivnik et al.，Clin.Neuropsychol.10262-276，1996)。这些门槛值的例子如下a)对于16或更多年教育的为小于或等于8；b)对8-15年教育的为小于或等于4；及c)对0-7年教育的为小于或等于2。例如，可以通过从平均值中选择为1、优选为1.5或大于标准偏差的值来确定教育和年龄分组的门槛值。如果与对照组的患者表现相比在使用本发明方法治疗的患者表现间，或者对同一患者在随后测试中的表现间，在正态方向上具有统计学显著差异，那么在本发明的上下文中就认为存在记忆“提高”。如果成年DS患者的认知退化严重，那么患者可能符合DSM-IV-TR中所述的临床痴呆症标准。本发明的优点之一在于预防DS患者患痴呆症。因为在此之前已知痴呆症可使用糖皮质激素拮抗剂来治疗，所以患有痴呆症的唐氏综合症患者超出本发明范围。用于痴呆症的一种客观测试是所谓的简易智能评估(MMSE)，如Folstein的“‘Mini-mental state.’A pratical method for grading the cognitive state ofpatients for the clinician.”J.Psychiatr.Res.12189-198，1975中所公开的。MMSE可评估整体智力退化的出现。也参见Folstein的“Differentialdiagnosis of dementia.The clinical process.”Psychiatr Clin North Am.2045-57，1997。MMSE是一种长期识别的方法用以评估痴呆症的开始和整体智力退化的出现，如在Alzheimer症和多发梗塞性痴呆症中看到的那样。例如参见，Kaufer，J.Neuropsychiatry Clin.Neurosci.1055-63，1998；Becke，Alzheimer Dis Assoc Disord.1254-57，1998；Ellis，Arch.Neurol.55360-365，1998；Magni，Int.Psychogeriatr.8127-134，1996；Monsch，Acta Neurol.Scand.92145-150，1995。MMSE的分数为1～30。MMSE没有评估基本的认知潜能，例如所谓的IQ测试。代替的是其测试智力技能。在MMSE客观测试中“正常”智力能力的人的分数为“30”(然而MMSE分数为30的人在IQ测试中的“正常”之下也有较好的分数)。由此，当在MMSE中个体评分为30时本发明方法也适于使用。由于在实施一次测试时“正常”个体的分数可能低于30，所以测试“正常”指示是指在三次测试中至少一次测试分数为30。评估痴呆症的另一种方法是Alzheimer症评估量表(ADAS-Cog)，或者是其被称为标准化的Alzheimer症评估量表(SADAS)的变体。这在以认知下降为特征的Alzheimer症及相关病症的临床药物试验中是常用的有效方法。设计SADAS和ADAS-Cog不是用来诊断Alzheimer症，它们可识别痴呆症症状并且对于痴呆症的进展也是相当灵敏的指示器。(例如参见，Doraiswamy，Neurology 481511-1517，1997；及Standish，J.Am.Geriatr.Soc.44712-716，1996。)[45]也可使用主观诊断和客观测试的组合来评估认知退化的出现。例如由患者或其他个体提供的家族史和病史可用作测定认知退化的因素。在认知退化的诊断中也可考虑其它测试。在一种研究中(Petersen et al.，Arch Neurol.56303-308，1999)，由从患者得到病史和证据源，并进行包括精神态小测试、哈金斯基缺血量表和神经检查在内的各种测试的行为神经科专门医师观察患者。收集的其它资料包括自立生活记录、老年人精神抑郁量表及其它的家族史信息，及实验测试，如化学、完全血细胞计数、维生素B12和叶酸水平及甲状腺刺激性激素水平。在此研究中，用于诊断目的的第一组测试包括修改的韦氏成年人智力量表、修改的韦氏记忆量表、听觉口语学习测试及广范围成就测验-III。用于研究目的的第二组测试包括简易智能评估、痴呆等级量表、自由和提示的选择性提醒测验、波士顿命名测试、可控制的口语相关测试及分类流畅性程序。
2.一般的实验室程序[46]当实施本发明的方法时，许多普通的实验室检测可用于辅助经GR拮抗剂治疗的DS患者的发展，包括参数的监测，如血液皮质醇、药物的新陈代谢等。由于所有的患者产生代谢变化和独特的药物反应，所以这些程序是有帮助的。此外，由于每一种GR拮抗剂有不同的药物代谢动力学，所以此类监测是重要的。不同的患者和AP药物需要不同的剂量方案和制剂。此种测定剂量方案和制剂的过程和方法在科学和专利文献中已被充分公开。下面举出几个示例性的实施例。
a.测定血液皮质醇水平[47]虽然本发明是对带有明显正常血液皮质醇水平的患者实施，但是血液皮质醇水平的变化也和DS有关。由此，监测血液皮质醇和测定基线皮质醇水平是有助于预防DS患者认知退化的实用实验室测试。多种实验室测试可被用于测定个体是皮质醇正常、皮质醇不足还是皮质醇增多。DS患者通常具有经常在早晨小于25μg/dl、常常在下午为约15μg/dl或更少的正常皮质醇水平，尽管这个值经常处于正常范围的高端处，即通常在下午是5～15μg/dl。免疫化验如放射性免疫化验因其精确、容易操作和相对较便宜所以普遍被使用。由于循环皮质醇水平是肾上腺皮质的功能指示器，所以多种刺激和抑制测试，如ACTH刺激、ACTH储备或地塞米松抑制测试(例如参见Greenwald，Am.J.Psychiatry 143442-446，1986)，也能在本发明方法中辅助性地用于提供诊断、预后或其它信息。一种以药盒形式利用的此类化验是利用“双抗体皮质醇药盒”(Diagnostic Products Corporation，Los Angeles，CA)，(Acta Psychiatr.Scand.70239-247，1984)作放射性免疫化验。这种化验是竞争性的放射性免疫化验，其中125I示踪的皮质醇和从抗体位置而来的临床样品中的皮质醇竞争。在这种化验中，由于抗体的特异性和缺少任何明显的蛋白作用，所以血清和血浆样品既不需要预提取也不需要预稀释。在下面的实施例2中更详细地描述了这种化验。
