专利名称：适用于中风病急性期或先兆期治疗需要的中药组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及中风病急性期或先兆期用的中药组合物，具体涉及含有麝香或人工麝香、栀子或其醇提取物、猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷、川芎或其醇提取物和冰片的适用于中风病急性期或先兆期治疗需要的中药组合物及其制剂的制备方法。
背景技术：
中风病已成为一个很大的公共社会问题。当今世界人口老龄化，脑血管(中风)病已成为中老年人的常见病、多发病，并以其高发病率、高死亡率、高致残率而严重危害人类健康。根据世界卫生组织脑血管病协作研究组对57个国家的统计资料(王新志、韩群英、陈贺华主编，中华实用中风病大全，人民卫生出版社)脑血管病被列为前3种死亡原因的有40个国家，57个国家中因脑血管病致死的患者占总死亡率的11.3％。每年发病率为165～245/10万人口，患病率国外资料为500～700/10万人口。国内报道短暂性脑血管病发作(TIA)患病率为2191.4/10万人口，完全性卒中的患病率1407.6/10万人口，每年中风新发病例约130万，死于本病约100万，存活的患病人数(包括已痊愈者)高达500～600万。中风病的病残率很高，其中绝大多数会留有不同程度的后遗症，给社会和许多家庭带来巨大的经济负担和不良影响。而目前以溶栓、抗凝的治疗方案成功率仅30％。中风病已经成为当前一个很大的公共社会问题。
全球大力促进脑研究的行动。为了提高公众对脑研究的重视，加强脑的研究，国际脑研究组织(IBRO)力促使“脑的10年”成为全球大力促进脑研究的行动。1995年夏，IBRO在日本京都举办的第四届世界神经科学大会上提议把下一世纪(21世纪)称为“脑的世纪”。同时各国竞相拨巨款，专家人数与日俱增。美国国立卫生研究院神经疾病及中风研究所(NINCDS)用于神经疾病及中风病研究经费，为美国心肺血液国家研究所同期经费的两倍，而美国癌肿国家研究所同期经费却减少了18％。中风病的研究已在世界各国处于重要位置，并由此引发了神经科学的巨大进步，各国科学家正在从不同角度阐述中风病的发生和发展，如从经典角度神经生物学、神经生理学、神经病理学、神经药理学的发展，近年异军突起的分子生物学、免疫生物学更使神经科学突飞猛进。在临床上，当务之急是努力降低发病率、死亡率和致残率，而对于每个医生来说，如何在急性期减小病灶、保护脑细胞是衡量每个治疗方案的标尺。
发挥中医药治疗优势势在必行。中风病急性期始发态的主要病机是风火痰。中医药治疗中风病有独到之处，但目前临床用药多为传统的口服固体制剂，如脑醒冲剂、脑安胶囊、脑力宝、麝香心脑乐、脑血栓片，以及凉开剂安宫牛黄丸等，因吸收缓慢，不宜急救；醒脑静注射液、清开灵注射液等中药静脉注射剂，存在微粒安全性及其用药不便等问题。另根据中医有关专家对中风病的分期为超急性期(发病6小时内)；急性期(发病后2周内)；恢复期(发病2周或1个月至半年内)；后遗症期(发病半年以上)。专家认为其中急性期的治疗，对于降低中风病患者的病死率和致残率具有特别重要的意义，而目前市场尚无理想的中风病急性期救治药品。
综上所述，研制治疗中风病急性期或先兆期的急救药品，尤其是中药复方速效制剂，预计有较好的社会效益和经济效益。
发明内容
为解决上述问题，本发明人以中药复方多靶点理论和中药复方有效成分组学理论为指导，研制出了能有效治疗中风病急性期或先兆期的急救药品。
本发明一方面提供一种中药组合物，它含有麝香或人工麝香、栀子或其醇提取物、猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷、川芎或其醇提取物、冰片作为其活性成分和药学上可接受的载体或赋形剂。
以重量份计，本发明中药组合物含有0.5-5重量份麝香或人工麝香、5-20重量份的栀子醇提取物或25-100重量份的栀子、1-10重量份的猪胆粉或猪胆酸、1-10重量份的三七总皂苷、1-10重量份成稠浸膏或干浸膏形式的川芎醇提取物或4-40重量份的川芎和1-10重量份的冰片。
本发明中药组合物中，每克中药组合物含有的栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于13.0mg。
本发明另一方面还提供制备本发明所述中药组合物的方法，该方法包括将上述重量份的活性成分与药学上可接受的载体或赋形剂混合。
本发明一个制备所述中药组合物的实施例涉及滴丸剂的制备方法，该方法包括称取药学上可接受的载体(优选本文所述的聚乙二醇类水溶性基质)，置于水浴中熔融；加入栀子提取物，搅拌均匀；离开水浴后继续加入川芎膏状提取物和猪胆粉或猪胆酸糊状物、三七总皂苷、麝香和冰片，搅拌均匀，形成混合物，调温至65-70℃，然后可将温度为65-70℃的所述混合物滴入温度为10～15℃的油溶性冷却剂中，滴制成丸后沥尽冷却剂，获得滴丸剂。
本发明另一制备所述中药组合物的实施例还涉及将本发明的中药组合物配制成分散片或咀嚼片的方法。所述方法包括，分别实施以下步骤称取麝香或人工麝香，加入0.5～1倍重量的糊精混合均匀，得到混合物A；分别称取栀子醇提取物和川芎醇提取物，加入0.5～1倍重量的糊精混合均匀，得到混合物B；分别称取猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷混合均匀，得到混合物C；将所获得的混合物A、B和C混合，以1∶1～5的重量配比加入药学上可接受的赋形剂，制得分散片或咀嚼片。
本发明再一方面还涉及成滴丸剂、分散片或咀嚼片的本发明中药组合物。
图1显示本发明中药组合物对MCAT大鼠脑梗塞范围的影响，该试验采用TTC染色，白色为梗塞区。A为MCAT模型组，B为假手术组，C为受试药150mg/kg组，D为受试药50mg/kg组，E为受试药17mg/kg组，F为对照安宫牛黄丸300mg/kg组。
图2显示本发明中药组合物对MCAT大鼠大脑皮层神经细胞的影响，采用HE染色(150X)，其中A假手术组；BMCAT模型组；C受试药150mg/kg组；D受试药50mg/kg组；E受试药17mg/kg组；F对照安宫牛黄丸300mg/kg组。
图3显示本发明中药组合物对MCAT大鼠大脑皮层神经细胞的影响，采用Nissal染色(150X)。其中，A假手术组；BMCAT模型组；C受试药150mg/kg组；D受试药50mg/kg组；E受试药17mg/kg组；F对照安宫牛黄丸300mg/kg组。
具体实施例方式
传统中药理论认为，中风病是由于气血逆乱，产生风、火、痰、瘀，导致脑脉痹阻或血溢脑脉之外，临床以突然昏仆、半身不遂、口舌歪斜、不语或言语蹇涩、偏身麻木为主症的常见疾病。依据脑髓神机受损的程度不同，有中经络、中脏腑之分，临床表现为不同证候。中风病病因复杂，常由多种病因造成人体阴阳失调、气血逆乱而发生。
