专利名称：一种gst活化的抗癌化合物与另一种抗癌疗法的复合癌症疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及癌症治疗。
背景技术：
癌症治疗的目的(抗癌疗法)是阻止癌细胞繁殖、侵入、转移以及最终杀死它们的宿主机体，如人或其他哺乳动物。由于细胞繁殖是许多正常细胞及癌细胞的特性，大多数的抗癌疗法对正常细胞特别是繁殖速度快的细胞有毒性影响，如骨髓细胞和粘膜细胞。因此，选择有效治疗癌症的方法的目的就是寻找一种疗法可以阻碍或控制癌细胞生长并且对其宿主的毒性影响最小。在最有效的疗法中，所用的药剂不仅能够阻止而且能够消灭癌细胞，并且可以充分地保护正常细胞使宿主恢复到正常或者至少达到满意的生命功能和生活质量。癌症治疗方法包括典型的以所有正在分裂的细胞为目标采用抗增殖药剂的化学疗法(代表性地，小分子)；针对特定目标癌细胞的分子目标疗法，如采用基因疗法、抗过敏疗法和药物如埃罗替尼盐酸盐、吉非替尼和甲磺酸伊马替尼以改变癌细胞分子功能的功能疗法，以及以独特的表型癌细胞为目标的直接表型疗法，如采用单克隆抗体、免疫毒素、放射性免疫结合物和癌疫苗的疗法；采用细胞因子如2-白细胞介素和α-干扰素的生物疗法；以及放射疗法。
然而，尽管在20世纪40年代就将第一种有效的抗癌化合物用于临床试验，但最初的治疗结果令人很失望。采用单独的药剂能够使急性淋巴细胞白血病和成人淋巴瘤病得到消退，如氮芥、抗叶酸、皮质类固醇以及长春花属生物碱，但是反应经常是局部的，持续时间短，并且会对原来的药物产生抗药性使旧病复发。对给定的单药剂的初始抗药性(天然抗药性)是经常性的，甚至在用药后最初起反应的癌症常常表现出已经习惯的抗药性，这可能是由于从异质群体中选择了已经存在的抗药性癌细胞，也可能是由于抗药性的突变速率增大了。这同临床观察是一致的，几乎没有例外，癌症只能通过复合疗法治疗。癌症常常会对抗癌疗法具有抗药性(在最初的治疗过程中就不起反应)和难控制性(对最初的治疗起反应，然后复发，并且对后来的治疗已经不再起反应)。对一种抗癌药物如铂抗癌化合物-顺铂的抗药性通常是与对同种类的其他药物如其他铂化合物的交叉抗药性关联的。多重抗药性，也被称为多向抗药性，是指一种药物治疗不仅对该药物及同类的其他药物产生抗药性，而且对不相关的药剂也产生了抗药性。
基于几个主要原因，在复合疗法中，常常采用抗癌疗法，特别是化学疗法。第一，采用两个或多个非交叉抗药疗法的治疗方法可以防止抗药性细胞系的形成；第二，在细胞的不同生长阶段(休眠-G0，有丝分裂期后-G1，DNA合成-S，有丝分裂前-G2和有丝分裂-M)可以对抗细胞活性的两种或多种疗法的复合疗法，该疗法可以杀死分裂缓慢的细胞和分裂活跃的细胞和/或将细胞恢复到多种更活跃的分裂状态，使它们对许多抗癌疗法更加敏感；第三，复合疗法在单一的生物化学路径里通过影响不同的路径或不同的步骤可以起到生物化学增强作用。特别是当两种或多种疗法的毒性没有重叠时，这些疗法可以全部被采用或者几乎全部采用，在复合疗法中，每种疗法的作用都可以得到发挥；传统的抑制骨髓的药物可以用非抑制骨髓药物如长春花属生物碱、强的松和博来霉素来补充；以及在很多不能用单药剂疗法治疗的癌症中，复合化学疗法得到了发展。化学疗法、分子目标疗法、生物疗法以及放射疗法中的两种或多种的复合疗法是众所周知的并且被广泛应用。尽管很多机理明显不同的抗癌疗法都要求找到非交叉抗药性疗法，但是众所周知，癌细胞产生多向抗药性的机理是不同的。这些抗药性机理可用于复合疗法不起作用的普通癌症，如转移的结肠癌和前列腺癌。
Cancer Chemotherapy and BiotherapyPrinciples and Practice，3rded.(2001)，Chabner and Longo，eds.，和Handbook of CancerChemotherapy，6thed.(2003)，Skeel，ed.，两本书的作者均是LippincottWilliams & Wilkins，Philadelphia，Pennsylvania，U.S.A.，两本书都讨论了化学疗法和生物疗法，并举了一些适当的治疗方案实例；对于抗癌疗法的方式而言，特别是化学疗法，可以通过一些网站查到，如国家癌症协会(www.cancer.gov)、美国临床肿瘤学会(www.asco.org)、以及国家综合癌症网(www.nccn.org)。
谷胱甘肽(GSH)，在其还原形式中，是化学式为γ-L-Glu-L-Cys-Gly的三肽。还原的谷胱甘肽对保持细胞中的氧化还原条件起着重要作用，同时也是谷胱甘肽S-转移酶(GST)的必需的底物。GST作为一种同功酶的总科，存在于哺乳动物中，可以调节进入细胞体内的外来物质的新陈代谢和解毒。通常，GST可以促进外来物质的解毒(包括抗癌药物)，但是它也能将某种前体转化成有毒物质。同功酶GST P1-1存在于很多癌细胞中，如卵巢、非小细胞肺、乳房、结肠直肠、胰腺和淋巴组织(75％以上患有乳房癌、肺癌、肝癌和结肠直肠癌病人的肿瘤样本都被报道表达GSTP1-1)。通常，在用许多化学疗法药剂治疗的肿瘤中含有更多的GSTP1-1，含有GST P1-1的癌细胞已经产生了对这些药剂的抗药性。
美国专利第5,556,942号披露了化学式如下的化合物
以及它们的酰胺、酯和盐，其中L为吸电子离去基团；Sx为-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-S(＝NH)-、-S(＝O)(＝NH)-、-S+(C1-C6烷基)-、-Se(＝O)-、-Se(＝O)2-、-Se(＝NH)-，或者为-Se(＝O)(＝NH)-，或者-O-C(＝O)-，或者-HN-C(＝O)-；每个R1、R2和R3独立地为H或互不干扰(non-interfering)取代基；n为0、1或2；Y选自由 和 组成的组，其中m为1或2；以及AAc为通过肽键连接到该化合物及其合成物的剩余物上的氨基酸。
该专利中所公开的化合物对于选择性治疗含有GST同功酶的靶组织是有益的药物，同时也提高了骨髓中GM祖细胞的水平。所披露的实施例中，L包括那些能够产生药物的吸电子离去基团，所产生的药物对于有害的细胞具有细胞毒害性，包括氨基磷酸酯和二氨基磷酸酯芥子。
TLK286为其中的一种化合物，该专利中TLK286亦即TER286，命名为γ-谷氨酰-α-氨基-β-((2-乙基-N，N，N，N-四(2′-氯)乙基氨基磷酸酯)磺酰)丙酰-(R)-(-)苯基甘氨酸。TLK286为具有以下化学式 以及具有CAS的化合物，该CAS命名为L-γ-谷氨酰-3-[[2-[[双[双(2-氯乙基)氨基]磷酰基]氧基]乙基]磺酰基]-L-丙氨酰基-2-苯基-(2R)-甘氨酸。TLK286盐酸盐被建议的美国通用名为canglustratide盐酸盐。TLK286是一种抗癌化合物，通过GST P1-1和GST A1-1的作用被活化，释放出细胞毒素的二氨基磷酸酯芥子部分。TLK286经过GST P1-1的活化作用后，在MKK4、JNK、p38MAP激酶和caspase 3的活化作用下通过应激反应信号路径来诱导细胞凋亡。