b.血液/尿液中米非司酮水平的测定[50]由于病人的新陈代谢、清除速率、毒性水平等随主要或续发性疾病、药物史、年龄、普通医学疾病等的不同而变化，所以测定血液和尿液中的GR拮抗剂的水平是必要的。此种监测方式在科学和专利文献中已被充分公开。在本发明的一个实施方案中，使用米非司酮预防DS患者的认知退化，在下面的实施例中举出测定血液和尿液中米非司酮水平的示例性例子。
c.其它实验室程序[51]由于DS患者认知退化的机理是复杂的，所以许多附加的实验室测定可在本发明的方法中辅助使用以有助于诊断、治疗功效、预后、毒性等。例如，诊断和治疗评估可由监测和测量糖皮质激素敏感变量而变化，包括但限于空腹时血糖、口服葡萄糖后的血糖、血浆浓度甲状腺刺激激素(TSH)、与皮质类固醇结合的球蛋白、刺激黄体分离激素(LH)、与睾丸激素雌二醇结合的球蛋白、肥胖蛋白、胰岛素、和/或全部或无睾丸激素。监测和测量GR拮抗剂代谢物的产生、血浆浓度和清理速率(包括拮抗剂和代谢物的尿浓度)的实验室测试在本发明方法的实施中也是有用的。例如，米非司酮有两个亲水性的N-单甲基化的和N-二甲基化的代谢物。这些代谢物(除RU486外)的血浆和尿浓度可使用例如由Kawai在Pharmacol.and Experimental Therapeutics 241401-406，1987中公开的薄层层析法测定。
3.抑制或逆转DS患者认知退化的糖皮质激素受体拮抗剂[53]本发明提供使用任何可阻断生物反应的组合物或化合物来抑制或逆转成年DS患者认知退化的方法，该生物反应与皮质醇或皮质醇类似物和GR的结合有关。用在本发明方法中的GR拮抗剂的活性在科学和专利文献中已被充分公开。下面举出几个示例性实施例。
a.作为GR拮抗剂的甾族抗糖皮质激素[54]在本发明的不同实施方案中，为抑制或逆转认知退化用甾族糖皮质激素拮抗剂给药。甾族抗糖皮质激素可通过对糖皮质激素激动剂的基本结构进行修饰而得到，即改变甾族化合物的骨架形式。皮质醇的结构可用多种方式改变。皮质醇甾族化合物骨架的结构修饰可产生糖皮质激素拮抗剂，其中两种最通用的公知分类法包括对11β羟基的修饰和对17β侧链的修饰(例如参见Lefebvre，J.Steroid Biochem.33557-563，1989)。甾族GR拮抗剂的例子包括如美国专利第5,929,058号所述的雄性激素型甾族化合物，及美国专利第4,296,206、4,386,085、4,447,424、4,477,445、4,519,946、4,540,686、4,547,493、4,634,695、4,634,696、4,753,932、4,774,236、4,808,710、4,814,327、4,829,060、4,861,763、4,912,097、4,921,638、4,943,566、4,954,490、4,978,657、5,006,518、5,043,332、5,064,822、5,073,548、5,089,488、5,089,635、5,093,507、5,095,010、5,095,129、5,132,299、5,166,146、5,166,199、5,173,405、5,276,023、5,380,839、5,348,729、5,426,102、5,439,913、5,616,458及5,696,127号公开的化合物。这些甾族GR拮抗剂包括皮质酮、地塞米松-丙醇酸丙酯(oxetanone)、19-去甲基脱氧肾上腺酮、19-去甲基孕酮、皮质醇-21-甲磺酸盐、地塞米松-21-甲磺酸盐、11β-(4-二甲氨基乙氧苯基)-17α-丙炔基-17β-羟基-4，9-雌甾二烯-3-酮(RU009)及17β-羟基-17α-19-(4-甲基苯基)-雄甾-4，9(11)-二烯-3-酮(RU044)。
i)11β羟基的移除或取代[56]在本发明的一个实施方案中使用带有经修饰的甾族化合物骨架的糖皮质激素激动剂，包括11β羟基的移除或取代。这种类别包括天然的抗糖皮质激素，包括皮质酮、孕酮及睾丸激素衍生物、及合成的组合物，如米非司酮(Lefebvre等，supra)。本发明的优选实施方案包括所有的11β芳基甾族化合物骨架衍生物，是由于这些化合物没有孕酮受体(PR)结合能力的原因(Agarwal，FEBS 217221-226，1987)。另一个优选实施方案包括11β-苯基-氨基二甲基甾族化合物骨架的衍生物，即米非司酮，其是有效的抗糖皮质激素和抗孕酮药剂。这些组合物作为与甾族受体可逆结合的拮抗剂。例如，当与11β-苯基-氨基二甲基甾族化合物结合时，甾族受体保持在不能与其天然配体结合的构象，如在GR情形下的皮质醇(Cadepond，1997，supra)。合成的11β-苯基-氨基二甲基甾族化合物包括米非司酮，也被称为RU486，或17β-羟基-11β-(4-二甲基-氨基苯基)-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮。已表明米非司酮对于孕酮和糖皮质激素(GR)受体是一种强力的拮抗剂。