专利名称：具有作为激酶抑制剂的活性的氨基吲唑衍生物、它们的制备方法和含有它们的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有作为激酶抑制剂的活性的氨基吲唑衍生物，更具体涉及3-氨基-吲唑衍生物，它们的制备方法，包含它们的药物组合物和它们作为治疗剂、特别是作为治疗与蛋白激酶失调有关的疾病的治疗剂的应用。
蛋白激酶(Pks)功能异常是多种疾病的标志。人类癌症所涉及的大部分致癌基因和原癌基因编码Pks。PKs活性增加还涉及多种非恶性疾病，如良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑细胞增殖、肺纤维化、关节炎肾小球性肾炎和术后狭窄与再狭窄。
Pks还涉及炎症和病毒与寄生虫的增殖。PKs还在神经变性疾病的病因和形成中起主要作用。
关于PKs功能异常或失调的一般性参考资料，例如参见CurrentOpinion in Chemical Biology 1999，3，459-465。
本发明的另一个目的是提供在治疗中用作抗由蛋白激酶活性失调引起和/或与蛋白激酶活性失调有关的许多疾病的试剂的化合物。
本发明的另一目的是提供赋有多蛋白激酶抑制活性的化合物。
本发明者现已发现某些3-氨基吲唑衍生物、下文称为吲唑衍生物或吲唑赋有多蛋白激酶抑制活性，因而用于与蛋白激酶失调有关的疾病的治疗。
更为具体地，本发明的吲唑用于治疗多种癌，包括但不限于癌症如膀胱、乳房、结肠、肾、肝脏、肺(包括小细胞肺癌)、食道、胆汁-膀胱、卵巢、胰腺、胃、宫颈、甲状腺、前列腺和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；淋巴系造血肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞-淋巴瘤、Hodgkin淋巴瘤、非Hodgkin淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和Burkett淋巴瘤；骨髓系造血肿瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征和前髓细胞白血病；间充质源肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和外周神经系统肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、胶质瘤和神经鞘瘤；其它肿瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角质黄色瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
由于PKs在细胞增殖调节中的关键作用，这些吲唑还用于治疗多种细胞增殖疾病，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑细胞增殖、肺纤维化、关节炎肾小球性肾炎和术后狭窄与再狭窄。
cdk5涉及tau蛋白的磷酸化这一事实(J.Biochem.，117，741-749，1995)表明，本发明的化合物可以用于治疗阿尔茨海默氏病。
本发明化合物作为细胞凋亡调节剂，还可以用于治疗癌、病毒感染、预防HIV感染个体的AIDS发展、自身免疫疾病和神经变性疾病。
本发明的化合物可以用于抑制肿瘤血管生成和转移。
本发明的化合物可以用作细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)抑制剂，还可以作为诸如以下的其它蛋白激酶的抑制剂不同同工型的蛋白激酶C、Met、PAK-4、PAK-5、ZC-1、STLK-2、DDR-2、Aurora1、Aurora2、BUb-1、PLK、Chk1、Chk2、HER2、rafl、MEK1、MAPK、EGF-R、PDGF-R、FGF-R、IGF-R、VEGF-R、PI3K、weel激酶、Src、Abl、Akt、ILK、MK-2、IKK-2、Cdc7、Nek，因而有效地治疗与其它蛋白激酶有关的疾病。
许多吲唑和氨基吲唑在本领域中已知作为合成或化学中间产物、作为聚合物稳定剂、作为治疗剂，甚至作为蛋白激酶抑制剂。
例如，在Smithkline Co.的US 28939(US 3,133,081再发行)中公开了某些烷基氨基-吲唑赋有肌肉松驰剂和止痛活性；其中有3-甲基氨基-5-三氟甲基-吲唑和3-二乙基氨基-5-三氟甲基-吲唑。
在Bioorg.Med.Chem.Lett.(1998)；8(7)，715-720公开了具有3-氨基吲唑基团的环状N，N′-脲衍生物作为HIV蛋白酶抑制剂。
在Bayer Co.的WO 99/32111中公开了二芳基-脲衍生物可在除癌之外的疾病的治疗中用作p38激酶抑制剂，其中具体例举的化合物为N-[4-[(吡啶基-4-基)氧]苯基]-N′-[6-氯-(吲唑-3-基)]-脲。
在Pfizer Ltd的WO 91/17162中公开了进一步被芳基部分取代，例如被吲哚基-氨基羰基-苯基的咪唑并吡啶衍生物作为一种血小板活化因子(PAF)拮抗剂。
在Agouron Pharmaceuticals Inc.的WO 01/02369中公开了进一步在3位被除氨基之外的基团取代的吲唑化合物或其衍生物具有蛋白激酶抑制活性。
在Hoechst的US 5,714,514中公开巯基-氰基丙烯酰基氨基-或烷硫基-氰基丙烯酰基-氨基-杂环用于治疗与细胞生长增加有关的疾病。
在Vertex Pharmaceuticals Inc的WO 99/65870公开1-酰基氨基-3-(N-芳基磺酰基-N-烷氧基氨基)-2-羟基-丙烷衍生物作为HIV天冬氨酰基蛋白酶抑制剂，其中所述芳基部分还包括吲唑基团。
某些其它特定的吲唑衍生物已知作为治疗剂，具体而言，公开了3-[3-(吗啉-4-基)丙酰基氨基]-吲唑、3-(N，N-二乙基氨基)-丙基氨基-5-甲氧基-吲唑、3-[(3-甲基)吗啉-4-基]-丙基氨基-5-甲氧基-吲唑、3-(N，N-二乙基氨基)-丙基氨基-5-甲基-吲唑和3-[(3-甲基)吗啉-4-基]-丙基氨基-5-甲基-吲唑具有止痛和抗炎活性[参见Asahi Chemical Industry的US 4,751,302和JP-A-60061569]；3-[(2-羟基苯基)羰基氨基]-吲唑被公开作为抗微生物剂[参见Pharmazie(1990)，45(6)，441-2]。在本领域中已知许多其它吲唑，主要公开作为化学中间产物或用于除治疗之外的目的，例如聚合物稳定剂、漂白剂、染料等。
其中有3-(乙氧基羰基氨基)-吲唑[参见Chemical Abstracts92(1980)215400]；3-乙酰基氨基-吲唑和3-苯甲酰基氨基-吲唑[参见J.Org.Chem.(1996)，61(24)，8397-8401]；3-丁酰基氨基-吲唑、3-[(4-氯苯基)羰基氨基]-吲唑、3-[(4-甲基-苯基)羰基氨基]吲唑和3-[(3，3-二苯基)丙酰基氨基]吲唑[参见Acta Chim.Hung.(1990)，127(6)，795-802]；3-[(3，5-二甲基-异噁唑-4-基)羰基氨基]-吲唑[参见J.Heterocyl.Chem.(1974)，11(4)，623-6]；3-[(4-硝基苯基)羰基氨基]-吲唑和3-(苯基乙酰基氨基)-吲唑[参见J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1(1982)，(3)，759-66]；3-[(2-氨基苯基)羰基氨基]-吲唑和3-[(2-硝基苯基)羰基氨基]-吲唑[杂环(1996)，43(11)，2385-2396]；3-[(4-氯-2-硝基苯基)羰基-氨基]-吲唑、3-[(2-氨基-4-氯苯基)羰基氨基]-吲唑、3-[(2-氨基-5-氯苯基)羰基氨基]-吲唑和3-[(3-氯-6-硝基苯基)羰基氨基]-吲唑[参见Arch.Pharm.(1999)，332(9)，317-320]；3-(乙酰基氨基)-5-氨基-吲唑[参见Farbwerke Hoechst A.G.的US3,316,207]；3-二甲基氨基-5-三氟甲基-吲唑[参见Bayer A.G.的DE-A-2458965]；3-苯基氨基-6-甲基-吲唑、3-苯基氨基-、3-(4-氯)苯基氨基-、3-(4-甲基)苯基氨基-、3-(3-甲基)苯基氨基-和3-(4-氨基磺酰基)苯基氨基-5-甲基-吲唑[参见ChemicalAbstracts 78(1973)136158]；3-[(1-羟基-2-甲基)-2-丙基]氨基-6，7-二甲氧基-吲唑[参见Ortho PharmaceuticalCo.的US 4,864,032]。
此外，在Asahi Chemical Industry Co的US 4,751,302中公开了3-苯二甲酰亚氨基-吲唑和4-氯-3-苯二甲酰亚氨基-吲唑作为制备具有止痛和抗炎活性的药物的合成中间产物。
在Heisei的JP-A-08022109中公开磺酰基氨基吲唑，更具体为长链烷氧基苯基磺酰基氨基-吲唑为一种青色染料形成化合物。
Vertex Pharmaceuticals Inc.还在如下大量的专利申请中公开了一大类用作蛋白激酶抑制剂的吡唑化合物WO02/62789、WO02/59112、WO02/59111、WO02/57259、WO02/50066、WO02/50065、WO02/22608、WO02/22607、WO02/22606、WO02/22605、WO02/22604、WO02/22603和WO02/22601。
因此，本发明提供一种用于治疗由蛋白激酶活性改变导致的疾病和/或与蛋白激酶活性改变有关的疾病的方法，所述方法采用给需要所述方法的哺乳动物施用有效量的式(I)代表的氨基吲唑或其药学上可接受的盐
其中R选自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自独立地为选自以下的任选进一步被取代的基团直链或支链C1-C6烷基、C2-C6链烯基或炔基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环基或杂环基C1-C6烷基；或者R为下式(II)的苯二甲酰亚氨基， 任何R1，如果存在的话，在吲唑环的5位或6位，并代表如以上关于R′或R″所述的任选进一步被取代的基团；m为0或1。
在上述方法的一个优选的实施方案中，由蛋白激酶活性改变导致的疾病和/或与蛋白激酶活性改变有关的疾病选自癌、细胞增殖疾病、阿尔茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神经变性疾病。
可以治疗的具体的癌种类包括癌症、鳞状细胞癌、骨髓或淋巴系造血肿瘤、间充质源肿瘤、中枢和外周神经系统肿瘤、黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角质黄色瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
在上述的本发明的其它优选的实施方案中，所述的细胞增殖疾病选自良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑细胞增殖、肺纤维化、关节炎肾小球性肾炎和术后狭窄与再狭窄。
此外，本发明的方法的目的还提供肿瘤血管生成和转移抑制作用。
本发明还提供一种式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其药学上可接受的盐 其中R选自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自独立地为选自以下的任选进一步被取代的基团直链或支链C1-C6烷基、C2-C6链烯基或炔基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环基或杂环基C1-C6烷基；或者R为下式(II)的苯二甲酰亚氨基， 任何R1，如果存在的话，在吲唑环的5位或6位，并代表如以上关于R′或R″所述的任选进一步被取代的基团；m为0或1；附带条件是
a)如果R为-NHCOR′而m为0，则R′不为甲基、正丙基、苄基、2，2-二苯基乙基、3，5-二甲基-异噁唑-4-基、2-(吗啉-4-基)乙基或者任选被氯、羟基、甲基、硝基或氨基取代的苯基；b)如果吲唑在5位或6位被甲氧基取代，则R不为3-(N，N-二乙基氨基)丙基氨基、3-[(3-甲基)吗啉-4-基]丙基氨基或1-羟基-2-甲基-2-丙基氨基；c)排除化合物3-苯二甲酰亚氨基-吲唑。
本发明目标式(I)的化合物可以具有不对称碳原子，因而可以作为外消旋混合物或作为单独的光学异构体存在。
因此，式(I)的化合物的代谢物和药学上可接受的生物前体(或者称为前药)的所有可能的异构体和它们的混合物以及任何包括它们的治疗方法也在本发明的范围之内。
在本说明书中，除非另外指出，术语直链或支链C1-C6烷基意指诸如以下的基团甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等等。
术语直链或支链C2-C6链烯基或炔基意指具有双键或叁键的不饱和烃链，例如乙烯基、乙炔基、1-丙烯基、烯丙基、1-或2-丙炔基、1-、2-或3-丁烯基、1-、2-或3-丁炔基、戊烯基、戊炔基、己烯基、己炔基等等。
术语C3-C6环烷基意指诸如以下的基团环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
术语芳基意指具有1-4个彼此稠合或通过单键连接的环部分的一、二或多碳环和杂环烃，其中至少一个碳环或杂环为芳环。
例如芳基的非限制性实例为苯基、茚满基、联苯基、α-或β-萘基、芴基、9，10-二氢蒽基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、咪唑基、咪唑并吡啶基、1，2-亚甲二氧基苯基、噻唑基、异噻唑基、吡咯基、吡咯基-苯基、呋喃基、苯基-呋喃基、苯并四氢呋喃基、噁唑基、异噁唑基、吡唑基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、异二氢吲哚基、苯并咪唑基、四唑基、四唑基苯基、吡咯烷基-四唑基、异二氢吲哚基-苯基、喹啉基、异喹啉基、2，6-二苯基-吡啶基、喹喔啉基、吡嗪基、苯基-喹啉基、苯并呋咱基、1，2，3-三唑基、1-苯基-1，2，3-三唑基等等。
因此术语5或6元杂环基包括还称为芳基的芳香杂环基团，它意指饱和或部分不饱和5或6元碳环，其中一个或多个碳原子被1-3个杂原子如氮、氧和硫取代。
任选苯稠合或进一步取代的5或6元杂环基的实例为1，3-二氧戊环、吡喃、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、吗啉、四氢呋喃等等。