在体外，对阿霉素具有抗药性的M6709人类结肠癌细胞系和对环磷酰胺具有抗药性的MCF-7人类乳房癌细胞系，TLK286是更有效的，这两种癌细胞系中均过表达(overexpress)GST P1-1，超过了它们的亲本细胞；而在对于具有高、中、低GST P1-1水平M7609的鼠科异种移植物中，TLK286的有效性是与GST P1-1的水平密切相关的(Morgan et al.Cancer Res.，582568(1998))。
TLK286的盐酸盐，目前正在评估它在治疗卵巢癌、乳房癌、非小细胞肺癌和结肠直肠癌的多种临床试验中的效用。在治愈非小细胞肺癌患者和卵巢癌患者中，已经证明了它具有重要的单药剂抗癌的活性和改进。来自体外细胞培养和瘤活组织切片检查的证据表明，TLK286对铂、紫杉醇和阿霉素(Rosario et al.，Mol.Pharmacol.，58167(2000))以及对吉西他滨无交叉抗药性。采用TLK286治疗的患者对临床中重要的血液毒性反应很小。
美国专利第5,556,942号中还特别提到的其它化合物TLK231(TER 231)，L-γ-谷氨酰-3-[[2-[[双[双(2-氯乙基)氨基]磷酰基]氧基]乙基]磺酰基]-L-丙氨酰基-甘氨酸，被GST M1a-1a活化；TLK303(TER 303)，L-γ-谷氨酰-3-[[2-[[双[双(2-氯乙基)氨基]磷酰基]氧基]乙基]磺酰基]-L-丙氨酰基-2-苯基-(2S)-丙胺酸，被GSTA1-1活化；TLK 296(TER 296)，L-γ-谷氨酰-3-[[2-[[双[双(2-氯乙基)氨基]磷酰基]氧基]乙基]磺酰基]-L-苯丙氨酰基-甘氨酸，被GST P1-1活化；以及TLK 297(TER 297)，L-γ-谷氨酰-3-[[2-[[双[双(2-氯乙基)氨基]磷酰基]氧基]乙基]磺酰基]-L-苯丙氨酰基-2-苯基-(2R)-甘氨酸，以及它们的盐。
将美国专利第5,556,942号所披露的内容，以及参照该申请的其它文献所披露的内容，结合于本申请作为参考。
癌症疗法正在稳步发展，但是即使是目前最好的疗法也不是总起作用，并且在经过治疗后常常就不起作用了，所以急需寻找到改进的癌症疗法。
发明内容
一方面，本发明提供了一种哺乳动物特别是人类的复合癌症治疗方法，包括给予治疗有效量的GST活化的抗癌化合物和治疗有效量的另外一种抗癌治疗，即，抗癌治疗不是一种采用GST活化的抗癌化合物进行的治疗(包括化学疗法、分子目标疗法、生物疗法和放射疗法，单独使用或联合使用)。
第二方面，本发明提供了一种用于哺乳动物特别是人类的增强抗癌疗法效力的方法，包括给予采用该抗癌疗法治疗的哺乳动物治疗有效量的GST活化的抗癌化合物。
第三方面，本发明提供了一种用于抗癌疗法的药物组合物，包括GST活化的抗癌化合物，另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂或生物疗法药剂中的一种或多种，以及赋形剂。
第四方面，本发明提供了一种用于抗癌疗法的药用产品或试剂盒，包括存在于剂型中的GST活化的抗癌化合物，以及也存在于剂型中的另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂或生物疗法药剂中的一种或多种。
第五方面，本发明提供了一种GST活化的抗癌化合物和另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂或生物疗法药剂的一种或多种在生产用于治疗哺乳动物特别是人类癌症的药物中的应用。
第六方面，本发明提供了一种GST活化的抗癌化合物在生产用于采用放射疗法治疗哺乳动物特别是人类癌症的药物中的应用。
在本发明的优选实施例中(优选的方法、组合物、产品、试剂盒和应用)，GST活化的抗癌化合物是美国专利第5,556,942号中的一种化合物，特别为TLK 286，或其酰胺、酯、酰胺/酯，或它的盐，特别是TLK 286的盐，尤其是TLK 286盐酸盐，以及这些优选物和优选的另一种抗癌疗法在说明书和权利要求2-20的方法特征中都做了描述。
在本发明的实施例中，本发明的复合癌症疗法不包括TLK 286和多西他赛两种药物联合的复合疗法；或者包括TLK 286和多西他赛的两种药物联合的复合疗法，其中只包括，TLK 286的剂量为60-1280mg/m2，特别是400-1000mg/m2，多西他赛的剂量为35-100mg/m2，特别是50-100mg/m2。
图1示出了用卡铂、TLK 286和卡铂+TLK 286治疗的OVCAR-3抑制细胞生长。
图2示出了用奥沙利铂、TLK 286和奥沙利铂+TLK286治疗的DLD-1抑制细胞生长。
图3示出了用阿霉素、TLK 286和阿霉素+TLK 286治疗的OVCAR-3抑制细胞生长。
图4为用多西他赛、TLK286和多西他赛+TLK 286治疗的MCF-7抑制细胞增殖。
图5示出了用顺铂、TLK 286和顺铂+TLK 286治疗的A-549抑制细胞增殖。
图6示出了用紫杉醇、TLK 286和紫杉醇+TLK 286治疗的A-549抑制细胞增殖。
图7示出了用吉西他滨、TLK 286和吉西他滨+TLK 286治疗的MCF-7抑制细胞生长。
图8示出了用利妥昔单抗、TLK 286和利妥昔单抗+TLK 286治疗的RL抑制细胞生长。
图9示出了用吉非替尼、TLK 286和吉非替尼+TLK 286治疗的MX-1抑制细胞生长。
具体实施例方式
GST活化的抗癌化合物“GST活化的抗癌化合物”是一种包括谷胱甘肽或谷胱甘肽类似物的化合物，该化合物以化学方法连接到细胞毒素的部分中，因此在存在一种或多种GST同功酶时，细胞毒素的部分能够通过分裂从谷胱甘肽或谷胱甘肽类似物中被释放出来。
适宜的该化合物包括美国专利第5,556,942号中披露的化合物，化学式为 以及它们的酰胺、酯和盐，其中L为细胞毒素的吸电子离去基团；Sx为-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-S(＝NH)-、-S(＝O)(＝NH)-、-S+(C1-C6烷基)-、-Se(＝O)-、-Se(＝O)2-、-Se(＝NH)-，或者为-Se(＝O)(＝NH)-，或者-O-C(＝O)-，或者-HN-C(＝O)-；每个R1、R2和R3独立为H或互不干扰取代基如H、可选取代的C1-C6烷基(例如，甲基、叔丁基、环己基等)、可选取代的C6-C12芳基(例如，苯基、萘基、吡啶基等)、可选取代的C7-C12芳烷基(例如，苄基、苯乙基、2-吡啶基乙基等)、氰基、卤基、可选取代的C1-C6烷氧基、可选取代的C6-C12芳氧基、或者可选取代的C7-C12芳氧基，其中这些取代基可以为卤基、-OR、-SR；以及-NR2，其中R为H或C1-C4烷基；n为0、1或2；Y选自由 和 组成的组，其中m为1或2；以及AAc为通过肽键连接到该化合物及其合成物的剩余物上的氨基酸。
