专利名称：一种鼠不育药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种鼠不育药物及其制备方法，属于植物源灭鼠用药领域。
二.
背景技术：
鼠害是一种世界性的严重生物灾害，控制鼠害仍然是科技界的重大技术难题。经过了漫长的人鼠之战，目前国内外控制鼠害的主要技术有物理法、化学法、微生物法和生态法等。用化学药物控制害鼠，是当前使用最普遍的方法。化学灭鼠药物的特点是使用方便，见效快，在鼠害大发生时能及时控制作用鼠害。但由于鼠类种群的回复能力强，化学灭杀存在“种群反弹”、污染环境、天敌二次中毒等缺点，不育控制已成为当前鼠类种群数量控制研究的热点之一。在鼠类控制方面，使鼠类不育已被公认比传统的毒杀方法更有潜力。
目前，鼠不育药物有化学不育药物、不育疫苗及植物不育药物等。针对长期使用化学避孕药物或不育药物给哺乳动物、特别是人类带来的毒副作用甚多的现状，寻求使用简便、易行、成本更低、对环境更友好的新型植物不育药物既是一项艰巨的任务，又是必须的和必要的。天然植物不育药物是不育控制鼠害的一类新型且对环境友好的生物控制药物，其研究与发展一直受到人们的关注。
蓖麻(Ricinus communis Linn)起源于非洲东部，是世界十大油料作物之一。我国具有悠久的种植历史。查阅相关文献并分析比较可知，目前，利用蓖麻籽作为抗生育药物的研究虽然已有报道，但主要是对其进行简单应用。如，多以蓖麻籽粗提取物或直接粉碎物的形式作为抗生育药物或某种抗生育药物的配料使用。技术内容最为接近的三件已有技术是①中国专利01114461.0公开的“不孕膏”，其主要特征是在现有的药用橡胶膏中包含桃仁、红花、枳壳、牛膝、当归、圆白芷、辛夷、棉花根、紫草、了哥王、知母、黄柏、枣仁、蓖麻子、麝香酮、狸香等药物浓缩提取物，将药膏贴在脐部，可以避孕(外贴)，蓖麻籽仅为其中的一种成分；②中国专利03144033.9公开的“一种治疗偏瘫高血压及避孕的药贴”，其主要特征为以蓖麻子为主要原料加荆三棱、莪术等散瘀行血类药，可作女用外用避孕药。该两项专利均为人体外用皮肤贴药物避孕药，且蓖麻籽仅仅作为该药物中的一种成分，以蓖麻籽粗提取物或直接粉碎后与其它成分直接混合而成。该两项技术虽制备方法低廉、工艺简单，但该技术制备的原药因为所含成份复杂，药物有效成分难于检测，药效不容易稳定。最为重要的是，蓖麻油、蛋白未分别制取，二者相混不容易微胶囊化，从而在自然界容易腐败变质失效；同时，未微胶囊化的蓖麻粗提取物或直接粉碎物异味强烈，容易引起田间鼠的强烈拒食而达不到作用目的。③国外医学中医中药分册(2001年第23卷第5期286-287)登载的文章“蓖麻籽抗生育作用的毒理及临床研究”其主要特征为用石油醚从蓖麻籽中提取女用避孕药并进行相关研究。蓖麻籽石油醚提取物主要成分为蓖麻油(无蓖麻蛋白)，对人有较为长期的避孕作用，可在特殊选择的生理期间内(月经后的4-5d确定无怀孕及月经紊乱者口服该石油醚提取物2.3-2.5g)作女用避孕药。但其对已怀孕者的抗早孕、抗着床及中期妊娠终止的作用显著弱于蓖麻蛋白(我们对此已进行了相关实验比较)。田间雌鼠个体间的生理状况差异很大，不可能人为选择指定的生理期间给田间的雌鼠饲喂避孕药，所以，蓖麻籽石油醚提取物对田间鼠的抗生育作用很有限。同时，该研究未对蓖麻粗提取物进行微胶囊化。
从蓖麻籽中分别分离、提取出均具有使鼠不育的蓖麻油、蓖麻蛋白，并分别对二者进行微胶囊化后再配制成为使鼠不育药物的研究未见报道。
三.发明的内容本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种鼠不育药物及其制备方法，其特点是从蓖麻籽中分别分离、提取出均具有使鼠不育的天然成分蓖麻油、蓖麻蛋白，经分别进行微胶囊化后与诱饵、防腐剂有机组合加工制成。