根据以上提供的R1、R′和R″的含义，任何以上的基团可以进一步任选在任何自由位置被一个或多个基团，如1-6个基团取代，该基团选自卤素、硝基、氧代基团(＝O)、羧基、氰基、烷基、全氟代烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基、杂环基、氨基及其衍生物，例如烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、脲基、烷基脲基或芳基脲基；羰基氨基及其衍生物，例如甲酰基氨基、烷基羰基氨基、链烯基羰基氨基、芳基羰基氨基、烷氧基羰基氨基；羟基及其衍生物，例如烷氧基、芳氧基、烷基羰基氧、芳基羰基氧、环链烯氧基或亚烷基氨基氧基；羰基及其衍生物，例如烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、环烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基；硫化衍生物，例如烷硫基、芳硫基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰氧基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基或二烷基氨基磺酰基。
如果合适的话，以上每一个基团依次可以进一步被一个或多个上述的基团取代。
在这些后面的基团中，除非本说明书另外特指，术语卤素原子意指氟、氯、溴或碘原子。
术语全氟代烷基意指以上定义的直链或支链C1-C6烷基，其中多于一个氢原子被氟原子取代。
例如，全氟代烷基的实例为三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，2-二氟乙基、1，1，1，3，3，3-六氟丙基-2-基等等。
根据以上的全部，本领域技术人员清楚地看出任何名称确定为复合名称的基团，例如环烷基烷基、芳基烷基、杂环基烷基、烷氧基、烷硫基、芳氧基、芳基烷氧基、杂环氧基、杂环基烷氧基、烷基羰基氧等等应意指对它们来源的部分所做的常规解释。例如，术语杂环基-烷基代表进一步被以上定义的杂环基取代的烷基。
式(I)的化合物的药学上可接受的盐是与诸如以下的无机或有机酸形成的酸加成盐硝酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、草酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲磺酸、羟乙磺酸和水杨酸，以及与诸如以下的无机或有机碱形成的盐碱金属或碱土金属，特别是钠、钾、钙或镁氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐、无环或环胺，优选甲基胺、乙基胺、二乙基胺、三乙基胺或哌啶。
根据以上的全部，本领域技术人员清楚地看出，在式(I)的化合物中，当m为0时，不存在-OR1基团，从而不存在通过氧原子与吲唑骨架连接的R1基团。因此，在这种情况下，根据以下报道的编号体系的5位或6位未被取代(或者氢取代)。
另一方面，当m为1时，在吲唑环的5位或6位中的任一位置存在一个-OR1基团(从而存在R1)。
第一类优选的本发明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R为基团-NHR′或-NR′R″，而R′、R″、R1和m如以上定义。
在此类中更优选这样的化合物其中m为1，而R1在吲唑环的5位或6位中的任一位置。
甚至更优选这样的化合物其中R1、R′和R″各自独立地选自C2-C6链烯基，C3-C6炔基，芳基，芳基C1-C6烷基，具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
其它类优选的本发明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R为基团-NHCOR′，而R′、R1和m如以上定义。
在此类中更优选这样的化合物其中m为1，而R1在吲唑环的5位或6位中的任一位置。
甚至更优选这样的化合物其中R1和R′各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
其它类优选的本发明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R为基团-NHCONHR′或-NHCONR′R″，而R′、R″、R1和m如以上定义。
在此类中更优选这样的化合物其中m为1，而R1在吲唑环的5位或6位中的任一位置。
甚至更优选这样的化合物其中R1、R′和R″各自独立地选自C1-C6烷基，C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
其它类优选的本发明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R为基团-NHSO2R′，而R′、R1和m如以上定义。
在此类中更优选这样的化合物其中m为1，而R1在吲唑环的5位或6位中的任一位置。
甚至更优选这样的化合物其中R1和R′各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
其它类优选的本发明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R为基团-NHCOOR′，而R′、R1和m如以上定义。
在此类中更优选这样的化合物其中m为1，而R1在吲唑环的5位或6位中的任一位置。
甚至更优选这样的化合物其中R1和′各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
其它类优选的本发明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R为式(II)的苯二甲酰亚氨基，而R1和m如以上定义。
在此类中更优选这样的化合物其中m为1，而R1在吲唑环的5位或6位中的任一位置。
甚至更优选这样的化合物其中R1选自C2-C6链烯基、C3-C6炔基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
任选为药学上可接受的盐的形式的式(I)的化合物的特定的实例在实验部分报道。
如上述，本发明的另一个目的是一种用于制备式(I)的氨基吲唑衍生物的方法。
因此，式(I)的化合物及其药学上可接受的盐(其中R如以上定义，但不为式(II)的苯二甲酰亚氨基)可以通过包括以下步骤的方法获得a)在酸性条件下使式(III)的2-氨基-苄腈衍生物与亚硝酸钠在氯化亚锡存在下反应得到式(IV)的化合物
其中m如以上定义，且R_如果存在的话为甲基或苄基； b)使式(IV)的化合物与邻苯二甲酸酐反应得到式(V)的化合物 c)使式(V)的化合物与适宜的醚裂解试剂反应得到对应的式(VI)的羟基衍生物 d)使式(VI)的化合物与适宜的甲硅烷化试剂(Riv)3SiZ反应得到式(VII)的化合物，其中各Riv相同或不同，为直链或支链C1-C4烷基，并且Z为卤原子，
e)使式(VII)的化合物与适宜的可任选地担载在适宜的聚合树脂上的吲唑氮保护剂反应得到式(VIII)的化合物， 其中Q为上述的保护基或者代表载体树脂；f)使式(VIII)的化合物与肼一水合物反应得到式(IX)的化合物， 并使式(IX)的化合物根据以下步骤g.1)或g.2)中的任一步骤进行反应；g.1)与适宜的式R′-Z(X)、R′-COZ(XI)、R′-NCO(XII)、R′-SO2Z(XIII)或R′OCOZ(XIV)的试剂反应，其中R′如以上定义，而Z代表卤原子或适宜的离去基团，从而得到对应的式(XV)的化合物 其中R为基团-NHR′、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHSO2R′或-NHCOOR′，而且如果需要的话，使R为-NHR′或-NHCONHR′基团的化合物与下式的化合物反应，R″Z (XVI)其中R″和Z如以上定义，从而得到式(XV)的化合物，其中R为基团-NR′R″或-NHCONR′R″；g.2)与(XVII)的化合物在4-硝基苯基氯甲酸酯存在下反应R′R″NH (XVII)其中R′和R″如以上定义，从而得到对应的式(XV)的化合物，其中R为基团-NHCONR′R″；h)使任何以上式(XV)的化合物与四丁基氟化铵反应得到式(XVIII)的化合物
i)使式(XVIII)的化合物与下式的衍生物反应，R1-Z (XIX)其中R1如以上定义，并且Z为卤原子、适宜的离去基团或羟基，从而得以式(XX)的化合物； j)将式(XX)的化合物脱保护，或者可选择地将聚合树脂裂解以得到目标式(I)的化合物，而且如果需要的话，将它转化成另一种式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐。
根据以上的全部，本领域技术人员清楚看到如果根据以上方法制备的式(I)的化合物是作为一种异构体的混合物得到的话，则根据常规技术使它们成为式(I)的单一异构体的分离仍在本发明的范围之内。
类似地，根据本技术中已知的方法使对应的盐成为游离化合物(I)的转化仍在本发明的范围之内。
根据所述方法的步骤a)，将式(III)的化合物、优选2-氨基-4-甲氧基-苄腈或2-氨基-5-苄氧基-苄腈与亚硝酸钠反应。在氯化亚锡存在下和酸性条件如盐酸或硫酸下将重氮盐还原。
所述反应可以在水和适宜的溶剂如甲醇、乙醇等的混合物中，在大约0℃至大约10℃的温度范围内完成。
所述反应可以通过以下步骤进行将亚硝酸钠加到在浓盐酸中的式(III)化合物的溶液中，同时保持搅拌大约1小时至3小时的时间。
然后可以将所述的悬浮液转移滴到在浓盐酸中的氯化亚锡溶液中，并在大约0℃下冷却，同时保持搅拌适宜的时间，例如在约4小时至大约6小时。
根据所述方法的步骤b)，式(IV)的化合物与邻苯二甲酸酐根据常规方法进行反应以制备苯二甲酰亚氨基衍生物。所述反应可以在不同的溶剂中完成，包括氯仿、乙腈、二噁烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等等；优选与乙腈反应。在这方面，将邻苯二甲酸酐加到式(V)化合物的溶液中。然后将温度变成适宜的值，例如大约70℃至大约100℃，优选80℃。搅拌在大约1小时至大约4小时的适宜时间内完成。
根据所述方法的步骤c)，通过与适宜的醚裂解试剂如吡啶鎓盐酸盐、碘代三甲基硅烷或三溴化硼反应而将式(V)的化合物转化成对应的羟基衍生物。所述反应可以在净氯化吡啶鎓中完成，或者与其它试剂一起在二氯甲烷或氯仿中完成。优选使用净氯化吡啶鎓。
在这方面，将氯化吡啶鎓和式(V)的化合物的混合物带入大约180℃至大约200℃的适宜温度，同时在大约1小时至大约3小时的时间内完成搅拌。
根据所述方法的步骤d)，将式(VI)的化合物与甲硅烷基衍生物、优选叔丁基-二甲基-甲硅烷基氯化物(TBDMSCl)反应，以得到对应的甲硅烷基醚衍生物。所述的反应可以在适宜的碱存在下完成，所述碱如1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，或者更优选1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)。
在这方面，将叔丁基-二甲基-甲硅烷基氯化物(TBDMSCl)加到式(VI)的化合物的溶液。所述反应在不同的溶剂如二氯甲醇、乙腈、二甲基甲酰胺等中完成，溶剂优选二氯甲烷。温度范围可以为大约20℃至大约40℃，同时保持搅拌大约1小时至大约4小时。
根据所述方法的步骤e)，将如此得到的式(VII)的吲唑衍生物在吲唑氮原子上进行保护，或者可选择地担载在适宜的聚合树脂上。
所述的保护反应可以根据本领域中已知的常规方法完成，例如通过使用适宜的氮保护基团，例如叔丁氧基-羰基(BOC)基团。
在相同的位置，可选择地，式(VII)的吲唑可以方便地粘附到惰性聚合物载体，例如2-氯-三苯甲基氯化物树脂、三苯甲基氯化物树脂、对硝基苯基碳酸酯Wang树脂或溴-4-甲氧基苯基)甲基聚苯乙烯，它们在本领域中都是公知的。
显然，此相同的选择特别有利于在固相合成(SPS)条件下制备式(I)的化合物，所述条件一般在根据诸如以下所述的组合化学技术制备化合物库时采用。
与树脂的反应在存在稍微过量的适宜的碱，例如胺如二异丙基乙基胺(DIPEA)，三乙基胺(TEA)，1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂-磷杂苯(phosphorine)的情况下，在适宜的溶剂如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等等中完成。
优选反应在二氯甲烷中在大约20℃的温度下完成。
反应可以通过以下步骤进行将碱和式(VII)的化合物加到树脂悬浮液中，并在大约20℃的温度下搅拌适宜的时间，例如至多24小时。
根据所述方法的步骤f)，用肼一水合物处理式(VIII)的衍生物以裂解苯二甲酰亚氨基。
反应优选通过使用大大过量，例如至多10当量的肼水合物或一水合物，在存在适宜的溶剂如卤代烃、低级醇及其混合物的情况下完成。
溶剂为二氯甲烷、乙醇及其混合物。
反应可以通过以下方法完成将肼加到式(VIII)的化合物的溶液，并在大约20℃至大约45℃的温度下搅拌适宜的时间。优选将反应混合物在大约40℃下保持搅拌大约16小时。
根据所述方法的步骤g.1)或g.2)中的任一步骤，根据已知的方法使式(IX)的氨基衍生物与适宜的式(X)-(XIV)的试剂反应，或者与式(XVII)的化合物反应。
典型地，式(IX)的化合物可以与式(X)的化合物反应得到对应的-NHR′衍生物，其中R′如以上定义；与式(XI)的化合物反应得到对应的-NHCOR′酰基衍生物；与式(XII)的化合物反应得到对应的-NHCONHR′脲基衍生物；与式(XIII)的化合物反应得到对应的-NHSO2R′衍生物；与式(XIV)的化合物反应得到对应的-NHCOOR′衍生物。
可选择地，式(IX)的化合物可以与式R′R″NH(XVII)的化合物，在4-硝基苯基氯甲酸酯存在下反应得到对应的脲基-NHCONR′R″衍生物。
任何一个以上的反应根据在官能化氨基衍生物的制备中所用的常规方法，以对应的胺为原料完成。
优选在式(X)的化合物中，Z代表适宜的离去基团，例如碘、溴或硼酸；在式(XI)、(XIII)或(XIV)的化合物中，Z代表卤原子，甚至更优选氯原子。
除了以上化合物以外，本领域技术清楚地看出如果需要的话，任何一种如此制备和其中的R代表基团-NHR′或-NHCONHR′的以上式(XV)的化合物可以进一步转化成为对应的R分别为-NR′R″或-NHCONR′R″基团的衍生物。
而且这些反应根据常规方法，通过适宜的式(XV)的中间产物化合物和适宜的式(XVI)的衍生物反应而进行。
在这方面，将式(IX)的化合物溶于适宜的溶剂如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二噁烷等，并加入适宜的碱如三乙基胺、二异丙基乙基胺、碳酸钠等等。然后加入通式(XI)、(XIII)或(XIV)的化合物，并将混合物在范围为大约20℃至大约80℃的温度下搅拌大约2小时至大约15小时的时间。当使用通式(XII)的异氰酸酯时，反应条件与以上相同，除了不需要碱。在所有这些反应中，可以任选使用适宜的催化剂如二甲基氨基吡啶。
