专利名称：椒目提取高纯度α－亚麻酸的方法及其药物应用的制作方法
技术领域：
本发明椒目提取高纯度α-亚麻酸的方法及其药物应用属中药原料药加工技术及新药应用，尤其涉及从中药、天然药物中提取的有效成分及其制剂的制备工艺。
背景技术：
α-亚麻酸称作十八碳三烯酸，属n-3系列多烯酸，简称α-LXA，学名全顺式-9，12，15-十八碳三烯酸，非共轭立体构型，分子式为C18H30O2，它以甘油脂的形式存在于深绿色植物中，α-亚酸麻进入人体后，在酶的作用下，生成EPA和DHA，此生化过程是不可逆的，是构成人体组织细胞的重要成分，是维系人体进化、保持身体健康的必需脂肪酸，对人体的重要作用有三个方面一是具有抗血栓、抗血逆、调节血液粘稠度、降低血液中甘油三脂和胆固醇含量的作用，是降血压、降血脂药物和保健食品的重要原料；二是具有很强的增长智力、保护视力、降低血压、延缓衰老、抗过敏、抑制癌症的发生和转移的功效；三是具有抗炎症、抗心率失常及调节脑神经系统的多种功能。现代中药研究也证实，α-亚麻酸具有健脾和胃、滋补肝肾、行气开郁、活血祛瘀、消癓生肌、安神益智的功效，可有效治疗和预防癌症、血栓病、高血脂症、糖尿病和老年痴呆症。随着其重要生理功能的揭示，α-亚麻酸产品在上世纪已成为食品、药品、保健食品领域的开发热点，如“美国深海鱼油胶丸”、“北海深海狗油胶丸”等都曾一度成为热销产品，但上述产品是以深海动物为原料加工而成，不仅生产成本高，还对人体有一定副作用，近年来已将原料开发重点转移到植物类，含有α-亚麻酸的植物资源十分丰富，据目前掌握，在我国α-亚麻酸含量＞30％的植物有53种，国内食用油中α-亚麻酸含量最高的是紫苏油和亚麻油，但作为药用原料，其所含的毒副作用却成为障碍。本世纪初，利用芸香料植物花椒的种子(中药材椒目)提取的椒目仁油，用于食用油已批准批量生产，其脂肪酸中α-亚麻酸含量高于30％，由于资源丰富，生产成本低廉，无毒副作用，保健食品和药品的开发应用正在多方位进行，利用中药材椒目加工和提取高纯度α-亚麻酸及其应用也成为科研攻关热点，尤其是开发治疗和预防癌症、血栓病、高血脂症、糖尿病和老年痴呆症的国家一类中药产品更具有广阔的国内外市场前景。
发明内容
本发明的目的是利用中药材椒目为原料，采用创新的工艺技术，加工和提纯出高纯度α-亚麻酸，确保含量超过90％，成为国家一类中药新药原料药，并针对治疗和预防癌症、血栓病、高脂血症、糖尿病和老年痴呆症加工注射剂、软胶囊和片剂，为率先申报“未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效成分及其制剂”和保健食品奠定基础。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是利用中药材椒目为原料，采用椒目仁油加工技术和α-亚麻酸提纯技术，生产出α亚麻酸含量高于90％的国家中药一类新药原料药，并加工α-亚麻酸注射剂、α-亚麻酸软胶囊和α-亚麻酸片剂。高纯度α-亚麻酸分为皂化酸解、低温冷冻、尿素包合、硝酸银络合四道工艺，一是皂化酸解取100mL椒目仁油与120mL 10％NaOH溶液混合均匀，于75℃条件下反应1小时，待温度降至70℃后，加入50mL 95％乙醇，继续反应3小时，待温度降至60℃后，缓慢滴入50％硫酸，使溶液pH值至2～3，用分液漏斗分离出上层油液，水洗3次，分离出油相，得混合脂肪酸4℃保存备用；二是冷冻分离取皂化酸解所得的混合脂肪酸每100mL中加入95％乙醇100ml，在-2℃～-5℃下冷冻8～12小时，过滤，滤液回收乙醇后用水洗3次，分离出上层油相用无水硫酸镁脱水，过滤，得混合脂肪酸4℃保存备用；三是尿素包合在200mL 95％乙醇中加入100g分析纯尿素，于70℃条件下加热回流至尿素完全溶解后，加入冷冻分离后的混合脂肪酸100mL，搅拌30分钟，再依次在5℃±2℃、-6℃±2℃、-12℃±2℃下分别冷冻8～12小时，第三次冷冻后快速抽滤，回收乙醇后水洗剩余物三次，分离出油相，用无水硫酸镁脱水，过滤，得α-亚麻酸混合物4℃保存备用；四是硝酸银络合取100mL α-亚麻酸混合物加入到400mL 4mol/LAgNO3溶液中，0℃±2℃下搅拌1小时，分离水相和油相，用200mL60～90沸程的石油醚萃取水相，分离出石油醚相，回收石油醚即得含量大于90％α-亚麻酸。