在优选实施例中，下面优选物的一种或多种为L为毒素如篦麻毒素或白喉毒素，可连接的抗癌药剂如阿霉素或道诺霉素，或者氨基磷酸酯或二氨基磷酸酯芥子，特别是化学式为-OP(＝O)(NHCH2CH2X)2或-OP(＝O)(N(CH2CH2X)2)2的二氨基磷酸酯芥子，尤其是化学式为-OP(＝O)(N(CH2CH2X)2)2的二氨基磷酸酯芥子，其中X为Cl或Br，特别是Cl；Sx为O＝S＝O；R1为H，C1-C4烷基或苯基，特别是H或苯基，尤其是H；
每个R2单独地选自H和C1-C6烷基，特别是H；每个R3单独地选自H、C1-C4烷基和苯基，特别是H；n为0；Y-C(＝O)-为γ-谷氨酰、β-天冬氨酰、谷氨酰、天冬氨酰、β-谷氨酰甘氨酰、β-天冬氨酰甘氨酰、谷氨酰甘氨酰或者天冬氨酰甘氨酰，特别是γ-谷氨酰；AAc为甘氨酸、苯基甘氨酸、β-丙胺酸、丙胺酸、苯基丙氨酸、缬氨酸、4-氨基丁酸、天冬氨酸、组氨酸、色氨酸和酪氨酸，如前面R1到R3所述，(S)-或(R)-异构体在苯环上可选取代，优选为甘氨酸、苯基甘氨酸、β-丙胺酸、苯基丙氨酸或缬氨酸，特别优选为(R)-苯基甘氨酸。
这些化合物适宜的酰胺(氨基化合物)和酯包括将该化合物中的一个或多个羧基酰胺化或酯化，以便形成C1-C6烷基或链烯基、C6-C10芳基或C7-C12芳烷基酰胺或酯的化合物，其中烷基或芳基可选地被互不干扰的取代基取代，如卤基、烷氧基或烷胺基。这些酰胺和酯可以是单酰胺、二酰胺、或(如果可适用的话)三酰胺、单酯、二酯或(如果可适用的话)三酯或者混合的酰胺-酯。适宜的盐(参见Berge et al.，J.Pharm.Sci.，661(1971)for a nonexclusive list)为无机碱(如氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化钙)或有机碱(如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乙二胺、氨基丁三醇、N-甲基葡糖胺)与羧基反应形成的盐，以及无机酸(如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸和氯磺酸)或有机酸(如乙酸、丙酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、反丁烯二酸或酒石酸，和链烷或芳基磺酸如甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、取代的苯磺酸如氯苯磺酸和甲苯磺酸、萘磺酸和取代的萘磺酸、萘二磺酸和取代的萘二磺酸以及樟脑磺酸)反应以生成氨基酸盐所形成的盐。还包括混合氨盐和酯盐，如氢氧化物形式以及其它的溶剂化物和非溶剂化物形式。
这些化合物及其衍生物的制备方法可以采用本领域普通技术人员熟知的方法以及美国专利第5,556,942号中描述的方法。
一种特别优选的GST活化的抗癌化合物是TLK 286盐酸盐。(整个说明书，提及的TLK 286均指TLK 286盐酸盐)用作很多癌症包括卵巢癌、乳房癌、非小细胞肺癌和结肠直肠癌的单一疗法时，TLK 286通过静脉注射的剂量给予400-1000mg/m2体表面积，给药为一周一次和三周一次。
用作与多西他赛(75mg/m2)联合的一种复合疗法时，以3周的间隔时间给予剂量为500、750、和960mg/m2的TLK286。用作与卡铂联合的一种复合疗法(AUC 5和6mg/mL·min)时，以3-4周的间隔时间给予剂量为500、750、和960mg/m2的TLK 286。用作与阿霉素联合的一种复合疗法(40或50mg/m2)时，以4周的间隔时间给予剂量为500、750、和960mg/m2的TLK 286。
另一种抗癌疗法“另一种抗癌疗法”是指一种不用被GST活化的抗癌化合物治疗的抗癌疗法，特别是前面实施例中所披露的化合物。这种“另一种抗癌疗法”包括典型的化学疗法、分子目标疗法、生物疗法和放射疗法。这些疗法可以作为单一疗法或用在复合疗法中。
化学疗法药剂包括烷烃化剂，包括烷基磺酸如甲磺酸丁二醇二酯，亚乙基氨衍生物如三胺硫磷，氮芥子如苯丁酸氮芥、环磷酰胺、雌氮芥、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、苯丙氨酸氮芥和尿嘧啶氮介，亚硝基脲如双氯乙基亚硝脲、洛莫司汀和链脲霉素，三氮烯如达卡巴嗪、甲苄肼和泰莫佐罗，以及铂化合物如顺铂、卡铂、奥沙利铂、赛特铂和(SP-4-3)-(顺)-氨合二氯-[2-甲基嘧啶]铂(II)；抗代谢物，包括抗叶酸如氨甲叶酸、培美曲塞、雷替曲塞和三甲曲沙，嘌呤类似物如克拉利平、氯脱氧腺苷、clofarabine(核苷类似物)、氟达拉滨、巯基嘌呤、喷司他丁和硫鸟嘌呤，嘧啶类似物如阿扎胞苷、卡培他滨、阿糖胞苷、依达曲沙、氟尿苷、氟尿嘧啶、吉西他滨和曲沙他宾；天然产物包括抗癌抗菌素抗生素如博来霉素、更生霉素、光神霉素、丝裂霉素、米托蒽醌、甲基丝裂霉素和蒽环霉素如道诺霉素(包括道诺霉素脂质体)、阿霉素(包括阿霉素脂质体)、表柔吡星、去甲氧基柔红霉素和戊柔比星，酶如L-天冬酰胺酶和PEG-L-天冬酰胺酶，微管聚合物稳定剂如紫杉烷类(taxanes)紫杉醇和多西他赛，有丝分裂抑制剂如长春花属生物碱长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞宾，拓扑异构霉I抑制剂如喜树碱伊立替康和拓扑替康，以及拓扑异构霉II抑制剂如安丫啶、依托泊甙和替尼泊甙；激素和激素类似物，包括男性激素如氟羚甲基睾丸素、和睾丸激素，抗雄激素如比卡鲁胺、去乙酰环丙氯地孕酮、氟他胺和尼鲁米特，芳香酶抑制剂如氨基苯乙哌啶酮、阿那曲唑、依西美坦、福美司坦和来曲唑，皮质甾类(皮质类固醇)如地塞米松和强的松，雌激素如己烯雌酚，抗雌激素如氟维司群、雷洛昔芬、它莫西芬和涛瑞米芬，LHRH激动剂激动剂和拮抗剂如布舍瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林和曲普瑞林，黄体酮如醋酸甲羟孕酮和醋酸甲地孕酮，以及甲状腺激素如左甲状腺素和碘甲腺氨酸；以及混杂药剂，包括六甲蜜胺、砒霜、硝酸镓、羟基脲、左咪唑、邻对二氯苯二氯乙烷、奥曲肽、甲苄肼、苏拉明、沙利度胺、光能化合物如甲氧补骨脂素和卟吩姆钠、以及蛋白霉体抑制剂如bortezomib(癌症蛋白体抑制剂)。
分子目标疗法药剂包括功能治疗药剂，包括基因疗法药剂，抗敏疗法药剂，酪氨酸激酶抑制剂如类维生素A氢氯化物、吉非替尼、甲磺酸伊马替尼和semaxanib(血管生成抑制剂)，以及基因表达调节剂如类维生素A和rexinoid(激活药物)，例如阿达帕林、视黄醛(倍克洛丁)、反-维生素A酸、9-顺-维生素A酸和N-(4-羟苯基)维胺酯；直接表型疗法药剂，包括单克隆抗体如阿来组单抗、贝伐单抗、西妥昔单抗、替伊莫单抗、利妥昔单抗和曲妥珠单抗，免疫毒素如吉妥单抗，放射性免疫结合物如131I标记托西莫单抗，以及癌疫苗。
生物疗法药剂包括干扰素如α2a-干扰素和α2b-干扰素，以及白细胞介素如阿地流律、地尼白介素-2和奥普瑞白介素。