当根据已知的方法使式(XII)的化合物与式(X)的化合物反应得到对应的官能化的式(XIV)的氨基衍生物时，可以适用基本上类似的方法。
例如，可以根据常规方法进行操作，使式(IX)的化合物可以与式(X)的衍生物(其中Z为卤素，例如碘或溴，而R′为芳基烷基如苄基)反应。
另一方面，可以使式(IX)的化合物与式(X)的衍生物(其中Z为溴原子，而R′为芳基)在钯催化剂，例如三(二亚苄基丙酮)二钯，乙酸钯或1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁二氯钯存在下，通过加入适宜的碱如叔丁醇钾、碳酸铯等和钯配基如2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘基(binaphthyl)，三邻甲苯基膦、三正丁基膦、三叔丁基膦等等而进行反应，以得到对应的式(XV)的衍生物。
在这方面，将式(IX)的化合物悬浮在适宜的无水溶剂如甲苯、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲氧基乙烷、二噁烷等等，并将式(X)的化合物、催化剂、碱和配基加到其中。然后使悬浮液变为范围为大约50℃至大约100℃的适宜的温度，同时保持搅拌大约8小时至5小时。在惰性气氛下完成反应。
根据所述方法的步骤h)，随后使式(XV)的化合物与四丁基氟化铵反应得到对应的式(XVIII)的羟基衍生物。从而可以将化合物(XV)悬浮在无水溶剂如二噁烷、四氢呋喃等，并加入在适宜的溶剂中的四丁基氟化铵溶液。将溶液在范围为大约20℃至大约50℃的温度下搅拌大约2小时至大约16小时。
如此得到的式(XVIII)的产物可以进一步根据所述方法的步骤i)，与适宜的式(XIX)的衍生物进行反应。
更为具体地，与式(XIX)的化合物(其中Z为卤原子如溴或氯或适宜的离去基团)的反应在碱如氢氧化钠、氢化钠、2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂-磷杂苯(phosphorine)或者更优选的碳酸铯存在下完成，以得到对应的式(XX)的醚衍生物。
在这方面，将式(XVIII)的化合物悬浮在适宜的溶剂如二甲基乙酰胺、四氢呋喃、二噁烷或更优选的二甲基甲酰胺中，并加入碱。
将混合物于大约20℃至大约80℃的温度下搅拌大约5小时至大约36小时。
可选择地，这些相同的式(XX)的化合物可以通过式(XVIII)的衍生物与式(XIX)的化合物(其中Z为羟基)在Mitsunobu操作条件下，例如在三苯基膦和偶氮二甲酸二异丙酯存在下反应而得到。
在这方面，将三苯基膦、偶氮二甲酸二异丙酯和通式(XIX)的化合物溶于适宜的溶剂如四氢呋喃、二噁烷等，并在适宜的碱如三乙基胺或二异丙基乙基胺存在下，将溶液转到溶于适宜的溶剂如四氢呋喃，二噁烷等的式(XVIII)的化合物的混合物中。将混合物在范围为0℃至20℃的温度下搅拌在范围为大约2小时至大约15小时的时间。
最后，根据所述方法的步骤j)，通过常规方法，在酸性条件下进行操作而在吲唑氮原子处将式(XX)的化合物脱保护。将式(XX)的化合物悬浮在适宜的溶剂如甲醇、乙醇等，并加入浓盐酸溶液。将混合物在范围为大约20℃至大约40℃、优选大约20℃的温度下搅拌大约5小时至大约15小时的适宜时间。可选择地，从载体树脂上裂解此相同的式(XX)的中间体化合物。
树脂裂解可以在三氟乙酸存在下完成以得到目标式(I)的化合物。将树脂悬浮在处于二氯甲烷中的5-95％三氟乙酸溶液，并将混合物于大约20℃的温度下搅拌大约5分钟至大约3小时的时间。
根据以上的全部，本领域技术人员清楚地看到式(I)的化合物(其中R1和m如以上定义，而R为式(II)的苯二甲酰亚氨基)及其药学上可接受的盐可以根据类似的方法，通过使式(VIII)的化合物依照所述方法的步骤h)、i)和j)进行反应，以得到具有代替R基团的苯二甲酰亚氨基(II)的目标式(I)的衍生物。
优选地，当制备式(I)的化合物(其中R为亚磺酰氨基(-NHSO2R′)基团)时，可以通过改变脱保护步骤的顺序而方便地修改以上的合成途径。
更为具体地，其中R为-NHSO2R′基团的式(I)的化合物可以优选通过根据所述方法的步骤(e)所得的式(VIII)的中间体衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤(h)进行反应得到其中R为苯二甲酰亚氨基的式(XVIII)的化合物。
然后使如此得到的式(XVIII)的化合物与式(XIX)的衍生物根据所述方法的步骤(i)进行反应，以得到其中的R为苯二甲酰亚氨基的式(XX)的化合物。
然后使以上式(XX)的化合物与肼一水合物根据所述方法的步骤(f)进行反应，以得到其中的R为-NH2的式(XX)的化合物。
最后，接着使以上式(XX)的化合物与适宜的式(XIII)的衍生物根据所述方法的步骤(g.1)进行反应，以得到对应的其中的R代表所给出的-NHSO2R′基团的式(XX)的磺胺基衍生物，将此衍生物根据所述方法的步骤(j)进行脱保护或从树脂上裂解。
当根据所述方法的任何变形制备式(I)的化合物而这些变形都意在本发明的范围内时，可能引起不期望的副反应的两种原料、试剂或其中间体中的任选的官能团需要根据常规的技术进行适宜地保护。
同样，后者至游离的脱保护的化合物的转化可以根据已知的方法完成。
式(I)的化合物的药学上可接受的盐或可选择的来自它们的盐的游离化合物都可以根据常规的方法得到。
式(III)的化合物是已知的，或者容易地根据已知的方法制备。例如，2-氨基-4-甲氧基-苄腈可以根据以Shionogi & Co名义申请的EP-A-257583所述进行操作而制备；2-氨基-5-苄氧基-苄腈可以如J.Heterocycl.Chem.(1972)，9(4)，759-73所述制备。
如果目前不能商购得到的话，所有式(X)、(XI)、(XII)、(XIII)、(XIV)、(XVI)、(XVII)和(XIX)的化合物是已知的，并容易地根据已知的方法制备。
同样，任何包含甲硅烷基衍生物(Riv)3SiZ以及聚合树脂的本发明方法的试剂可以商购得到或者容易地由可商购的来源制备。
如前述，本发明的式(I)的化合物方便地根据本领域中公知的组合化学技术，通过以连续的方式完成上述多种中间体之间的反应并在SPS条件下进行操作而制备。
所有优选的本发明的化合物，可能合适的其药学上可接受的盐的形式，这里被方便地指代并定义为所述方法的产物，即作为可以通过给定的方法得到的式(I)的产物。
因此，这里可以通过以下步骤提供本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXa)的化合物 与表I所述的每一种式(X)的化合物反应，以得到多种式(XVa)的化合物， 然后使每一种式(XVa)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，接着与每一种表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
还可以通过以下步骤提供本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXb)的化合物 与表I所述的每一种式(X)的化合物反应，以得到多种式(XVa)的化合物，
然后使每一种式(XVb)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II或III所述的每一种式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
而且可以通过以下步骤提供本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXa)的化合物 与表IV所述的每一种式(XI)的化合物反应，以得到多种式(Xvc)的衍生物， 然后使每一种式(XVc)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II或III所述的每一种式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
还可以通过以下步骤得到本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXb)的化合物 与表IV所述的每一种式(XI)的化合物反应，以得到多种式(XVd)的化合物， 然后使每一种式(XVd)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II和III所述的每一种式(XIX)的衍生物进行反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
还可以通过以下步骤得到本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXa)的化合物 与表V所述的每一种式(XII)的化合物反应，以得到多种式(XVe)的化合物，
然后使每一种式(XVe)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II和III所述的每一种式(XIX)的衍生物进行反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
还可以通过以下步骤得到本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXb)的化合物 与表V所述的每一种式(XII)的化合物反应，以得到多种式(XVf)的化合物， 然后使每一种式(XVf)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II和III所述的每一种式(XIX)的衍生物进行反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
还可以通过以下步骤得到本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXa)的化合物 与表VI所述的每一种式(XIII)的化合物反应，以得到多种式(XVg)的化合物， 然后使每一种式(XVg)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II和III所述的每一种式(XIX)的衍生物进行反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
还可以通过以下步骤得到本发明的新的化合物及其药学上可接受的盐例如根据以上方法通过组合化学技术，首先使式(IXb)的化合物 与表VI所述的每一种式(XIII)的化合物反应，以得到多种式(XVh)的化合物，
然后使每一种式(XVh)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与表II和III所述的每一种式(XIX)的衍生物进行反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
表I式R′-Z(X)的化合物
表II式R1-Z(XIX)的化合物，其中Z为溴
表III式R1-Z(XIX)的化合物，其中Z为羟基
表IV式R′COZ(XI)的化合物
表V式R′-NCO(XII)的化合物
表VI式R′-SO2Z(XIII)的化合物
因此，本发明的另一个目的是二种或更多种式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其药学上可接受的盐的库，
其中R选自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自独立地为选自以下的任选进一步被取代的基团直链或支链C1-C6烷基、C2-C6链烯基或炔基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环基或杂环基C1-C6烷基；或者R为下式(II)的苯二甲酰亚氨基， 任何R1，如果存在的话，在吲唑环的5位或6位，并代表如以上关于R′或R″所述的任选进一步被取代的基团；m为0或1。
综上所述，本领域技术人员清楚地看出一旦如此制备出例如由数千种式(I)的化合物组成的吲唑衍生物的库，则该库可以非常有利地用于针对给定的激酶进行筛选，如前面报道。
关于化合物库及其作为筛选生物活性的工具的应用，参见J.Med.Chem.1999，42，2373-2382和Bioorg.Med.Chem.Lett.10(2000)，223-226。
药理学式(I)的化合物具有作为蛋白激酶抑制剂的活性，因而例如用于限制肿瘤细胞增殖失调。
在治疗中，它们可以用于治疗不同的肿瘤，例如癌症如乳腺癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢和子宫内膜肿瘤、肉瘤如软组织和骨肉瘤以及血液恶性肿瘤如白血病。
此外，式(I)的化合物还用于治疗其它细胞增殖疾病如牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑细胞增殖和术后狭窄与再狭窄，以及治疗阿尔茨海默氏病。
通过基于使用SPA技术(Amersham Pharmacia Biotech)的分析方法，测定推定的cdk/细胞周期蛋白抑制剂的抑制活性和所选择的化合物的效力。
所述的分析是通过激酶将放射活性标记的磷酸酯部分转入生物素底物。将所得的33P-标记的生物素产物与抗生物素蛋白链菌素包被的SPA珠结合(生物素容量130pmol/mg)，并在闪烁计数器中测定光发射。
Cdk2/细胞周期蛋白A活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的4μM自制(inhouse)生物素化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、10μM ATP(0.1microCi P33γ-ATP)、4.2ng细胞周期蛋白A/CDK2复合体、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育30分钟后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在平板的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器(Top-Count)中进行放射性计数。
IC50测定测定范围为0.0015-10μM的不同浓度下的抑制剂。通过计算机程序GraphPad Prizm，使用四参数对数方程分析实验数据y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logIC50-X)*斜率))，其中x为抑制剂浓度的对数，y为应答；y起始于底部并以S形状走至顶部。
