专利名称：含NF－κB诱饵的用于治疗和预防呼吸疾病的药物组合物及其使用方法
技术领域：
本发明涉及组合物及其使用方法，所述组合物包含与转录调节因子尤其是NF-κB的染色体结合位点特异性结合的化合物(如核酸及其同源物)。更具体的，本发明涉及含NF-κB诱饵(decoy)化合物的组合物及其使用方法。
具体而言，本发明提供治疗、改善和预防气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病的组合物及其具有显著效果的使用方法，具体的，例如，根本性治疗、改善和预防哮喘或鼻炎的组合物。
背景技术：
1993年3月，WHO(世界卫生组织)报告了“事实上全球哮喘发病率正在增加”，并公布了他们的发现在世界55亿人口中间哮喘患者超过1亿(“Internationalguidance towards asthma control-global strategy for asthma control and prevention，NHLBI/WHO Workshop Report”ed.Sohei MAKINO，Kokusai Igaku Shuppan(International Medical Publishers，Inc.)1995)。特别是哮喘在小儿中的发病率正在增加。
在日本，小儿哮喘增加的趋势明显，根据文部省(Ministry of Education)的学校保健调查，小儿哮喘发病率最高是在1994年，与1975-1984年期间相比已经增加2-4倍。
厚生省(Ministry of Health and Welfare)于1993年10月公布日本总计有1,066,000人患哮喘(男性586,000；女性480,000)，据此统计数字计算人口中0.9％患有哮喘。
而且根据调查方法在日本有2-3百万哮喘患者(人口的约2-3％)，并且每年因哮喘死亡的人数估计是约6,000-7,000。
如此，日本和其它地方的当前趋势是与哮喘相关的发病率增加。而且，与哮喘相关的死亡率也微降低；哮喘导致死亡的风险高，尤其是对于难治的哮喘。
气道粘膜炎症在支气管哮喘病理中起重要作用。
也就是说，一旦气道粘膜接受变应原刺激，炎症细胞如肥大细胞或嗜酸性粒细胞就产生各种细胞因子、组织毒性蛋白等。由此，细胞的炎性刺激引起受炎性刺激而激活的转录因子如NF-κB和AP-1激活，从而增强各种基因的表达，如各种细胞因子的表达。
炎性因子如细胞因子负责介导免疫系统细胞之间的相互作用，并在对变应原或微生物的免疫应答中起重要作用。
然而，由这些因子介导的过度的变态反应或炎症导致支气管哮喘、气道狭窄等患者的不利现象，如哮喘发作。
肥大细胞和嗜酸性粒细胞的表面膜上携带细胞因子受体。一旦其它细胞或其自身产生的细胞因子与这些受体结合，信号就经细胞内信号传递传入细胞核而促进各种基因转录，从而基于转录产生新细胞因子、趋化因子和细胞粘附分子。
在此情况下，转录因子在调节核中遗传信息的转录活性方面起重要作用。气道炎症中重要的转录因子包括NF-κB、AP-1、NF-AT(活化T细胞的核因子)，尤其是NF-κB起关键作用。
对NF-κB促进转录反应而产生的因子包括各种因子如炎性细胞因子、趋化因子、细胞毒性蛋白、细胞粘附分子、免疫系统相关的细胞膜受体等。
迄今为止，已经报道在人肥大细胞(MC)中，IgE依赖的NF-κB被炎性抗体刺激激活，TNF-α(肿瘤坏死因子α)被认为促进NF-κB活化。而且，已知在嗜酸性粒细胞中GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)对NF-κB活化重要(J.Immunol.，169(9)，5287-93，2002)。
气道中的TNF-α有与IL-1相似的生物学作用，并与气道炎症和气道中过度反应相关。此外，受IL-1或IL-4激活在气道上皮和内皮中表达的粘附分子尤其是VCAM-1导致嗜酸性粒细胞浸润入气道，并参与气道中的过度反应。动物试验中施用抗ICAM-1抗体抑制嗜酸性粒细胞浸润和气道反应性。
传统哮喘治疗主要是针对炎症控制，并可按以下分类连续使用用于长期控制的长期控制剂(控制剂)，和用于短期治疗哮喘发作的发作治疗剂(缓解剂)。
具体的，吸入性类固醇、抗变态反应剂、持续释放性茶碱等已经被用作控制剂，而吸入性β2受体激动剂、氨茶碱、口服或静脉注射的类固醇等已经被用作缓解剂。
然而，尽管缓解剂的发作缓解作用，使用传统控制剂治疗不能达到足够效果，因为如上所述，哮喘发病率增加，哮喘死亡率仍没有降低。
因此，对哮喘治疗的研究最近已经从这些传统症状治疗转向抑制气道炎症。
代表性转录因子NF-κB是由p65和p50异二聚体组成的转录调节因子。NF-κB典型位于细胞浆中，在此与其抑制因子IκB结合从而使NF-κB的核转位受阻。然而，当施加刺激如细胞因子、缺血、再灌注等时，IκB因磷酸化而被降解。结果导致NF-κB被活化并转位进入核。在核中，NF-κB结合到染色体上的NF-κB结合位点，并促进其下游基因转录。位于NF-κB结合位点下游的很多基因是已知的，如炎性细胞因子(如IL-1、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNFα)等)和粘附分子(例如(如VCAM-1、ICAM-1等)。
尽管有许多患者，支气管哮喘、变应性哮喘、小儿哮喘等是难于根治的疾病，而长期以来一直期待这种根治。现在的治疗主要基于症状治疗，并且主要是施用支气管扩张剂如茶碱等。然而，这些症状治疗仅能在发作后开始，因此完全抑制患者症状是不可能的，并且根治也是不可能的。因此，提供根本性治疗的疗法已经被长期期待。
除了感冒中常见的症状如鼻塞、鼻涕、喷嚏等以外，鼻炎有多种症状，各种症状如鼻出血、嗅觉和味觉减退、头痛、注意力缺乏等。
根据诱因/诱发性物质或临床症状，将鼻炎分成以下几类变应性鼻炎、花粉病、急性鼻炎、慢性鼻炎、肥大性鼻炎、慢性窦炎(积脓症)和鼻中隔偏移等。
作为代表性鼻炎，变应性鼻炎由吸入吸入性抗原如尘、尘螨、花粉等引起，导致鼻部症状如喷嚏、鼻涕和鼻塞等。刚吸入抗原性物质时没有症状。然而在开始吸入这种抗原以后，体内的抗体量逐渐增加，当抗体效价超过某一水平并且这种抗原性物质被吸入时，就出现症状。
基本上认为其病理是变应性炎症(Rhinology，41(2)，80-6，2003)。
日本柳杉(Cryptomeria japonica)所致花粉病的患者数在日本一直在增加，现在认为已经达到一千五百万人。特别是日本大都市地区，据说有五分之一的人有花粉病。这里的原因被认为是(1)日本柳杉花粉分散量增加；(2)柴油机尾气对空气的污染促进IgE抗体产生。
(3)压力增加促进变态反应。
(4)由于西方化饮食习惯促进IgE抗体产生。
(5)寄生虫感染降低。
如本文所用，术语“变应性鼻炎”表示引起鼻腔粘膜抗特异性物质反应的鼻炎，可能与喷嚏、鼻涕和鼻塞这三种主要症状相关，可能还与其它症状如眼部搔痒、眼部充血和系统性症状如缺乏食欲和疲劳相关。
引起变态反应的物质(变应原)包括花粉(日本柳杉、日本扁柏(Chamaecyparisobtusa)等)、豚草、尘螨、居室尘、宠物毛等，这些可以分成季节性变应原(如春季的日本柳杉花粉)和全年性变应原。
已经提出治疗鼻炎的各种方法。然而迄今，只有去除变应原或症状治疗可用，并且很多这些症状治疗有副作用。
此外，慢性阻塞性肺病(COPD)为全球死因的第四大原因。然而，有很多患者在变严重之前没有意识到它，因此它已成为21世纪最严重的健康问题之一。在美国，COPD死亡率随年龄增加，并且根据年龄层划分，在45岁或更高年龄中是排在第四或五位的死亡原因。在1965-1998年期间，尽管其它疾病死亡率降低，COPD死亡率已显著增加，因此强烈需要根本性解决方案。
近年COPD患者数一直在增加，因而预期在未来将进一步增加。如今没有COPD的根本性治疗，并且社会保险对与COPD相关的医疗支出也大。COPD是气流不可逆限制的发病状态。气流限制通常是进行性的，并且根据吸入有毒气体的量或类型而程度不同。气流限制是由肺实质破坏引起，而所述肺实质破坏是由对吸入气体的反应而由周围气道中炎症反应引起。WHO和世界银行(World Bank)于1990年进行了一项调查，其中报告其全球死亡率是9.34/千人(男性)和7.33/千人(女性)。如今COPD正在增加，并且是1990年排到第六位的死亡诱因，预期到2020年将上升到第三位。在日本如今有约50,000名患者由于该疾病而在家接受氧疗。根据厚生省1996年公布的统计数字，患者数是220,000。然而，根据肺病流行病学调查协会(haishikkanekigaku chosa kenkyukai)公布的统计数字，日本COPD患者数估计是5,300,000。此外，40岁或更高年龄中COPD发病率是8.5％，这与全球发病率相当。迄今为止，认为日本有少数患者，然而，有很多仍未被诊断的患者，因此以实际患者数来看对于COPD的根本性治疗有日益增加的需要。
COPD是呼吸过程中作为空气通路的“气道”受到破坏并因而呼吸功能逐渐降低的一种疾病。以前称“肺气肿”和“慢性支气管炎”的疾病现在统称为COPD。
COPD从正常症状开始，并逐渐发展，并因而被认为是“与生活方式相关的肺病”，其中当患者接受诊断时，他/她已经处于严重状态。COPD是这样一种疾病，其中由于严重状态的呼吸困难而导致患者运动受限制，并将发生系统性障碍，这是极其严重的疾病。因此，从改善症状的角度讲，非常需要对其的治疗。