另一种表现出有GR拮抗剂作用的11β-苯基-氨基二甲基甾族化合物包括RU009(RU39.009)，11β-(4-二甲氨基乙氧苯基)-17α-(丙炔基-17β-羟基-4，9-雌甾二烯-3-酮)(参见Bocquel，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.45205-215，1993)。另一种与RU486有关的GR拮抗剂是RU044(RU43.044)，即17β-羟基-17α-19-(4-甲基苯基)-雄甾-4，9(11)-二烯-3-酮(Bocquel，1993，supra)。也参见Teutsch，Steroids 38651-665，1981；美国专利第4,386,085和4,912,097号。一个实施方案中包括含有糖皮质激素甾族化合物基本结构的组合物，其是不可逆的抗糖皮质激素。这种化合物包括皮质醇的α-氧代甲磺酸盐衍生物，包括皮质醇-21-甲磺酸盐(4-孕烯-11β，17α，21-三醇-3，20-二酮-21-甲磺酸盐)、及地塞米松-21-甲磺酸盐(16-甲基-9α-氟代-1，4-孕二烯-11β，17α，21-三醇-3，20-二酮-21-甲磺酸盐)。参见Simons，J.Steroid Biochem.2425-32 1986；Mercier，J Steroid Biochem.2511-20，1986；美国专利第4,296,206号。
ii)17β侧链基团的修饰[59]甾族抗糖皮质激素可由对17β侧链进行的各种结构修饰而得到，并也可用在本发明的方法中。这类包括合成的抗糖皮质激素如地塞米松-丙醇酸丙酯(oxetanone)、各种17，21-丙酮衍生物和地塞米松的17β-羧酰胺衍生物(Lefebvre，1989，supra；Rousseau，Nature 279158-160，1979)。
iii)其它甾族化合物骨架的修饰物[60]用在本发明各种实施方案中的GR拮抗剂包括可影响起因于GR-激动剂相互作用的生物反应的任何甾族化合物骨架的修饰物。甾族化合物骨架拮抗剂可以是任何天然的或合成的皮质醇变体，如缺少C-19甲基的肾上腺类固醇，如19-去甲基脱氧肾上腺酮及19-去甲基孕酮(Wynne，Endocrinology 1071278-1280，1980)。一般而言，11β侧链取代基，尤其是取代基的大小，在测定甾族化合物的抗糖皮质激素的活性程度中起关键作用。在甾族化合物骨架的环A中的取代也是重要的。17-羟基-丙烯基侧链与含有17-丙炔基侧链的化合物相比通常可降低抗糖皮质激素的活性。其它本领域公知的并适于本发明实施的糖皮质激素受体拮抗剂包括21-羟基-6，19-氧化孕酮(参见Vicent，Mol.Pharm.52749-753，1997)、Org31710(参见Mizutani，J steroid Biochem Mol Biol 42(7)695-704，1992)、Org34517、RU43044、RU40555(参见Kim，J steroid Biochem Mol Biol.67(3)213-22，1998)、RU28362及ZKk98299。
b.作为拮抗剂的非甾族化合物抗糖皮质激素[63]非甾族化合物的糖皮质激素拮抗剂也能用在本发明的方法中抑制或逆转DS个体的认知退化。这些包括合成的蛋白拟态物和类似物，包括部分肽类、拟肽类和非肽类的分子实体。例如，用在本发明中的低聚肽类拟态物包括(α-β-不饱和)的肽类磺胺、N-取代的氨基乙酸衍生物、低聚氨基甲酸酯、低聚脲肽类拟态物、肼肽、低聚砜等(例如参见，Amour，Int.J.P ept.Protein Res.43297-304，1994；de Bont，Bioorganic & MedicinalChem.4667-672，1996)。合成分子大库的建立和同时筛选可按在组合化学中公知的技术进行，例如参见van Breemen，Anal Chem 692159-2164，1997；Lam，Anticancer Drug Des 12145-167，1997。特别针对GR的肽类拟态物可结合组合化学(组合库)筛选技术使用计算机程序设计(Murray，J.of Computer-Aided Molec.Design 9381-395，1995；Bohm，J.ofComputer-Aided Molec.Design 10265-272，1996)。这种“合理的药物设计”有助于形成肽类的异构体和构象，包括环异构体、逆-反异构体、逆异构体等(如由Chorev在TibTech 13438-445，1995中所讨论的)。非甾族GR拮抗剂的例子包括酮康唑、克霉唑；N-(三苯甲基)咪唑；N-([2-氟-9-苯基]芴基)咪唑；N-([2-吡啶基]二苯甲基)咪唑；N-(2-[4，4’，4”-三氯三苯甲基]氧乙基)吗啉；1-(2[4，4’，4”-三氯三苯甲基]氧乙基)-4-(2-羟乙基)哌嗪马来酸氢酯；N-([4，4’，4”]-三氯三苯甲基)咪唑；9-(3-巯基-1，2，4-三唑基)-9-苯基-2，7-二氟芴酮；1-(2-氯三苯甲基)-3，5-二甲基吡唑；4-(吗啉基甲基)-A-(2-吡啶基)二苯基甲醇；5-(5-甲氧基-2-(N-氨基甲酸甲酯基)-苯基)二苯并环庚醇；N-(2-氯三苯甲基)-L-脯氨醇乙酸酯；1-(2-氯三苯甲基)-2-甲基咪唑；1-(2-氯三苯甲基)-1，2，4-三唑；1，S-二(4，4’，4”-三氯三苯甲基)-1，2，4-三唑-3-硫醇；N-((2，6-二氯-3-甲基苯基)二苯基)甲基咪唑(参见美国专利第6,051,573号)；美国专利第5,696,127号中公开的GR拮抗剂化合物；Bradley et al.