Ki计算实验方法反应在含有3.7nM酶、组蛋白和ATP(冷/标记的ATP的恒定比率为1/3000)的缓冲液(10mM Tris，pH7.5，10mM MgCl2，0.2mg/ml BSA，7.5mM DTT)中完成。用EDTA终止反应，并将底物捕获在磷酸膜(来自Millipore的多筛网96孔平板)上。在进行充分地洗涤之后，在顶部计数器中对多筛网(Multi Screen)平板进行读数。测定各ATP和组蛋白浓度的对照(时间零)。
实验设计在不同的四种ATP、底物(组蛋白)和抑制剂浓度下测定反应速度。在各个ATP和底物Km值和抑制剂IC50值(0.3、1、3、9倍的Km或IC50值)附近设计80点浓度基底。在不存在抑制剂的情况下并在不同的ATP和底物浓度下的初始期间的实验允许在关于Ki测定实验的线性反应范围内选择单一的终点时间(10分)。
动力学参数估算通过同时非线性最小平方回归，使用[Eq.1](ATP的竞争性抑制剂，随机机理)，利用完全数据组(80点)估算动力学参数v=Vm·A·Bα·Ka·Kb+α·Ka·B+α·Kb·A+A·B+α·KaKi·I·(Kb+Bβ)---[Eq.1]]]>其中A＝[ATP]，B＝[底物]，I＝[抑制剂]，Vm＝最大速度，Ka、Kb、Ki分别为ATP、底物和抑制剂的解离常数。α和β分别是底物和ATP结合与底物和抑制剂结合之间的协同因子。
此外，所选择的化合物的特征是ser/threo激酶的平板与细胞周期(Cdk2/细胞周期蛋白E、cdkl/细胞周期蛋白B1、cdk5/p25、cdk4/细胞周期蛋白D1)紧密相关，并对MAPK、PKA、EGFR、IGF1-R和Aurora-2具有特异性。
Cdk2/细胞周期蛋白E活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制(inhouse)生物素化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3microCi P33γ-ATP)、4ng GST-细胞周期蛋白E/CDK2复合体、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育60分钟后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在平板的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器中进行放射性计数。
IC50测定参见上述。
Cdk1/细胞周期蛋白B1活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的4μM自制(inhouse)生物素化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、20μM ATP(0.2microCi P33γ-ATP)、3ng细胞周期蛋白B/CDK1复合体、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育20分钟后，用含有1mg SPA珠的100μLPBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器中进行放射性计数。
IC50测定参见上述。
cdk5/p25活性的抑制分析cdk5/p25活性的抑制分析根据以下方案进行。
激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制生物素化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3 microCiP33γ-ATP)、15ng CDK5/p25复合体、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育30分钟后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mMEDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器中进行放射性计数。
IC50测定参见上述。
Cdk4/细胞周期蛋白D1活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为50μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、7.5mM DTT+0.2mg/ml BSA)中的0.4μM小鼠GST-Rb(769-921)(#sc-4112，来自Santa Cruz)底物、10μM ATP(0.5μCi P33γ-ATP)、100ng杆状病毒表达的GST-cdk4/GST-细胞周期蛋白D1、适宜浓度的抑制剂加到96U底的每孔中。在37℃下温育40分钟后，用20μl EDTA 120mM终止反应。
捕获将60μL从每孔转至多筛网平板，以允许底物与磷酸纤维素过滤器结合。然后用150μl/孔不含Ca++/Mg++的PBS将平板洗涤3次，并用多筛网过滤系统过滤。
检测在37℃下干燥过滤器，然后加入100μl/孔闪烁物，并通过在顶部计数器中进行放射性计数而检测33P标记的Rb片断。
IC50测定参见上述。
MAPK活性的抑制分析将在最终体积为30μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH 7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制生物素化MBP(Sigma#M-1891)底物、15μM ATP(0.15microCi P33γ-ATP)、30ngGST-MAPK(Upstate Biothecnology#14-173)、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育30分钟后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器中进行放射性计数。
IC50测定参见上述。
PKA活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制生物素化组蛋白HI(Sigma # H-5505)底物、10μM ATP(0.2microMP33γ-ATP)、0.45U PKA(Sigma#2645)、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育90分钟后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mMEDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器中进行放射性计数。
IC50测定参见上述。
EGFR活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(Hepes 50mM pH7.5、MgCl23mM、MnCl23mM、DTT1mM、NaVO33μM、+0.2mg/mlBSA)中的10μM自制生物素化MBP(Sigma#M-1891)底物、2μMATP(0.04 microCi P33γ-ATP)、36ng昆虫细胞表达的GST-EGFR、抑制剂加到96U底的每孔中。室温下温育20分钟后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μL的体积转入Optiplate。
进行20分钟底物捕获的温育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的顶部，并静置4小时，然后在顶部计数器中进行放射性计数。
IC50测定参见上述。
IGF1-R活性抑制分析根据以下的方法进行IGF1-R活性的抑制分析。
激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(Hepes 50mM pH 7.9、3mM MnCl23mM、1mM DTT、3μM NaVO3)中的10μM生物素化MBP(Sigma#M-1891)底物、0-20μM抑制剂、6μM ATP、1microCi33P-ATP和22.5ngGST-IGFI-R(在室温下与冷的60μM ATP一起预温育30分钟)加到96U底平板的每孔中。室温下温育35分钟后，通过加入含有32mM EDTA，500μM冷ATP、0.1％TritonX100和10mg/ml抗生物素蛋白链菌素包衣的SPA珠的100μL PBS缓冲液终止反应。
进行20分钟温育之后，取出110μl悬浮液，并转入含有100μl的5M CsCl的96孔OPTIPLATE中。4小时后，在Packard顶部计数放射性读取器中对平板进行2分钟的读数。
Aurora-2活性的抑制分析激酶反应将在最终体积为30μL的缓冲液(Hepes 50mM pH7.0、MgCl210mM、1mM DTT、0.2mg/ml BSA，3μM正钒酸盐)中的8μM生物素化肽(4个重复的LRRWSLG)、10μM ATP(0.5μCi P33g-ATP、15ng Aurora2，抑制剂加到96U孔平板的每孔中。室温下温育30分钟后，终止反应，并通过加入100μl珠悬浮液而捕获生物素化肽。
层化将100μL CsCl25M加到每孔并静置4小时，然后在顶部计数器中计算放射性。
IC50测定参见上述。
Cdc7/dbf4活性的抑制分析Cdc7/dbf4活性的抑制分析根据以下方案进行。
在用γ33-ATP示踪的ATP存在下，用Cdc7/Dbf4复合体将生物素-MCM2底物反式磷酸化。然后用抗生物素蛋白链菌素包被的SPA珠捕获磷酸化生物素-MCM2底物，并通过β计数评价磷酸化程度。
Cdc7/dbf4活性抑制分析在96孔平板中根据以下方案进行。
往平板的每孔中加入-10μl底物(生物素化MCM2、6μM最终浓度)-10μl酶(Cdc7/Dbf4、12.5nM最终浓度)-10μl受试化合物(在nM至μM范围内12个增大的浓度，以产生剂量反应曲线)-然后使用10μl冷ATP(10μM最终浓度)和放射性ATP(与冷ATP的摩尔比为1/2500)的混合物以开始反应，允许所述反应在37℃下发生。
用含有15mM MgCl2、2mM DTT、3μM NaVO3、2mM甘油磷酸酯和0.2mg/ml BSA的50mM HEPES pH7.9中稀释底物、酶和ATP。所述受试化合物的溶剂还包含10％DMSO。
温育20分钟后，通过往每孔加入包含50mM EDTA、1mM冷ATP、0.1％Triton X100和10mg/ml抗生物素蛋白链菌素包被的SPA珠的100μl PBS pH7.4。
室温下温育15分钟以允许生物素化MCM2-抗生物素蛋白链菌素SPA珠发生相互作用之后，在96孔滤板(UnifilterRGF/BTM)中，使用Packard细胞收集器(Filtermate)捕获珠，用蒸馏水洗涤，然后用顶部计数器(Packard)计数。
计数扣除空白，然后使用非线性回归分析(Sigma Plot)分析实验数据(每个点进行三重试验)以确定IC50。
本发明的式(I)的化合物适于施用于哺乳动物如人，可以通过常规的途径给药，且剂量水平取决于患者的年龄、体重、症状和给药途径。
例如，适于式(I)的化合物口服的适宜的剂量可以是大约10至大约500mg前剂量，每天1-5次。
本发明的化合物可以多种剂型给药，例如以片剂、胶囊、糖或薄膜包衣片、液体溶液或悬浮液的形式口服；以栓剂形式进行直肠给药；肠胃外如肌内或静脉内和/或阴道内和/或脊柱内注射或输注。
此外，本发明的化合物可以作为单一试剂给药，或者可选择地与已知的抗癌治疗联合给药，例如放射治疗或化学治疗方案结合细胞抑制试剂或细胞毒性试剂、抗生物素类试剂、烷基化试剂、抗代谢药、激素药、干扰素类型试剂、环氧酶抑制剂(如COX-2抑制剂)、金属基质蛋白酶抑制剂、端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体试剂、抗HER试剂、抗EGFR试剂、抗血管生成药、法呢基转移酶抑制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞周期抑制剂，其它cdks抑制剂、微管蛋白结合试剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等等。
例如，本发明的化合物可以与一种或多种诸如以下的化学治疗药联合给药依西美坦、福美司坦、阿那曲唑、来曲唑、法屈唑、紫杉烷、紫杉烷衍生物、胶囊化紫杉烷、CPT-11、喜树碱衍生物、蒽环苷类、例如多柔比星、伊达比星、表柔比星、依托泊苷、去甲长春花碱、长春花碱、卡铂、顺铂、雌莫司汀、塞来昔布、它莫西芬、雷洛昔芬、Sugen SU-5416、Sugen SU-6668、贺赛汀等等，它们任选在其脂质体制剂中。
如果制成固定的剂量，则这些组合产物使用在上述剂量范围内的本发明化合物和允许的剂量范围内的其它药学活性试剂。
当组合制剂不合适时，式(I)的化合物可以依次地与已知的抗癌药使用。
本发明还包括含有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐并结合药学上可接受的赋形剂(可以是载体或稀释剂)的药物组合物。
含有本发明的化合物的药物组合物通常根据常规的方法制备，并以药学上适宜的形式给药。
例如，固体口服剂型可以共同包含活性化合物和稀释剂如乳糖、右旋糖、蔗糖(saccharose)、蔗二糖(sucrose)、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁或钙和/或聚乙二醇；粘合剂如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧基甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；解聚试剂如淀粉、海藻酸、海藻酸盐或羟乙酸淀粉钠；泡腾混合物；染料、甜味剂；润湿剂如卵磷脂、聚山梨醇酯、月桂基硫酸酯；和用于药物制剂的通常无毒和不具有药理学活性的物质。该药物制剂可以已知的方式制备，例如通过混合、制粒、制片、糖包衣或薄膜包衣工艺进行制备。
例如，用于口服的液体分散体可以是糖浆、乳液和悬浮液。
糖浆可以包含载体如蔗糖或含甘油和/或甘露糖醇和/或山梨醇的蔗糖。
悬浮液和乳液可以包含载体如天然树胶、琼脂、海藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧基甲基纤维素或聚乙烯醇。
用于肌内注射的悬浮液或溶液可以共同包含活性化合物和药学上可接受的载体如无菌水、橄榄油、油酸乙酯、二醇如丙二醇和可能需要的适量的盐酸利多卡因。用于静脉内注射或输注的溶液可以包含载体如无菌水，或者优选它们可以是无菌、含水、等渗盐水溶液的形式，或者它们可以包含载体丙二醇。
栓剂可以共同包含活性化合物和药学上可接受的载体如可可油、聚乙二醇、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯表面活性剂或卵磷脂。