本发明的目的通过下述方案来实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。其配方为I.蓖麻蛋白微胶囊10-50份防腐剂0.5-1.5份诱饵48-88份II.蓖麻蛋白微胶囊10-25份 防腐剂0.5-1.5份蓖麻油微胶囊15-40份 诱饵 33-73份其中所属诱饵为常用配方食糖5％，植物油3.4％，食盐0.5％，味精0.1％，玉米粉38％，面粉17％，水35％，普鲁士蓝1％；防腐剂为苯甲酸钠。
其中所属配方I对雌鼠的抗早孕、抗着床及中期妊娠终止的作用显著。配方II在配方I的基础上加入微胶囊化的蓖麻油既对雌鼠的抗早孕、抗着床及中期妊娠终止的作用显著增强，同时对处于特殊生理期间的雌鼠有显著而长期的避孕作用，所以配方II对鼠群的抗生育作用强于配方I(我们对此已进行了相关实验比较)。
配方I与配方II中蓖麻油与蓖麻蛋白进行微胶囊化后在自然界不容易腐败变质失效，有利于该药物在环境中抵抗不良因素而长期、高效的发挥作用。同时，二者的微胶囊化屏蔽了蓖麻的异味，易于被鼠所接受，提高了药物的采食量和利用率。
该鼠不育药物的制备方法如下配方I将蓖麻蛋白微胶囊10-50份、防腐剂0.5-1.5份及诱饵48-88份混合充分，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装即可。
其中所述蓖麻蛋白及微胶囊的制备如下蓖麻蛋白的提取500g提取蓖麻油后的残渣在磷酸缓冲液中混合，匀浆。匀浆液4℃放置24小时。制备上清液于17000g离心30分钟，弃沉淀。在上清夜中加入固体硫酸铵使成60％饱和度。4℃放置4小时，17000g离心40分钟。沉淀透析12小时，4℃170008离心15分钟。取上清液低温干燥，得固体蓖麻蛋白110-122.5g，在4℃冰箱中保存备用。采用机械搅拌乳化法(内源法)制备海藻酸钠蓖麻蛋白微胶囊将6-60g的蓖麻提取物和适量碳酸钙加入1-2.5％浓度的海藻酸钠溶液中，混和均匀。将此混合物加入到含有1％Span85的液体石蜡中，搅拌乳化均匀，然后加入含有冰醋酸的液体石蜡，继续搅拌5min，静置40min，过滤得到海藻酸钙凝胶珠。将得到的凝胶珠再放于液体石蜡中，置于30℃的水浴，加入100-600mlEudragit S100乙醇溶液，搅拌2小时。过滤沉淀得到Eudragit S100包覆的海藻酸钠蛋白微胶囊，以1％体积分数的Tween80水溶液清洗，干燥即可。
配方II将蓖麻蛋白微胶囊10-25份、蓖麻油微胶囊15-40份、防腐剂0.5-1.5份及诱饵33-73份混合充分，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装即可。
其中所述蓖麻油及微胶囊、蓖麻蛋白及微胶囊的制备如下A.蓖麻油及微胶囊的制备 蓖麻油的提取称取去壳后的蓖麻籽300克并破碎。破碎的蓖麻籽中加入95％乙醇450ml，在50℃水浴中搅拌75h。0℃的离心机离心30min。制备上清液380ml。上清液中加入等量乙醚，在60℃的水浴中搅拌24h，浓缩除去溶药物得蓖麻油120-150g。蓖麻油微胶囊的制备把50-80g蓖麻油在45℃温度下搅拌均匀，分散到含55.5g明胶的500ml水溶液中。然后在搅拌下加入含55.5g阿拉伯树胶的500ml水溶液，再加入45℃的温水4000ml加以稀释。在保持PH＝9、温度为45℃条件下向混合液中加入5％浓度的聚乙烯甲基醚一顺丁烯二酸酐共聚物的水溶液32g。向上述混合液体系中加入20％的醋酸，将溶液pH值调到PH＝4.2时，在搅拌下冷却到10℃以下，再用20％NaOH调pH为8-9，搅拌15min，最后加入25％甲醛适量，在此温度下搅拌1h。静置，倾去上清液，用水洗微胶囊至近中性即可。
B.蓖麻蛋白及微胶囊的制备如上配方I中所述。