除了上述对癌细胞起作用的药剂外，癌症疗法还包括保护剂或附加剂，包括细胞保护剂如阿米斯丁、左丙亚胺和美司钠，膦酸盐如帕米膦酸盐和唑米磷酸盐，以及刺激因子如环氧型菌素、darbeopetin(促红血球生成素)、非格司亭、聚乙烯化非格司亭和沙格司亭。
联合了GST活化的抗癌化合物的复合抗癌治疗方法包括所有含有采用两种或多种抗癌疗法(抗癌药剂)的治疗方法，如前述实施例中所述的治疗方法和/或放射疗法，还可选地包括前述的保护剂和附加剂；以及TLK 286可以加入到已知的抗癌治疗方法中用于治疗各种癌症，如背景技术中所述的治疗方法。
很多复合化学治疗方法是本领域公知的，如铂化合物与紫杉烷联合，例如，卡铂/紫杉醇、卡培他滨/多西他赛、“Cooper治疗方法”、氟二氧嘧啶-左咪唑、氟二氧嘧啶-亚叶酸、甲氨蝶呤-亚叶酸，以及公知的治疗方法缩写为ABDIC、ABVD、AC、ADIC、AI、BACOD、BACOP、BVCPP、CABO、CAD、CAE、CAF、CAP、CD、CEC、CF、CHOP、CHOP+利妥昔单抗、CIC、CMF、CMFP、CyADIC、CyVADIC、DAC、DVD、FAC、FAC-S、FAM-S、FOLFOX-4、FOLFOX-6、M-BACOD、MACOB-B、MAID、MOPP、MVAC、PCV、T-5、VAC、VAD、VAPA、VAP-Cyclo、VAP-II、VBM、VBMCP、VIP、VP等等。
化学疗法与分子目标疗法、生物疗法和放射疗法的复合疗法是本领域公知的，包括的治疗方法如曲妥珠单抗+紫杉醇疗法，单独使用或进一步与卡铂联合，用于治疗某些乳房癌，以及用于治疗其它癌症的很多诸如此类的其它治疗方法；以及“Dublin治疗方法”(第1-5天间隔16个小时给药555mg/m2氟尿嘧啶IV，第7天间隔8小时给药75mg/m2顺铂IV，重复6周，在前3周联合40Gy放射疗法，分15次进行)和“Michigan疗法”(氟尿嘧啶+顺铂+长春碱+放射疗法)都可以用于治疗食道癌，以及用于治疗其它癌症的很多诸如此类的其它治疗方法。
一种GST活化的抗癌化合物和另一种抗癌疗法的复合治疗方法本发明是一种用于哺乳动物特别是人类的复合抗癌治疗方法，给予治疗有效量的GST活化的抗癌化合物和治疗有效量的另一种抗癌疗法。
复合疗法是指在进行癌症化学疗法的过程中采用GST活化的抗癌化合物和另一种抗癌疗法联合进行治疗。该复合疗法包括在用另一种抗癌疗法治疗之前、进行中或之后采用GST活化的抗癌化合物进行治疗。采用GST活化的抗癌化合物治疗在治疗时间上与另一种抗癌疗法的治疗时间是分开的，通常在几周内，可以在另一种抗癌疗法的治疗时间之前或之后，优选的采用GST活化的抗癌化合物治疗的治疗时间与另一种抗癌疗法的治疗时间相差48小时以内，更优选的在24小时内。
治疗有效量是指在治疗哺乳动物特别是人类癌症中足以有效治疗癌症的治疗量。对哺乳动物癌症的“处理(treating)”或“治疗(treatment)”包括下面的一种或多种(1)抑制肿瘤(癌瘤)生长，即，阻止其发展；(2)防止癌症扩散，即，防止转移；(3)减轻癌症，即，使肿瘤消退；(4)防止癌症复发，以及(5)减轻癌症症状。
可以采用本发明的方法有效治疗的癌症包括哺乳动物癌症，特别是人类癌症。能够采用本发明的方法治疗的癌症是对细胞凋亡诱导物敏感的癌症，特别是那些表达出尤其是过表达出一种或多种谷胱甘肽酸S-转移酶同功酶的癌症。癌症当采用其它的抗癌化合物或复合癌症化学治疗方法(不包括GST活化的抗癌化合物)治疗时，会表达出或过表达出一种或多种谷胱甘肽酸S-转移酶同功酶，对于这类癌症采用本发明的方法是特别有效的。这类癌症包括脑癌、乳房癌、膀胱癌、宫颈癌、结肠和直肠癌、食道癌、头颈癌、肾癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和胃癌；白血病如ALL、AML、AMML、CLL、CML、CMML和多毛细胞白血病；Hodgkin’s和非Hodgkin’s淋巴瘤；间皮瘤、多骨髓瘤；以及骨和软组织恶性毒瘤。特别适用本发明的方法治疗，并用TLK 286作为GST活化的抗癌化合物的癌症，包括乳房癌、卵巢癌、结肠直肠癌和非小细胞肺癌；以及由于TLK 296也能够被GST P1-1活化，因此TLK 296对这些癌症同样很有效。其它GST活化的抗癌化合物对这些癌症或其它癌症的适用，主要取决于治疗癌症时肿瘤所表达的GST同功酶的性质。
本发明的方法包括联合确定GST活化的抗癌化合物的治疗有效量和另一种抗癌疗法的治疗有效量。另一种抗癌疗法通常是指，即使没有采用GST活化的抗癌化合物治疗时，对于癌症治疗也一样具有实用性的抗癌疗法，本领域普通技术人员对于治疗一个具体癌症能够决定一种适当的另一种抗癌疗法。当然本发明的复合抗癌疗法在抗癌治疗中还没有采用。伴随着放射疗法，GST活化的抗癌药剂可以被用作辅助疗法或新辅助疗法。
给予治疗哺乳动物的GST活化的抗癌化合物的用量应该是指与另一种抗癌疗法复合治疗时的治疗有效量；同样，给予治疗哺乳动物的另一种抗癌疗法的用量应该是指与GST活化的抗癌化合物复合治疗时的治疗有效量。然而，无论是治疗有效量的GST活化的抗癌化合物还是治疗有效量的另一种抗癌疗法都应该低于将它们单独作用于哺乳动物时的有效量。一般在癌症疗法中，疗法或每种疗法都采用最大耐受剂量，减少剂量只是因为这些疗法的毒性或另一种疗法对一种疗法的毒性增强。由于TLK286不存在交叉抗药性，例如，连同几种普通的化学疗法药剂，TLK 286不存在严重的临床毒性，特别是严重的临床血液毒性，TLK 286在作为单药剂时基本可以采用最大耐受剂量，而且另一种抗癌疗法的剂量也不需要减少。实施例10至实施例12用三种普通抗癌药剂对此做了举例说明。
尽管不希望受到理论的限制，但是GST活化的抗癌化合物，特别是GST P1-1活化的抗癌化合物如TLK 286，与另一种抗癌疗法的复合疗法的机理为下面的一种或两种(1)当采用公知的抗癌疗法如用含铂化合物和阿霉素疗法治疗癌细胞系时，过表达出GST P1-1；以及GST P1-1的增加与对该抗癌疗法的抵抗力增加有关。由于化合物如TLK 286被GST P1-1激活用以释放(癌)细胞毒性的二氨基磷酸酯部分，已经用另一种抗癌疗法治疗的癌细胞将会含有升高水平的GST P1-1，进而会提高这些细胞中TLK 286的活性，增加其细胞毒性。因此，给予用GST活化的抗癌化合物如TLK 286和另一种抗癌疗法的复合疗法治疗要比单独使用每一种方法更有效；以及(2)化合物如TLK 286被GST P1-1活化，活化作用是由TLK286和酶的活性部分交互作用完成的。交互作用会限制酶交互作用的能力，并且使其它的抗癌药剂解毒，否则这些抗癌药剂是GSTP1-1解毒，所以有效地增加了这些其它抗癌药剂的细胞毒性。因此，采用一种GST活化的抗癌化合物如TLK 286和另一种抗癌疗法的复合疗法治疗要比单独使用每一种方法更有效。
TLK 286同其它抗癌疗法相互作用的结果在本申请后面的实施例中做了举例说明。