目前中风病急性期尚无理想的口服自救药。安宫牛黄丸作为传统丸剂，虽然可以用于中风病急性期救治，但剂量较大，作用迟缓，尤其不宜作为吞咽困难的患者用药。
基于目前市场尚无理想的中风病急性期救治药品，本申请以中药复方多靶点理论和中药复方有效成分组学理论为指导，即，根据现代实验研究结果，随方确认和保留与治疗作用有关的成分(组分)和生物活性成分(尽量参照法定标准或省部级标准，收载的该药项下有效成分)，设计和研制了治疗中风病急性期与恢复早期疗效可靠、服用方便的复方中药组合物，该中药组合物基本上含有以下组分麝香或人工麝香、栀子或其醇提取物、猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷、川芎或其醇提取物、冰片，能起到醒神开窍、解毒通络的功效。
本中药组合物使用麝香，较佳使用人工麝香取代麝香。人工麝香是1993年经卫生部批准生产的麝香代用品，中药一类新药。经现代中药药理学研究(19种模型、29种药理指标)和对临床热病神昏、中风痰厥等(10个病种、1000余例)临床试验，表明能取代天然麝香配制的复方制剂，包括重点观察的人工麝香开窍醒神功能等，两者疗效一致。麝香对中枢神经系统呈双向性影响，即小剂量兴奋中枢，大剂量抑制中枢，且对中枢系统的缺氧性损伤有明显保护作用，提高其耐缺氧能力，但对自发活动无影响。因此，本中药组合物应用小剂量人工麝香可达开窍醒神，活血通经之功效。用于本发明的人工麝香可从市场上购买获得，例如可购自北京协和制药二厂，符合卫生部WS-20(Z-32)-93标准(中国药品生物制品检定所检定合格)。由于是贵重药，直接入药。参照中国药典2000版麝香项下规定，确定麝香酮为主要有效成分。
用于本发明中药组合物的栀子(Gardenia jasminoides Ellis)属于茜草科植物，本发明可使用其干燥的成熟果实。栀子味苦、性寒，入心、肺、三焦经，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒的功效。主要含有环烯醚萜苷类成分，如栀子苷(janminoidin)、羟异栀子苷(gardenoside)、栀子苷酸(geniposide acid)、京尼平苷(geniposide)、京尼平龙胆二糖苷(genipingentiobioside)、山栀子苷(shanzhiside)，栀子酮苷(gandoside)等栀子新苷等，此外尚含有熊果酸(ursolic acid)，具有防治动脉粥样硬化和利胆作用的三萜类化合物藏红花素(crocin)等；以及黄酮类栀子素(gardenin)，谷甾醇、D-甘露醇、胆碱等。根据本中药组合物中栀子的作用，其具有解毒利胆、抗炎保肝作用的环烯醚萜苷类成分应视为主要有效部分，其次是具有镇静降温以及抗惊厥作用的醇提物和熊果酸等。按照中国药典(一)部栀子项下HPLC法测定栀子苷的规定，本制剂以有效成分栀子苷为指标性成分，用HPLC法测定栀子苷的含量，以控制原药材(以干燥品计含栀子苷不得少于1.8％)和成品质量。
用于本发明中药组合物的三七总皂苷是得自五加科植物三七〔Panaxnotoginseng(Burk)F.H.chen〕干燥茎叶的提取物。三七甘、微苦，温。归肝、胃经。散瘀止血，消肿定痛。临床用于咯血，吐血，便血，崩漏，外伤出血等。现代药理实验证明三七可阻止Ca2+内流，而对脑缺血损伤起保护作用，通过调节IL-2产生增强免疫，达到清除自由基的作用。三七总皂苷为三七的主要有效部位，具有类似人参皂苷样作用。由于三七提取工艺比较成熟，为了节约工时、降低成本、稳定产品质量且充分利用药源，采用以三七总皂苷投料的方法。用于本发明的三七总皂苷可从市场上购得。例如，可购自云南昆明雅阁臣药业有限公司(批号010301)。在制药过程中，可采用HPLC法测定指标性成分人参皂苷Rb1和Rg1的含量，控制药料的治疗。也可以人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1以及三七皂苷R1为对照品，采用TLC法定性鉴别成品中的三七。
本发明中药组合物使用的猪胆粉是来自猪科动物猪(Sus scrofa dommesticaBrisson.)胆汁的干燥品。其药性苦、寒。归肝、胆、肺、大肠经。清热，润燥，解毒，止咳平喘。临床用于热病燥渴，目赤，喉痹，黄疸，百日咳，哮喘。泄泻，病疾，便秘，痈疮肿毒。主要含猪胆酸、胆红素、胆固醇等，胆酸类通常与结合胆汁酸中的牛磺酸结合成牛磺胆酸，可对抗如咖啡因、樟脑等的中枢兴奋作用，而有镇静、抗惊厥效果，对吞噬细胞起促进作用。常用剂量0.3～0.6g。猪胆粉符合中国药典2000年版(一)部标准，直接入药。猪胆酸为其指标性成分，可采用TLC法定性鉴别成品中的猪胆粉。也可用猪胆酸代用。
本发明中药组合物中使用的川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)属于伞形科藁本属，的根茎和姜科植物温味辛，性温，归肝、胆、心包经，具有活血行气、祛风止痛的功效。其有效成分为川芎嗪等生物碱类、阿魏酸、酚性物质、挥发油等。川芎的总生物碱和酚性成分具有较明显的扩张冠脉，增加冠脉和脑血流量，抑制ADP诱导的血小板的凝集，对已凝集的血小板有解聚作用、降低血小板的表面活性等药理作用。其中川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)可迅速透过血脑屏障，在脑干分布较多，具有扩张血管、增加冠脉血流和脑血流，改善微循环的作用，已作为缺血性脑病的常规治疗药物，含量0.01～0.02％；阿魏酸(Ferulic acid，FA)具有抑制血小板聚集、阻止血栓形成的药理活性，含量约0.1％。因川芎嗪和阿魏酸极易升华，TLC检测重现性较差，为便于生产质控，按照中国药典2000年版(一)部川芎项下标准，以标准药材为对照，应用TLC法对成品进行川芎的定性鉴别。
本发明中药组合物使用的冰片主要含龙脑和异龙脑，味辛、苦，微寒。归心、脾、肺经。具有开窍醒神、清热止痛的功能。临床用于热病神昏、痉厥、中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷等。现代实验研究证明冰片能增强血脑屏障的通透性，其中异龙脑的脂溶性较大更易通过血脑屏障，并证实其“独行则势弱，佐使则有功”及“芳香走窜，引药上行”的传统理论。常用剂量0.15～0.3g。本发明使用的冰片也可从市场上购得，例如购自广州市黄浦化工厂(批号001039)，符合中国药典2000年版(一)部冰片项下标准。