本发明中所用的防腐剂、诱饵都是现有公知技术，可以配合使用，其前提条件是这些助剂对本发明的目的的实现以及本发明优良的效果的取得不产生不利影响。
本发明具有如下优点1.具有高效持久性我们对蓖麻籽鼠绝育药物的重要组成物质——蓖麻油与蓖麻蛋白及其微胶囊产物二者单一或者混合后的组合均进行了实验，其结果表明均对鼠具有一定的抗生育作用。但蓖麻油与蓖麻蛋白的组合效果最显著，作用时间最持久，二者的组合物将蓖麻蛋白的短期高效抗生育性与蓖麻油的长期持久抗生育性有机结合而达到了最佳抗鼠生育效果。二者分别制取和分别微胶囊化后，在自然界不容易腐败变质失效，有利于该药物在环境中抵抗不良因素而长期、高效的发挥作用。同时，二者的微胶囊化屏蔽了蓖麻的异味，易于被鼠所接受，提高了药物的采食量和利用率。
2.药物质量易于控制、使用简便、易行本发明药物组成成分较为简单，重要成分明确，检测方法简单易行，药物质量易于控制。田间使用简便、易行。
3.对环境友好(1)无残留一般化学农药的另一弊端就是毒性残留问题，而且残留周期长，危害范围广，有些杀鼠药甚至可以在人畜等生物体内沉淀和积累。而蓖麻籽鼠绝育药物是利用天然植物经科学工艺制备的一种鼠绝育性物质，使用量较少、害鼠取食1-2次均可达到不育，对环境属于低毒产品，自然界生物降解快，来自于自然，回归自然不会存在毒性残留问题。
(2)生产无三废一般，化学鼠药生产厂都或多或少的存在着产生三废对周围环境的污染问题，为此耗费了大量的人力、财力和物力也很难从根本上解决这一问题，而生产蓖麻籽鼠绝育药物却不存在产生三废的问题①生产所剩下的废渣能够用来发酵，发酵所产生的沼气作为能源利用，发酵药渣经与其它有机肥进行有机的配比和科学的处理后，可以制成上好的复合有机肥料，有着很好的发展前景和广阔的市场；②使用后的溶药物可以重新回收利用；③无废气。
4.原料来源广泛，价格低廉蓖麻起源于非洲东部，是世界十大油料作物之一。我国具有悠久的种植历史。蓖麻适应范围广、抗逆性强、栽培管理条件不十分严格，全国80％以上地区都能种植，因而原料来源广泛，价格低廉。
5.提取和制药工艺简便，易于形成规模化生产生产蓖麻籽鼠绝育药物的生产工艺并不复杂，所需的设备主要有提取罐，浓缩器、回收塔、三效机等，其生产流程简明、清晰。其工艺流程是原材料—清洗—粉碎—浸泡—回流浸提—萃取—浓缩及微胶囊化—混合—制成药粒—烘干包装—入库。生产过程的简单大大增加了大规模生产和开发的可行性。
四.具体实施方法下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是本实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容对本发明作出一些非本质的改进和调整。
实施例1将蓖麻蛋白微胶囊25份、防腐药物1.5份(苯甲酸钠)及诱饵73.5份(食糖5％，植物油3.5％，食盐0.5％，味精0.1％，玉米粉38％，面粉17％，水35％，普鲁士蓝1％)混合均匀，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装既可。其中所述蓖麻蛋白及微胶囊的制备如下蓖麻蛋白的提取500g提取蓖麻油后的残渣在磷酸缓冲液中混合，匀浆。匀浆液4℃放置24小时。制备上清液于17000g离心30分钟，弃沉淀。在上清夜中加入固体硫酸铵使成60％饱和度。4℃放置4小时，17000g离心40分钟。沉淀透析12小时，4℃17000g离心15分钟。取上清液低温干燥，得固体蓖麻蛋白120.5g，在4℃冰箱中保存备用。采用机械搅拌乳化法(内源法)制备海藻酸钠蓖麻蛋白微胶囊将30g的蓖麻提取物和适量碳酸钙加入2％浓度60ml的海藻酸钠溶液中，混和均匀。将此混合物加入到含有1％Span85的液体石蜡中，搅拌乳化均匀，然后加入含有300ul冰醋酸的液体石蜡60ml，继续搅拌5min，静置40min，过滤得到海藻酸钙凝胶珠。将得到的凝胶珠再放于液体石蜡中，置于30℃的水浴，加入300mlEudragit S100乙醇溶液，搅拌2小时。过滤沉淀得到Eudragit S100包覆的海藻酸钠蛋白微胶囊，以1％体积分数的Tween80水溶液清洗，干燥即可。