作为被GST活化的抗癌化合物，TLK 286的适宜剂量为大约60-1280mg/m2体表面积，特别是500-1000mg/m2。给药剂量可以间隔1-35天；例如，间隔1-5周，剂量约500-1000mg/m2，特别是间隔1、2、3或4周，或者可以更高的频率包括一天一次持续几天(如5或7天)，每2、3或4周重复，或者进行为期6-72小时的持续输注，每2、3或4周重复；这种剂量的弹性容易与现在采用的抗癌疗法形成复合疗法。其它GST活化的抗癌化合物的适宜剂量和给药频率是本领域普通技术人员容易确定的。
其它抗癌疗法的适宜剂量为该疗法已经建立的剂量，如前面背景技术中列出的文献所描述的。
剂量是随着疗法变化的例如，卡培他滨(2500mg/m2，口服)一天服用两次，服用两周，停用一周，甲磺酸伊马替尼(400或600mg/天，口服)每天服用，利妥昔单抗为每周服用，紫杉醇(135-175mg/m2)和多西他赛(60-100mg/m2)为每周到每三周给药，卡铂(4-6mg/mL·min)每三到四周给药一次(尽管这些剂量可以分开，间隔几天给药)，亚硝基脲烷化剂如双氯乙基亚硝脲(卡氮芥)为每6周给药一次。放射疗法可以每周进行(或者甚至可以分成更小剂量，每天进行给药)。
癌症疗法领域的普通技术人员对于一个特定的癌症和疾病阶段，不用经过过多的试验，依靠个人的知识和本申请所公开的内容，就能够确定GST活化的抗癌化合物的治疗有效量和另一种抗癌疗法的治疗有效量。
GST活化的抗癌化合物和另一种抗癌疗法可以采用任何适合被治疗癌症和癌症条件性质的路线。治疗路线包括，但不限于，通过注射治疗包括静脉注射、腹膜内注射、肌肉注射和皮下注射，以及通过经粘膜或经皮肤递送，通过局部应用、鼻喷入法和栓剂等等，也可以口服给药。剂型可选地为脂质体剂型、感光乳、设计成药物穿过粘膜的剂型或经皮肤的剂型。每种治疗方法已经找到适用的剂型，例如，在Remington中，The Science and Practice of Pharmacy，20thed.，A.Gennaro，ed.，Lippincott Williams & Wilkins，Philadelphia，Pennsylvania，U.S.A，代表性的剂型或者为口服(用于化合物如卡培他滨)或者为用于静脉注射的溶液。具有代表性的剂型为片剂(用于口服给药)、用于静脉注射的溶液和类似用于静脉注射的溶液用于再生的冻干粉末。剂型中含有GST活化的抗癌化合物，另一种化学疗法药剂、分子目标疗法药剂和/或生物疗法药剂也包含在剂型中，如，在普通的外包装中将它们包装在一起。
特别有益的复合疗法是含有TLK 286的复合治疗方法与一种铂化合物联合如卡铂或顺铂，进一步可以可选地与吉西他滨或紫杉烷如多西他赛或紫杉醇联合；与吉西他滨联合；与紫杉烷联合；与蒽环霉素如阿霉素或阿霉素脂质体联合；与奥沙利铂联合，进一步可选地与卡培他滨或氟尿嘧啶/亚叶酸联合；以及与吉西他滨或铂化合物如卡铂或顺铂联合，进一步与长春花属生物碱如长春瑞宾联合。从体外和后面治疗实施例可以看出，TLK 286连同很多其它癌症疗法可以增加疗效，如前所述，通常，TLK 286或其它GST活化的抗癌化合物可以加入到现有的抗癌疗法中。
体外实施例下面举例说明了体外一种GST活化的抗癌化合物TLK 286与一种其他抗癌化合物联合治疗人类癌细胞的有益效果。测定的每种TLK 286和其他抗癌药剂在人体中表现出了抗癌活性，结果验证了在人类癌症化学疗法中的有效性。
癌细胞系。人类癌细胞系A549(肺癌)、DLD-1(结肠直肠癌)、HT29(结肠直肠腺癌)、K-562(慢性骨髓白血病)、MCF-7(乳腺癌)、MG-63(骨肉瘤)、OVCAR-3(卵巢癌)以及RL(非-Hodgkin’s细胞淋巴瘤)可以从美国维吉尼亚马纳萨斯的美国典型菌种收藏所获得。人类乳腺癌细胞系MX-1可以从美国马里兰Bethesda的国家癌症协会获得。
抗癌化合物。吉非替尼和TLK 286由Telik制备。卡铂、顺铂、阿霉素和紫杉醇可以从美国密苏里州圣路易sigma-Aldrich化学公司获得。多西他赛可以从Aventis制药有限公司获得，吉西他滨可以从Eli lilly公司获得，奥沙利铂可以从Sanofi-Synthelabo有限公司获得，单克隆抗体IDEC-C2B8(rituxan)可以从IDEC制药公司获得。
分析方法。所有分析都在用三重测定口中进行，同时进行溶剂控制。细胞生长程度由溶剂控制口的信号的百分数表示。这些方法由标准偏差作为误差进行计算并用图表表示。
实施例1TLK 286盐酸盐和卡铂人类卵巢癌细胞系OVCAR-3以4×104细胞/mL，150μL/口(well)的速度接种，经过4-5小时吸附在口上。然后，以50μL/口的速度加入稀释的化合物或溶剂对照。单独温育TLK 286和与卡铂一起联合温育至接近六倍数量的细胞，细胞的发育能力由Wst-1分析方法测定，该方法中平皿采用新陈代谢的染料Wst-1(美国印地安那州印第安纳波利斯Roche Diagnostics公司)脉冲，温育1-2小时。每个多口平皿间隔30分钟记录几次，以确保测定的线性。在采用固定比率和不同比率的各种研究设计中，将TLK 286与卡铂联合与单独采用两种化合物进行比较，细胞毒性显著增强。结果可以采用来自Biosoft的带有“CalcuSyn”程序的联合指数(CI)方法进行进一步分析。CI值小于1表示协同，等于1表示有附加影响，大于1表示具有拮抗作用。重复试验的分析结果表明TLK 286与卡铂联合的CI平均值小于1，一般为协同。图1示出了TLK 286(3.1μM，大约IC30)和卡铂(浓度在大约1.85-4μM之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)的活性，明显地说明了联合的有益效果。
实施例2TLK 286和奥沙利铂人类结肠癌细胞系DLD-1以4×104细胞/mL，150μL/口的速度接种，并且使其附着在口上过夜。然后以50μL/口的速度加入稀释的化合物或溶剂对照。单独温育TLK 286和与卡铂一起联合温育至接近八倍数量的细胞，细胞的发育能力由细胞Titer-Glo分析方法测定(美国威斯康星州麦迪逊市Promrga公司)，根据该分析试剂盒说明书进行测定。在不同的研究设计中，采用相等的效力和不同的比率，将TLK 286与奥沙利铂联合与单独采用两种化合物进行比较，细胞毒害性显著增强。结果可以采用来自Biosoft的带有“CalcuSyn”程序的联合指数(CI)方法进行进一步分析。CI值小于1表示协同，等于1表示有附加影响，大于1表示具有拮抗作用。重复试验的分析结果表明TLK 286与奥沙利铂联合的CI平均值小于1，一般为协同。图2示出了TLK 286(9μM，大约IC20)和奥沙利铂(浓度在大约1-25μM之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)的活性，明显地说明了联合的有益效果。TLK 286和奥沙利铂对DLD-1细胞生长的协同抑制与同时用药或分先后次序用药(或者先用TLK 286或者先用奥沙利铂)无关，但是在奥沙利铂之前使用TLK 286会产生最大的协同作用。TLK 286和奥沙利铂也可以在人类结肠直肠癌细胞系HT-29中进行分析测定，同样可以看到该联合的有益效果。