当前COPD治疗仅包括症状治疗和改善生活方式，它们是被动方法，因而没有积极方法或根本性治疗。例如，建议放弃有高COPD风险的生活习惯，如吸烟。此外，也在使用促进呼吸的药物治疗、康复、氧疗等，它们都是对症治疗。预防支气管感染的接种和并发症治疗等也在使用。对于最严重患者，当所有条件都被满足时也可考虑手术治疗。然而不能说这种手术治疗令人满意得改善症状。
如此，现如今没有有效的CIPD治疗，并且如今没有方法延缓疾病进程。如上所述，迄今为止，现在使用的疗法只是对症治疗，如吸氧、外部主动换气等。如上所述，必要时手术切除病变的肺组织。然而有很多报告说明上述治疗不提供COPD的长期预后改善。而且，施用药剂如支气管扩张剂、祛痰剂等的作用是有限的。
专利文献1(WO 03/105780)和专利文献2(US 6303582)公开了生产核酸微颗粒的技术。然而，所述文献没有描述小核酸如诱饵是否能被生产为微颗粒而仍然具有对抗炎性疾病的功能。
本发明的目的是提供组合物及其用途，适用于治疗由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病，如包括气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病的疾病、障碍和/或病症。
发明内容
本发明提供含NF-κB诱饵作为主要成分的组合物，用于治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症，以及使用所述组合物治疗和/或预防所述疾病的方法。
发明人已经发现，施用NF-κB诱饵可以有效治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达或由嗜酸性粒细胞和/或嗜中性粒细胞异常引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症，从而实现了本发明。
本发明涉及用于治疗和预防由受NF-κB调节的基因表达引起的疾病、障碍和/或病症的药物组合物。所述组合物包含NF-κB诱饵、其衍生物、变体或片段以及药学上可接受的载体，并且其衍生物、变体或片段是具有生物活性的诱饵。
本发明也涉及用于治疗和/或预防与嗜酸性粒细胞异常相关的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的药物组合物，包含诱饵和药学上可接受的载体。
优选的，所述疾病是COPD、哮喘或鼻炎。
优选的，所述疾病是与嗜酸性粒细胞异常相关的疾病。这种与嗜酸性粒细胞异常相关的疾病例如包括哮喘，如支气管哮喘、小儿哮喘、变应性哮喘、特应性哮喘、类固醇抵抗型哮喘(SRA)、非变应性哮喘(内因性哮喘、外因性哮喘如阿司匹林哮喘、心脏性哮喘和感染性哮喘)；和其它嗜酸性粒细胞异常，如鼻炎、变应性疾病等。
优选的，所述药学上可接受的载体是亲水聚合物、不溶性脂质体、碳水化合物或不溶性添加剂。
优选的，所述药学上可接受的载体是选自脂质体、乳糖、海藻糖、蔗糖、甘露醇和木糖醇的一种或多种。
优选的，所述NF-κB诱饵是SEQ ID NO1中列出的诱饵。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD、哮喘或鼻炎。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是哮喘。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是鼻炎。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是选自哮喘或鼻炎，所述哮喘选自支气管哮喘、小儿哮喘、变应性哮喘、特应性哮喘、类固醇抵抗型哮喘、非变应性哮喘、内因性哮喘、外因性哮喘、阿司匹林哮喘、心脏性哮喘和感染性哮喘；所述鼻炎选自变应性鼻炎、花粉病、急性鼻炎、慢性鼻炎、肥大性鼻炎、慢性窦炎(积脓症)和鼻中隔偏移。
另一方面，本发明涉及NF-κB诱饵用于制造药剂或药物组合物的用途，所述药剂或药物组合物用于治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症，或由嗜酸性粒细胞异常引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症。
另一方面，本发明包含本发明的上述组合物，其适用于施用于呼吸系统。
优选的，施用于呼吸系统包含施用于气道内或经气道吸收。
优选的，施用于呼吸系统特征是经雾化或吸入施用于气道。
优选的，施用于呼吸系统特征包含经定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器施用。
优选的，所述组合物以干粉提供。
优选的，所述干粉是经选自下组之一的方式生产的微粒球磨、珠磨、喷射磨、ultimaizer、研钵、石磨、喷雾干燥和超临界流体。
优选的，所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.01至约50微米。
优选的，所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.05至约30微米。
优选的，所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.1至约10微米。
优选的，本制剂(formulation)中提供的每轮剂量是10μg-100mg。
优选的，本制剂中提供的每轮剂量是50μg-50mg。
优选的，本制剂中提供的每轮剂量是10mg或更少。
优选的，施用于呼吸系统包含经鼻吸收。
优选的，所述制剂是选自滴鼻剂、喷鼻剂、喷雾剂、呼吸器用剂和粉末给药制剂的制剂。
优选的，所述制剂是用于鼻炎的滴鼻剂。
优选的，本发明特征在于NF-κB诱饵包封在HVJ-E囊膜载体(envelope vector)中。
优选的，施用于呼吸系统包含施用于肺。
另一方面，本发明提供治疗呼吸系统的装置，其包含根据本发明的组合物以及将所述组合物施用于呼吸系统的器具。
优选的，所述施用于呼吸系统的器具包含选自下组的器具用于向肺给药的器具、用于经气道给药的器具、用于经气道吸收的器具和用于经鼻吸收的器具。
优选的，所述用于向气道中给药的器具包含定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器。
另一方面，本发明提供制造含NF-κB诱饵的颗粒的方法，包括以下步骤A)提供所述诱饵和药学上可接受的载体；B)将所述诱饵和载体干燥并加热到足以造粒(particulization)的温度；和C)获得具有预期颗粒大小的颗粒。
优选的，所述温度是50摄氏度或更低。
优选的，所述温度是100摄氏度或更低。
优选的，所述干粉气体动力学平均粒径为约0.01至约50微米。
优选的，所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.05至约30微米。
优选的，所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.1至约10微米。
另一方面，本发明提供治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的方法，包括以下步骤A)向对象的呼吸系统施用含NF-κB诱饵和药学上可接受载体的组合物。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病。
优选的，所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD、哮喘或鼻炎。
优选的，施用于呼吸系统包含施用于气道内或经气道吸收。
优选的，施用于呼吸系统特征是经雾化或吸入施用于气道。
优选的，施用于气道包含经定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器施用。
优选的，所述施用经选自滴鼻剂、喷鼻剂、喷雾器、呼吸器和粉末给药的方式实现。
另一方面，本发明提供治疗和/或预防由嗜酸性粒细胞异常引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的方法，包括以下步骤A)向对象的呼吸系统施用含NF-κB诱饵和药学上可接受载体的组合物。
另一方面，本发明涉及NF-κB诱饵在制造用于治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的药物方面的用途。
另一方面，本发明涉及NF-κB诱饵在制造用于治疗和/或预防由嗜酸性粒细胞异常引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的药物方面的用途。
发明效果本发明允许处理如治疗或预防呼吸疾病如气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病等。
图1是显示根据本发明的药物组合物在哮喘模型中效果的试验方案的实例(图1A)。图1B和1C显示吸入诱饵的效果。
图2的结果显示来自卵清蛋白激发的动物的支气管肺泡灌洗液中根据本发明的药物组合物的效果。图2A和2B所示为用于计算嗜酸性粒细胞数目的原始数据。图2C显示本发明的效果，其中从左边开始分别表示对照、卵清蛋白激发、气溶胶处理(2mg×2)和液体处理(0.5mg×1)。
图3的结果显示来自卵清蛋白激发的动物的支气管肺泡灌洗液中根据本发明的药物组合物的效果。图3A(嗜酸性粒细胞数)和图3B(嗜酸性粒细胞百分率)显示本发明的效果。从左边开始，每个图分别表示对照、卵清蛋白激发、裸诱饵(500微克)、HVJ(200；含HVJ-E 10000HAU和诱饵200μg)、HVJ(500；含HVJ-E 25000HAU和诱饵500μg)和载体(只有HVJ-E 25000HAU，无诱饵)。#表示对照相对于卵清蛋白激发的统计显著性。