以重量份计，本发明中药组合物含有0.5-5重量份麝香或人工麝香、5-20重量份的栀子醇提取物或25-100重量份的栀子、1-10重量份的猪胆粉或猪胆酸、1-10重量份的三七总皂苷、1-10重量份成稠浸膏或干浸膏形式的川芎醇提取物或4-40重量份的川芎、1-10重量份的冰片。
在本发明的一个优选实施例中，以该中药组合物的总重量计，麝香或人工麝香占0.5-5％，栀子醇提取物占5-20％，猪胆粉或猪胆酸占1-10％，三七总皂苷占1-10％，川芎醇提取物占1-10％，所述冰片占1-10％。在本发明另一优选实施例中，以中药组合物的总重量计，麝香或人工麝香占2-4％，栀子醇提取物占7-15％，猪胆粉或猪胆酸占1-7％，三七总皂苷占1-7％，川芎醇提取物占2-8％，冰片占1-7％。
本发明中药组合物每克含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于13.0mg。较佳每克含15.9～16.7mg。
本发明还涉及制备所述中药组合物的方法。在所述方法中，人工麝香、猪胆粉、三七总皂苷和冰片直接入药，可使用栀子和川芎或其醇提取物入药。
具体而言，本发明的制备方法包括将所述活性成分以所述重量配比与药学上可接受的载体或赋形剂混合。
本发明一个制备所述中药组合物的实施例涉及滴丸剂的制备方法，该方法包括称取药学上可接受的载体(优选本文所述的聚乙二醇类水溶性基质)，置于水浴中熔融；加入栀子提取物，搅拌均匀；离开水浴后继续加入川芎膏状提取物和猪胆粉或猪胆酸糊状物、三七总皂苷、麝香和冰片，搅拌均匀，形成混合物，调温至65-70℃，然后可将温度为65-70℃的所述混合物滴入温度为10～15℃的油溶性冷却剂中，滴制成丸后沥尽冷却剂，获得滴丸剂。
本发明另一制备所述中药组合物的实施例还涉及将本发明的中药组合物配制成分散片或咀嚼片的方法。所述方法包括，分别实施以下步骤称取麝香或人工麝香，加入0.5～1倍重量的糊精混合均匀，得到混合物A；分别称取栀子醇提取物和川芎醇提取物，加入0.5～1倍重量的糊精混合均匀，得到混合物B；分别称取猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷混合均匀，得到混合物C；将所获得的混合物A、B和C混合，以1∶1～5的重量配比加入药学上可接受的赋形剂，制得分散片或咀嚼片。
本发明制备中药组合物中涉及的混合、压片、制粒等方法是本领域技术人员熟知的。可采用任何合适的已知方法实施所述步骤。
可采用乙醇回流提取法提取栀子，获得干燥的浸膏粉。在本发明实施例中，用70±10％乙醇提取两次，溶媒量为12±3倍，提取时间为2.5±1小时。在一优选实施例中，用70％乙醇提取两次，溶媒量为12(7∶5)倍，提取时间为2.5(1.5∶1)小时。在本发明的优选实施例中，每100克栀子药材中栀子苷的含量约为2.86-3.05克，优选的提取物得率约为18-25％，较佳约为20％。
可采用渗漉法提取川芎。在本发明实施例中，用约70±10％的乙醇渗漉，浸泡时间为12-24小时，溶媒量为5-9倍。为了有效保留川芎挥发油等脂溶性成分，兼顾川芎嗪、阿魏酸等有效成分的得率，在另一优选实施例中，用约80％的乙醇渗漉，浸泡约24小时，溶媒量约为8倍。在川芎的提取中，提取物量以体积计，控制川芎得率约为20-30％，优选约为25％。在制成分散片和咀嚼片的制备工艺中经低温(50℃)减压回收乙醇，干燥，提取物量以重量计，控制川芎得率约为8-12％。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体或赋形剂”指用于治疗剂给药的载体或赋形剂，包括各种稀释剂和用于配制本发明中药组合物的基质。该术语指这样一些药剂载体它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。
在Remington′s PharmaceuticalSciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可含有液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如润湿剂或乳化剂、pH缓冲物质等。
用于本发明的赋形剂、助流剂和润滑剂等是本领域技术人员周知的。在本发明一个制备分散片的实施例中，使用的赋形剂用量比例为(以重量百分比计)糊精45～50％、低取代羟丙基纤维素30～15％、羧甲基淀粉钠(或速崩王)15～30％、微晶纤维素5～9％；助流剂为微粉硅胶，其用量为0.5～0.3％；润滑剂为硬脂酸镁，其用量为0.3～0.5％。在本发明一个制备咀嚼片的实施例中，所使用的赋形剂的用量比例为(以重量百分比计)糊精25～30％、乳糖30～15％、甘露醇20～15％、羧甲基淀粉钠(或速崩王)15～30％、木糖醇5～9％；助流剂为微粉硅胶，其用量为0.5～0.3％；润滑剂为硬脂酸镁，其用量为0.3～0.5％。
在本发明的制备方法中，根据临床用药特点，可选择使用水溶性基质聚乙二醇类作为基质，常用的如PEG4000、PEG6000或它们的混合物。药物与基质的配比为2∶1到1∶10，以完全包合药物、减少服用剂量为原则。优选的药物与基质配比为1∶1到1∶4，更优选的为1∶2，生产时可控制在1∶1.8-2.2。在本发明的一个优选实施例中，使用PEG6000与PEG4000的混合物作为基质，其用量配比为1∶5到5∶1，优选为2∶4。在另一优选的实施例中，基质中PEG6000∶PEG4000为2∶4，基质与药物的配比为2.5∶1。
基质的熔融温度优选为85-90℃，滴制温度优选为65-70℃。更优选的滴制温度为68±0.5℃。选择使用油溶性冷却剂进行冷却，优选使用液体石蜡和甲基硅油。更优选的是使用甲基硅油。冷却温度可以为10-15℃。
本中药组合物中含有脂溶性成分和难溶性成分，给混合带来一定难度，可采用加湿润剂使药物湿润的方法，如加入PEG400，对难溶性的人工麝香和易吸潮的栀子浸膏粉均起到了较好的湿润或促分散作用，川芎提取物与猪胆粉先行混合能使药物均匀分散，形成乳化状态。
在本发明的优选实施例中，栀子用70％乙醇回流提取二次(第一次加醇8倍，提取1.5小时；第2次加醇6倍，提取1.0小时)，减压回收乙醇(真空度0.05～0.07MPa)，浓缩至相对密度为1.35～1.40(55～60℃)的清膏，70℃以下减压干燥(真空度0.07～0.09MPa)，粉碎得细粉备用。川芎粗粉用80％乙醇(8倍量)按渗漉法提取，用适量80％乙醇湿润后，装筒，浸泡24小时，以3ml/kg.min速度收集渗漉液，漉液于55℃以下，减压回收乙醇(真空度0.05～0.065MPa)至药材量的25％(g/g)，得稠膏状物，备用。
可采用本领域已知的合适的配制方法将本发明的中药组合物配制成任何合适的剂型，包括片剂、丸剂、颗粒剂等等。在本发明的优选的实施例中，将所述中药组合物配制成滴丸剂型、分散片或咀嚼片。