实施例3TLK 286和阿霉素阿霉素作为一种DNA插入剂能够防止DNA和RNA合成并且侵袭拓扑异构酶II。阿霉素还能够改变膜的流动性并且产生半醌自由基。人类慢性骨髓白血病细胞系K-562、骨肉瘤细胞系MG-63和卵巢癌细胞系OVCAR-3分别由TLK 286单独温育和连与阿霉素联合温育，并且测定细胞的发育能力。结果可以采用来自Biosoft的带有“CalcuSyn”程序的联合指数方法进行分析。测定浓度为10至20nM的阿霉素与不同数量的TLK 286联合时的协同作用。所有三个细胞系的数据表明TLK 286和阿霉素以固定和不同比率联合基于所有的分析数据点都能起到附加的增效作用。图3示出了TLK286(1.7μM，大约IC10)和阿霉素(浓度在大约8-40μM之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)在OVCAR-3细胞中的活性，明显地说明了联合的有益效果。
实施例4TLK286和多西他赛由于多西他赛在很大程度上能够抑制人类乳房癌细胞系MCF-7细胞的生长，因此采用细胞增殖分析方法。MCF-7以4×104细胞/mL，150μL/口的速度接种，经过4到5小时吸附在口上。然后以50μL/口的速度加入稀释的化合物或溶剂对照。单独温育TLK286以及与卡铂一起联合温育至接近细胞数量的一倍，细胞增殖由BrdU(化学荧光)方法测定，采用BrdU(美国印地安那州印第安纳波利斯市Roche Diagnostics公司)标记过夜。该分析在DNA合成中基于结合的BrdU是一种胸腺密啶核苷的类似物。BrdU的结合反映了细胞增殖的程度，然后用ELISA试剂盒(同样来自RocheDiagnostics公司)测定了结合的BrdU数量。根据联合指标方法对结果进行分析。采用以固定和不同比率的TLK 286和多西他赛进行联合的数据可以起到附加的增效作用。图4示出了TLK 286(3.3μM，大约IC40)和多西他赛(浓度在大约0.8-3nM之间，从几乎无影响到大约达到60％的抑制)的活性，明显地说明了联合的有益效果。
实施例5TLK 286和顺铂在人类肺癌细胞系A-549中测定TLK 286和顺铂，采用同实施例4中的相似的方法。图5示出了TLK 286(4μM，大约IC50)和顺铂(浓度在大约0.5-8μM之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)的活性，明显地说明了联合的有益效果。
实施例6TLK 286和紫杉醇在人类肺癌细胞系A-549中测定TLK 286和紫杉醇，采用与实施例4中的相似的方法。图6示出了TLK 286(6μM)和紫杉醇(浓度在大约1-6nM之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)的活性，明显地示出了联合的有益效果。TLK 286和奥沙利铂也可以在人类卵巢癌细胞系OVCAR-3中进行分析测定，同样可以看到该联合的有益效果。
实施例7TLK 286和吉西他滨在人类乳房癌细胞系A-549中测定TLK 286和吉西他滨，采用与实施例1中相似的方法。图7示出了单独及联合起来的TLK 286和吉西他滨的活性，浓度在大约0.1和4 IC50之间，明显地说明了联合的有益效果。
实施例8TLK 286和利妥昔单抗在人类非Hodgkin’s B细胞淋巴瘤细胞系RL中测定TLK 286和利妥昔单抗，采用与实施例2中的相似的方法。图8示出了TLK286(4.6μM，大约IC25)和利妥昔单抗(浓度在大约0.01-3μg/mL之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)的活性，明显地说明了联合的有益效果。
实施例9TLK 286和吉非替尼在人类乳房癌细胞系MX-1中测定TLK 286和吉非替尼，采用与实施例2中的相似的方法。图9示出了TLK 286(浓度在大约12-200μM之间，从几乎无影响到几乎达到最大抑制)和吉非替尼(2.0μM，大约IC30)的活性，明显地示出了联合的有益效果。
治疗实施例以下实施例示出了与另一种抗癌疗法结合的用于TLK 286(GST活化的抗癌化合物)的给药方案。
实施例10在非小细胞肺癌中采用TLK 286和多西他赛复合疗法在临床研究中，登记了46位患有阶段IIIB或阶段IV非小细胞肺癌的患者，其中20位患者可用于评价临时分析。20位患者中，所有患者对铂化合物都有抗药性或对其不起反应，16位对紫杉醇具有抗药性或对其不起反应，很多患者对其它的化学疗法无反应，包括吉西他滨、培美曲塞、EFGR抑制剂如埃罗替尼盐酸盐和吉非替尼，以及血管抑制素(angiostatins)。TLK 286静脉注射的开始用量为500mg/m2体表面积，30分钟后，静脉注射多西他赛，用量为75mg/m2。TLK 286用量可以增加到750mg/m2，进一步可以增加到960mg/m2。在20位患者中，3位患者TLK 286的用量为500mg/m2，3位患者的用量为750mg/m2，而14位患者的用量为960mg/m2，每个病例中多西他赛的用量均为75mg/m2。在TLK 286用量为960mg/m2的14位患者中，采用RECIST(实体瘤反应评估标准)标准，4位患者表现出有部分反应，而5位患者表现出病情稳定；所有TLK286用量为750mg/m2的3位患者和1位用量为500mg/m2患者表现出病情稳定。研究还在进行中，间隔三周给药，研究明显地说明了联合的有益效果。
实施例11在卵巢癌中采用TLK 286和卡铂复合疗法在临床研究中，登记了13位转移性卵巢癌患者，其中8位患者可以用于评价临时分析。在8位患者中，6位患者对铂抗癌化合物有抗药性或对其不起反应，所有人都对紫杉醇有抗药性或对其不起反应，很多人对其它的化学疗法无反应，包括阿霉素脂质体、吉西他滨和拓扑替康。TLK 286静脉注射的用量为500mg/m2体表面积，30分钟后，静脉注射卡铂，用量为5或6mg/mL·min。在8位患者中，1位患者表现出完全性反应，4位患者表现出部分反应，2位患者表现出病情稳定。研究还在进行中，间隔3或4周给药，包括TLK 286剂量增加，研究明显地说明了联合的有益效果。