图4表示嗜酸性粒细胞行为的实例。
图5表示本发明NF-κB诱饵的粉末吸入药剂的结果。
图6表示用作对照的含乳糖的粉末吸入药剂的结果。
图7表示NF-κB诱饵在大鼠哮喘模型(AHR)中的结果。图例如下##p＜0.01vs盐水组(学生t-检验)；*，**分别表示p＜0.05，0.01vs对照组(Dunnett’s多重比较检验)。
图8表示NF-κB诱饵在大鼠哮喘模型(BALF)中的结果。图例如下##p＜0.01vs盐水组(学生t-检验)；*，**分别表示p＜0.05，0.01vs对照组(Dunnett’s多重比较检验)。
图9表示NF-κB诱饵在大鼠鼻炎模型中的效果。图例如下##p＜0.01vs盐水组(学生t-检验)；*，**分别表示p＜0.05，0.01vs对照组(Dunnett’s多重比较检验)。序列表说明SEQ ID NO1是NF-κB诱饵。
SEQ ID NO2是打乱的(scrambled)NF-κB诱饵。
SEQ ID NO3是NF-κB诱饵的变体。
以下，本发明将用优选实施方案的方式描述。本领域技术人员将会理解，基于本说明书的描述和本领域公知的常用技术，本发明的实施方案可以适当实施或实现。本发明的功能和效果容易被本领域技术人员识别。
实施发明的最佳方式以下将描述本发明。应该理解，在本说明书中除非文中明确的另外指出，单数形式的冠词(如英语中的“a”、“an”、“the”等；德语中的“ein”、“der”、“das”、“die”、等及其变化；法语中的“un”、“une”、“le”、“la”等；西班牙语中的“un”、“una”、“el”、“la”等，和其它语言中的冠词、形容词等)包括其复数指示物。也应该理解，除非另外说明，此处所用的术语具有本领域通常使用的定义。因此，除非另外定义，此处使用的所有术语和技术名词与本发明所属领域的技术人员一般理解具有相同含义。如果有冲突，以本说明书(包括定义)为准。
此处下面提供的实施方案为更好理解本发明的目的而提供，因而应该理解本发明范围不受以下描述的限制。因此，根据本说明书的描述，进行在本发明范围内的任何修饰对于本领域技术人员是显而易见的。
术语“诱饵”或“诱饵化合物”表示这样一种化合物，它结合到NF-κB的染色体结合位点或受NF-κB控制的基因的另一个转录调节因子的染色体结合位点(以下称为靶结合位点)，并拮抗NF-κB与其靶结合位点的结合。代表性的，所述诱饵或诱饵化合物包括核酸及其类似物。
当诱饵存在于核中时，诱饵与转录调节因子冲突，竞争所述转录调节因子的靶结合位点。结果，通过转录调节因子与靶结合位点的结合而产生的生物功能被抑制。所述诱饵含有至少一种能结合靶结合序列的核酸序列。只要诱饵能结合靶结合序列，所述诱饵就能用于制备本发明的药物组合物。
诱饵的优选实施例包括但不限于含5’-CCT-TGA-AGG-GAT-TTC-CCT-CC-3’(SEQ ID NO1)(NF-κB诱饵)的寡核苷酸、或其互补序列、其变体或包括一种或多种这些分子的化合物等。所述寡核苷酸可以是DNA或RNA，并且其中也可以包括修饰核酸和/或假核酸。此外，这些寡核苷酸可以是其突变体或其中有它们的化合物。所述寡核苷酸可以是单链或双链，或可以是线性或环状，或可以带分支或线性。突变体指具有在上述序列之一中含突变、替换、插入或缺失的序列的核酸，并且它能特异性拮抗NF-κB或受NF-κB控制基因的另一种转录调节因子与其结合位点的结合。更优选的诱饵包括含一种或多种上述核酸序列的双链寡核苷酸或其突变体。NF-κB诱饵的代表性变体包括但不限于具有SEQ ID NO3核酸序列的那些。
用于本发明的寡核苷酸包括经修饰以抵抗体内降解的寡核苷酸等，如具有硫代磷酸二酯键(其中磷酸二酯键中的氧原子被硫原子替换)的寡核苷酸(S-oligo)、磷酸二酯键被不带电荷的甲基磷酸基团替换的寡核苷酸等。
此处所用的分子生物学技术、生化技术和微生物学技术是公知其常用的，例如描述于Ausubel F.A.et al ed.(1988)，Current Protocols in Molecular Biology，Wiley，New York，NY；Sambrook J.et al.(1989)Molecular CloningA Laboratory Manual，2ndEd.，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY，SupplementExperimental Medicine“Gene introduction and expression analysis methods”，Yodosha，1997等。
除非另外注明，此处所用的术语“核酸”、“核酸分子”、“多核苷酸”和“寡核苷酸”具有相同含义，指由一系列核苷酸组成的聚合物。核苷酸指形成磷酸酯的核苷。基本部分包括具有嘧啶碱基或嘌呤碱基的核苷酸(嘧啶核苷酸和嘌呤核苷酸)。组成多核苷酸的核苷酸包括DNA或RNA等。如上所述，诱饵通常使用这些形式的核酸。
基于本发明的诱饵序列通过用软件如BLAST、FASTA等对基因组数据如人类基因组计划(the Human Genome Project)中包括的那些或基因信息数据库如GenBank进行同源性搜索而获得的序列也在本发明范围内。生物学筛选基于这种数据库制备的文库而获得的序列(例如，在严谨条件下获得的序列)也包括在本发明范围内。
此处使用FASTA(序列分析工具)比较碱基序列的相似性、一致性和同源性时使用默认参数，除非另外注明。
如此处所用，术语“对应”的基因或序列(如诱饵或启动子序列等)指给定物种中具有或预期具有与供比较的参考物种中的预定基因相似的功能的基因。当有多个具有这种功能的基因时，该术语指具有相同进化起源的基因。因此，与给定基因对应的基因可以是所述给定基因的直向同源基因。因此，与那些如小鼠NF-κB或序列对应的基因可以在其它动物如人、大鼠、猪、牛等中发现。可通过本领域公知的技术鉴定这种对应的基因。因此，例如，给定动物中的对应基因可用序列如作为参考基因的小鼠NF-κB作为查询序列通过搜索所述动物(如人、大鼠)的序列数据库而被发现。这些对应基因可由本领域技术人员用序列数据库或文库容易的获得。本发明中，与本发明的特定序列对应的序列因此也将被包括。
“寡核苷酸衍生物”或“多核苷酸衍生物”包括核苷酸衍生物，或表示核苷酸之间具有与典型连接不同的连接的寡核苷酸或多核苷酸，可互换使用。这种寡核苷酸的实例具体包括寡核苷酸中的磷酸二酯键转变成硫代磷酸二酯键的寡核苷酸衍生物、寡核苷酸中的磷酸二酯键转变成N3’-P5’氨基磷酸酯键的寡核苷酸衍生物、寡核苷酸中的核糖和磷酸二酯键转变成肽核酸键的寡核苷酸衍生物、寡核苷酸中的尿嘧啶被替换成C-5丙炔基尿嘧啶的寡核苷酸衍生物、寡核苷酸中的尿嘧啶被替换成C-5噻唑尿嘧啶的寡核苷酸衍生物、寡核苷酸中的胞嘧啶被替换成C-5丙炔基胞嘧啶的寡核苷酸衍生物、寡核苷酸中的胞嘧啶被替换成吩噁嗪修饰胞嘧啶的寡核苷酸衍生物、DNA中的核糖被替换成2’-O-丙基核糖的寡核苷酸衍生物，以及寡核苷酸中的核糖被替换成2’-甲氧乙氧基核糖的寡核苷酸衍生物。
如此处所用，术语“生物活性”指某种因子在生物体内所具有的活性，包括表现各种功能的活性。例如，当某种因子是转录因子时，其生物活性包括调节转录活性的活性。当某种因子是酶时，其生物活性包括酶活性。作为另一个例子，当某种因子是配体时，其生物活性包括与所述配体对应的受体的结合。在本发明的实施方案中，这种生物活性包含与至少一种转录因子的结合活性。通过混合转录因子和转录因子的结合序列、并测定由这种结合所得的复合体(如经电泳观察)可以实现测定这种转录因子结合活性的方法。这种方法在本领域公知并常规使用。
如此处所用，术语“核苷酸”可以是天然存在的或非天然存在的。“核苷酸衍生物”指与天然存在核苷酸不同但具有与这种核苷酸相似功能的衍生物。这种核苷酸衍生物与核苷酸类似物在本领域公知。这种核苷酸衍生物的实例例如包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基磷酸酯、手性甲基磷酸酯、2-O-甲基核糖核苷酸、肽核酸(PNA)。
如此处所用，术语“变体”指起始物质如多核苷酸的一部分被改变的物质。这种变体包括具有替换、添加或缺失的变体、截短型变体、等位基因变体等。等位基因指与另一个位于相同遗传座位并可以互相有区别的遗传变体。
本发明的诱饵可用本领域已知的化学或生化合成方法制备。例如，当用核酸作为诱饵化合物时，可以采用遗传工程中常用的核酸合成方法。例如，DNA合成仪可直接用于合成预定的诱饵核酸。此外，可以合成这些核酸、含所述核酸的核酸或其部分，随后用PCR方法、克隆载体等扩增。而且，将由这些方法获得的核酸用限制酶等切割，并用DNA连接酶等连接，等等，以制备预定核酸。为获得在细胞中更稳定的诱饵核酸，所述核酸中的碱基、糖和磷酸酯部分可以被化学修饰，如烷基化、酰基化等。
本发明提供含单独或与稳定化合物、稀释剂、载体或其它成分或药剂组合的上述诱饵化合物的药物组合物。
如此处所用，术语“患者”或“对象”指被施加本发明的治疗或组合物的生物体。患者可以是任何动物，如灵长类、啮齿类等。只要可以施加本发明的治疗或组合物即可。优选的，所述患者可以是人，如此处所用，术语“由受NF-κB调节的基因表达引起的疾病、障碍和/或病症”指原因是转录因子NF-κB调节(例如增加、减少、延迟等)表达(例如翻译或转录)的疾病或障碍。这种疾病、障碍或病症包括但不限于哮喘、鼻炎、COPD等。