因此，以下的实施例意在更好地例示本发明，而不是对其进行任何限定。
一般方法快速色谱法在硅胶(Merck grade 9395，60A)上完成。通过以下方法测定高压液相色谱法保留时间(HPLCRT值)方法1仪器操作Waters 2790 HPLC系统，配备(996 Waters)PDA检测器和Micromass mod.ZQ单一四极质谱仪，并配备电喷雾(ESI)离子源。
色谱条件RP18 Waters X Terra(4,6×50mm，3.5μm)柱；流动相A是5mM乙酸铵缓冲液(pH5.5，其中乙酸/乙腈95∶5)，而流动相B是H2O/乙腈(5∶95)。8分钟内梯度从10至90％，保持90％B 2分钟。在220nm和254nm下进行UV检测。流速1ml/分。注射体积10μl。完全扫描，质量范围为100-800amu。毛细管电压为2.5KV；源温度为120℃；锥体(Cone)为10V。
保留时间(HPLC r.t.)以分钟为单位在220nm或254nm下得到。质量以m/z比得到。
方法2仪器操作Waters 2790 Alliance，配备恒温自动进样器；双波长UV检测器2487；光滑界面；转移阀LabPro，质谱仪Waters ZQ单一四极，并具有ESI界面；Antek化学发光氮检测器(CLND)8060。
色谱条件Zorbax SB C8(4.6×50mm；5μm)柱；流动相A是在乙腈中的0.01％甲酸，而流动相B是在甲醇中的0.01％甲酸。10分钟内的梯度为0-95％B，保持95％2分钟。UV检测在220nm下进行，流速1ml/分。注射体积10μl。完全扫描，质量范围为120-1000amu。毛细管电压为2.8KV；源温度为115℃；锥体为32V。
保留时间(HPLC r.t.)以分钟为单位在220nm或254nm下得到。质量以m/z比得到。
方法3仪器操作HP1100 HPLC二元泵；Gilson 215自动进样器，HP1100单波长UV检测器，Sedex 75c蒸发光散射(ELS)检测器(Sedere，France)；和PE/Sciex API-2000质谱仪色谱条件YMC ODS-AQ 4.6×50mm，5μm S5柱；其中HPLC流动相由在HPLC级水中的0.5％甲酸(A)和在HPLC级乙腈中的0.5％甲酸组成。对每分样品用5μl注射完成如表所示的HPLC梯度。UV检测在220nm下进行。
使用Turbo离子喷雾源，其中离子喷雾电压为5kV，温度为475℃，而小孔和环电压分别为10V和250V。在160 to 800amu的Q1下扫描阳离子。
如果需要的话，使用配备996 Waters PDA检测器和Micromassmod.ZMD单一四极质谱仪、电子喷雾电离、正模式的Waters制备HPLC 600，通过在Waters对称C18(19×50mm，5μm)柱上进行制备HPLC而纯化化合物。流动相A是水0.01％TFA，而流动相B是乙腈。8分钟内的梯度为10-90％B，保持90％2分钟。流速20ml/分。
在配备5mm双共振探针[1H(15N-31P)ID_PFG Varian]并在400.45MHz下工作的Mercury VX 400上完成1H-NMR光谱测定。
如前述，本发明的多种式(I)的化合物已根据组合化学技术平行合成。
在这方面，已根据表IX至XVI的编码系统结合HPLC保留时间(方法1-3)和质量，方便和明确地鉴定如此制备的某些化合物。
确定单一的特定的式(I)的化合物的每一代码由单元A-M-B组成。
A代表任何取代基R1-[参见式(I)并通过氧原子与剩余的吲唑部分连接以得到在5位(A-M1-B)或6位(A-M2-B)被取代的吲唑衍生物；每一个A基团(取代基)表示在下表VII中。
B-NH-与其结合的吲唑部分的3位的-NH-基团一起代表式(I)的R基团；每一个B基团(取代基)表示在下表VIII中。
M指在5位或6位具有-O-基团并被基团A和B取代的二价3-氨基-吲唑部分的中心核。
具体而言，M可以根据下式进行M1或M2的变化，每一种确定在5位(M1)或6位(M2)被A-O-基团取代的化合物。
为了便于指示，表VII和VIII中的A或B基团已用合适的化学式识别，还指出与分子M的其余部分的结合点。
例如，表XI中的化合物A21-M1-B10(参见实施例11，登录号429)代表在5位(通过氧原子)被基团A21取代或在3位(通过-NH-基团)被基团B10取代的吲唑M1；同样地，表XII的化合物A10-M2-B70(参见实施例12，登录号281)代表在6位(通过氧原子)被基团A10取代和在3位(通过-NH-基团)被基团B70取代的吲唑M2
表VII-A基团
表VII-B基团
实施例16-甲氧基-1H-吲唑-3-胺向在530ml浓HCl中的66.35g(0.448mol)2-氨基-4-甲氧基苄腈的冰冷的悬浮液中滴加在55ml水中的37.07g(0.537mol)亚硝酸钠的溶液。1.5小时后，在5℃下将冷悬浮液滴加到预制的在530ml浓盐酸(HCl)中的679.25g(3.58mol)氯化亚锡的溶液。3小时后，将冷悬浮液过滤，并用1.7升沸水将潮湿的固体处理30分钟。通过布过滤器过滤使热的混浊的溶液澄清。使溶液冰冷，并滴入0.8l升17％NaOH进行处理。滤出固体，并在真空和50℃下干燥得到67.2g产物，为浅褐色固体。产率＝91.9％。mp＝195-197℃分解。HPLC r.t.1.9[M+H]+＝164H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)3.74(s，3H)，5.17(宽峰s，2H)，6.5(dd，1H)，6.6(d，1H)，7.5(d，2H)，11.07(s，1H)。
实施例22-({6-甲氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮将20g(0.122mol)6-甲氧基-1H-吲唑-3-胺、20g(0.135mol)邻苯二甲酸酐和140mg(1.22mmol)4-二甲基氨基吡啶在0.4升乙腈中回流2.5小时。将混合物冷却至5℃，并过滤得到第一批产物(24.2g)。
在真空下浓缩母液并用70ml叔丁基甲基醚(MTBE)处理过滤得到第二批产物(5.8g)。
然后，得到总量为30.0g的黄色固体产物。产率＝83.6％。mp＝193-195℃HPLC r.t.4.7[M+H]+＝294[2M+H]+＝587[3M+H]+＝880H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)3.84(s，3H)，6.78(dd，1H)，6.96(d，1H)，7.55(dd，1H)，7.91-8.1(m，4H)，13.14(s，1H)。
实施例32-({6-羟基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1.3(2H)-二酮将24.2g(82.5mmol)2-({6-甲氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和73.4g(0.635mol)吡啶盐酸盐的混合物于200℃下加热4小时。将所得的褐色溶液冷却至140℃，并缓慢地倾入良好搅拌的250ml 0.2 N HCl和350ml乙酸乙酯的混合物中。分离有机层，将水层盐化(45g NaCl)，并用350ml乙酸乙酯萃取二次。用硫酸钠干燥有机萃取物，并在真空下浓缩至小体积。滤出沉淀并干燥得到15.89g产物，为黄色固体。产率＝68.9％.mp＝265-270℃分解。
HPLC r.t.3.7[M+H]+＝280[2M+H]+＝559[3M+H]+＝838H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)6.65(dd，1H)，6.8(s，1H)，7.44(d，1H)，7.97(m，4H)，9.73(broad s，1H)12.86(s，1H)。
实施例42-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮向在150ml二氯甲烷中的15.03g(53.82mmmol)2-({6-羟基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮的悬浮液加入在75ml二氯甲烷中的20.19g(0.134mol)TBDMS氯化物的溶液。室温下滴加12.06ml(80.73mmol)1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯](DBU)处理所得的混合物，得到澄清的溶液。3小时后，将反应混合物倾入250ml 0.5NHCl。分离水层，并用120ml二氯甲烷萃取。用硫酸钠干燥有机萃取物，并在真空下蒸发溶剂。在50ml乙酸乙酯中在50℃下搅拌湿的粗产物。
然后，在真空下蒸发大约一半的溶剂，并滴加100ml环己烷滴处理混合物。抽滤分离产物，为浅黄色固体(15.04g)。产率＝71.0％。MP＝207-209℃。
HPLC r.t.7.6[[M+H]+＝394[2M+H]+＝787H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)0.21(s，6H)，0.98(s，9H)，6.71(dd，1H)，6.91(d，1H)，7.54(d，1H)，7.93(m，2H)，8.1(m，2H)。
实施例55-苄氧基-1H-吲唑-3-胺向在500ml浓盐酸中的63.27g(0.282mol)2-氨基-5-(苄氧基)苄腈的冰冷的悬浮液滴加在75ml水中的23.32g(0.338mol)亚硝酸钠的溶液。2小时后，在2℃下将冷悬浮液滴加到预制的在380ml浓HCl中的509.25g(2.26mol)氯化亚锡的溶液。3小时后将冷悬浮液过滤，用1.8升沸水和300ml乙醇95°将湿固体处理30分钟。通过布过滤器过滤使热的混浊溶液澄清。将溶液浓缩除去乙醇，并在4℃下滴加0.35升35％NaOH进行处理。滤出固体，并在真空和50℃下干燥得到73.82g产物，为浅褐色固体。mp＝193-195℃HPLC r.t.4.7[M]+＝240[2M+H]+＝479H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)5.03(s，2H)，5.16(宽峰s，1H)，6.96(d，1H)，7.13(d，1H)，7.26(d，1H)，7.27-7.49(m，5H)。
实施例62-[5-(苄氧基)-1H-吲唑-3-基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮搅拌下用3升乙腈处理73.82g 5-苄氧基-1H-吲唑-3-胺。倾析溶液，并在搅拌下用0.5升甲醇和0.5升乙酸乙酯的混合物处理残余物。滤出所得的固体(11.05g锡盐)，并在真空下将溶液蒸发至干。将残余物溶于前者溶液，并在真空下除去溶剂至最终体积为大约1升。向此溶液加入45.97g(0.31mol)邻苯二甲酸酐和345mg(2.82mmol)4-二甲基氨基吡啶。将混合物回流2小时，然后在真空下浓缩得到第一批产物(70.11g)。将母液浓缩至干，并用30ml乙酸乙酯和100ml叔丁基甲基醚(MTBE)处理残余物过滤得到第二批产物(9.75g)。然后得到总共79.86g产物，为黄色固体。产率＝76.6％，经过两步。mp＝190-192℃，HPLC r.t.6.5min.[M+H]+＝370[2M+H]+＝739H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)5(s，2H)，7.14(d，1H)，7.3-7.47(m，5H)，7.52(d，2H)，8，(m，4H)，13.27(s，1H)。
实施例72-(5-羟基-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮将46.14g(0.125mol)2-[5-(苄氧基)-1H-吲唑-3-基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和143.35g(1.24mol)吡啶盐酸盐的混合物于180℃下加热1.5小时。将所得的褐色溶液冷却至120℃，并缓慢地倾入良好搅拌的800ml 0.5 N HCl的混合物。滤出沉淀并干燥得到32.26g产物，为黄色固体。产率＝92.4％。
mp≥270℃HPLC r.t.3.2[M+H]+＝280[2M+H]+＝559]H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)6.8(s，1H)，6.98(d，1H)，7.42(d，1H)，8(m，4H)，9.2(s，1H)13.12(s，1H)。
实施例82-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-]异吲哚-1，3-二酮向在320ml二氯甲烷中的32.26g(0.115mol)2-(5-羟基-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮的悬浮液加入在150ml二氯甲烷中的43.54g(0.288mol)TBDMS氯化物的溶液。在室温下滴加35.5ml(0.23mol)1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)处理所得的混合物，得到澄清的溶液。3小时后，将反应混合物倾入300ml 0.1N的盐酸溶液。分离水层，并用200ml二氯甲烷萃取。用硫酸钠干燥有机萃取物，并在真空下蒸发溶剂。通过硅胶快速色谱法纯化粗产物，用二氯甲烷-环己烷-乙酸乙酯(4∶4∶2)洗脱。得到36.03g产物，为白色固体。产率＝79.2％。mp＝225-228℃。HPLC r.t.8.3[M+H]+＝394[2M+H]+＝787H1NMR(DMSO-d6)，诊断信号(ppm)0.15(s，6H)，0.93(s，9H)，6.98(dd，1H)，7.07[(S，1H)，7.49(d，1H)，7.96(m，4H)，13.25(s，1H)。
实施例9N-(6-羟基-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺将500mg Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μL 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥树脂。