滴丸剂是用固体分散法将固体或液体药物与水溶性固体基质加热熔融混匀后，滴入不相混溶的冷却剂，收缩冷凝而成的球形固体剂型。具有剂量小、易服用、方便携带的优点，便于救治和自救。同时固体分散法也是提高药物生物利用度的工艺技术之一，药物以固体溶液、微晶或无定型微粒等状态高度分散于基质后，口服遇体液后药物可随着基质的溶解，很快释放、吸收入血。
在本发明一个优选的实施例中，称取药物二倍量的PEG6000和PEG 4000(用量比例为2∶4)，置水浴85℃～90℃全部熔融后，依次加入栀子提取物(加入适量PEG400研磨成糊状物)、三七总皂苷，搅拌均匀，继加入川芎稠膏和猪胆粉糊状物、人工麝香(加入适量PEG400研磨)糊状物和研细的冰片，充分搅拌分散均匀，得到混合物。将该混合物温度调节至滴制温度68±0.5℃，滴入温度为10～15℃的油溶性冷却剂中，滴制成丸后沥尽冷却剂，置室温晾干，获得滴丸剂。以重量百分比计，该滴丸剂含有1.2％的麝香或人工麝香、11.1％的栀子醇提取物、3.7％的猪胆粉或猪胆酸、2.5％的三七总皂苷、5.0％的川芎醇提取物和3.7％的冰片。
在本发明优选的分散片和咀嚼片剂型中，以重量百分比计，所述剂型含有1.2％的麝香或人工麝香、11.1％的栀子醇提取物、3.7％的猪胆粉或猪胆酸、2.5％的三七总皂苷、2～2.5％的川芎醇提取物和3.7％的冰片。对于分散片剂型，它还含有由(以重量百分比计)45～50％糊精、30～15％低取代羟丙基纤维素、15～30％羧甲基淀粉钠(或速崩王)、5～9％微晶纤维素组成的赋形剂，和0.5～0.3％的助流剂微粉硅胶以及0.3～0.5％的润滑剂硬脂酸镁。对于咀嚼片剂型，它还含有(以重量百分比计)由25～30％糊精、30～15％乳糖、20～15％甘露醇、15～30％羧甲基淀粉钠(或速崩王)、5～9％木糖醇组成的赋形剂、和0.5～0.3％的助流剂微粉硅胶以及0.3～0.5％的润滑剂硬脂酸镁。
使用本发明的中药组合物可获得以下优点(1)采用临床有效方，组方精炼，配伍严谨。经用本发明滴丸对15例急性脑梗塞肝阳暴亢、风火上扰证患者的临床初步观察结果表明，本发明制剂具有显著的清火熄风、宽胸通络的作用，显著改善的症状依次为眩晕、头痛、心烦易怒、面红目赤、舌强言蹇或不语、胸闷、舌咽困难。对缺血性中风病急性期具有显著改善症状、控制病情发展和降低血液黏度的临床效果。未发现不良反应。将安宫牛黄丸作为阳性对照药，药效实验表明，大鼠大脑中动脉血栓形成模型(MCAT)后，本发明滴丸各剂量组的大鼠在术后6h、24h其神经症状均有不同程度的改善。术后24h，本发明滴丸150mg/kg、50mg/kg组的大鼠梗塞程度明显减轻，与模型组相比有显著差异，具有与安宫牛黄丸同等的功效。
(2)动物毒理实验证明安全。急性毒性试验表明，小鼠灌胃本发明中药组合物最大给药量为134.4g/kg(以含生药量计)，为临床人日用量(含生药量1.4g/60kg)的5760倍。结果说明本品急性大量用药比较安全。
长期毒性试验观察了本发明中药组合物连续灌胃给药180天对大鼠体重、血液学指标、血清生化学指标以及主要脏器系数和组织学的影响。以1.68、0.84、0.42g/kg/日(以含生药量计)，分别为临床人用量(0.023g/kg/日)的72倍、36倍、18倍，连续给药180天全过程中，大鼠活动正常，无踡缩、松毛及死亡等现象，未见药物所致明显毒性反应，各组大鼠心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、前列腺、膀胱、子宫、卵巢、脑、胃脏器指数组间无显著差异，外观观察及组织学切片检查均未见病理改变。
(3)动物药效实验证明有效。根据临床主治要求，采用三氯化铁致大鼠大脑中动脉血栓形成缺血损伤模型，麻醉犬血流动力学实验，MCAT与同侧颈总动脉结扎致前脑缺血致血流量降低模型，抗栓、溶栓试验，观察研究本发明中药组合物的主要药效药理。并从该药对血小板聚集性、凝血因子的影响，初步分析其作用机理。药效学研究证明，本发明中药组合物对急性脑缺血有明显拮抗作用，可减少脑梗塞，缩小缺血范围，降低毛细血管通透性，减轻脑水肿，并明显改善神经症状。血流动力学和血液流变学研究结果进一步说明，本发明中药组合物可明显增加脑血流量，降低血液黏度，抑制血小板聚集和红细胞聚集，抑制血栓形成，并有一定的溶栓作用，显示出良好的改善血液流变学作用。本发明中药组合物的脑保护作用还表现为改善缺血后能量代谢障碍和抑制毒性产物的增加，使脑组织MDA、LD含量降低，SOD、LDH含量增加。
本领域技术人员结合本发明上述描述和下述具体实施例，能进一步理解本发明的上述优点以及其它优点。应理解，这些实施例仅用于阐述本发明而不用于限制本发明。在实施例中，百分比为重量百分比，份数为重量份数，除非特别说明。实施例1药物组合物的制备(一)原料处方人工麝香 0.5g栀子 22.5g
猪胆粉 1.5g三七总皂苷 1.0g川芎 8.0g冰片 1.5gPEG 6000/4000 适量(共6味，制成1000粒，10粒/次，日服3次)其中，人工麝香购自华禾药业股份有限公司(同仁堂-人工麝香经营部)，产自北京协和制药二厂，批号20000326，符合卫生部WS-20(Z-32)-93标准，经中国药品生物制品检定所检定合格，性状、鉴别、检查、含量测定和抗炎效价均符合规定。
栀子购自北京市宣武天桥医药公司，按照中国药典2000年版栀子项下检测方法，用HPLC法测定栀子中栀子苷的含量为3.16％(药典规定为1.8％以上)，符合国家药品标准。
三七总皂苷购自昆明雅阁臣药业有限公司，批号为010301，性状为淡黄色无定性粉末。按照云南省药品标准(滇Q/WS765～1985)，总皂苷含量应为不低于88％，人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量应为30％以上，人参皂苷Rg1(C42H72O14)的含量应为20％以上。实际值人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量为32.2％，人参皂苷Rg1(C42H72O14)的含量为33.4％(本研究组用HPLC法检测，验证结果为人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量为32.73％，人参皂苷Rg1(C42H72O14)的25.98％)。符合药品标准。
猪胆粉购自北京市宣武天桥医药公司，符合中国药典2000年版猪胆粉项下检测标准。直接入药。
川芎购自北京市同仁堂药业集团公司(经本校中药鉴定系副主任刘春生老师鉴定为正品)工艺研究应用反相色谱以非极性表面的担体(硅胶基质，表面键合疏水基团)为固定相，甲醇∶0.0005mol/L三乙胺水溶液(49∶51)流动相，以该条件测定的川芎嗪和阿魏酸含量均高于文献报道。TLC定性鉴别结果符合中国药典该药材项下规定。