得到的高纯度α-亚麻酸，产品中α-亚麻酸含量高于90％，无异臭，无酸败味，在10℃时始终保持澄明，皂化值为185-200，碘值为79-128，酸值低于0.56。加工α-亚麻酸注射剂的工艺的是原料和用量是高纯度α-亚麻酸10毫升、泊洛沙姆100毫升和注射用水加至1000毫升，加工时先取高纯度α-亚麻酸加入干烧杯中，再加入泊洛沙姆，混合均匀后随即加入适量注射用水中，混匀，再加注射用水至1000毫升，0.22μm膜除菌，以每支2毫升灌封后灭菌得成品；加工α-亚麻酸软胶囊的工艺是用高纯度α-亚麻酸为料液，采用软胶囊加工设备直接生产出装量为0.1～0.6毫升多种规格软胶囊，得成品。加工α-亚麻酸片剂的工艺是每1万片原料和用量分别是高纯度α-亚麻酸2.0kg、糊精1.25kg、淀粉7.25kg、硬脂酸镁0.15kg，加工时先将α-亚麻酸加入淀粉、糊精的混合物中，搅拌均匀，使成软材，制粒，干燥，再加入硬脂酸镁，整粒后按1000毫克压片，既得成品。
在中试中，已加工高纯度α-亚麻酸样品3批，α-亚麻酸含量为91％～98％之间，并以此为原料，分别加工出α-亚麻酸注射剂、α-亚麻酸软胶囊和α-亚麻酸片剂三种产品样品，样品质量稳定。
本发明的有益效果是利用中药材椒目加工和提纯α-亚麻酸的工艺料学规范，成本低廉，质量稳定，α-亚麻酸含量超过了90％，已达到国家一类中药原料药标准，制剂样品质量稳定，具备了申报“未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效成份及其制剂”的基本条件。
图1为椒目提取高纯度α-亚麻酸工艺流程图。
图1中从椒目仁油至第一次混合脂肪酸为皂化酸解工艺流程阶段。
图1中从第一次混合脂肪酸至第二次混合脂肪酸为低温冷冻工艺流程阶段。
图1中从第二次混合脂肪酸至第三次混合脂肪酸为尿素包合工艺流程阶段。
图1中从第三次混合脂肪酸至α-亚麻酸为硝酸银络合工艺流程阶段。
具体实施例方式
1、原材料备用(1)椒目仁油备用在花椒采摘期中收集椒目，用玉米或小麦脱皮机械先将椒目外皮层脱离内壳，形成粘糊状后在温水中洗去外皮层油脂和粉渣，并捞去空籽粒，得到完整干净的含仁光籽粒，再将光籽粒用植物油榨取设备或二氧化碳临界萃取设备加工出椒目仁油毛油，最后将毛油脱酸、脱味、脱色精炼后在5℃～-10℃低温条件下贮放一个月以上，待低温析层后取上清液过滤得到椒目仁油备用，也可购置一级食用椒目仁油备用。
(2)椒目仁油提纯α-亚麻酸化工原料备用10％氢氧化钠、95％乙醇、50％硫酸、无水硫酸镁、分析纯尿素、硝酸银，分别适量备用。
(3)制剂辅料备用注射剂辅料用表面活性剂泊洛沙姆；片剂辅料用填充剂糊精、淀粉和润滑剂硬脂酸镁，分别适量备用。
2、椒目仁油提纯高纯度α-亚麻酸方法按说明书附图中的工艺流程图，具体加工方法分为四个阶段①皂化酸解取100mL椒目仁油与120mL 10％NaOH溶液混合均匀，于75℃条件下反应1小时，待温度降至70℃后，加入50mL 95％乙醇，继续反应3小时，待温度降至60℃后，缓慢滴入50％硫酸，使溶液pH值至2～3，用分液漏斗分离出上层油液，水洗3次，分离出油相，得混合脂肪酸4℃保存备用；②低温泠冻取皂化酸解所得的混合脂肪酸每100mL中加入95％乙醇100ml，在-2℃～-5℃下冷冻8～12小时，过滤，滤液回收乙醇后用水洗3次，分离出上层油相用无水硫酸镁脱水，过滤，得混合脂肪酸4℃保存备用。
③尿素包合在200mL 95％乙醇中加入100g分析纯尿素，于70℃条件下加热回流至尿素完全溶解后，加入冷冻分离后的混合脂肪酸100mL，搅拌30分钟，再依次在5℃±2℃、-6℃±2℃、-12℃±2℃下分别冷冻8～12小时，第三次冷冻后快速抽滤，回收乙醇后水洗剩余物三次，分离出油相，用无水硫酸镁脱水，过滤，得α-亚麻酸混合物4℃保存备用。
④硝酸银络合取100mL α-亚麻酸混合物加入到400mL 4mol/L的硝酸银溶液中，0℃±2℃下搅拌1小时，分离水相和油相，用200mL60～90沸程的石油醚萃取水相，分离出石油醚相，回收石油醚即得含量大于90％α-亚麻酸，每千克椒目仁油得率为250克左右。