，J.Med.Chem.45，2417-2424(2002)中公开的糖皮质激素受体拮抗剂，例如4a(S)-苄基-2(R)-氯乙炔基-1，2，3，4，4a，9，10，10a(R)-八氢-菲-2，7-二醇(“CP394531”)和4a(S)-苄基-2(R)-丙炔-1-基-1，2，3，4，4a，9，10，10a(R)-八氢-菲-2，7-二醇(“CP409069”)；Hoyberg et al.，Int’l J.of Neuro-psychopharmacology，5Supp.1，S148(2002)中公开的化合物(11b，17b)-11-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)-17-羟基-17-(1-丙炔基)雌甾-4，9-二烯-3-酮(“ORG34517”)；在PCT国际申请第WO96/19458号中公开的化合物，其公开了对于甾族受体具有高亲合力、高选择拮抗剂的非甾族化合物，如6-取代的-1，2-二羟基-N-受保护的-喹啉；一些κ阿片配体，如κ阿片化合物强啡肽-1，13-二酰胺，U50,488(反式-(1R，2R)-3，4-二氯-N-甲基-N-[2-(1-吡咯烷基)环己基]苯乙酰胺)，bremazocine和ethylketocyclazocine；在Evans et al.，Endocrin.，1412294-2300(2000)中公开的非特效阿片受体配体，纳洛酮。
c.特效糖皮质激素受体拮抗剂的识别[65]由于除了上述的化合物和组合物之外，任何特效GR拮抗剂都能在本发明的方法中用于抑制或逆转成年DS患者的认知退化，其它有用的GR拮抗剂可被熟练的技术人员测定。科学和专利文献公开有可使用的各种此类方案和公知方法，包括用于识别其它GR拮抗剂的体外和体内的化验。下面举出几个示例性的例子。一种用来识别本发明的GR拮抗剂的化验是按照Granner在Meth.Enzymol.15633，1970中的方法测量推测的GR拮抗剂对酪氨酸氨基转移酶活性的影响。此分析是基于在鼠肝癌细胞(RHC)培养基中的肝酶酪氨酸氨基转移酶(TAT)的活性而测量的。TAT在酪氨酶的新陈代谢中催化第一步，并由在肝和肝癌细胞中的糖皮质激素(皮质醇)引起。在细胞抽提物中这种活性容易测量。TAT将酪氨酸的氨基转为2-氧代戊二酸，也形成p-羟基苯基丙酮酸酯，其能在碱性溶液中被转化为更稳定的p-羟基苯甲醛，并在331nm处定量吸收。推测的GR拮抗剂和皮质醇在体内或体外共同给药至整个肝、肝癌细胞或细胞提取物中。当化合物的给药与对照组(即只加入皮质醇或GR激动剂)相比降低了引起的TAT活性量时，此化合物被识别为GR拮抗剂的化合物(也参见Shirwany，Biochem.Biophys.Acta886162-168，1986)。除了TAT化验之外，可用在本发明的方法中用于识别成分的许多进一步的示例性化验也是基于体内的糖皮质激素活性化验。例如，也可使用评估推测的GR拮抗剂受糖皮质激素刺激而抑制吸收3H-胸苷进入细胞中的DNA的能力的化验。可选择地，推测的GR拮抗剂包括与肝癌组织培养GR结合的3H-地塞米松(例如参见，Choi等，Steroids 57313-318，1992)。作为另一个实施例，可使用推测的GR拮抗剂抑制与3H-地塞米松-GR配合物的核结合的能力(Alexandrova等，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.41723-725，1992)。为进一步识别推测的GR拮抗剂，可使用通过受体结合动力学来区分糖皮质激素激动剂和拮抗剂的动力学化验(如由Jones在Biochem J.204721-729，1982中所公开的)。在另一个说明性的实施例中，可使用由Daune在Molec.Pharm.13948-955，1977公开的及美国专利第4,386,085号中公开的化验来识别抗糖皮质激素活性。简而言之，将肾上腺切除的大鼠胸腺细胞在含有地塞米松和测试化合物(推测的GR拮抗剂)的不同浓度的营养培养基中培养。在细胞培养基中加入3H-尿苷进一步培养，测量放射性同位素进入多核苷酸的程度。糖皮质激素激动剂可减小3H-尿苷的加入量。这样，GR拮抗剂与这种作用相反。至于其它可在本发明的方法中使用的化合物及识别和制造此类化合物的方法，参见美国专利第4,296,206(参见上面的)、4,386,085(参见上面的)、4,447,424、4,477,445、4,519,946、4,540,686、4,547,493、4,634,695、4,634,696、4,753,932、4,774,236、4,808,710、4,814,327、4,829,060、4,861,763、4,912,097、4,921,638、4,943,566、4,954,490、4,978,657、5,006,518、5,043,332、5,064,822、5,073,548、5,089,488、5,089,635、5,093,507、5,095,010、5,095,129、5,132,299、5,166,146、5,166,199、5,173,405、5,276,023、5,380,839、5,348,729、5,426,102、5,439,913和5,616,458号，及WO 96/19458，其公开了对于甾族受体具有高亲合力、高选择调节剂(拮抗剂)的非甾族化合物，如6-取代的-1，2-二羟基-N-1受保护的喹啉。可以使用本领域所属技术人员公知的各种化验测量拮抗剂相对于MR而言对GR的选择性。