冰片购自广州市黄浦化工厂(批号001039)，经气相色谱法检测，符合中国药典该药材项下规定。
聚乙二醇6000购自北京市海淀会友精细化工厂，批号20010113，检测报告显示外观、粘度、平均分子量、pH值、乙二醇、二甘醇、重金属、砷盐等指标均符合中华人民共和国药典2000年版有关项下标准。
聚乙二醇4000购自北京市海淀会友精细化工厂，批号20011225，检测报告显示外观、粘度、平均分子量、pH值、乙二醇、二甘醇、重金属、砷盐等指标均符合中华人民共和国药典2000年版有关项下标准。
聚乙二醇400购自北京市海淀会友精细化工厂，批号20010115，检测报告显示外观、粘度、平均分子量、pH值、乙二醇、二甘醇、重金属、砷盐等指标均符合中华人民共和国药典2000年版有关项下标准。
(二)制备工艺1.备料人工麝香、猪胆粉、三七总皂苷和冰片直接入药，栀子和川芎分别提取制成浸膏和稠浸膏，备用。
2.提取工艺栀子碾碎，用70％乙醇回流提取二次(第一次加醇8倍，提取1.5小时；第2次加醇6倍，提取1.0小时)，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.35～1.40(55～60℃)的清膏，70℃以下真空干燥(真空度0.07～0.09MTA)，粉碎，得细粉备用。
川芎粗粉用80％乙醇(8倍量)按渗漉法提取，用适量80％乙醇湿润后，装筒，浸泡24小时，以3ml/kg.min速度收集渗漉液，漉液于55℃以下，减压回收乙醇(真空度0.05～0.065 MTA)至药材量的25％(g/g)，得稠膏状物，备用。
3.制备工艺称取药物2.68倍量的PEG6000和PEG 4000(用量比例为2∶4)，置水浴85℃～90℃熔融，降温至70℃，依次加入栀子提取物(加适量PEG 400研磨成糊状物)、三七总皂苷，搅拌均匀，继加入川芎稠膏和猪胆酸糊状物、人工麝香(加适量PEG 400研磨)糊状物和研细的冰片，分散均匀后转移至贮液瓶，保温68±0.5℃，调节滴出口与冷却液面距离为8～10cm，滴入温度为10～15℃的冷却剂甲基硅油中，滴制成丸后沥尽冷却剂，置室温晾干，分装即得。
(三)制剂处方的确定经过小试三批(5000粒/批)和中试三批(10000粒/批)，在固定药物投料量的基础上， 滴制过程基质损耗率基本在5％左右，确定制剂处方，并作如下说明处方 原处方(1付量) 25付人工麝香20mg 0.5g栀子醇提取物180mg(栀子0.9g，提取物按20％计)4.5g
猪胆粉 60mg 1.5g三七总皂苷 40mg 1.0g川芎醇提取物 80mg(川芎0.320g，提取物按25％计) 2.0g/1.8ml冰片 60mg 1.5gPEG 6000/4000(2∶4) 2.68倍共6味11.0g，基质29.5g， 计40.5g制成滴丸1000粒，30～45粒/付，日服3次。每粒约38mg，分装成10瓶，每瓶100粒。
(四)制剂外观、重量差异和溶散时限检查照中国药典2000年版一部附录滴丸剂项下规定，对中试三批样品进行制剂外观、重量差异和溶散时限检查，结果三批样品均符合规定。平均溶散时限在4.02～4.39分钟。
实施例2主要药效学试验(一)本发明中药组合物对大脑中动脉血栓(Middle Cerebral Artery Thrombosis，MCAT)模型大鼠神经症状及脑梗塞范围的影响实验材料1.药品与试剂受试药实施例1制得的本发明滴丸，临床用药剂量以生药量计每人每日1.4g，即23mg/kg体重。用饮用水配制。
阳性对照药安宫牛黄丸，购自北京同仁堂制药厂生产，口服，1次/日，1丸/日，每丸含生药3g。批号1010383。
试剂与药品FeCl3·6H2O(A.R.)，北京化工厂产品，用1mol/L盐酸配制；红四氮唑(TTC)，北京化工厂产品，批号960307。
2.动物SD大鼠，雌雄兼用，体重190～210g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK 11-00-0008。
3.仪器XTT实体显微镜，北京电光科学仪器厂产品；SHZ-22型恒温水浴振荡器，江苏太仓医疗器械厂产品；AEG-220型电子分析天平，日本岛津仪器公司产品。
方法与结果1.分组及给药将73只大鼠随机分为六组，即假手术对照组、MCAT模型组、受试药420mg/kg、140mg/kg、49mg/kg组(分别相当于人用量的18倍、6倍、2倍)、安宫牛黄丸300mg/kg组(相当人用量的6倍)，每组12～13只。灌胃给药，一日剂量分两次给予，给药五次后一小时造模，造模后再给药两次，假手术对照组、MCAT模型组给予等量的饮用水(1ml/100g体重)。
2.造模方法大鼠腹腔注射12％水合氯醛溶液(350mg/kg)麻醉。按Tamura等〔Tamura A，Graham DI，McCulluoch J等，“大鼠病灶性脑局部缺血1.大脑中动脉梗塞后的技术和早期神经病理学结果的描述”(Focal Cerebral ischemia in the rat.1.Description of technique and early neuropathological consequences following middleCerebral artery occlusion)，J Cereb Blood Flow Metab，1981；153〕的方法，稍加改进。大鼠右侧卧位固定，在眼外眦和外耳道连线中点作一弧形切口，长约1.5cm，夹断颞肌并切除，暴露颞骨，用牙科钻在颧骨与颞鳞骨接合处靠近口侧1mm处作一直径2.5mm骨窗，清理残渣，暴露大脑中动脉(位于嗅束及大脑下静脉之间)。置一小片中空塑料薄膜保护血管周围组织。将吸有50％氯化铁溶液10μl的小片定量滤纸敷在此段大脑中动脉上〔刘小光、徐理钠，“一种能评价溶拴药和抗栓药的大鼠大脑中动脉血栓模型”，《药学学报》，1995，30662〕，30分钟后取下滤纸，用生理盐水冲洗局部组织，逐层缝合，回笼饲养。假手术组，除不滴加氯化铁溶液外，其余手术步骤同模型组。
3.MCAT大鼠神经症状的评定在术后不同时间(6h，24h)，按Bederson等〔Bederson JB，Pitts LH，TsujiM等，“大鼠大脑中动脉梗塞神经检测的模型和发展的评估”(Rat middleCerebral artery occlusionevaluation of the mode and development of a neurologicexamination)，Stroke，1986，17472〕的方法并加以改进，对动物进行行为评分。1.提鼠尾离开地面约一尺，观察前肢屈曲情况。如双前肢对称伸向地面，记为0分；如手术对侧前肢出现肩屈曲、肘屈曲、肩内旋或既有腕肘的屈曲又有内旋者，记为1分。2.将动物置于平滑地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力者记为0分；如向手术对侧推动时阻力下降者，记为1分。3.将动物两前肢置一金属网上，观察两前肢的肌张力。双侧肌张力对等且有力者为0分；手术对侧前肢肌张力下降记为1分。4.提鼠尾离开地面约一尺，动物有不停地向手术对侧旋转者，记为1分；否则，记为0分。根据以上标准评分，满分为4分，分数越高，动物的行为障碍越严重。对行为检测打分值进行组间比较，t检验。结果见表1-1。