实施例2将蓖麻蛋白微胶囊10份、蓖麻油微胶囊35份、防腐药物1.0份(苯甲酸钠)及诱饵54.0份(成分同实施例1)混合均匀，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装即可。
其中所述蓖麻油及其微胶囊的制备如下蓖麻油的提取称取去壳后的蓖麻籽300克并破碎。破碎的蓖麻籽中加入95％乙醇450ml，在50℃水浴中搅拌75h。0℃的离心机离心30min。制备上清液380ml。上清液中加入等量乙醚，在60℃的水浴中搅拌24h，浓缩除去溶药物得蓖麻油130g。蓖麻油微胶囊的制备把65g蓖麻油在45℃温度下搅拌均匀，分散到含55.5g明胶的500ml水溶液中。然后在搅拌下加入含55.5g阿拉伯树胶的500ml水溶液，再加入45℃的温水4000ml加以稀释。在保持PH＝9、温度为45℃条件下向混合液中加入5％浓度的聚乙烯甲基醚一顺丁烯二酸酐共聚物的水溶液32g。向上述混合液体系中加入20％的醋酸，将溶液pH值调到PH＝4.2时，在搅拌下冷却到10℃以下，再用20％NaOH调pH为8-9，搅拌15min，最后加入25％甲醛适量，在此温度下搅拌1h。静置，倾去上清液，用水洗微胶囊至近中性即可。
其中所述蓖麻蛋白及微胶囊的制备如实施例1。
实施例3将蓖麻蛋白微胶囊20份、蓖麻油微胶囊20份、防腐药物1.0份(苯甲酸钠)及诱饵59.0份(成分同实施例1)混合均匀，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装即可。
其中所述蓖麻蛋白及微胶囊的制备如实施例1。
其中所述蓖麻油及其微胶囊的制备如实施例2。
实施验证 蓖麻鼠不育剂对鼠的抗生育作用一.方法实验鼠均为25±2g的小家鼠。
1.抗早孕，抗中期妊娠雌雄小鼠按2∶1合笼交配，每日上午检查阴栓，发现阴栓日为妊娠第1天。取出小鼠，按孕期分别饲养。喂药方式每组实验鼠喂药期间给予充分的药饵让其自然采食。对照饲喂无药饵料。
抗早孕从妊娠策7天开始，连续喂药饵3天(重复三次)抗中期妊娠从妊娠策11天开始，连续喂药饵3天(重复三次)。
各实验组小鼠均在最后1次给药后间隔1天解剖，观察胎仔，以坏死与子宫壁游离或吸收而留有痕迹者为有效。分别统计每组的妊娠抑制百分率。按机率单位法计算结果见表1。
2.抗着床雌雄小鼠按2∶1合笼交配，每日上午检查阴栓，发现阴栓的当天作为妊娠的第1天。小鼠于妊娠第1，2和3天分别喂药饵。于妊娠第12天统计各组妊娠小鼠数和平均胚胎数。统计妊娠抑制百分率(重复三次)。喂药方式每组实验鼠喂药期间给予充分的药饵让其自然采食。对照饲喂无药饵料。
3.长期抗生育将小鼠以雌雄2∶1合笼，在次日清晨做阴道涂片，看到精子为d1天，从第2天起连续喂药饵2天，随后让其自然采食至对照组不再产仔(其间小鼠均以雌雄2∶1合笼)，随时观察、统计产仔数(重复三次)。喂药方式每组实验鼠喂药期间给予充分的药饵让其自然采食。对照饲喂无药饵料。
二.实验结果如表1其中所属配方I(实施例1.)对雌鼠的抗早孕、抗着床及中期妊娠终止的作用显著。配方II(实施例2.3.)在配方I的基础上加入微胶囊化的蓖麻油既对雌鼠的抗早孕、抗着床及中期妊娠终止的作用显著增强，同时对雌鼠有显著而长期的避孕作用。
实验中同时观察发现，实验鼠对药饵的采食量与对照鼠饲喂无药饵料的采食量无显著差异，表明微胶囊化的蓖麻油及微胶囊化的蓖麻蛋白屏蔽了蓖麻的异味，易于被鼠所接受。
表一 蓖麻鼠不育剂对小鼠的抗生育作用