通过裂解装载的产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷中，并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排干树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次；干燥收集的溶液，并回收13.8mg标题化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.425mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物中，并加入500μl肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热并搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。过滤树脂，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
裂解产物6-{[叔丁基](二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺；HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-H]-＝262将得自第二步的树脂样品(100mg，0.08mmol)悬浮在2.5ml二氯甲烷；并加入N，N′-二异丙基乙基胺(131μl，约10eq)和苯甲酰氯(30μl，约3eq)。保持在室温下搅拌20小时，将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解产装填的产物检查树脂的特征。如前述进行反应。
裂解产物N-(6-{[叔丁基](二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC r.t.方法17.47[M+H]+＝368[M-H]-＝366将得自前面步骤的树脂(100mg，0.08mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后过滤树脂，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
将100mg树脂悬浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次，将收集的溶液干燥，并回收标题化合物。
N-(6-羟基-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.3.5[M+H]+＝253.99[M-H]-＝252。
通过与实施例9类似的方式进行，将2-[(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮担载于树脂，然后根据所述的合成路线，合成以下的产物。
N-(5-羟基-吲唑-3-基)-苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.3.08[M+H]+＝253.992-(4-叔丁基苯氧基)-N-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)乙酰胺HPLC方法1 r.t.5.38[M+H]+＝340.2N-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺HPLC方法1r.t.3.35[M+H]+＝298.1N-(6-羟基-2H-吲唑-3-基)-3-苯基丙酰胺HPLC方法1 r.t.3.94[M+H]+＝282.1N-(6-羟基-2H-吲唑-3-基)]环丙烷甲酰胺HPLC方法1 r.t.2.36[M+H]+＝218.1以相的方式进行(实施例9)，平行地合成7个产物，并如前述的表IX编码；报道了相关的HPLC保留时间和实测值[M+H]+。
表IX
实施例10正丁基-N′-(6-羟基-1H-吲唑-3-基)脲将500mg Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后过滤树脂，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥树脂。
通过裂解装填产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次，干燥收集的溶液，并回收13.8mg标题化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.425mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入500μL肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热和搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。将树脂过滤，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
裂解产物6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺]HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-H]-＝262将得自第二步的树脂样品(100mg，0.08mmol)悬浮在2ml二甲基甲酰胺；加入异氰酸正丁酯(28μl，约5eq)。将悬浮液加热至50℃。保持搅拌和加热60小时，然后将悬浮液冷却至室温。将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
然后将100mg树脂悬浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小时后排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤；将收集的溶液干燥，并回收标题化合物。
1-丁基-3-(6-羟基-1H-吲唑-3-基)-脲HPLC方法1 r.t.3.87[M+H]+＝249[[M-H]-＝247。
通过类似于实施例10的方式进行，将2-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和[2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮担载在树脂上，然后根据所述的合成路线，合成以下的产物。
1-丁基-3-(5-羟基-1H-吲唑-3-基)-脲HPLC方法1 r.t.3.65[M+H]+＝249[[M-H]-＝247N-苄基-N′-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)]脲HPLC方法1 r.t.4[M+H]+＝283.1N-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)-N′-异丙基脲HPLC方法1 r.t.2.92[M+H]+＝235.1N-(6-羟基-2H-吲唑-3-基)-N′-苯基脲HPLC方法1 r.t.4.4[M+H]+＝269.1通过相同的方式进行(实施例10)，平行地合成13种产物，它们如前述的表X编码；报道了相关的HPLC保留时间和实测[M+H]+。
表X
实施例11N-(6-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺将500mg Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯](1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。在真空下干燥树脂。
通过裂解装填产物检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，并回收13.8mg标题化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.425mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入500μl肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热和搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。将树脂过滤，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264[M-H]-＝262将得自第二步的树脂样品(100mg，0.08mmol)悬浮在2.5ml二氯甲烷；加入N，N′-二异丙基乙基胺(131μl，约10eq)和苯甲酰氯[(30μl，约3eq)。室温下保持搅拌20小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解装填产物检查树脂的特性。如前述进行反应。
N-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.7.47[M+H]+＝368[M-H]-＝366将得自第三步的树脂(100mg，0.08mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
通过裂解装填产物检查树脂的特性。如前述进行反应。
N-(6-羟基-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.3.5[M+H]+＝253.99[M-H]-＝252。
将得自第四步的树脂(100mg，0.08mmol)悬浮在3ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，然后加入43μl 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(约1.5eq)和57μl苄基溴(约6eq)。将悬浮液搅拌16小时。将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
将100mg无水树脂悬浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。
2小时后，排出树脂，并用3ml二氯甲烷洗涤二次；干燥收集的溶液，并回收目标标题化合物。
N-(6-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺HPLC r.t.方法16.17[M+H]+＝344。
通过类似于实施例11的方法进行，将2-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和[2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮担载在树脂上，然后根据所述的合成路线，合成以下的产物。
N-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺HPLC r.t.6.05[M+H]+＝344；2-({3-[(3-苯基丙酰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧基)]丁酸甲酯HPLC方法2 r.t.8.2[M+H]+＝382.1；N-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}环丙烷甲酰胺HPLC方法2 r.t.7.19[M+H]+＝377.2；2-({3-[(环丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧基)丁酸甲酯HPLC方法2 r.t.7.05[M+H]+＝318.12-[(3-[(4-甲氧基苯基)乙酰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]丁酸甲酯HPLC方法2 r.t.7.78[M+H]+＝398.2N-{6-[(2-甲基苄基)氧基]-1H-吲唑-3-基}环丙烷甲酰胺HPLC方法2 r.t.8.38[M+H]+＝322.1；N-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}环丙烷甲酰胺HPLC方法2 r.t.7.41[M+H]+＝377.2；2-({3-[(环丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧基)丁酸甲酯HPLC方法1 r.t.4.31[M+H]+＝318.1；2-({3-[(3-氯苯甲酰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧基)丁酸甲酯HPLC方法1 r.t.6.02[M+H]+＝388.1通过相同的方式进行(实施例11)，平行地合成806种产物，并如上述的表XI编码；报道了相关的HPLC方法和保留时间以及实测值[M+H]+。
表XI
实施例121-(6-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-3-丁基-脲将500mg Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥树脂。
通过裂解装填的产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次，干燥收集的溶液，并回收13.8mg标题化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(300mg，约0.25mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入400μl肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热和搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。将树脂过滤，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
裂解化合物6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]-氧基}-1H-吲唑-3-胺HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-[H]-＝262将得自第二步的树脂样品(100mg，0.08mmol)悬浮在2ml二甲基甲酰胺；加入异氰酸正丁酯(28μl，约5eq)。将悬浮液加热至50℃。保持搅拌和加热60小时，然后将悬浮液冷却至室温。将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第三步的树脂(100mg，0.08mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
裂解化合物1-丁基-3-(6-羟基-1H-吲唑-3-基)-]脲；HPLC方法1 r.t.3.87[M+H]+＝249[M-H]-＝247.