表1-1本发明滴丸对MCAT大鼠神经症状的影响(X±SD)
注各组与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
结果显示，假手术组未见行为异常改变，MCAT模型组大鼠在术后6h，24h均出现偏瘫样症状，主要表现为手术对侧前肢内收，肩内旋，前肢肌张力降低，肩抗力下降。除受试药140、49mg/kg组在术后6h神经症状改善不明显外，受试药各剂量组与安宫牛黄丸组的大鼠在术后6h，24h其神经症状均有不同程度的改善(P＜0.01，P＜0.05)。
4.MCAT大鼠脑梗塞范围的测量动物经末次行为评分后，断头取脑。去掉嗅球、小脑和低位脑干，剩余部份在4℃下冠状切成5片。迅速将脑片置于TTC染液中(每5ml染液中含4％TTC 1.5ml，1M K2HPO4 0.1ml)，37℃避光温孵30分钟，再取出，置于10％甲醛液中避光保存。经染色后非缺血区为玫瑰红色，梗塞区为白色(6)。将白色组织仔细挖下称重，以梗塞组织重量占右侧半脑重量的百分比作为脑梗塞范围。结果进行组间比较，t检验。结果见表1-2、附图1。
表1-2本发明滴丸对MCAT大鼠脑梗塞范围的影响(X±SD)
注各组与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
结果显示，术后24h，除假手术组未见脑组织异常改变外，模型组、给药组大鼠均有不同程度梗塞灶，受试药420mg/kg、140mg/kg组、安宫牛黄丸300mg/kg组的大鼠梗塞程度明显减轻，与模型组相比具有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)。受试药49mg/kg组可减轻梗塞灶，但无统计学差异。
(二)本发明中药组合物对双侧颈总动脉结扎大鼠脑毛细血管通透性的影响实验材料1.药品与试剂受试药、阳性对照药同试验一。
伊文思兰，进口分装，上海化学试剂供应站经销，批号821102。
2.动物SD大鼠，雌雄兼用，体重190～210g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK 11-00-0008。
3.仪器722型分光光度计，上海第三分析仪器厂产品。
方法与结果1.分组及给药分组及给药同试验五。
2.造模方法实验用大鼠，以10％水合氯醛0.35g/kg腹腔注射麻醉，分离双侧颈总动脉并埋线、结扎，结扎后舌下静脉注入2.5％伊文思兰(Evans Blue，EB)生理盐水溶液0.1ml/100g。
3.检测术后6小时，断头取脑，剔除小脑及脑干，将脑组织称重后置于4ml甲酰胺中，37℃水浴24小时后取上清液，在722分光光度计上比色，波长620nm，记录OD值。
4.计算及统计处理将所得OD值代入标准曲线回归方程，计算EB量，再除以脑组织湿重求得每克脑组织湿重所含EB的量。试验结果组间比较，进行t检验。结果见表2-1和图2。
表2-1本发明滴丸对CCAO大鼠血脑屏障通透性的影响(X±SD)
注各组与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
结果显示，模型组大鼠脑组织中伊文思兰(EB)含量明显高于假手术组，给药组EB含量明显低于模型组。说明双侧颈总动脉结扎缺血6小时，可使脑血管对EB通透性明显加大。受试药420mg/kg、140mg/kg、49mg/kg组(以生药量计，分别为人日用剂量的18、6、2倍)可使缺血造成的血管通透性增加明显减轻，与模型组比较p＜0.05，p＜0.01。
注操作过程中4只动物死亡。
(三)本发明滴丸对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响实验材料1.药品与试剂受试药同试验一阳性对照药天保宁，康恩贝集团制药有限公司生产，口服，3次/日，1～2次/日，每片含银杏叶精提物40mg。批号980902.。
2.动物SD大鼠，雌雄兼用，体重190～210g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK 11-00-0008。
3.仪器AEG-220型电子分析天平，日本岛津仪器公司产品；Df-206型鼓风干燥箱，北京西城医疗器械厂产品。
方法与结果1.分组与给药将大鼠随机分为五组，即血栓模型组、受试药420mg/kg、140mg/kg、49mg/kg组(以生药量计，分别为人日用剂量的18、6、2倍)、天保宁24mg/kg组。造模后灌胃给药，一日剂量分两次给予，共给药五次，血栓模型组给予等量的饮用水(1ml/100g体重)，末次给药后1小时手术。
2.造模方法根据陈奇主编的《中药药理研究方法学》(人民卫生出版社，1993564，571，581)的方法，对其略加改进，用10％水合氯醛0.35g/kg腹腔注射麻醉实验用大鼠，仰卧位固定，手术，分离右颈总动脉和左颈外静脉。将三段聚乙烯管相连，一端插入右颈总动脉，另一端插入左颈外静脉，中间段放入一根长8cm的7号手术用丝线，重约8mg，管内注满生理盐水溶液，建立动、静脉旁路。10分钟后取下套管，取出血栓，在湿润的滤纸上滚动，除去多余浮血，称重得血栓湿重；然后置60℃烘箱烘干1小时至恒重，冷却后称重得血栓干重，结果组间比较，进行t检验，结果见表3-1和图3。
表3-1本发明滴丸对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响(X±SD)
注各组与血栓模型组相比，*P＜0.05；**P＜0.01结果显示受试药各剂量组、阳性对照药天保宁24mg/kg组，可明显降低血栓湿重和干重，与模型组比较p＜0.05，p＜0.01。
(四)口服给予本发明中药组合物后含药血清体外溶栓作用实验材料1.动物SD大鼠，雌雄各半，体重230-250g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号为SCXK(京)2002-0003。
2.药品受试药同试验一。
阳性对照药引激酶胶囊，由北京百奥药业有限责任公司生产。批号20020108。
3.仪器电子分析天平，AEG-220型，日本岛津仪器公司产品。