例如，可通过测量与MR相比拮抗剂与GR结合的能力识别出特效拮抗剂(例如参见，美国专利第5,606,021、5,696,127、5,215,916、5,071,773号)。此分析可通过直接结合化验进行或者在公知拮抗剂的存在下通过评估与纯GR或MR的竞争结合进行。在示例性的化验中，可稳定表达较高水平糖皮质激素受体或盐皮质激素受体的细胞(例如参见，美国专利第5,606,021号)用作纯化的受体源。然后直接测量受体拮抗剂的亲合力。然后选择那些在本发明的方法中相对于MR来讲对GR表现出至少高100倍的亲合力，通常是1000倍的拮抗剂。GR特效拮抗剂也可被定义为具有抑制GR介导活性的能力而没有抑制MR介导活性能力的化合物。识别此类GR特效拮抗剂的一种方法是使用转染化验评估拮抗剂阻止报道组成的活化能力(例如参见，Bocquel等J.Steroid Biochem Molec.Biol.45205-215，1993；美国专利第5,606,021、5,929,058号)。在示例性的转染化验中，编码受体的表达质粒和含有与受体特效调节元件相连的报道基因的报道质粒被一起转染进入适合的受体负性宿主细胞。然后转染的宿主细胞在有激素的存在下和没有激素(如皮质醇或其类似物)的存在下培养，其可活化报道质粒的激素反应促进剂/增强剂元件。接下来，为引入(即存在)报道基因序列的产物而监测转染和培养的宿主细胞。最后，通过测定受体基因在有无拮抗剂的存在下的活性，测量激素受体蛋白质(由受体DNA序列在表达质粒上编码及在转染和培养的宿主细胞中产生)的表达和/或与甾族化合物的结合容量。化合物的拮抗剂活性可通过与公知的GR和MR受体拮抗剂的对比而测定(例如参见美国专利第5,696,127号)。然后对每一个化合物相对于参照的拮抗剂化合物以观察到的最大响应度来报告效力。相对于MR来讲，对GR表现出至少高100倍的活性、经常是1000倍或更大的活性的拮抗剂被认为是GR特效拮抗剂。
4.使用糖皮质激素受体拮抗剂抑制或逆转认知退化[72]在本发明的方法中使用抗糖皮质激素如米非司酮作为药物来抑制或逆转DS患者的认知退化。任何可抑制和皮质醇或皮质醇类似物与GR的结合相关的生物反应的组合物或化合物都能用作本发明的药物。测定实施本发明方法的GR拮抗剂的剂量方案和制剂的常规方法在专利文献和科学文献中已被充分公开。下面举出一些示例性实施例。
a.糖皮质激素受体拮抗剂作为药物组合物[73]在本发明的方法中使用的GR拮抗剂可通过本领域公知的任何方式给药，例如，肠胃外给药、表皮给药、口服给药，或局部性的给药，如气雾式或经皮给药。本发明的方法提供预防性和/或治疗性治疗。取决于健康状况或疾病、及精神病程度、每个患者的普通医学疾病、给药的优选方法等，作为药物制剂的GR拮抗剂可以按各种单位剂量的形式给药。关于制剂和给药的细节在科学和专利文献中已充分公开，例如参见最新版的Remington’s Pharmaceutical Sciences，Maack Publishing Co，Easton PA(“Remington’s”)。适于用在本发明方法中的糖皮质激素阻断剂的治疗有效量的通常范围为约0.5～25毫克/千克(mg/kg)。本领域所属技术人员结合本领域的技术和本发明的揭示不需要通过过多的实验就能确定用在本发明中的特定糖皮质激素阻断剂化合物的治疗有效量。例如，较高或较低剂量的特定糖皮质激素阻断剂可能是更有效的。通过使用本文所述的方法来评估患者，熟练的医生能够确定患者是否响应治疗并由此知道怎样调节剂量水平。一般地，糖皮质激素阻断剂化合物可以用本领域公知的任何给药治疗药物的方法作为药物组合物给药。组合物可以是片剂、药丸、胶囊、半固体、粉末、持续释放制剂、溶液、悬浮液、药酒、气溶胶或任何其它适宜的组合物形式，并且包括至少一种本发明的化合物，该化合物与至少一种药物可接受的赋形剂组合在一起。适合的赋形剂对于本领域所属技术人员是公知的，它们和形成组合物的方法可以在诸如Alfonso ARRemington′s Pharmaceutical Sciences，17th ed.，Mack Publishing Company，Easton PA，1985的标准参考文献中查到。适合的液体载体，特别是注射溶液中使用的液体载体，包括水、水性盐溶液、水性葡萄糖溶液及二元醇。本发明的水性悬浮液含有与适于制备水性悬浮液的赋形剂相混合的GR拮抗剂。此类赋形剂包括悬浮试剂及分散或润湿剂，悬浮试剂如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、褐藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶及阿拉伯树胶、及蛋白，如凝胶和胶原质；分散或润湿剂如天然磷脂(例如卵磷脂)、含有脂肪酸的环氧烷烃的浓缩产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、含有长链脂肪醇的环氧乙烷的浓缩产物(例如heptadecaethylene oxycetanol)、含有从脂肪酸和己糖醇衍生而来的偏酯的环氧乙烷的浓缩产物(例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)、或含有从脂肪酸和己糖醇酐衍生而来的偏酯的环氧乙烷的浓缩产物(例如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯)。此水性悬浮液也可含有一种或多种防腐剂，如乙基或正丙基-p-羟基苯甲酸酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂、及一种或多种甜味剂，如蔗糖、天冬甜素或糖精。