将得自第四步的树脂(100mg，0.08mmol)悬浮在3ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，然后加入43μl 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(约1.5eq)和57μl苄基溴(约6eq)。将悬浮液搅拌16小时。将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
将100mg无水树脂悬浮在3ml二氯甲烷并加入450μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用3ml二氯甲烷洗涤二次；干燥收集的溶液；回收标题化合物1-(6-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-3-丁基-脲HPLC方法3 r.t.2.3[M+H]+＝339.3通过类似于实施例12的方式进行，将2-[(6-{叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮担载在树脂上，然后根据所述的合成路线合成以下产物。
1-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-3-丁基-脲HPLC]方法3 r.t.2.25[M+H]+＝339.32-({3-[(苯胺基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧基)丁酸甲酯HPLC r.t.方法15.88[M+H]+＝369.12-[(3-{[(苄基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]丁酸甲酯HPLC r.t.方法28.19[M+H]+＝383.2N-异丙基-N′-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}脲HPLC r.t.方法27.84[M+H]+＝394.22-[(3-{[(异丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]-N-苯基丙酰胺HPLCr.t.方法27.76[M+H]+＝382.22-[(3-{[(异丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]丁酸甲酯HPLC r.t.方法27.65[M+H]+＝335.2N-异丙基-N′-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}脲HPLC r.t.方法27.89[[M+H]+＝]394.2通过相同的方式(实施例12)进行，平行地合成506种产物，并如前述的表XII编码，报道了相关的HPLC保留时间和实测值[M+H]+]。
表XII
实施例133-甲基-N-{5-[(3-甲基苄基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺将500mg Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷和374mg 2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)，并加入367μl2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥树脂。
通过裂解装填的产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，并回收13.8mg标题化合物。计算装填0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.42mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入630μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
2-[6-羟基-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮HPLC r.t.方法13.9[M+H]+＝280。
将得自第二步的树脂的样品(100mg，约0.08mmol)悬浮在3ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，然后加入43μl 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(约1.5eq)和65μl 3-甲基苄基溴(约6eq)。将悬浮液搅拌16小时。将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
将得自第三步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入100μl肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热和搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。将树脂过滤，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第四步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在2.5ml二氯甲烷，并加入90mg间甲苯磺酰氯(约6eq)，加入200μl N，N′-二异丙基乙基胺(约15eq)和催化量的4-二甲基氨基吡啶。将悬浮液搅拌过夜。将树脂过滤，并用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺和甲醇和二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥。
将得自第5步的树脂悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
将100mg无水树脂悬浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用3ml二氯甲烷洗涤二次，将收集的溶液干燥，回收标题化合物。
3-甲基-N-{5-[(3-甲基苄基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺HPLC方法2r.t.8.79[M+H]+＝408.1通过类似的方式(实施例13)操作，制备以下表XIII的化合物。
表XIII
实施例144-异丙基-N-{6-[(3-甲基苄基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺将500mg of Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯](1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥树脂。
通过裂解装填的产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，并回收13.8mg标题化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.42mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入630μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
2-[6-羟基-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮HPLC r.t.方法13.9[M+H]+＝280。
将得自第二步的树脂的样品(100mg，约0.08mmol)悬浮在1.5ml无水四氢呋喃。在圆底烧瓶中，将209mg三苯基膦(0.8mmol，约10eq)溶于2ml无水四氢呋喃，然后在0℃下加入157μl偶氮二甲酸二异丙酯(0.8mmol，约10eq)，并在0℃下缓慢地加入145μl 3-甲基苄基醇(1.2mmol，约15eq)]。将溶液振荡2小时，然后将其转移到树脂的悬浮液中。
将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤上，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
重复所述过程二次。
将得自第三步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入100μl肼一水合物。将悬浮液加热到45℃。继续加热和搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。将树脂过滤，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第四步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在2.5ml二氯甲烷，并加入111mg 4-叔丁基苯磺酰氯(约6eq，200μl N，N′-二异丙基乙基胺(约15eq)和催化量的4-二甲基氨基吡啶。将悬浮液搅拌过夜。将树脂过滤，并用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺和甲醇以及二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥。
将得自第五步的树脂悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
将100mg无水树脂悬浮在3ml二氯甲烷并加入450μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用3ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，回收标题化合物。
4-异丙基-N-{6-[(3-甲基苄基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺HPLC]方法3r.t.2.69，[M+H]+＝436.2通过类似的方式(实施例14)制备以下表XIV的化合物。
表XIV
实施例153-苯基-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基l丙酰胺将500mg of Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367[PL]of 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下干燥树脂。
通过裂解装填的产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小时后排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次，将收集的溶液干燥，并回收13.8mg标题化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.425mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入500μl肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热和搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。将树脂过滤，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺]HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264[[M-H]-＝262将得自第二步的树脂的样品(100mg，0.08mmol)悬浮在2.5ml二氯甲烷；加入N，N′-二异丙基乙基胺(131μl，约10eq)和氢化肉桂酰氯(35μl，0.24mmol，约3eq)。室温下保持搅拌20小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第三步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第四步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在1ml无水四氢呋喃。在圆底烧瓶中，将209mg三苯基膦(0.8mmol，约10eq)溶于2ml无水四氢呋喃，然后在0℃下缓慢地加入157μl偶氮二甲酸二异丙酯(0.8mmol，约10eq)]和147μl 1-(2-羟基乙基)吡咯烷(1.2mmol，约15eq)。将溶液振荡2小时，然后转移至树脂的悬浮液。
将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
重复所述过程二次。
将100mg无水树脂悬浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用3ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，并回收所要的标题化合物。
3-苯基-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]丙酰胺HPLCr.t.方法12.99[M+H]+＝379.2通过与实施例15类似的方式进行，将2-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和[2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮担载在树脂上，然后根据所述的合成路线，合成以下的产物。
2-(4-叔丁基苯氧基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺HPLC方法2r.t.6.65[M+H]+＝437.22-(4-甲氧基苯基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺HPLC方法2r.t.4.56[M+H]+＝395.2通过与实施例15相同的方式进行，平行地合成表XV的195种产物。
表XV
实施例16N-(5-{[5-(苄氧基)戊基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-N′-异丙基脲将500mg of Novabiochem三苯甲基树脂(标明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)悬浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢化-1，3，2-二氮杂磷杂苯(1.3mmol)。将悬浮液搅拌16小时，然后将树脂过滤，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗涤，并再次用二氯甲烷洗涤。然后在真空下将树脂干燥。
通过裂解装填的产物来检查树脂的特性和装填步骤的产率将40mg树脂悬浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用1ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，并回收13.8mg标题化化合物。计算装填量0.85mmol/g，HPLCr.t.方法17.64[M+H]+＝394。
将得自第一步的树脂(500mg，约0.425mmol)悬浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物中，并加入500μl肼一水合物。将悬浮液加热至45℃。继续加热并搅拌过夜，然后将混合物冷却至室温。过滤树脂，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗涤，并再次用甲醇洗涤，然后在真空下干燥。
通过裂解检查树脂的特性。如上述进行反应。
6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺；HPLCr.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-H]-＝262将得自第二步的树脂样品(100mg，0.08mmol)悬浮在2ml二甲基甲酰胺；并加入异氰酸异丙酯(39μl，0.4mmol，约5eq)。将悬浮液加热至50℃。保持搅拌和加热60小时，然后将悬浮液冷却至室温。将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第三步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在3ml无水四氢呋喃，并加入120μl在四氢呋喃(约1.5eq)中的1M四丁基氟化铵的溶液。将悬浮液搅拌过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤，然后在真空下干燥。
将得自第四步的树脂(100mg，约0.08mmol)悬浮在1ml无水四氢呋喃。在圆底烧瓶中，将209mg三苯基膦(0.8mmol，约10eq)溶于2ml无水四氢呋喃，然后在0℃下缓慢地加入157μl偶氮二甲酸二异丙酯(0.8mmol，约10eq)和230μl 5-苄氧基-1-戊醇(1.2mmol，约15eq)。将溶液振荡2小时，然后转移至树脂的悬浮液。
将悬浮液干燥过夜，然后将树脂过滤，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗涤。
重复所述过程二次。
将100mg无水树脂悬浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小时后，排出树脂，并用3ml二氯甲烷洗涤二次；将收集的溶液干燥，并回收所需的标题化合物。
N-(5-{[5-(苄氧基)戊基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-N′-异丙基脲HPLC方法1r.t.6.75[M+H]+＝411.2通过与实施例16类似的方式进行，将2-[(6-{[叔丁基](二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-异吲哚-1，3-二酮担载在树脂上，然后根据所述的合成路线合成以下产物。
N-[5-(丁-3-炔基氧基)-1H-吲唑-3-基]-N′-异丙基脲HPLC方法1r.t.4.77[M+H]+＝287.1N-苄基-N′-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]脲HPLC方法1r.t.3.28[M+H]+＝380.2N-异丙基-N′-{5-[2-(4-甲基-1，3-噻唑-5-基)乙氧基]-1H-吲唑-3-基}脲HPLC方法2r.t.8.02[M+H]+＝360.1通过与实施例16相同的方式，平行地合成表XVI中的95种产物。