如此处所用，术语“与嗜酸性粒细胞异常相关的疾病、障碍和/或病症”指体内(如血液中)嗜酸性粒细胞水平位于正常水平以外作为原因或结果的任何疾病、障碍和/或病症。嗜酸性粒细胞表面有IgE受体，并在变应性疾病中起重要作用。
这些与嗜酸性粒细胞异常相关的疾病包括但不限于哮喘(支气管哮喘、小儿哮喘、变应性哮喘、特应性哮喘、类固醇抵抗型哮喘(SRA)、非变应性哮喘(内因性哮喘、外因性哮喘如阿司匹林哮喘、心脏性哮喘和感染性哮喘)；和其它嗜酸性粒细胞异常如鼻炎、变应性疾病等。
如此处所用，术语“与呼吸系统相关的疾病、障碍和/或病症”指与呼吸系统相关的任何疾病、障碍和/或病症。这种与呼吸系统相关的疾病包括但不限于气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病。
如此处所用，与呼吸系统相关的疾病包括COPD、哮喘、鼻炎等。
如此处所用，术语“COPD”(Chronic Obstructive Pulmonary Disease的缩写)总起来说表示空气进出肺慢性变差并因而逐渐变得有病的疾病。它基本包括如今已被称为“慢性支气管炎”和“肺气肿”的任何疾病。举例来说，COPD病情包括每天连续咳嗽并有痰、甚至患者没有感冒时也是如此的情况，和当移动他/她的身体如上下楼梯等时患者感到呼吸困难的情况。一些患者在当他们以与没有咳嗽和痰的同龄人相同步伐行走而感到疲劳时将只识别出呼吸困难。这些是常见病情，并因而被误认为是由于衰老导致。然而，COPD的特征是连续表现咳嗽、有痰和呼吸困难等。
COPD主要分成传统称谓的“慢性支气管炎”和“肺气肿”，其中慢性支气管炎有支气管和细支气管疾病，肺气肿特征是肺泡疾病。多数患者同时看到两种类型疾病。即使患者有慢性支气管炎，也有不总是伴随咳嗽和有痰的病例，因此最近将它称为“气道疾病类型”，应该理解所有这些都被本发明目标包括。
多数气道疾病类型被识别为气道表面发炎并分泌大量粘液的情况。此外，气道壁变厚，气道变狭窄，因而通气被破坏。
肺气肿表示那些疾病，其中慢性炎症引起肺泡破坏和融合，因而肺含空气导致起泡或膨胀的肺组织挤压气道，从而破坏气道并且通气被破坏。
与上述两种疾病类型无关，肺中的细胞都已经被破坏，因而没有根本性治疗，除非假定肺中的细胞可以再生。应该注意本发明有史以来第一次提供COPD的根本性治疗。
如下诊断COPD可以用称为“肺量计”的装置经简单的呼吸功能测试(肺量测试)进行COPD诊断。肺量测试是肺容量和呼气时气道通畅程度的测试。
“用力肺活量(forced vital capacity)(FVC)”表示当对象尽可能吸气随后彻底呼出时的呼吸体积，而“一秒内体积(FEV1.0)”是吸气后第一秒内呼出的体积，在肺量测试中测量这两个数据。然后，如果FEV1.0值除以FVC值所得的值(以下称为一秒比率“FEV1.0％”)小于70％，则认为有COPD的可能。调查确认病情、症状、吸烟史或状态、生活环境和疾病史等，如果必要也将进行其它测试，例如，包括胸部X-射线检查、CT扫描等的成像诊断、研究是否身体缺氧的血气分析等。这使用动脉血或使用脉冲式量氧计(pulse oxymeter)测量氧，以进行COPD诊断，其中所述脉冲式量氧计是一种装备在指尖等的小型测定装置。
如果一秒比率(FEV1.0％)＝一秒体积/用力肺活量×100＜70％，则所述对象诊断有COPD。
(COPD严重程度)优选根据疾病的严重程度进行COPD治疗。因此，根据需要确定COPD的严重程度。基于可由肺量测试测量的％预期一秒体积(％FEV1.0)对COPD的严重程度分类。
表1
FEV1.0一秒体积；FVC用力肺活量GOLDCOPD global strategy for diagnosis，control and prevention(2003，revision)如此处所用，术语“哮喘”指呼吸系统(例如，气道(鼻腔、咽、喉、气管、支气管)和肺)对粘膜相关浮肿、粘稠分泌物和任意其它刺激具有更强反应、导致气道狭窄引起呼气困难的病症。哮喘包括但不限于，例如，支气管哮喘、小儿哮喘、变应性哮喘、特应性哮喘、类固醇抵抗性哮喘、非变应性哮喘、内因性哮喘、外因性哮喘、阿司匹林哮喘、心脏性哮喘和感染性哮喘等。
如此处所用，术语“鼻炎”指鼻腔粘膜的任何炎性疾病。鼻炎包括但不限于，例如变应性鼻炎、花粉病、急性鼻炎、慢性鼻炎、肥大性鼻炎、慢性窦炎(积脓症)和鼻中隔偏移等。变应性鼻炎是与作为主要症状的频繁打喷嚏、大量鼻液溢和因鼻粘膜水肿性增生而致的鼻塞相关的鼻炎，因此变应原(抗原)包括居室尘、尘螨、雪松或其它的花粉等，据说日本有一千五百万患者。
实施本发明的药物组合物和方法中，在患者是人的情况下，优选在人体试验之前，进行体外、随后体内和最终的动物试验以确定对预期治疗或预防适当的剂量。作为预备试验，组合物抗细胞系和/或动物模型的效果可以用本领域已知技术测定。根据本发明，可用于确定是否可施用特定化合物的体外测试包括观察转录因子与转录因子结合序列之间的结合等。在动物水平试验中，可以象对人一样向动物施用所述组合物并确认治疗效果的水平例如观察嗜酸性粒细胞变化，从而进行测定。本领域中应该理解，一旦在动物模型中测定到治疗和/或预防效果，通常在人中将获得相似效果。
本发明的药物组合物可以这种形式使用，其中诱饵可被摄入目标组织中的受影响部分或细胞中。
本发明药物组合物可以在任何无菌生物相容性药物载体(包括但不限于生理盐水、缓冲生理盐水、右旋糖和水)中被施用。上述诱饵化合物在药物组合物中与适当赋形剂、佐剂和/或药学上可接受的载体混合而使用。这种组合物可以单独或与药物组合物中的另一种药物成分组合施用于患者。在本发明的一个实施方案中，所述药学上可接受的载体没有药物活性。
可通过口腔或非胃肠道途径施用本发明药物组合物。非胃肠道递送方法包括局部、动脉内(如直接入肿瘤、动脉瘤等)、肌肉内、皮下、骨髓内、入蛛网膜下腔、心室内、静脉内、腹膜内或鼻内施用。除了诱饵化合物以外，本发明药物组合物还包含药学上可接受的载体，如赋形剂和加速处理所述诱饵化合物的其它化合物，从而制备药学上可接受的制剂。处方和给药的进一步技术细节例如描述于最新版“REMINGTON’S PHARMACEUTICAL SCIENCES”(Maack Publishing Co.，Easton，PA)。
用于给药的药物组合物可以用本领域公知的药学上可接受的载体制备成适于给药的形式。这种载体可以制备成片剂、丸剂、糖衣剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、膏剂(slurry)、悬液等，它们适于患者使用所述药物组合物。药学上可接受的载体包括但不限于脂质体、乳糖、海藻糖、蔗糖、甘露醇、木糖醇、结晶纤维素、脱乙酰壳多糖、碳酸钙、滑石、氧化钛或硅胶(氧化硅)等。
所用药物组合物可以例如如下方式获得将活性化合物与固体赋形剂组合，必要时将所得混合物研磨成粉，如果必要再加入适当化合物而获得片或糖衣剂的芯，并加工颗粒混合物。适当赋形剂可以是碳水化合物或蛋白质填充剂，包括但不限于以下糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；来源于玉米(玉米淀粉)、小麦、稻米、马铃薯或其它植物的淀粉；纤维素如甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠；和胶，包括阿拉伯胶和黄芪胶；和蛋白质，如明胶和胶原。如果必要可以使用崩解剂或助溶剂，如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或其盐(如海藻酸钠)。
糖衣剂芯与适当的包衣如浓缩糖溶液一起提供。糖衣剂芯也可以含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、carbopolygel、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液以及适当有机溶剂或溶剂混合液。为识别产品或表征活性化合物的量(即剂量)，染料或颜料可以加入片剂或糖衣剂中。
可使用的药物组合物例如可以含有由明胶胶囊、明胶和包衣(如甘油或山梨醇)组成的密封软胶囊。明胶胶囊可以含有活性成分，其中混合填充剂或粘合剂如乳糖或淀粉、润滑剂如滑石或硬脂酸镁，和任选的稳定剂。在软胶囊中，所述诱饵化合物可以溶于或悬于适当液体如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中，其中有或无稳定剂。
用于非胃肠道给药的药物组合物含有活性化合物的水溶液。对于注射目的，本发明的药物组合物在水性溶液中制备，优选Hank’s溶液、Ringer’s溶液或生理适合的缓冲液如缓冲生理盐水。注射用水悬液可以含有增加悬液粘度的物质(如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖)。此外，活性化合物的悬液可以制备为适当的油性悬液。适当的亲脂性溶剂或介质包括脂肪酸如麻油、合成脂肪酸酯如油酸乙酯或三甘油酯，或脂质体。如果必要，悬液可以含有允许制备高浓度溶液的稳定剂，或用于增加所述化合物溶解性的适当药物成分或试剂。
对于局部给药，如肺部给药、经气道给药或鼻内给药，制剂中可使用透过特定屏障的适当通透剂。这种通透剂在本领域公知。
本发明药物组合物可以用与本领域已知方法相似的方法制备(如常规混合、溶解、造粒、制备糖衣剂、淘析、乳化、胶囊化、包合或冻干)。