实施例12在卵巢癌中采用TLK 286和阿霉素脂质体复合疗法在临床研究中，登记了17位转移性卵巢癌患者，其中13位患者可以用于评价临时分析。在13位患者中，所有人对铂抗癌化合物有抗药性或对其不起反应，9位患者都对紫杉醇有抗药性或对其不起反应，很多人对其它的化学疗法无反应(现有的化学疗法的中值数为2)。TLK 286静脉注射的开始用量为500mg/m2体表面积，30分钟后，静脉注射阿霉素脂质体，用量为40mg/m2。TLK 286用量可以增加到750mg/m2，进一步可以增加到960mg/m2，而阿霉素脂质体的用量可以增加到50mg/m2。在17位患者中，3位患者TLK 286的用量为500mg/m2，3位患者的用量为750mg/m2，4位患者的用量为960mg/m2，每个病例中阿霉素脂质体的用量均为40mg/m2，还有7位患者TLK 286的用量为960mg/m2以及阿霉素脂质体的用量为50mg/m2。在3位患者可用于评价的TLK 286用量为960mg/m2、阿霉素脂质体的用量为50mg/m2患者中，1位患者表现出了部分反应，1位患者病情稳定；3位可用于评价的TLK 286用量960mg/m2、阿霉素脂质体用量40mg/m2患者中的2位，3位TLK 286用量750mg/m2、阿霉素脂质体用量40mg/m2患者中的1位，以及3位TLK 286用量500mg/m2、阿霉素脂质体用量40mg/m2患者中的1位，表现出了病情稳定。研究还在进行中，间隔4周给药，研究明显地说明了联合的有益效果。
TLK 286与其它抗癌疗法的复合疗法TLK 286静脉注射的开始用量为500mg/m2，30分钟后，静脉注射奥沙利铂，用量为治疗有效量如85mg/m2。TLK 286用量可以增加到850mg/m2，进一步可以增加到1280mg/m2，奥沙利铂的剂量可以不同。这种复合疗法间隔2周给药。
TLK 286静脉注射的开始用量为500mg/m2，间隔三周给药，伴随着口服卡培他滨，用量为治疗有效量如1250mg/m2，每天两次，服用14天，接下来的七天不服用。TLK 286用量可以增加到750mg/m2，进一步可以增加到960mg/m2，卡培他滨的剂量也可以不同。
TLK 286静脉注射的开始用量为400mg/m2，间隔2周给药，30分钟后，静脉注射氟尿嘧啶，用量为治疗有效量如12mg/Kg，氟尿嘧啶给药4天后补充亚叶酸。TLK 286用量可以增加到700mg/m2，进一步可以增加到1000mg/m2，氟尿嘧啶的剂量也可不同。
其它GST活化的化合物也可以采用本发明相似的方法。不同的其它抗癌疗法也可以采用本发明相似的方法，如其它化学疗法、分子目标疗法、生物疗法和放射疗法。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种哺乳动物的复合癌症治疗方法，包括给予治疗有效量的GST活化的抗癌化合物和治疗有效量的另一种抗癌疗法。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述哺乳动物为人类。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌化合物为具有以下化学式 的化合物或其酰胺、酯或盐，其中L为细胞毒素的吸电子离去基团；Sx为-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-S(＝NH)-、-S(＝O)(＝NH)-、-S+(C1-C6烷基)-、-Se(＝O)-、-Se(＝O)2-、-Se(＝NH)-或-Se(＝O)(＝NH)-，或者为-O-C(＝O)-或-HN-C(＝O)-；每个R1、R2和R3独立地为H或互不干扰的取代基；n为0、1或2；Y选自由 和 组成的组，其中m为1或2；以及AAc为通过肽键连接到所述化合物的剩余物的氨基酸。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌化合物为具有如下化学式 的化合物或其酰胺、酯或盐，其中L为细胞毒素的吸电子离去基团；Sx为-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-S(＝NH)-、-S(＝O)(＝NH)-、-S+(C1-C6烷基)-、-Se(＝O)-、-Se(＝O)2-、-Se(＝NH)-或-Se(＝O)(＝NH)-，或者为-O-C(＝O)-或-HN-C(＝O)-；每个R1、R2和R3独立地为H，可选取代的C1-C6烷基，可选取代的C6-C12芳基，可选取代的C7-C12芳烷基、氰基和卤基，可选取代的C1-C6烷氧基，可选取代的C6-C12芳氧基，或者可选取代的C7-C12芳氧基，其中所述取代基可以为卤基、-OR、-SR；以及-NR2，其中R为H或C1-C4烷基；n为0、1或2；Y选自由 和 组成的组，其中m为1或2；以及AAc通过肽键连接到所述化合物的剩余物的氨基酸。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其中L为毒素、可连接的抗癌药剂、或氨基磷酸酯或二氨基磷酸酯芥于；和/或Sx为O＝S＝O；和/或R1为H、C1-C4烷基或苯基；和/或每个R2独立地选自H和C1-C6烷基；和/或每个R3独立地选自H、C1-C4烷基和苯基；和/或n为0；和/或Y-C(＝O)-为γ-谷氨酰、β-天冬氨酰、谷氨酰、天冬氨酰、β-谷氨酰甘氨酰、β-天冬氨酰甘氨酰、谷氨酰甘氨酰或天冬氨酰甘氨酰；和/或AAc为甘氨酸、苯基甘氨酸、β-丙胺酸、丙胺酸、苯基丙氨酸、缬氨酸、4-氨基丁酸、天冬氨酸、组氨酸、色氨酸和酪氨酸，如前面R1至R3所述，(S)-或(R)-异构体在苯环上可选地取代。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，L为化学式-OP(＝O)(NHCH2CH2X)2或者化学式-OP(＝O)(N(CH2CH2X)2)2的二氨基磷酸酯芥子，其中X为Cl或Br；每个R1、R2和R3为H；Y-C(＝O)-为γ-谷氨酰；AAc为甘氨酸、苯基甘氨酸、β-丙胺酸、丙胺酸或苯基丙氨酸。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，L为-OP(＝O)(N(CH2CH2Cl)2Cl)2；以及AAc为(R)-苯基甘氨酸。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌化合物为canglustratide或其盐。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌化合物为canglustratide盐酸盐。
10.根据权利要求1-9中任一项权利要求所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法选自化学疗法、分子目标疗法、生物疗法和放射疗法中的一种或多种。
11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法是给予烷化剂、抗代谢物、天然产物、激素或激素拮抗剂、混杂药剂、功能治疗药剂、基因疗法药剂、抗敏疗法药剂、酪氨酸激酶抑制剂、基因表达调节剂、直接表型疗法药剂、单克隆抗体、免疫毒素、放射性免疫结合物、癌疫苗、干扰素、以及白细胞介素中的一种或多种。