可以按重量克分子渗透浓度调节制剂。通过在植物油、矿物油或这些油的混合物中悬浮GR拮抗剂可形成油悬浮液，植物油如落花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，矿物油如液体石蜡。油悬浮液可以含有增厚剂，如蜂蜡、固体石蜡或十六烷醇。加入甜味剂如甘油、山梨糖醇或蔗糖可提供美味的口服制剂。这些制剂可通过加入抗氧化剂如抗坏血酸而保存。注射用的油赋形剂的例子可参见Minto，J.Pharmacol.Exp Ter.28193-102，1997。本发明的药物制剂也可是水包油乳状液的形式。油相可是如上所述的植物油、或矿物油、或其混合物。适合的乳化剂包括天然的橡胶，如阿拉伯橡胶和黄芪胶、天然的磷脂，如大豆卵磷脂、酯或从脂肪酸和己糖醇酐衍生而来的偏酯，如山梨聚糖单油酸酯、及含有环氧乙烷的偏酯浓缩产物，如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯。乳状液也可含有甜味剂和调味剂，如糖浆和甘香酒剂。这些制剂也可含有缓和剂、防腐剂或着色剂。可按照药物制造领域公知的任何方法制备糖皮质激素阻断剂药物制剂。这些药物可以含有甜味剂、调味剂、着色剂和保存剂。任何糖皮质激素阻断剂药物制剂可和无毒药物可接受的、适于制造的赋形剂混合。通常适于用在本发明中的糖皮质激素阻断剂化合物采用口服给药。组合物中本发明化合物的量取决于组合物的类型、单位剂量的大小、赋形剂的种类及本领域所属技术人员公知的其它因素而能够在大范围内变化。一般地，最终组合物可以包括重量百分数为0.000001(％w)到10％w的糖皮质激素阻断剂化合物，优选为0.00001％w到1％w，其余的是赋形剂或多种赋形剂。例如，GR拮抗剂米非司酮可以以片剂形式口服给药，剂量范围约为0.5～25mg/kg，更优选约为0.75mg/kg～15mg/kg，最优选约为10mg/kg。用于口服给药的药物制剂可以使用本领域公知的药物学上可接受的载体以适于口服的剂量形成。这些载体可使药物制剂以单位剂量的形式形成，如片剂、药丸、粉末、糖衣丸、胶囊、液体、止咳糖、溶胶、糖浆、浆料、悬浮体等适于患者摄取的方式。在需要时加入适当的其它化合物以获得片剂或糖衣芯后，可通过混合糖皮质激素阻断剂化合物和固体赋形剂、选择性地研磨得到的混合物、及加工颗粒混合物而得到口服用的药物制剂。适合的固体赋形剂是碳水化合物或蛋白质填充剂，包括但不限于糖，如乳糖、蔗糖、甘露糖醇、或山梨糖醇；从玉米、小麦、稻子、马铃薯或其它植物而来的淀粉；纤维素，如甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠；及橡胶，包括阿拉伯橡胶和黄芪胶；及蛋白，如凝胶和胶原质。如果需要，可以加入分解或增溶试剂，如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、褐藻酸或其盐，如褐藻酸钠。为从直肠给药，本发明的GR拮抗剂也可以以栓剂的形式给药。这些制剂可通过混合药物与适合的非刺激性赋形剂而制备，此赋形剂在普通温度下是固体，但在直肠温度下是液体，由此可在直肠中融化而释放出药物。这些材料是可可油和聚乙二醇。本发明的GR拮抗剂也可以以鼻内、眼内、阴道内和直肠内的方案给药，包括栓剂、吹入剂、粉末和烟雾剂的制剂(例如类固醇吸入剂，参见Rohatagi，J.Clin.Pharmacol.351187-1193，1995；Tjwa，Ann.AllergyAsthma Immunol.75107-111，1995)。本发明的GR拮抗剂可以通过透皮、局部线路配送，并制成涂药棒、溶液、悬浮液、乳状液、溶胶、膏状物、油膏、糊状物、凝胶剂、油漆、粉末及气溶胶等形式。为在体内缓慢释放，本发明的GR拮抗剂也可以以微球的形式配送。例如，微球可通过皮层注射含有可在皮下缓慢释放的微球药物(例如米非司酮)给药(参见Rao，J.Biomater Sci.Polym.Ed.7623-645，1995)、作为可生物降解或可注射的溶胶制剂给药(例如参见Gao Pharm.Res.12857-863，1995)、或作为微球口服给药(例如参见Eyles，J.Pharm.Pharmacol.49669-674，1997)。透皮和皮层内的路线都可提供按周和月的定量配送。本发明的GR拮抗剂药物制剂可以以盐提供，并可用许多种酸来形成，包括但不限于盐酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等。盐更易在水性或其它相应的游离碱形式的质子溶剂中溶解。在其它情况下，优选的制剂可是在使用前和缓冲液混合的冻干粉末，此缓冲液的pH是4.5至5.5并含有1mM-50mM的组氨酸、0.1％-2％的蔗糖、2％-7％的甘露醇。在另一个实施方案中，本发明的GR拮抗剂制剂适于肠胃外给药，如静脉内(IV)给药。这种给药制剂通常包括溶解在药物可接受的载体中的GR拮抗剂(例如米非司酮)的溶液。这些可接受及可使用的赋形剂和溶剂是水和灌流溶液(Ringer’s solution)、等渗氯化钠溶液。此外，无菌固定油通常也能被用作溶剂或悬浮介质。为达到此目的，可使用任何刺激性少的固定油，包括合成的单甘油酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸同样地可在注射制剂中使用。这些溶液是无菌的，而且通常也没有不需要的物质。这些制剂可由常规的公知杀菌技术杀菌。