因此，应该理解，根据本领域已知技术，可以容易的实施适用于向呼吸系统给药的方法。例如，应该理解气道内给药或经气道吸收优选的可适于用喷雾或吸入的形式包括微粒如干粉。如此处所用，例如，本发明适于经定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器施用。对于鼻腔给药，应该理解水溶液也适合。对于肺部给药，应该理解优选使用与气道给药相似的剂量或甚至更细的微粒。干粉制造可通过选自以下之一的方式球磨、珠磨、喷射磨、ultimaizer、研钵、石磨、喷雾干燥和超临界流体。对于气道给药，理想的干粉的气体动力学平均粒径典型是约0.01至约50μm，优选约0.1至约30μm，更优选约0.1至约10μm。对于肺部给药，考虑到递送入肺泡，优选制造具有气体动力学平均粒径约3μm或更小的颗粒，但本发明不限于此。术语“气体动力学平均粒径”指沉降速率与所研究颗粒相同、其密度为1(g/cm3)并具有球形的粒径。可基于颗粒沉降距离的差异或颗粒加速时惯性差异进行这种粒径的测定。例如，阶式碰撞取样器等通过分级这些颗粒而捕集颗粒。本发明使用这种气体动力学平均粒径的原因是基于一种理论，其中经呼吸而吸入身体的沉积到每个位点上的颗粒的比例可以用气体动力学平均粒径确定。典型的，动态光散射(例如，用可从HORIBA获得的LB-550)或激光衍射(例如用可从HORIBA获得的LB-500)、离心沉降(例如可从HORIBA获得的CPA-500)等可用于测定。如此处所用，术语“动态光散射”指用激光照射溶液中颗粒并从输出散射光的随时间波动获得布朗运动速率(分散效率)而测量粒径的方法。激光衍射法是用光散射现象(Fraunhofer现象)和米氏散射现象的方式获得粒径的方法。离心沉降渗透方法是通过在介质中沉降的颗粒直径与沉降速度之间关系而测量粒径的方法。
优选的，在非胃肠道给药的情况下，如向受影响部位的细胞或预定组织的细胞局部给药，本发明药物组合物可以含有合成或天然存在的亲水聚合物作为载体。这种亲水聚合物的实例包括羟丙基纤维素和聚乙二醇。本发明的诱饵化合物可与上述亲水聚合物在适当溶剂中混合。可用例如空气干燥的方法去除溶剂。所得化合物可成形为预期形式如片，然后可给予靶位点。这种含亲水聚合物的制剂具有低含水量、优异的储存期限，并具有优异的保持所述诱饵化合物的能力，因为使用时所述制剂吸水并变成凝胶。
这种片可以包括亲水片，通过混合多元醇与上述组合物成分相似的化合物如纤维素或淀粉、或其衍生物、合成聚合化合物等、并调节片的硬度而获得。
这种片可以在腹腔镜下放置在靶位点内。当前，腹腔镜手术已经显著的发展为一项非侵入性技术。通过组合本发明的药物组合物以及腹腔镜技术，可以提供可重复使用的治疗疾病的方法。
作为替代方案，当核酸或其修饰物用作诱饵时，本发明药物组合物有利地使用通常在基因导入方法中使用的形式，如用仙台病毒(HVJ)等的膜融合脂质体制剂、用细胞内吞等的脂质体制剂、含阳离子脂的脂质体制剂如Lipofectamine(LifetechOriental)等，或用逆病毒载体、腺病毒载体等的病毒制剂。具体而言，优选膜融合脂质体制剂。
所述脂质体制剂是以下脂质体构造物的任一种大单层囊泡(LUV)、多层囊泡(MLV)和小单层囊泡(SUV)。LUV具有200-1000nm的颗粒系统。MLV具有400-3500nm的颗粒系统。SUV具有20-50nm的颗粒系统。用仙台病毒等的膜融合脂质体制剂优选使用具有200nm-1000nm颗粒体系的MLV。
对制备脂质体的方法没有特别限制，只要脂质体能保留诱饵即可。脂质体可用常用方法制备，例如，反相蒸发法(Szoka，F et al.，Biochim.Biophys.Acta，Vol.601559(1980))、醚注入法(Deamer，D.W.Ann.N.Y.Acad.Sci.，Vol.308 250(1978))、表面活性剂法(Brunner，J et al.Biochim.Biophys.Acta，Vol.455 322(1976))等。
用于形成脂质体的脂的实例包括磷脂、胆固醇、氮脂(nitrogen lipids)等。一般来说，优选磷脂，包括天然存在的磷脂，如磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酸、心磷脂、鞘磷脂、卵黄卵磷脂、大豆卵磷脂、溶血卵磷脂等，或用常用方法氢化的对应磷脂，还有合成磷脂，如联十六烷基磷酸酯(dicetylphosphate)、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、桐酰磷脂酰胆碱(eleostearoylphosphatidylcholine)、桐酰磷脂酰乙醇胺、桐酰磷脂酰丝氨酸等。
包括这些磷脂的脂类可以单独使用，或至少两种组合使用。在此情况下，分子内含具阳离子基团的原子团如乙醇胺、胆碱等的脂类可用于增加带负电诱饵核酸的结合速率。除了用于形成脂质体的主要磷脂以外，可以使用添加剂如胆固醇、硬脂胺、α-生育酚等，它们已被公认为形成脂质体的添加剂。
由此获得的脂质体还可含有促进膜融合的物质，如从仙台病毒纯化的膜融合促进蛋白、灭活仙台病毒等，以加速吸收入受影响部位的细胞或预定组织的细胞。
制备脂质体制剂的示例性方法将在下面具体描述。例如，上述用于形成脂质体的物质与胆固醇一起溶于有机溶剂如四氢呋喃、氯仿、乙醇等中。所得溶液放入适当容器，随后减压去除溶剂，从而在容器内壁形成可形成脂质体物质的膜。将含诱饵的缓冲溶液加入容器中，随后搅拌。如果必要将上述促进膜融合的物质加入所得脂质体中，随后分离脂质体。由此获得的含诱饵脂质体可悬于适当溶剂中，或可加以冻干并在以后分散于适当溶剂中。所得悬液可用于治疗。可在分离脂质体之后和使用之前的中间时期加入促进膜融合的物质。
如此处所用，术语或“治疗(treatment或therapy)”指当患者感染疾病或障碍时防止这种疾病或障碍的恶化，优选至少维持现状，更优选缓解，更优选消退。
如此处所用，术语“预防(prophylaxis或prevention)”当针对疾病或障碍时指在这种状态出现之前进行一种处理从而使这种状态不会发生。因此，对于疾病或障碍而言，它包括这种状态的防止、延迟等，以及恶化的防止。
如此处所用，对于疾病、障碍或病症而言，术语“处理(treatment)”的最广义含义指对疾病、障碍或病症的任何医学行为，包括诊断、治疗、预防、预后等的任何行为。
通常，用于药物治疗呼吸系统疾病如哮喘的药物分为缓解剂和控制剂，其中所述缓解剂是用于减轻发作的发作处理药物，所述控制剂是用于预防发作的长期控制药物。应该理解，NF-κB可用于预防和治疗。这具体是因为防止发作基本是哮喘的根本性治疗，更重要的是具有根本性治疗效果，而缓解发作剂则没有这种效果。一旦明白本发明可用于其它疾病如鼻炎、COPD等，它也可用于治疗。另一方面，一旦明白本发明可用于治疗，那么它也可用于预防。因此，应该明白在本发明中当已知预防或治疗的适当剂量时，本领域技术人员将能从已知剂量计算用于治疗或预防的适当剂量。
本发明药物组合物包括含可达到诱饵化合物预定目的的有效量诱饵化合物的组合物。“预防有效量”、“治疗有效量”和“药理有效量”是本领域技术人员公知的术语，指产生预定药理效果如预防或治疗效果的药剂有效量。因此，预防有效量是足以避免发生症状的量，治疗有效量是足以降低待治疗疾病表现的量。确认对预定应用的有效量(如治疗有效量)的有用测试是测量从目标疾病的恢复程度。实际给药量取决于待治疗个体。优选优化该量以获得预期效果，而没有显著副作用。确定治疗有效量在本领域技术人员的能力范围内。
可用细胞培养测试或任何适当动物模型初步估计任何化合物的预防或治疗有效量。动物模型用于获得预期浓度范围和给药途径。之后，这些信息可用于确定用于向人给药时的剂量和途径。
预防和治疗有效量分别指足以预防疾病发生的量，和导致疾病的症状或状态改善的诱饵化合物的量。这种化合物的治疗效果和毒性可用标准药学方法在细胞培养物或试验动物中确定(如ED50，对群体中50％治疗有效的剂量；LD50，导致群体中50％死亡的剂量)。治疗和毒性作用的剂量比是治疗指数，它可以表示为ED50/LD50的比。优选表现高治疗指数的药物组合物。从细胞培养测试和动物研究中获得的数据可用于配制用于人的剂量范围。这些化合物的剂量优选位于包括ED50同时很少或没有毒性的循环浓度范围内。这种剂量可根据所用剂型、患者易感性和给药途径而在此范围内变化。作为实例，可根据患者年龄和其它情况、疾病类型、所用诱饵类型等适当选择诱饵剂量。例如，在血管内给药、肌肉内给药、关节内给药或涂敷于皮肤的情况下，一般可以每天一次到几次施用1μg到100mg。
确切剂量由各医生根据待治疗患者的状况选择。调节剂量和给药以提供足够水平的活性部分或达到预期效果。待考虑的其它因素包括疾病状态的严重程度(如肿瘤大小和位置)；患者的年龄、重量和性别；饮食限制时间和给药频率、潜在药物相互作用、反应易感性和对治疗的抗性/反应)。根据具体制剂的半衰期和清除速率，持续作用的药物组合物可以每3-4天、每周或每两周施用一次。具体剂量和递送方法的指导在本领域已知的出版物中提供。
根据疾病类型、待使用诱饵类型等，含诱饵作为主要成分而制备的药物产品可以经多种方式施用。例如，对于哮喘、COPD等，雾化器型吸入器如MDI、BDI或喷雾器等可用于吸入。例如对于鼻炎，可使用吸收和吸入进行给药。
常规用作经鼻腔、气道和鼻通路给药方法等的吸入方法将在下面描述。在气道内给药剂型、经气道吸收剂型或经鼻吸收剂型中，通常优选制备合剂(mist)形式的药物溶液或作为细粉末(干粉)。通常，所形成药物溶液可经喷雾器的方式吸入，加工成粉末的那些可用加有药物的气雾化类型的器具MDI(定量喷雾式吸入器)或呼出吸入系统DPI(干粉吸入器)吸入。
对于粉末吸入器，现有两种类型用于快速和深度吸入，“干粉吸入器(DPI)”和延迟吸入类型“定量喷雾式吸入器(MDI)”。