实验方法1.分组及给药将实验用大鼠随机分为五组，对照组，阳性对照引激酶30万单位/kg组，受试药420mg/kg、140mg/kg、49mg/kg组(以生药量计，分别为人日用剂量的18、6、2倍)。连续灌胃给药3天，对照组给予等量的饮用水(1ml/100g)，阳性对照引激酶组不用预先灌胃给药。末次给药后1小时进行实验。
2.血块的制备取230～250g大鼠，10％水合氯醛350mg/kg腹腔注射，麻醉，经颈总动脉放血至1米长，直径3mm的塑料管中，夹闭两端，室温(25℃)垂直放置24小时后取出血块，精密称取50mg放入已制备好的药液中。
3.实验方法大鼠腹腔注射10％水合氯醛溶液(350mg/kg)麻醉，仰位固定，颈总动脉放血，2500转离心10分钟，取出血清1ml加入小瓶中，56℃灭活30分钟即得到含药血清。称取新鲜制备的血块50mg，放入制备好的血清中，37℃温浴17小时后取出血块称重，计算。结果见下表4-1表4-1本发明滴丸口服给药后含药血清的溶栓作用(X±SD)
注与对照组相比，**P＜0.01结果表明，受试药420mg/kg、140mg/kg、49mg/kg组(以生药量计，分别为人日用剂量的18、6、2倍)口服给药，其含药血清有明显溶栓作用，溶栓率在15.05％～22.19％，与对照组相比P＜0.01。
(五)急性毒性试验本试验观察1日内三次给药后小鼠的急性毒性反应，为临床提供急性大剂量用药时的安全性试验依据。
实验材料1.动物ICR小鼠，雌雄各半，体重19～21g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号为SCXK-11-00-0008号。
2.受试药本发明实施例1制得的滴丸。临用时以蒸馏水稀释10g至25ml，以生药量计小鼠口服剂量为134.4g/kg/日。(临床人日用量1.4g/60kg，相当于0.023g/kg)。
方法与结果试验用小鼠在实验室饲养1天后挑选体重合格者40只。按体重和性别随机分成给药组和对照组，每组雌雄各10只，实验前禁食不禁水12小时，三次给药，每次给药容量为0.4ml/10g体重。对照组给等容量的蒸馏水。给药后每天观察比较小鼠的外观、行为及反应，隔日称量1次体重。结果表明本发明滴丸给药后未见小鼠死亡，雄性小鼠可见从第二日起体重下降，与对照组比有显著性差异(如表1、表2所示)。
表1给药前后小鼠体重变化(g，X±SD)
表2给药前后小鼠饮水量、进食量变化(g，x±s)
结论实验结果显示，本发明滴丸小鼠灌胃给药最大给药量为134.4g/kg(以含生药量计)，相当于临床人日用量(0.023g/kg)的5760倍。
(六)大鼠长期毒性试验本试验观察对大鼠连续灌胃给予本发明中药组合物180天对机体的慢性毒性反应及继发反应，以评价临床用药的安全性。
试验材料1.受试药实施例1制得的滴丸，实验用浸膏，2.8g生药/g浸膏，由北京中医药大学中药学院制剂室提供。临床人日用量以生药量计为0.023g/kg。
2.试验动物SD大鼠，雌雄各半，体重90-100g，合格证号为SCXK(京)2002-0003，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。
3.试验药品与试剂AST、ALT、BUN、CREA、ALP、TP、ALB、CHO、TG、BIL、GLU检测试剂和药盒均由北京中正生物工程高技术公司供给。
4.仪器CELLY血球计数仪，LISA-300全自动生化分析仪，均为法国产品。
试验方法1.分组与给药将大鼠正常饲养一周后，随机分为4组对照组、受试药大剂量1.68g/kg组、中剂量0.84g/kg组、小剂量0.42g/kg组(分别相当于临床人用量的72、36、18倍)，每组34只，雌雄各半。以上各组均按剂量灌胃给药，对照组给予等容量饮用水，连续180天，给药、给水的体积均为1ml/100g。分别于给药90天和180天时，每组杀检大鼠14只(雌雄各7只)，进行各项指标检测，观察有无毒性反应。剩余大鼠停止给药二周后杀检，观察有无继发性反应。
2.观察项目和测定方法(1)一般状态试验期间有专人负责观察各组大鼠的食量、自主活动、精神状态、排便等情况，每周称量体重一次，大鼠进食量按一日每笼进食总量除以动物数计。
(2)血液学检查在给药90天和180天后，将大鼠用水合氯醛(350mg/kg)麻醉，颈总动脉取0.5ml血用肝素抗凝，用血球计数仪测定血常规指标，包括红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、血小板计数(PLT)、白细胞计数(WBC)及其分类即中性白细胞(MID)、淋巴细胞(LYM)。
(3)血清生化检查另取3.5ml血，分离血清，用全自动生化分析仪测定血清生化指标，用速率法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性，IFCC推荐法测定碱性磷酸酶(ALP)活性，终点法测定尿素氮(BUN)含量，苦味酸法测定肌酐(CREA)含量，双缩脲法测定血清总蛋白(TP)含量，溴甲酚绿法测定血清白蛋白(ALB)含量，酶法测定血清胆固醇(CHO)含量，葡萄糖氧化酶法测定血糖(GLU)含量，终点法测定甘油三酯(TG)含量、重氮法测定胆红素(BIL)含量，共十一项指标。
(4)凝血时间测定用毛细管法测定。
(5)尸体解剖与脏器系数各组大鼠放血后取出心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、肾上腺、胸腺、睾丸、前列腺、膀胱、子宫与卵巢，称重并计算脏器指数(g/100g体重)。
(6)病理组织学检查将上述脏器以及甲状腺放入10％福尔马林溶液中固定，将大剂量、中剂量和对照组大鼠的脏器石蜡包埋切片，HE染色并进行光镜组织形态学检查，小剂量组大鼠脏器备查。
结果1.一般状态各试验组在给药全过程中活动正常，未见死亡。无蜷缩、松毛现象，皮毛光滑，肛门周围无潮湿现象，口、鼻、眼未见分泌物。与同时间段对照组相比，雄性大鼠大剂量组在给药第二周时体重明显下降，第三周起，恢复正常；中、小剂量组雄性大鼠从第二周至第二十四周，体重均低于对照组(P＜0.05，P＜0.01)。雌性大鼠大剂量组在给药第二周时体重明显上升，第三周起恢复正常。给药全过程中进食量未见明显异常。
2.血液学检查给药180天后，各组大鼠血常规检查中，给药组白细胞总数略有降低，与对照组比较，小剂量组和中剂量组分别在给药90天和180天时有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。恢复期后给药组与对照组比较无显著性差异。其余血常规指标和凝血时间的检测结果与对照组相比未见明显差异。