12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法给予甲磺酸丁二醇二酯、三胺硫磷、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、雌氮芥、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、苯丙氨酸氮芥、尿嘧啶氮介、双氯乙基亚硝脲、洛莫司汀、链脲霉素、达卡巴嗪、甲苄肼、泰莫佐罗、顺铂、卡铂、奥沙利铂、赛特铂、(SP-4-3)-(顺)-氨合二氯-[2-甲基嘧啶]铂(II)、氨甲叶酸、培美曲塞、雷替曲塞、三甲曲沙、克拉利平、氯脱氧腺苷、clofarabine、氟达拉滨、巯基嘌呤、喷司他丁、硫鸟嘌呤、阿扎胞苷、卡培他滨、阿糖胞苷、依达曲沙、氟尿苷、氟尿嘧啶、吉西他滨、曲沙他宾、博来霉素、更生霉素、光神霉素、丝裂霉素、米托蒽醌、甲基丝裂霉素、道诺霉素、道诺霉素、阿霉素、阿霉素脂质体、表柔吡星、去甲氧基柔红霉素、戊柔比星、L-天冬酰胺酶、PEG-L-天冬酰胺酶、紫杉醇、多西他赛、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞宾、伊立替康、拓扑替康、安丫啶、依托泊甙、替尼泊甙、氟羚甲基睾丸素、睾丸激素、比卡鲁胺、去乙酰环丙氯地孕酮、氟他胺、尼鲁米特、氨基苯乙哌啶酮、阿那曲唑、依西美坦、福美司坦、来曲唑、地塞米松、强的松、己烯雌酚、氟维司群、雷洛昔芬、它莫西芬、涛瑞米芬、布舍瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林、曲普瑞林、安宫黄体酮醋酸盐、甲地孕酮醋酸盐、左甲状腺素、碘甲腺氨酸、六甲蜜胺、砒霜、硝酸镓、羟基脲、左咪唑、邻对二氯苯二氯乙烷、奥曲肽、甲苄肼、苏拉明、沙利度胺、甲氧补骨脂素、卟吩姆钠、bortezomib、埃罗替尼氢氯化物、吉非替尼、甲磺酸伊马替尼、semaxanib、阿达帕林、视黄醛、反-维生素A酸、9-顺-维生素A酸、以及N-(4-羟苯基)维胺酯、阿来组单抗、贝伐单抗、西妥昔单抗、替伊莫单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗、吉妥单抗、131I标记托西莫单抗、α2a-干扰素、α2b-干扰素、阿地流律、地尼白介素-2和奥普瑞白介素中的一种或多种。
13.根据权利要求11所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法给予铂化合物，可选地与吉西他滨或紫杉烷进一步联合；吉西他滨；紫杉烷；蒽环霉素；奥沙利铂，可选地与卡培他滨或氟尿嘧啶/亚叶酸进一步联合；以及吉西他滨或铂化合物，进一步与长春花属生物碱联合。
14.根据权利要求11所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法给予化学疗法、分子目标疗法、生物疗法、和放射疗法中的两种或多种。
15.根据权利要求11所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法给予两种或多种化学疗法药剂。
16.根据权利要求10所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法包括放射疗法。
17.根据权利要求15所述的方法，其中，所述另一种抗癌疗法为放射疗法。
18.根据权利要求1所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌化合物的剂量为约60-1280mg/m2体表面积，特别是500-1000mg/m2，间隔时间为1-35天。
19.根据权利要求18所述的方法，其中，所述剂量为500-1000mg/m2，间隔时间为1-5周，特别是间隔时间为1、2、3或4周。
20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌化合物为canglustratide盐酸盐，并且所述剂量为约500-1000mg/m2，间隔时间1、2、3或4周。
21.一种哺乳动物增强抗癌疗法效果的方法，包括给予用所述抗癌疗法治疗的哺乳动物治疗有效量的GST活化的抗癌药剂。
22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述哺乳动物为人类。
23.根据权利要求21或22所述的方法，其中，所述GST活化的抗癌药剂为canglustratide盐酸盐。
24.一种用于抗癌治疗的药物组合物，包括GST活化的抗癌化合物，另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂、以及生物疗法药剂中的一种或多种，以及赋形剂。
25.根据权利要求24所述的组合物，其中，所述GST活化的抗癌药剂为canglustratide盐酸盐。
26.一种用于抗癌治疗的药用产品，包括GST活化的抗癌化合物，以及另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂和生物疗法药剂中的一种或多种。
27.根据权利要求26所述的产品，其中，所述GST活化的抗癌药剂为canglustratide盐酸盐。
28.一种用于抗癌治疗的药物试剂盒，包括存在于剂型中的GST活化的抗癌化合物，以及也存在于剂型中的另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂和生物疗法药剂中的一种或多种。
29.根据权利要求28所述的药物试剂盒，其中，所述GST活化的抗癌药剂为canglustratide盐酸盐。
30.根据权利要求28或29所述的药物试剂盒，其中，所述剂型被包装在普通的外包装中。
31.一种GST活化的抗癌化合物，以及另一种抗癌化学疗法药剂、分子目标疗法药剂和生物疗法药剂中的一种或多种在生产用于治疗哺乳动物癌症的药物中的应用。
32.根据权利要求28所述的应用，其中，所述GST活化的抗癌药剂为canglustratide盐酸盐。
33.一种GST活化的抗癌化合物在生产用于治疗采用放射疗法治疗的哺乳动物癌症的药物中的应用。
34.根据权利要求33所述的用途，其中，所述GST活化的抗癌药剂为canglustratide盐酸盐。
全文摘要
本发明公开了一种哺乳动物特别是人类的复合癌症治疗方法，其通过给予一种治疗有效量的GST活化的抗癌化合物和治疗有效剂量的另一种抗癌疗法进行治疗。公开了用于该方法的药物组合物、产品和试剂盒。公开了一种GST活化的抗癌化合物在生产用于该方法的药物中的应用。公开了一种用于哺乳动物特别是人类增强抗癌治疗的方法，包括给予用该抗癌治疗方法进行治疗的哺乳动物治疗有效量的GST活化的抗癌化合物。公开了GST活化的抗癌化合物在生产用于该方法的药物中的应用。GST活化的抗癌化合物优选为美国专利第5,556,942号中的化合物，更优选为TLK286，特别是盐酸盐。
文档编号A61K31/337GK1711076SQ200380103404
公开日2005年12月21日 申请日期2003年11月14日 优先权日2002年11月15日
发明者徐华, 盖尔·L·布朗, 史蒂文·R·修, 詹姆斯·G·凯克 申请人:泰立克公司