DPI又分成三类多剂量储器(产品名称；Turbuhaler，得自AstraZeneca)、多单位剂量(产品名称；Accuhaler/Diskus，得自GSK)、单位剂量(很多制造商)。
吸入器指由口端(mouth piece)和药筒(管)组成的药盒，通常管两端经铝箔密封使用。使用之前，将管装上口端以刺破铝箔，从而允许吸入内部的粉状药物。
另一方面，可经喷雾器或呼吸器、人工呼吸器的器具吸收药物溶液。喷雾器产生的药物气溶胶速度缓慢并在空气中流动，从而使任何人容易吸收药物，这是其优点。
珠磨是用于研磨和分散的装置，经向容器中加入珠子、旋转中心转轴以移动珠子、递送物质到珠子并研磨珠子而提供。
喷射磨是经高压气流而研磨颗粒的装置，将颗粒加速到约声速在气流中引起碰撞从而研磨颗粒。
ultimaizer是用于微粒化的装置，其中是经过使用经气体如空气、氮气等而加压雾化或加压的浆状物质在极端速度下互相碰撞粉体。
超临界流体微粒化是经过喷雾干燥溶于溶剂中药物的方式而制造微粒的方法，其中通过从连接于加压容器内的喷嘴并溶于超临界CO2而快速膨胀。
用于本发明的干粉的平均粒径不限制，但通常在约0.01-约50μm，优选约0.05μm-约30μm，更优选约0.1μm-约1μm。
当以位点选择性方式给药时，为作用于气管，通常要求气体动力学平均粒径约10-约30微米；为作用于支气管，通常要求气体动力学平均粒径约3-约10微米；为作用于肺泡，通常要求气体动力学平均粒径约3微米或更小，优选气体动力学平均粒径约2微米或更小，并优选要求均匀粒径。
本发明的NF-κB剂量不限制于特定值，但当以干粉用于气道内给药或经气道吸入时，剂量通常是每个成年个体10μg-100mg/轮，优选50μg-50mg/轮，更优选10mg或更少/轮。当作为经鼻吸入剂给药时，特别是作为鼻炎滴鼻剂给药时，剂量通常是每个成年个体10μg-100mg/轮，优选50μg-50mg/轮，更优选10mg或更少/轮。根据目标疾病、状况(程度)、年龄和是否有并发症，剂量可以适当变化。
此外，本发明NF-κB诱饵可以裸形式施用，或可以在各种载体如HVJ-囊膜载体中将诱饵包括在其中施用。
制造本发明干粉时，通常使用赋形剂。
可用的赋形剂是对NF-κB无活性的，并且只要被认为作为药物添加剂使用，对这种赋形剂没有限制，例如优选包括单糖如半乳糖、甘露糖、山梨糖；二糖如乳糖、蔗糖和海藻糖等；多糖如淀粉、棉子糖、葡聚糖等；糖醇(包括甘油、赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇、甘露醇)、二元醇(包括乙二醇、丙二醇、聚乙二醇、聚丙二醇)、纤维素样聚合物(包括羟基纤维素、羟丙基纤维素)、不溶性添加剂(结晶纤维素、脱乙酰壳多糖、碳酸钙、滑石、氧化钛或硅胶(氧化硅))或其混合物。
喷剂形式的气溶胶系统例如包括内含推进剂的容器，也在开发无推进剂的气溶胶系统。此外，气溶胶系统中推进剂包含与常规添加剂如乳糖一起的活性成分。由这些成分组成的组合物决定气溶胶吸入剂的特性，也即，例如颗粒分布、递送速率、粘度等。
气溶胶可以作为两相气溶胶(即气体和液体)或三相气溶胶(气体、液体和固体或液体)获得。两相气溶胶由溶于液化推进剂和喷雾推进剂中的活性物质溶液组成。溶剂例如包括推进剂或推进剂和醇或丙二醇等的混合物。聚乙二醇用于改善活性物质的溶解度。
三相系统包括悬剂或乳剂，每种包括与混合推进剂一起的一种或多种活性成分。悬剂包括经常规添加剂如润湿剂和/或固体载体如滑石或胶体二氧化硅的方式分散于推进剂系统中的活性成分。如果可能，使用已知推进剂如烃以防止破坏臭氧层。
只有如果吸入溶液雾化成1-10μm大小范围的极小颗粒，吸入才有可能。优选吸入其中微细分布的气溶胶。在除上述以外的常规气溶胶情况下，优选不吸入。为获得关于气溶胶吸入剂的详细信息，例如可参考药典如日本药典、美国药典等，它们的全部内容引入此处作为参考。
根据本发明使用的脂质体优选是0.1μm-2μm的大小，特别优选0.4μm。具体而言，优选使用单层脂质体。用挤出加工装置或高压过滤可以实现脂质体制备。例如通过将干脂膜重构于期望液体中可以制备脂质体(例如，Parthasarathy et al.，CancerChemother.and Pharmacol.1999，43(4)，277-283)。由此而制备所谓的多层脂质体(即在水性核心周围有多个脂层的脂质体)。这种脂质体的大小极其均匀。
另一方面，本发明提供预防或治疗肺组织的系统，其含有向肺给药的器具和适于肺给药形式的NF-κB诱饵。应该明白，只要系统利于向肺施用药剂，这种系统可以是任何形式。实现肺给药的这种器具例如包括但不限于吸入装置、支气管镜等。
在优选实施方案中，所用的NF-κB诱饵可以是任何形式，如干粉、脂质体、微粒等。
在一个实施方案中，用于本发明组合物中的NF-κB为有效浓度。这种浓度可以在简单的体外试验中确定。这种试验包括但不限于例如，经闪烁曲线等方式确定放射性同位素(如I125)标记的NF-κB诱饵的方法。优选的，有利地使用适于临床使用的闪烁曲线。这是因为它能用大型动物如狗进行确认。
在优选实施方案中，所用NF-κB诱饵可施用于期望组织如肺组织。这种选择性给药可通过描述为本发明系统中优选给药器具如吸入器或支气管镜的优选器具实现。因此，更优选的，NF-κB诱饵基本上不施用于除期望组织如肺以外的其它组织。如果NF-κB诱饵施用于除期望组织以外的其它组织，它可能引起意料之外的事件，导致出现副作用。
可使用的肺给药系统是能将本发明的NF-κB诱饵递送到肺的任何系统。这种肺给药系统包括吸入器或支气管镜，并包括Olympus Inc.商业供应的支气管镜系统。
下面将以实施例方式描述本发明。这些实施例只用于说明目的。本发明不限于这些实施例或本发明以上的详细描述，而只受所附权利要求的限制。
实施例下面将以实施例方式描述本发明，这些实施例仅用于说明本发明，而非要限制本发明。
(实施例1制备诱饵)以下诱饵寡聚脱氧核苷酸已被制备。
所用诱饵序列如下此处所用诱饵NF-κB诱饵(SEQ ID NO1)5′-CCT-TGA-AGG-GAT-TTC-CCT-CC-3′3′-GGA-GGG-AAA-TCC-CTT-CAA-GG-5′打乱的NF-κB诱饵(SEQ ID NO2)5′-TTG-CCG-TAC-CTG-ACT-TAG-CC-3′3′-GGC-TAA-GTC-AGG-TAC-GGC-AA-5′NF-κB诱饵变体(SEQ ID NO3)5′-GGG(A/G)(C/A/T)T(T/C)(T/C)(C/A/T)C-3′(SEQ ID NO3)3′-CCC(T/C)(G/T/A)A(A/G)(A/G)(G/T/A)G-5′这些诱饵溶液以100mg/管保存于-20℃直至使用。
(实施例2使用大鼠哮喘模型的NF-κB诱饵治疗)接着，建立哮喘模型以证明根据本发明的诱饵的效果。基本基于描述于Eur JPharmacol.1995 Dec 7；293(4)401-12中的方法建立哮喘模型。
(动物和致敏方法)从Charles River，Japan获得Brown Norway大鼠(8-10周龄；重200-300g)。基于大阪大学在动物福利精神下制定的规定繁殖并维持大鼠。经颈部皮下注射向这些大鼠施用溶于1ml无热源盐水中的4mg氢氧化铝和1mg卵清蛋白(OVA；Sigma，grade V)进行致敏。含3×109热灭活细菌的百日咳博代氏菌(Bordetella pertussis)疫苗作为佐剂用于腹膜内注射。与上述相同但缺少卵清蛋白的溶液作为对照用于腹膜内注射，从而提供阴性对照。
(制备仙台病毒囊膜载体)如下制备仙台病毒(HVJ)囊膜载体(HVJ-E)。简单的说，经紫外照射(99mJ/cm2)灭活病毒悬液(1.0×104血凝单位(HAU))，并与诱饵寡核苷酸(200μg)和0.3％Triton-X混合。离心后用1ml平衡盐溶液(BSS；10mM Tris-Cl，pH7.5，137mM NaCl，和5.4mM KCl)洗涤灭活病毒悬液，以去除表面活性剂和未掺入的寡核苷酸。离心后将囊膜载体悬于适量磷酸盐缓冲液(PBS)中。载体在4℃保存直至使用。
(实验方案)致敏后12天，如下处置大鼠。使用口腔气管(orotracheal)滴注，分别施用(1)0.5ml生理盐水(对照)；(2)500μg裸诱饵/0.5ml；(3)200μg用HVJ-E 1.0×104HAU处理的诱饵/0.5ml；(4)500μg用HVJ-E 2.5×104HAU处理的诱饵/0.5ml HVJ-E；(5)HVJ-E 2.5×104HAU/0.5ml。在第14天，用5％气溶胶化的卵清蛋白利用喷雾器(PARIturbo)激发5分钟。气流速率是7-8升/分钟。结果诱导产生了气道过敏。实验方案的流程图示于图1。
(导入诱饵)经鼻吸入(用气溶胶)或插管(液体、气溶胶、呼吸器)向大鼠施用诱饵。
第一个实验中，如下施用诱饵2mg×1次、1mg×2次或2mg×2次(气溶胶)或0.5mg×1次(液体给药)。
第二个实验中，如上述用HVJ-E制备诱饵并施用。
(支气管肺泡灌洗(BAL))卵清蛋白激发后24小时收集BAL液。腹膜内注射超剂量戊巴比妥钠对大鼠实施安乐死。用5ml磷酸盐缓冲液(PBS；137mM NaCl，10mM磷酸钠缓冲液pH7.4，2.7mM KCl)实施BAL 4次。用血细胞计数器确定BAL液中的细胞总数。通过用Diff-Quick染料(IBMC Inc.，Chicago，ILCatalog# K7124)计数300余个细胞来实施差异细胞计数。