表XVI
权利要求
1.一种用于治疗由蛋白激酶活性改变导致的疾病和/或与蛋白激酶活性改变有关的疾病的方法，所述方法包括给需要所述方法的哺乳动物施用有效量的式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其药学上可接受的盐 其中R选自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自独立地为选自以下的任选进一步被取代的基团直链或支链C1-C6烷基、C2-C6链烯基或炔基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环基或杂环基C1-C6烷基；或者R为下式(II)的苯二甲酰亚氨基， 任何R1，如果存在的话，在吲唑环的5位或6位，并代表如以上关于R′或R″所述的任选进一步被取代的基团；m为0或1。
2.权利要求1的方法，其中所述的由蛋白激酶活性改变导致的疾病和/或与蛋白激酶活性改变有关的疾病是选自以下的细胞增殖疾病癌、阿尔茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神经变性疾病。
3.权利要求2的方法，其中所述的癌选自癌症、鳞状细胞癌、淋巴或骨髓系统造血肿瘤、间充质源肿瘤、中枢和外周神经系统肿瘤、黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角质黄色瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
4.权利要求1的方法，其中所述的细胞增殖疾病选自良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑细胞增殖、肺纤维化、关节炎肾小球性肾炎和术后狭窄与再狭窄。
5.权利要求1的方法，所述方法提供肿瘤血管生成和转移抑制作用。
6.权利要求1的方法，所述方法还包括使需要所述方法的哺乳动物接受与至少一种细胞抑制药物或细胞毒性药物联合的放射治疗或化学治疗方案。
7.权利要求1的方法，其中需要所述方法的哺乳动物是人。
8.一种抑制蛋白激酶活性的方法，所述方法包括使该激酶与有效量的如权利要求1定义的式(I)的化合物接触。
9.一种式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其药学上可接受的盐 其中R选自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自独立地为选自以下的任选进一步被取代的基团直链或支链C1-C6烷基、C2-C6链烯基或炔基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环基或杂环基C1-C6烷基；或者R为下式(II)的苯二甲酰亚氨基， 任何R1，如果存在的话，在吲唑环的5位或6位，并代表如以上关于R′或R″所述的任选进一步被取代的基团；m为0或1；附带条件是a)如果R为-NHCOR′而m为0，则R′不为甲基、正丙基、苄基、2，2-二苯基乙基、3，5-二甲基-异噁唑-4-基、2-(吗啉-4-基)乙基或者任选被氯、羟基、甲基、硝基或氨基取代的苯基；b)如果吲唑在5位或6位被甲氧基取代，则R不为3-(N，N-二乙基氨基)丙基氨基、3-[(3-甲基)吗啉-4-基]丙基氨基或1-羟基-2-甲基-2-丙基氨基；c)排除化合物3-苯二甲酰亚氨基-吲唑。
10.根据权利要求9的式(I)的化合物，其中R为基团-NHR′或-NR′R″，并且R′、R″、R1和m如权利要求9定义。
11.根据权利要求10的式(I)的化合物，其中m为1，而且R1、R′和R″各自独立地选自C2-C6链烯基、C3-C6炔基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
12.根据权利要求9的式(I)的化合物，其中R为基团-NHCOR′，并且R′、R1和m如权利要求9定义。
13.根据权利要求12的式(I)的化合物，其中m为1，而且R1和R′各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
14.根据权利要求9的式(I)的化合物，其中R为基团-NHCONHR′或-NHCONR′R″，并且R′、R″、R1和m如权利要求9定义。
15.根据权利要求14的式(I)的化合物，其中m为1，而且R1、R′和R″各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
16.根据权利要求9的式(I)的化合物，其中R为基团-NHSO2R′，而且R′、R1和m如权利要求9定义。
17.根据权利要求16的式(I)的化合物，其中m为1，而且R1和R′各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
18.根据权利要求9的式(I)的化合物，其中R为基团-NHCOOR′，而且R′、R1和m如权利要求9定义。
19.根据权利要求18的式(I)的化合物，其中m为1，而且R1和R′各自独立地选自C1-C6烷基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
20.根据权利要求9的式(I)的化合物，其中R为式(II)的苯二甲酰亚氨基，并且R1和m如权利要求9定义。
21.根据权利要求20的式(I)的化合物，其中m为1，而且R1选自C2-C6链烯基、C3-C6炔基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或7元杂环基或杂环基C1-C6烷基。
22.如权利要求9定义的式(I)的化合物，所述化合物任选为药学上可接受的盐的形式，选自1)2-({3-[(苯胺基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧)丁酸甲酯；2)N-苄基-N′-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]脲；3)2-[(3-{[(苄基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]丁酸甲酯；4)N-异丙基-N′-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}脲；5)2-[(3-{[(异丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]-N-苯基丙酰胺；6)2-[(3-{[(异丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]丁酸甲酯；7)N-异丙基-N′-{5-[2-(4-甲基-1，3-噻唑-5-基)乙氧基]-1H-吲唑-3-基}脲；8)N-[5-(丁-3-炔基氧)-1H-吲唑-3-基]-N′-异丙基脲；9)2-({3-[(3-苯基丙酰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧)]丁酸甲酯；10)N-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}环丙烷甲酰胺；11)2-({3-[(环丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧)]丁酸甲酯；12)2-(4-叔丁基苯氧基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺；13)2-(4-甲氧基苯基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺；14)2-[(3-{[(4-甲氧基苯基)乙酰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]丁酸甲酯；15)N-异丙基-N′-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}脲；16)N-{6-[(2-甲基苄基)氧]-1H-吲唑-3-基}环丙烷甲酰胺；17)N-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}环丙烷甲酰胺；18)2-({3-[(环丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧)丁酸甲酯；19)2-(3-[(3-氯苯甲酰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧)丁酸甲酯；20)N-苄基-N′-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)脲；21)N-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)-N′-异丙基脲；22)2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)乙酰胺；23)N-(5-羟基-2H-吲唑-3-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺；24)N-(6-羟基-2H-吲唑-3-基)-N′-苯基脲；25)N-(6-羟基-2H-吲唑-3-基)-3-苯基丙酰胺；26)N-(6-羟基-2H-吲唑-3-基)环丙烷甲酰胺。
23.一种用于制备如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的方法，其中R如权利要求9定义，但不为式(II)的苯二甲酰亚氨基，所述方法包括a)在酸性条件下使式(III)的2-氨基-苄腈衍生物 其中m如权利要求9定义，且R_如果存在的话为甲基或苄基；与亚硝酸钠在氯化亚锡存在下反应得到式(IV)的化合物 b)使式(IV)的化合物与邻苯二甲酸酐反应得到式(V)的化合物 c)使式(V)的化合物与适宜的醚裂解试剂反应得到对应的式(VI)的羟基衍生物 d)使式(VI)的化合物与适宜的甲硅烷化试剂(Riv)3SiZ反应得到式(VII)的化合物，其中各Riv相同或不同，为直链或支链C1-C4烷基，并且Z为卤原子， e)使式(VII)的化合物与适宜的吲唑氮保护剂反应或可选择担载在适宜的聚合树脂上，得到式(VIII)的化合物， 其中Q为以上的保护基或者代表载体树脂；f)使式(VIII)的化合物与肼一水合物反应得到式(IX)的化合物， 并使式(IX)的化合物根据以下步骤g.1)或g.2)中的任一步骤进行反应；g.1)与适宜的式R′-Z(X)、R′-COZ(XI)、R′-NCO(XII)、R′-SO2Z(XIII)或R′OCOZ(XIV)的试剂反应，其中R′如权利要求9定义，并且Z代表卤原子或适宜的离去基团，从而得到对应的式(XV)的化合物 其中R为基团-NHR′、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHSO2R′或-NHCOOR′，而且如果需要的话，使R为-NHR′或-NHCONHR′基团的化合物与下式的化合物反应，R″Z(XVI)其中R″如权利要求9定义，而Z如以上定义，从而得到式(XV)的化合物，其中R为基团-NR′R″或-NHCONR′R″；g.2)与式(XVII)的化合物R′R″NH (XVII)其中R′和R″如以上定义，在4-硝基苯基氯甲酸酯存在下反应从而得到对应的式(XV)的化合物，其中R为基团-NHCONR′R″；h)使任何以上式(XV)的化合物与四丁基氟化铵反应得到式(XVIII)的化合物 i)使式(XVIII)的化合物与下式的衍生物反应，R1-Z (XIX)其中R1如权利要求9定义，并且Z为卤原子、适宜的离去基团或羟基，从而得到式(XX)的化合物； j)将式(XX)的化合物脱保护，或者可选择地将聚合树脂裂解以得到目标式(I)的化合物，而且如果需要的话，将它转化成另一种式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐。
24.权利要求23的方法，其中式(III)的化合物为2-氨基-4-甲氧基-苄腈或2-氨基-5-苄氧基-苄腈。
25.权利要求23的方法，其中步骤a)在盐酸存在下完成。
26.权利要求23的方法，其中在步骤d)中，甲硅烷化试剂为叔丁基-二甲基-甲硅烷基氯化物。
27.权利要求23的方法，其中在步骤e)中，式(VII)的吲唑衍生物担载在氯-三苯甲基氯化物聚合树脂上。
28.一种用于制备如权利要求9定义并且其中的R为式(II)的苯二甲酰亚氨基的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的方法，所述方法包括使如权利要求23定义的式(VIII)的化合物根据权利要求23的方法中的步骤h)、i)和j)进行反应。
29.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合化学技术，根据以上权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXa)的化合物与每一种如表I所述的式(X)的化合物反应得到多数式(XVa)的化合物， 然后使各种式(XVa)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
30.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXb)的化合物与每一种如表I所述的式(X)的化合物反应得到多数式(XVa)的化合物， 然后使各种式(XVb)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
31.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXa)的化合物与每一种如表IV所述的式(XI)的化合物反应得到多数式(XVc)的化合物， 然后使每一种式(XVc)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
32.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXb)的化合物与每一种如表IV所述的式(XI)的化合物反应得到多数式(XVd)的化合物， 然后使每一种式(XVd)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
33.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXa)的化合物与每一种如表V所述的式(XII)的化合物反应得到多数式(XVe)的化合物， 然后使每一种式(XVe)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
34.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXb)的化合物与每一种如表V所述的式(XII)的化合物反应得到多数式(XVf)的化合物， 然后使每一种式(XVf)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
35.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXa)的化合物与每一种如表VI所述的式(XIII)的化合物反应得到多数式(XVg)的化合物， 然后使每一种式(XVg)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
36.如权利要求9定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，它例如可以通过组合的化学技术，根据权利要求23的方法，通过以下步骤得到首先使式(IXb)的化合物与每一种如表VI所述的式(XIII)的化合物反应得到多数式(XVh)的化合物， 然后使每一种式(XVh)的衍生物与四丁基氟化铵根据所述方法的步骤h)进行反应，随后与每一种如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反应，接着根据所述方法的步骤j)进行操作。
37.二种或多种式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其药学上可接受的盐的库， 其中R选自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自独立地为选自以下的任选进一步被取代的基团直链或支链C1-C6烷基、C2-C6链烯基或炔基、C3-C6环烷基或环烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环基或杂环基C1-C6烷基；或者R为下式(II)的苯二甲酰亚氨基， 任何R1，如果存在的话，在吲唑环的5位或6位，并代表如以上关于R′或R″所述的任选进一步被取代的基团；m为0或1。
38.一种特定的式(I)的化合物，所述化合物任选为药学上可接受的盐的形式，如表IX-XVI之任一表所定义。
39.一种包含有效量的如权利要求9定义的式(I)的氨基吲唑和至少一种药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂的药物组合物。
40.根据权利要求39的药物组合物，所述组合物还包含一种或多种化学治疗剂作为组合制剂以同时、单独或连续地用于抗癌治疗。
41.一种包含权利要求9的化合物或如权利要求39定义的其药物组合物和一种或多种化学治疗剂的产品或试剂盒，其作为一种组合制剂以同时、单独或连续地用于抗癌治疗。
42.如权利要求9定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用作药物。
43.如权利要求9定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于制备治疗由蛋白激酶活性改变导致的疾病和/或与蛋白激酶活性改变有关的疾病的药物的用途。
44.根据权利要求43的用于治疗肿瘤的用途。
全文摘要
公开了化合物3－氨基吲唑衍生物或其药学上可接受的盐，并一起公开了包含它们的药物组合物；这些化合物或组合物用于治疗由蛋白激酶活性改变导致的疾病和/或与蛋白激酶活性改变有关的疾病，例如癌、细胞增殖疾病、阿尔茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神经变性疾病。
文档编号A61K31/42GK1556702SQ02818598
公开日2004年12月22日 申请日期2002年9月19日 优先权日2001年9月26日
发明者R·阿米茨, M·迪阿尼罗, K·玛蒂纳, B·萨罗姆, A·伍尔佩蒂, ⒛崧, R 阿米茨, 倌, 宓, 弈 申请人:法玛西雅意大利公司