此制剂可含有在近生理条件下所需要的药物可接受辅助物质，如pH调节剂、缓冲剂、毒性调节剂，例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。根据给药的特定方式和患者的需要，在这些制剂中的GR拮抗剂的浓度可以在大范围内变化，主要是基于流体体积、粘度、体重等来选择。对于IV给药，此制剂可是无菌注射制剂，如无菌注射水性或油性悬浮液。可按照使用适合的分散剂或润湿剂及悬浮剂的公知技术形成此悬浮液。无菌注射制剂也可以是存在于无毒的、肠胃外可接受的稀释液或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，如1，3-丁二醇溶液。在另一个实施方案中，本发明的GR拮抗剂制剂可以通过使用可以和细胞膜融合的脂质体或内吞而传递，即利用与脂质体粘连或直接粘连到低聚核苷酸的配体，低聚核苷酸通过与细胞的表面膜蛋白受体结合而引起内吞作用。通过使用脂质体，特别是利用脂质体表面运载对于目标细胞有特效的配体，或相反优选直接指向特定的器官，这样人们可以在体内将GR拮抗剂的配送集中到目标细胞。(例如参见AL-Muhammed，J.Microencapsul.13293-306，1996；Chonn，Curr.Opin.Biotechnol.6698-708，1995；Ostro，Am.J Hosp.Pharm.461576-1587，1989)。
b.糖皮质激素受体拮抗剂的剂量给药方案的测定[87]本发明的方法可抑制或逆转成年DS患者的认知退化。可充分实现此目的GR拮抗剂的量被定义为“治疗有效剂量”。对于此应用有效的剂量方案和量，即“剂量给药方案”，取决于各种因素，包括认知退化的严重程度、患者的身体状态、年龄等。在计算患者的剂量方案时，也应考虑给药方式。剂量方案也应考虑本领域公知的药物动力学参数，即GR拮抗剂的吸收速率、生物药效率、新陈代谢、清除等(例如参见Hidalgo-Aragones，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.58611-617，1996；Groning，Pharmazie51337-341，1996；Fotherby，Contraception 5459-69，1996；Johnson，J.Pharm.Sci.841144-1146，1995；Rohatagi，Pharmazie 50610-613，1995；Brophy，Eur.J.Clin.Pharmacol.24103-108，1983；最新版Remington的supra)。例如，在某一研究中，小于0.5％的米非司酮日剂量在尿中排泄掉，此药物可非常广泛地与循环白蛋白结合(参见Kawai，supra，1989)。此技术状态可允许临床医生测定每一个单个患者的剂量方案、GR拮抗剂和欲治疗的疾病或病症。在说明性的实施例中，下面提供可被用作指导测定剂量方案的米非司酮使用指南，即当实施本发明的方法时使用的任何GR拮抗剂的剂量给药方案和剂量水平。取决于患者所需要的和可忍受的剂量和频度，可用一种或多种GR拮抗剂制剂给药。此制剂应能提供足量的活性药剂，即米非司酮，以有效地抑制或逆转成年DS患者的认知退化。例如，尽管用于抗糖皮质激素如米非司酮或ORG 34517口服给药的普通药物制剂可以按每日约0.5～25mg/kg体重的剂量用在本发明中，但优选是按每日每一患者约5～15mg/kg体重的量给药，更优选是按每日每一患者约8～12mg/kg体重的量给药，最优选是按每日每一患者10mg/kg体重的量给药。特别是在解剖学隐蔽位置给药时，如脑脊髓液(CSF)位置，与口服给药相比，可用较低的剂量进入血流、体腔或器官的内腔。在局部给药时基本上可使用较高的剂量。用于制备肠胃外给药的GR拮抗剂制剂的实际方法对于本领域所属技术人员是公知的或是显然的，并在诸如Remington的supra出版物中有更详细的公开。也参见Nieman，“Receptor Mediated AntisteroidAction，”Agarwal等，eds.，De Gruyter，New York，1987。在可接受的载体中形成含有本发明的GR拮抗剂的药物后，可将其置于合适的容器内并标明治疗适应症的标签。对于GR拮抗剂的给药，此标明可以包括，例如，关于给药用量、频度和方法的用法说明。在一个实施方案中，本发明提供一种用于抑制或逆转成年DS患者认知退化的药盒，其包括GR拮抗剂和用于教导GR拮抗剂给药的适应症、剂量和给药时间的指导性材料。
实施例[91]提供下面的实施例说明但不限制所要保护的发明。
实施例1用米非司酮抑制或逆转成年DS患者的认知退化[92]下面的实施例说明怎样实施本发明的方法。
患者选择[93]被诊断患有唐氏综合症的成年人(18岁以上)。患者对于他的或她的年龄而言通常具有正常的皮质醇水平。
米非司酮的剂量方案和给药[94]在此研究中使用糖皮质激素受体(GR)拮抗剂，即米非司酮。以每天200mg的剂量给药。持续六个月每天向个体给药200mg的米非司酮，并按如下所述的进行评估。如果需要可调节剂量，并在全部治疗过程中定期地进一步评估。米非司酮片剂可从商业上购得，例如从中国上海的上海华联药物有限公司购得。
认知退化的评估[96]为描绘和评估米非司酮抑制或逆转认知退化的效力，用本文所述的客观和主观标准确定患者的认知功能，并测量在基线处、3个月和6个月时的认知功能。