(结果)图2显示第一次实验中BAL中嗜酸性粒细胞百分比的表现。发现卵清蛋白激发引起嗜酸性粒细胞数的统计学显著增加(p＜0.01)。激发以后进行气溶胶处理或液体处理。作为结果，在每种情况下，嗜酸性粒细胞增加被统计学显著的抑制(每组p＝0.08)。因此，证明了本发明诱饵对引起嗜酸性粒细胞异常的疾病如哮喘等是有效的，与给药方法无关。
图3显示使用仙台病毒作为另一种给药方法时本发明诱饵的效果。卵清蛋白激发后用上述HVJ-E诱饵药方进行处理。结果，HVJ-E诱饵具有比裸诱饵显著更高的效果(见图4)。具有2.5倍量的HVJ-E制剂具有统计学显著更高的治疗效果。证明这种HVJ-E效果不是由于载体自身。因而本发明中证明HVJ-E制剂有更高治疗效果。
(实施例3用变体治疗)接下来，代替上述实施例中使用的诱饵，在哮喘模型大鼠中使用诱饵变体。确认是否能用诱饵变体获得相同效果。此处，使用NF-κB的共有序列5′-GGG(A/G)(C/A/T)T(T/C)(T/C)(C/A/T)C-3′(SEQ ID NO3)作为变体。因此证明任何被NF-κB识别的序列都可用于治疗和预防受NF-κB调节的基因表达引起的疾病、障碍和/或病症，和嗜酸性粒细胞异常引起的疾病、障碍和/或病症。
除了使用不同诱饵，按上述实施例进行相同实验。对于主动脉瘤或哮喘，已经证明表现出治疗和预防效果。因此，本发明不限于特定NF-κB诱饵。已经证明，只要保持生物活性(即结合转录因子序列的活性)，任何变体NF-κB诱饵都具有相同治疗和预防效果。
(实施例4NF-κB诱饵对大鼠哮喘模型的效果)接下来，阐明NF-κB对大鼠哮喘模型的效果。在本实施例中，施用裸NF-κB诱饵的粉末吸入剂。
(制备NF-κB诱饵粉末吸入剂)NF-κB(100mg)与18g氧化锆珠(直径3.0mm)一起位于透明玻璃容器中(大小25.5mm，高48.5mm)，并以200rpm在球磨旋转摇床(Asahi Rika)上研磨10小时。
将乳糖(50g，产品名Pharmatose 450M，得自DMV)在喷射磨(产品名A-O喷射磨，得自Seishin Enterprise)中研磨。
为确定由此获得的NF-κB诱饵和乳糖的大小，使用扫描电子显微镜(S-570，得自HITACHI)观察。结果示于图5(NF-κB诱饵)和图6(乳糖)。照片放大倍数是×1000，每个颗粒的大小小于10μm。
通常认为使用10μm或更小施用于气管是理想的，但本发明不限于此。此外，已知使用3μm或更小的那些允许施用到肺泡中。
研磨后NF-κB诱饵(100mg)、研磨后乳糖(3700mg)和轻无水硅酸(Aerosil 200，得自Japan Aerosil Inc.；200mg)在小研磨器(Shibata Kagaku Inc.制造)中混合1分钟，得到NF-κB诱饵混合物粉末(25μg/mg)。
NF-κB诱饵混合物粉末(25μg/mg；1000mg)、研磨后乳糖(2850mg)和轻无水硅酸(150mg)在小研磨器中混合1分钟，得到NF-κB诱饵混合物粉末(6.25μg/mg)。
NF-κB诱饵混合物粉末(6.25μg/mg；800mg)、研磨后乳糖(3040mg)和轻无水硅酸(160mg)在小研磨器中混合1分钟，得到NF-κB诱饵混合物粉末(1.25μg/mg)。
NF-κB诱饵混合物粉末(25μg/mg；400mg)、研磨后乳糖(3420mg)和轻无水硅酸(180mg)在小研磨器中混合1分钟，得到NF-κB诱饵混合物粉末(2.5μg/mg)。
NF-κB诱饵混合物粉末(2.5μg/mg；400mg)、研磨后乳糖(3420mg)和轻无水硅酸(180mg)在小研磨器中混合1分钟，得到NF-κB诱饵混合物粉末(0.25μg/mg)。
NF-κB诱饵混合物粉末(0.25μg/mg；800mg)、研磨后乳糖(3040mg)和轻无水硅酸(160mg)在小研磨器中混合1分钟，得到NF-κB诱饵混合物粉末(0.05μg/mg)。
(实验步骤)向雄性BN大鼠股肌施用抗原卵清蛋白OA(1mg/大鼠)，并向腹腔施用百日咳博代氏菌(Bordetella pertussis)(1.25×1010/大鼠)并主动致敏。致敏后12或13天，麻醉下吸入盐水中的0.5％抗原，并产生变态反应。吸入抗原3天后，研究气道对乙酰胆碱(ACh)的反应性。用两分钟间隔吸入评价气道对ACh的反应性。每次吸入进行10秒，而浓度从0.1mg/nl每次依次加倍。从吸入ACh开始气道压力增加5cmH2O时的ACh浓度计算为激发浓度(Provocation Concentration)5cmH2O(PC5cmH2OACh)ACh(mg/mL)。确定气道反应性以后，进行气道洗涤，并计算浸润到气道中的细胞数。作为阴性对照，准备致敏大鼠吸入盐水的组和致敏大鼠吸入抗原与溶剂的对照组。
此外，在吸入抗原之前3天，4克由前述方法制备的NF-κB诱饵混合物粉末(0.05、0.25、1.25和6.25μg/mg)在麻醉下被大鼠吸入。本实施例中所用BN大鼠的平均体重是200g，因而NF-κB诱饵的剂量分别是1μg/kg、5μg/kg、25μg/kg和125μg/kg。
(实验结果)如图7和8所示，(图7和8NF-κB诱饵在大鼠哮喘模型中的效果。图例如下##p＜0.01vs盐水组(学生t-检验)；*，**分别表示p＜0.05，0.01vs对照组(Dunnett’s多重比较检验))，与盐水对照组比较，观察到在对照组中气道反应性(气道超敏性)和主要由嗜酸性粒细胞组成的炎症细胞的浸润明显增强。NF-κB诱饵以剂量依赖的方式从5μg/kg开始抑制这些变化，在25和125μg/kg达到最大抑制。这阐明了NF-κB诱饵粉末吸入剂在大鼠哮喘模型中的疗效。
表2大鼠哮喘模型附表
(实施例5NF-κB诱饵对变应性鼻炎模型的效果)本实施例证明NF-κB诱饵对大鼠鼻炎模型的效果。
(实验方法)抗原2，4-二硝基苯基卵清蛋白(DNP-OA)(1mg/大鼠)和百日咳博代氏菌(1.25×1010)皮给予雄性SD大鼠四肢的足垫上，进行主动致敏。致敏后9天，施用抗原到两侧鼻中(10％DNP-OA×0.02mL/位点×2位点)，由此引起变态反应。发生鼻炎后6小时，静脉注射施用染料(Pontamin Sky-Blue)，处理后9小时当观察到峰值时解剖所述对象。取出鼻中隔周围的组织并测定染料泄漏水平。准备向致敏大鼠鼻中给予盐水的阴性对照组和向致敏大鼠鼻中给予抗原与溶剂的对照组。以5和125μg/mL浓度将NF-κB诱饵溶解于盐水，之前3天每侧鼻孔中滴入20μL，使得剂量分别是0.2μg和5μg。本实施例使用的SD大鼠的平均体重是200g，因而NF-κB诱饵的剂量分别是1μg/kg和25μg/kg。
(实验结果)图9的图例如下##p＜0.01vs盐水组(学生t-检验)；*，**分别表示p＜0.05，0.01vs对照组(Dunnett’s多重比较检验)。如图9所示，其中显示NF-κB诱饵在大鼠鼻炎模型中的效果，与阴性对照(盐水)组比较，观察到阳性对照组的血液渗透性明显增强，因此可以确认出现鼻炎症状。另一方面，NF-κB以体积依赖的方式从1μg/kg开始抑制血液渗透性增强，并在25μg/kg显示基本完全抑制血液渗透性增强。由此证明了NF-κB诱饵在大鼠鼻炎模型中的疗效。
表3鼻炎附表NF-kB
(实施例6制备比格犬COPD模型)皮下注射动物麻醉剂(Selactal，Bayer)麻醉比格犬(体重9-14kg)。以气管内管的方式将支气管镜插入气管中。猪胰弹性蛋白酶(50mg；3750单位，得自NacalaiTesque)溶于5ml盐水，并将雾化导管(得自Olympus等)插入周围气管并分散到整个右肺5到10次。分散后约1个月过去后用作COPD模型肺。左肺用作正常肺进行比较。
(实施例7向比格犬模型施用NF-κB诱饵)根据实施例4的方法研磨NF-κB诱饵来制备粒径为3μm或更小的微粒粉末。
作为NF-κB诱饵混合粉末以扩散方式用支气管镜进入整个右肺中5到10次，从而将NF-κB(200μg)分散入COPD模型肺中。为观察NF-κB诱饵治疗前后之间的变化，用MRI测量血流并比较。
(比较MRI结果)MRI用于准备全身麻醉后比格犬的仰卧位照片。在右颈内动脉中确认静脉途径并注射常用造影剂，约3秒后对肺内血管进行造影。由于造影作用，MRI信号强度已被增强。MRI信号强度依赖于血流，因而血流越多，信号越强。由于肺动脉血液体积之间的个体差异，为消除这些个体差异，接受给药的右肺的MRI信号值除以正常左肺的值，用于左侧和石侧之间的比较。注射3ml常规造影剂后开始成像。对于注射造影剂后约120秒，拍照100个圆截面并连续测量和分析限于肺实质的截面的信号值。还计算MRI肺内血流体积的左右比值。基于这些结果，测量左右信号值的比值，观察到正常犬中左右肺没有区别，而在COPD模型中右肺血流降低，NF-κB诱饵治疗模型中血流被改善，并接近正常状态。也就是说，认识到施用NF-κB诱饵提供显著的血流改善。
尽管此处已经描述某些优选实施方案，除了所附权利要求列出的以外，不应理解为这些实施方案是对本发明范围的限制。在阅读用具体和优选的实施方案在此处的说明以后，根据本领域的普通知识，本发明的各种其它修饰和等价物对于本领域技术人员将是显而易见的，并可由他们容易的实现。本文引用的所有专利、公开的专利申请和出版物通过引用并入，就像全文在本文中列出一样。
工业实用性药物组合物或载体用于治疗疾病，所述疾病与受NF-κB调节的基因表达或嗜酸性粒细胞异常引起的疾病相关。局部施用本发明的药物组合物是非侵入性的，并可以重复提供。