3、α-亚麻酸注射液生产工艺准确量取高纯度α-亚麻酸10毫升，放入干燥的烧杯中，再取泊洛沙姆100毫升，混合均匀后先加入适量注射用水中，混匀，再加注射用水至1000毫升，0.22μm膜除菌，灌封于500支安瓿中，最后于旋转式灭菌器内100度灭菌40分钟，即得产品。
4、α-亚麻酸软胶囊生产工艺用高纯度α-亚麻酸为料液，采用软胶囊加工设备，直接加工成0.1～0.6毫升多种规格软胶囊得产品。
5、α-亚麻酸片剂生产工艺每1万片原料和用量分别是高度纯度α-亚麻酸2.0kg、糊精1.25kg、淀粉7.25kg、硬脂酸镁0.15kg，加工时将淀粉与糊精混合均匀，再加入α-亚麻酸搅拌均匀，制成软材，用14-16目尼龙筛制粒，80℃左右通风干燥，在干颗粒中加入硬脂酸镁，经14目筛整粒，混匀，压成1000毫克重片剂，即得产品。
权利要求
1.一种从椒目中提取高纯度α-亚麻酸的方法，其特征是一是皂化酸解取100mL椒目仁油与120mL 10％NaOH溶液混合均匀，于75℃条件下反应1小时，待温度降至70℃后，加入50mL 95％乙醇，继续反应3小时，待温度降至60℃后，缓慢滴入50％硫酸，使溶液pH值至2～3，用分液漏斗分离出上层油液，水洗3次，分离出油相，得混合脂肪酸4℃保存备用；二是冷冻分离取皂化酸解所得的混合脂肪酸100mL中加入95％乙醇100ml，在-2℃～-5℃下冷冻8～12小时，过滤，滤液回收乙醇后用水洗3次，分离出上层油相用无水硫酸镁脱水，过滤，得混合脂肪酸4℃保存备用；三是尿素包合在200mL95％乙醇中加入100g分析纯尿素，于70℃条件下加热回流至尿素完全溶解后，加入冷冻分离后的混合脂肪酸100mL，搅拌30分钟，再依次在5℃±2℃、-6℃±2℃、-12℃±2℃下分别冷冻8～12小时，第三次冷冻后快速抽滤，回收乙醇后水洗剩余物三次，分离出油相，用无水硫酸镁脱水，过滤，得α-亚麻酸混合物4℃保存备用；四是硝酸银络合取100mLα-亚麻酸混合物加入到400mL 4mol/LAgNO3溶液中，0℃±2℃下搅拌1小时，分离水相和油相，用200mL60～90沸程石油醚萃取水相，分离出石油醚相，回收石油醚即得含量大于90％α-亚麻酸。
2.如权利要求1所述从椒目中提取的高纯度α-亚麻酸加工注射剂的工艺，其特征是原料和用量是高度纯度α-亚麻酸10毫升、泊洛沙姆100毫升和注射用水加至1000毫升，加工时先取高纯度α-亚麻酸加入干烧杯中，再加入泊洛沙姆，混合均匀后随即加入适量注射用水中，混匀，再加注射用水至1000毫升，0.22μm膜除菌，以每支2毫升灌封后灭菌得成品。
3.如权利要求1所述从椒目中提取的高纯度α-亚麻酸加工软胶囊的工艺，其特征是用高纯度α-亚麻酸为料液，采用软胶囊加工设备直接生产出装量为0.1～0.6毫升多种规格软胶囊得成品。
4.如权利要求1所述从椒目中提取的高纯α-亚麻酸加工片剂的工艺，其特征是每1万片原料与用量是高纯度α-亚麻酸2.0kg、糊精1.25kg、淀粉7.25kg、硬脂酸镁0.15kg，加工时先将α-亚麻酸加入淀粉、糊精的混合物中，搅拌均匀，使成软材，制粒，干燥，再加入硬脂酸镁，整粒后按1000毫克压片得成品。
全文摘要
本发明椒目提取高纯度α－亚麻酸的方法及其药物应用，提供了治疗癌症、血栓病、高脂血症、糖尿病和老年痴呆症纯中药原料药及多种制剂，本原料药从中药材椒目中提取，制备高纯度α－亚麻酸分为皂化酸解、低温冷冻、尿素包含、硝酸银络合四道工艺，产品中α－亚麻酸含量超过90％以上，达到国家中药一类新药原料药标准，加工的各种制剂工艺规范、成本低廉，质量稳定，应用方便，具有健脾和胃、滋肝补肾、行气开郁、活血祛淤、消癓生肌、开心益智的功效，可有效预防和治疗癌症、血栓病、高血脂症、糖尿病和老年痴呆症。
文档编号A61P7/02GK1793104SQ20051009619
公开日2006年6月28日 申请日期2005年10月18日 优先权日2005年10月18日
发明者王四旺, 王庆伟, 王剑波, 谢艳华, 杨倩 申请人:中国人民解放军第四军医大学药物研究所