3.血清生化学检查给药90天时，中剂量、大剂量组大鼠血清ALT、AST和ALP活力增加(P＜0.05，P＜0.01)，中剂量、小剂量组大鼠还可见血清ALB、TP和BUN含量增高，与对照组相比有显著差异(P＜0.05，P＜0.01)；给药180天后，各剂量组大鼠均可见血清GLU和BUN含量增加，小剂量组血清CREA和TG含量增加(P＜0.05，P＜0.01)。
4.主要脏器检查与对照组相比，给药90天后，除雌性大鼠脾脏指数减小外，各组大鼠心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、膀胱、子宫、卵巢、脑、胃脏器指数组间无显著差异；给药180天后，各剂量组雄性大鼠的心指数均有所增高，雄性大鼠脾指数、肾上腺指数和胃指数均增加，脾指数低于对照组(P＜0.05，P＜0.01)，恢复期小剂量组大鼠见心指数仍高于对照组。其余脏器指数组间未见明显差异。
5.组织病理学变化病理观察结果表明各给药组大鼠诸多脏器的组织细胞无损害，形态学上提示该药物对各脏器未见病理学损伤。
讨论和小结结果表明，受试药1.68g/kg、0.84g/kg、0.42g/kg连续给药180天未见动物死亡。生长情况基本良好，自第二周至第二十四周，中、小剂量组雄性大鼠体重低于正常组，这种改变是由于第二周的体重降低所致。第二周体重偏小的原因不明。大剂量组雄性大鼠和雌性大鼠未见类似现象。所监测指标中，主要改变是给药90天时，血清转氨酶和BUN升高，肝肾功能有一定异常，肝功能的改变在给药1 80天时有好转，恢复期给药组与对照组比较无显著性差异，可能为长期给药肝脏对药物产生适应性。BUN含量在给药90天和180天时均显著升高，说明随着用药时间的延长，药物对肾功能的影响一直存在，因此血清中TP、ALB的升高可能与肾脏排泄速度减慢有关，恢复期均可见明显好转。
脏器指数指标中，出现心脏指数增加是一个共同的变化。雄性大鼠出现的脾脏指数、胃指数、肾上腺指数变化未见明显量效或时效的规律性，结合形态学的观察，未见明显病理学损害，故尚不能肯定是药物毒性所致。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1.一种治疗中风病急性期或先兆期用的中药组合物，其特征在于，它含有药学上可接受的载体或赋形剂，和以下活性成分0.5-5重量份麝香或人工麝香；5-20重量份的栀子醇提取物或25-100重量份的栀子；1-10重量份的猪胆粉或猪胆酸；1-10重量份的三七总皂苷；1-10重量份成稠浸膏或干浸膏形式的川芎醇提取物或4-40重量份的川芎；1-10重量份的冰片。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，以该中药组合物的总重量计，所述麝香或人工麝香占2-4％，所述栀子醇提取物占7-15％，所述猪胆粉或猪胆酸占1-7％，所述三七总皂苷占1-7％，所述川芎醇提取物占2-8％，所述冰片占1-7％。
3.如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于，所述药学上可接受的载体为聚乙二醇类水溶性基质，其与该中药组合物中的活性成分的总重量比为10∶1到1∶2。
4.如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于，所述聚乙二醇类水溶性基质选自PEG4000、PEG6000或其混合物，其与该中药组合物中的活性成分的总重量比为4∶1到1∶1。
5.如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物是滴丸剂、分散片或咀嚼片。
6.如权利要求5所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物为滴丸剂，以其总重量计，它含有1.2％的麝香或人工麝香、11.1％的栀子醇提取物、3.7％的猪胆粉或猪胆酸、2.5％的三七总皂苷、5.0％的川芎醇提取物和3.7％的冰片，余量为以2∶4配比的PEG6000∶PEG4000基质混合物。
7.一种制备权利要求1所述的用于治疗中风病急性期或先兆期用的中药组合物的方法，其特征在于，所述方法包括混合药学上可接受的载体或赋形剂和以下的活性成分0.5-5重量份麝香或人工麝香；5-20重量份的栀子醇提取物或25-100重量份的栀子；1-10重量份的猪胆粉或猪胆酸；1-10重量份的三七总皂苷；1-10重量份成稠浸膏或干浸膏形式的川芎醇提取物或4-40重量份的川芎；1-10重量份的冰片。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述栀子醇提取物以以下乙醇回流提取获得用70±10％乙醇提取两次，溶媒量为12±3倍，提取时间为2.5±1小时；所述川芎醇提取物以以下渗漉法提取获得用70±10％的乙醇渗漉，浸泡时间为12-24小时，溶媒量为5-9倍。
9.如权利要求7-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述混合步骤包括(1)称取药学上可接受的载体，置于水浴中熔融；(2)加入栀子提取物，搅拌均匀；(3)离开水浴后继续加入川芎膏状提取物和猪胆粉或猪胆酸糊状物、三七总皂苷、麝香和冰片，搅拌均匀，形成混合物，调温至65-70℃；所述方法还包括将温度为65-70℃的所述混合物滴入温度为10～15℃的油溶性冷却剂中，滴制成丸后沥尽冷却剂，获得滴丸剂。
10.如权利要求7-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述混合步骤包括(1)分别实施以下步骤称取麝香或人工麝香，加入0.5～1倍重量的糊精混合均匀，得到混合物A；分别称取栀子醇提取物和川芎醇提取物，加入0.5～1倍重量的糊精混合均匀，得到混合物B；分别称取猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷混合均匀，得到混合物C；(2)将步骤(1)获得的混合物A、B和C混合，以1∶1～5的重量配比加入药学上可接受的赋形剂，制得分散片或咀嚼片。
全文摘要
本申请提供一种用于中风病急性期或先兆期的中药组合物，它含有麝香或人工麝香、栀子或栀子醇提取物、猪胆粉或猪胆酸、三七总皂苷、川芎或川芎醇提取物和冰片，适用于中风病急性期治疗需要。本申请还提供所述中药组合物的制备方法。将本申请的中药组合物配制成滴丸剂、分散片和咀嚼片。本申请的中药组合物制剂在治疗中风病急性期时具有醒神开窍、解毒通络之功效。
文档编号A61K9/20GK1736426SQ20041005375
公开日2006年2月22日 申请日期2004年8月16日 优先权日2004年8月16日
发明者王永炎, 王玉蓉, 陆长生 申请人:上海宝昆医药科技有限公司