注#抗早孕率、抗着床率等均为与对照比较后得出的结果。
权利要求
1.一种鼠不育药物，其特征是含有从蓖麻籽中分离、提取出具有使鼠不育的天然成分蓖麻蛋白；将蓖麻蛋白微胶囊化后配与防腐药物、诱饵有机组合而成，所述蓖麻蛋白微胶囊中蓖麻蛋白实际含量(重量百分比)为60-80％，胶囊膜材料含量为20-40％；所述胶囊膜材料的主要成分为海藻酸钠与Eudragit S100。
2.按照权利要求1所述的鼠不育药物，其特征在于该鼠不育药物的配方(按重量计)为蓖麻蛋白微胶囊10-50份防腐剂0.5-1.5份诱饵 48-88份其中所述诱饵为常用配方食糖5％，植物油3.4％，食盐0.5％，味精0.1％，玉米粉38％，面粉17％，水35％，普鲁士蓝1％；防腐剂为苯甲酸钠。
3.按照权利要求1或2所述的鼠不育药物，其特征在于在该鼠不育药物中还含有蓖麻油微胶囊，所述蓖麻油微胶囊中蓖麻油实际含量(重量百分比)为75-90％，胶囊膜材含量为10-35％；胶囊膜材料的主要成分为明胶、阿拉伯树胶及聚乙烯甲基醚一顺丁烯二酸酐共聚物。
4.按照权利要求3所述的鼠不育药物，其特征在于该鼠不育药物的配方(按重量计)为蓖麻蛋白微胶囊 10-25份防腐剂 0.5-1.5份蓖麻油微胶囊15-40份诱饵33-73份其中所述诱饵为常用配方食糖5％，植物油3.4％，食盐0.5％，味精0.1％，玉米粉38％，面粉17％，水35％，普鲁士蓝1％；防腐剂为苯甲酸钠。
5.按照权利要求2所述的鼠不育药物的制备方法如下①蓖麻蛋白及微胶囊的制备 蓖麻蛋白的提取提取蓖麻油后的蓖麻籽残渣匀浆→水提物离心弃沉淀→上清液中加入固体硫酸铵，离心→沉淀透析，离心→上清液干燥→蓖麻蛋白；采用机械搅拌乳化法制备海藻酸钠蓖麻蛋白微胶囊蓖麻蛋白和碳酸钙加入海藻酸钠溶液中，混和均匀→加入到含有Span85的液体石蜡中→加入含有冰醋酸的液体石蜡，过滤→海藻酸钙凝胶珠→放于液体石蜡中→加入Eudragit S100乙醇溶液，过滤沉淀→Eudragit S100包覆的海藻酸钠蛋白微胶囊。②将蓖麻蛋白微胶囊10-50份、防腐剂0.5-1.5份及诱饵48-88份充分混合，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装即可。
6.按照权利要求4所述的鼠不育药物的制备方法如下①蓖麻油及微胶囊、蓖麻蛋白及微胶囊的制备A.蓖麻油及微胶囊的制备 蓖麻油的提取蓖麻籽破碎→乙醇提取，离心→上清液加乙醚萃取→蓖麻油；蓖麻油微胶囊的制备蓖麻油与含有明胶的水溶液充分混合→加入到含阿拉伯树胶的水溶液中→加入聚乙烯甲基醚一顺丁烯二酸酐共聚物的水溶液→分别加入适量醋酸、NaOH调pH值→加入适量甲醛→蓖麻油微胶囊。B.蓖麻蛋白及微胶囊的制备如上权利要求5所述。②该鼠不育药物的制备将蓖麻油微胶囊15-40份、蓖麻蛋白微胶囊10-25份、防腐剂0.5-1.5份及诱饵33-73份充分混合，再加入适量的水搅拌均匀，送入压粒机，切成所需的颗粒状，烘干包装即可。
7.按照权利要求1、3所述鼠不育药物的用途其特征在于将含有蓖麻蛋白或蓖麻油的鼠不育药物用于开发为防治鼠的药物，包括片剂、缓释片剂、胶囊剂、缓释胶囊剂、软胶囊剂和微丸剂。
全文摘要
本发明提供一种鼠不育药物及其制备方法，其特点是从蓖麻籽中分别分离、提取出的均具有使鼠不育的天然成分蓖麻油、蓖麻蛋白，并经常规的材料分别进行微胶囊化后以蓖麻籽油微胶囊、蓖麻蛋白微胶囊为原药，配与防腐药物、诱饵组合而成。该鼠不育药物的组成成分有蓖麻油微胶囊、蓖麻蛋白微胶囊、防腐药物及诱饵。该药物的配制、加工、贮藏及性能容易进行控制，本发明有实际应用的价值和意义。
文档编号A61P15/00GK1651073SQ20041008139
公开日2005年8月10日 申请日期2004年12月6日 优先权日2004年12月6日
发明者高平, 秦晓娜 申请人:四川大学