序列表<110>安琪士多摩奇株式会社森下龙一青木元邦荻原俊男川崎富夫牧野宽史肉仓孝小柳晶裕<120>含NF-KB诱饵的用于治疗和预防呼吸疾病的药物组合物及其使用方法<130>AN011-1PCT<150>PCT/JP03/08740<151>2003-07-09<160>3<170>PatentIn version 3.2<210>1<211>20<212>DNA<213>人工的<220>
<223>诱饵<400>1ccttgaaggg atttccctcc 20<210>2<211>20<212>DNA<213>人工的<220>
<223>诱饵<400>2ttgccgtacc tgacttagcc 20<210>3<211>10<212>DNA<213>人工的<220>
<223>诱饵<400>3gggrhtyyhc10
权利要求
1.一种药物组合物，其用于治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症，包含NF-κB诱饵和药学上可接受的载体。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述NF-κB诱饵是NF-κB诱饵或其衍生物、变体或片段，并且所述衍生物、变体或片段具有生物活性。
3.根据权利要求1的组合物，其中所述NF-κB诱饵是SEQ ID NO1列出的诱饵。
4.根据权利要求1的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病。
5.根据权利要求1的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD、哮喘或鼻炎。
6.根据权利要求1的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD。
7.根据权利要求1的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是哮喘。
8.根据权利要求1的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是鼻炎。
9.根据权利要求1的组合物，其中所述药学上可接受的载体是亲水聚合物、碳水化合物或不溶性添加剂。
10.根据权利要求1的组合物，其中所述药学上可接受的载体是选自脂质体、乳糖、海藻糖、蔗糖、甘露醇和木糖醇的至少一种类型。
11.一种组合物，其用于治疗和/或预防与嗜酸性粒细胞异常相关的呼吸系统疾病、障碍和/或病症，包含NF-κB诱饵和药学上可接受的载体。
12.根据权利要求11的组合物，其中所述NF-κB诱饵是NF-κB诱饵或其衍生物、变体或片段，并且所述衍生物、变体或片段具有生物活性。
13.根据权利要求11的组合物，其中所述NF-κB诱饵是SEQ ID NO1列出的诱饵。
14.根据权利要求11的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是气道炎性、气道狭窄性或鼻腔炎性疾病、障碍和/或病症。
15.根据权利要求11的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD、哮喘或鼻炎。
16.根据权利要求11的组合物，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是哮喘或鼻炎，所述哮喘选自支气管哮喘、小儿哮喘、变应性哮喘、特应性哮喘、类固醇抵抗型哮喘、非变应性哮喘、内因性哮喘、外因性哮喘、阿司匹林哮喘、心脏性哮喘和感染性哮喘；所述鼻炎选自变应性鼻炎、花粉病、急性鼻炎、慢性鼻炎、肥大性鼻炎、慢性窦炎(积脓症)和鼻中隔偏移。
17.根据权利要求11的组合物，其中所述药学上可接受的载体是亲水聚合物或碳水化合物。
18.根据权利要求11的组合物，其中所述药学上可接受的载体是选自脂质体、乳糖、海藻糖、蔗糖、甘露醇和木糖醇的一种或多种。
19.一种适于施用于呼吸系统的呼吸系统制剂，包含根据权利要求1-18中任意一项的组合物。
20.根据权利要求19的制剂，其中所述施用于呼吸系统包含施用于气道内或经气道吸收。
21.根据权利要求19的制剂，其中所述施用于气道是经雾化或吸入施用于气道。
22.根据权利要求19的制剂，其中所述施用于气道包含经定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器施用。
23.根据权利要求19的制剂，其中所述组合物以干粉提供。
24.根据权利要求23的制剂，其中所述干粉是经选自下组之一的方式生产的微粒球磨、珠磨、喷射磨、ultimaizer、研钵、石磨、喷雾干燥和超临界流体。
25.根据权利要求23的制剂，其中所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.01值至约50微米。
26.根据权利要求23的制剂，其中所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.05至约30微米。
27.根据权利要求23的制剂，其中所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.1至约10微米。
28.根据权利要求19的制剂，其中提供的每轮剂量是10μg-100mg。
29.根据权利要求19的制剂，其中提供的每轮剂量是50μg-50mg。
30.根据权利要求19的制剂，其中提供的每轮剂量是10mg或更少。
31.根据权利要求19的制剂，其中所述施用于呼吸系统包含经鼻吸收。
32.根据权利要求31的制剂，它是选自滴鼻剂、喷鼻剂、喷雾剂、呼吸器用剂和粉末给药制剂的制剂。
33.根据权利要求31的制剂，它是用于鼻炎的滴鼻剂。
34.根据权利要求19的制剂，其中NF-κB诱饵包封在HVJ-E囊膜载体中。
35.根据权利要求19的制剂，其中所述施用于呼吸系统包含施用于肺。
36.治疗呼吸系统的装置，包含根据权利要求1-18中任意一项的组合物，以及将所述组合物施用于呼吸系统的器具。
37.根据权利要求36的装置，其中所述施用于呼吸系统的器具包含选自下组的器具用于向肺给药的器具、用于经气道给药的器具、用于经气道吸收的器具和用于经鼻吸收的器具。
38.根据权利要求36的装置，其中用于向气道给药的器具包含定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器。
39.制造包含NF-κB诱饵的颗粒的方法，包括以下步骤A)提供所述诱饵和药学上可接受的载体；B)将所述诱饵和载体干燥并加热到足以造粒的温度；和C)获得具有预期颗粒大小的颗粒。
40.根据权利要求39的方法，其中所述温度是50摄氏度或更低。
41.根据权利要求39的方法，其中所述温度是100摄氏度或更低。
42.根据权利要求39的方法，其中所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.01至约50微米。
43.根据权利要求39的方法，其中所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.05至约30微米。
44.根据权利要求39的方法，其中所述干粉的气体动力学平均粒径为约0.1至约10微米。
45.治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的方法，包括以下步骤A)向对象的呼吸系统施用含NF-κB诱饵和药学上可接受载体的组合物。
46.根据权利要求45的方法，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是气道炎性疾病、气道狭窄或鼻腔炎性疾病。
47.根据权利要求45的方法，其中所述呼吸系统疾病、障碍和/或病症是COPD、哮喘或鼻炎。
48.根据权利要求45的方法，其中所述施用于呼吸系统包含施用于气道内或经气道吸收。
49.根据权利要求45的方法，其中所述施用于呼吸系统是经雾化或吸入施用于气道。
50.根据权利要求45的方法，其中所述施用于气道包含经定量喷雾式吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或喷雾器施用。
51.根据权利要求45的方法，其中所述施用经选自滴鼻剂、喷鼻剂、喷雾器、呼吸器和粉末给药的方式实现。
52.治疗和/或预防由嗜酸性粒细胞异常引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的方法，包括以下步骤A)向对象的呼吸系统施用含NF-κB诱饵和药学上可接受载体的组合物。
53.NF-κB诱饵在制造用于治疗和/或预防由受NF-κB调节的基因表达引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的药物方面的用途。
54.NF-κB诱饵在制造用于治疗和/或预防由嗜酸性粒细胞异常引起的呼吸系统疾病、障碍和/或病症的药物方面的用途。
全文摘要
药用组合物，用于治疗和预防由受NF－κB调节的基因表达引起的气道炎性、气道狭窄性或鼻腔炎性疾病、障碍和/或病症，该组合物含有NF－κB诱饵和药学上可接受的载体。以上疾病可以是哮喘、COPD或鼻炎。而且以上疾病可以是由嗜酸性粒细胞异常引起的疾病(例如，哮喘、鼻炎和COPD)。所述药学上可接受的载体可以是亲水聚合物、脂质体等。
文档编号A61K47/10GK1819845SQ200480019698
公开日2006年8月16日 申请日期2004年7月9日 优先权日2003年7月9日
发明者森下龙一, 青木元邦, 荻原俊男, 川崎富夫, 牧野宽史, 肉仓孝, 小柳晶裕 申请人:安琪士摩奇株式会社