实施例2测量皮质醇水平[97]为测量实施例1中患者的皮质醇水平，采用并作为基线皮质醇测量的午后皮质醇测试测量法。测量在第0天、接受药物治疗后的两周(第14天)、及直到六个月内的每次观察、和其后定期观察的皮质醇水平。使用“双抗体皮质醇药盒”(Diagnostic Products Corporation，LosAngeles，CA)测量血液皮质醇水平。这种测试是一种竞争性的放射性免疫化验，其中用125I示踪的皮质醇和从抗体位置而来的临床样品的皮质醇竞争，并基本上使用制造商提供的试剂及按照制造商的指示进行。简而言之，通过静脉穿刺和从细胞分离出的血清收集血液。样品在2～8℃下保存直到7天、或在-20℃下冷冻2个月。在化验前，通过温和的旋转或逆温(gentle swirling or inversion)可使样品升到室温(15-28℃)。准备16只完全相似的试管，每只试管中装有25微升的血清。从准备的校准试管计算皮质醇浓度。净含量等于平均CPM减去平均非特定的CPM。通过对核准曲线进行插值以估计未知的皮质醇浓度(Dudley等，Clin.Chem.311264-1271，1985)。应该理解，此处描述的实施例和实施方案只是说明性的，本领域所属的技术人员可以容易建议由此而产生的各种修饰和变化，它们属于本申请的精神和范围，并且也在权利要求书的范围之内。
权利要求
1.一种抑制或逆转成年唐氏综合症患者认知退化的方法，所述方法包括将治疗有效量的糖皮质激素受体拮抗剂给药至所述患者以抑制或逆转认知退化，条件是所述患者尚未需要用糖皮质激素受体拮抗剂进行治疗。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂含有甾族化合物骨架，在甾族化合物骨架的11β位置处至少含有一个苯基部分。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述的在甾族化合物骨架的11β位置处含有的苯基部分是二甲基氨基苯基部分。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂是米非司酮。
5.如权利要求3所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂选自11β-(4-二甲氨基乙氧苯基)-17α-丙炔基-17β-羟基-4，9-雌甾二烯-3-酮及17β-羟基-17α-19-(4-甲基苯基)-雄甾-4，9(11)-二烯-3-酮。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂选自4a(S)-苄基-2(R)-丙炔-1-基-1，2，3，4，4a，9，10，10a(R)-八氢-菲-2，7-二醇及4a(S)-苄基-2(R)-氯乙炔基-1，2，3，4，4a，9，10，10a(R)-八氢-菲-2，7-二醇。
7.如权利要求1所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂是(11b，17b)-11-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)-17-羟基-17-(1-丙炔基)雌甾-4，9-二烯-3-酮。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂按每日每千克体重约0.5～20mg的日剂量给药。
9.如权利要求8所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂按每日每千克体重约1～10mg的日剂量给药。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂按每日每千克体重约1～4mg的日剂量给药。
11.如权利要求1所述的方法，其中所述的给药是每天一次。
12.如权利要求1所述的方法，其中给药方式是口服。
13.如权利要求1所述的方法，其中所述患者是年龄为21-35岁的年轻成年人。
14.如权利要求1所述的方法，其中所述患者是年龄为21-35岁的年轻成年人，并且没有认知退化的测试证据。
15.如权利要求1所述的方法，其中给药方式是透皮敷用、喷雾悬浮给药、或气雾式给药。
16.一种抑制或逆转唐氏综合症患者认知退化的药盒，所述药盒包括特效糖皮质激素受体拮抗剂；及指导性材料，用于向唐氏综合症患者说明所述的糖皮质激素受体拮抗剂的适应症、给药剂量和给药时间。
17.如权利要求16所述的药盒，还包括抗精神病药物。
18.如权利要求16所述的药盒，其中所述的指导性材料表明所述的糖皮质激素受体拮抗剂可以按每日每千克体重约0.5～20mg的日剂量给药。
19.如权利要求16所述的药盒，其中所述的指导性材料表明所述的糖皮质激素受体拮抗剂可以按每日每千克体重约1～10mg的日剂量给药。
20.如权利要求16所述的药盒，其中所述的指导性材料表明所述的糖皮质激素受体拮抗剂可以按每日每千克体重约1～4mg的日剂量给药。
21.如权利要求16所述的药盒，其中所述的糖皮质激素受体拮抗剂是米非司酮。
22.如权利要求16所述的药盒，其中所述的米非司酮是片剂型的。
全文摘要
本发明一般涉及精神病学领域。特别地，本发明涉及对药剂的发现，该药剂可抑制皮质醇与其受体的结合并可用在抑制或逆转成年唐氏综合症患者认知退化的方法中。在这些方法中可使用有效的特效糖皮质激素受体拮抗剂米非司酮。本发明也提供一种抑制或逆转DS患者认知退化的药盒，该药盒包括糖皮质激素受体拮抗剂，及用于说明糖皮质激素受体拮抗剂的适应症、给药剂量和给药时间的指导性材料。
文档编号A61K31/56GK1556708SQ02818608
公开日2004年12月22日 申请日期2002年8月27日 优先权日2001年8月31日
发明者约瑟夫K·贝拉诺夫, 约瑟夫K 贝拉诺夫 申请人:科塞普特治疗公司