专利名称：多取代黄烷并噻二唑啉类化合物及制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属有机化合物的合成方法，涉及噻二唑啉衍生物的合成方法，尤其涉及多取代黄烷并噻二唑啉类化合物及制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
黄烷酮衍生物具有抗肿瘤作用。2001年C.Pouget等报道了一系列具有抗肿瘤作用的黄烷酮衍生物，其中7-甲氧基黄烷酮，5-甲氧基黄烷酮和5，7-二甲氧基黄烷酮对乳腺癌细胞MCF-7有效，其IC50值分别为35.7，35.7和36.0μM。该文所提供的黄烷酮衍生物的结构是较为常见的，芳环上无取代或只有含氧功能基(羟基和甲氧基)取代，同时作者仅对这些化合物进行了初步的活性和构效关系的探讨，但是对其抗肿瘤作用的机制未作进一步的深入研究。2002年C.T.T.Blatt等报道一系列的天然黄烷酮类化合物对多种肿瘤细胞株亦具有抑制作用，其中化合物(-)-Isoglabrachromene对KB肿瘤细胞株的IC50值仅为1.8μM。2005年C.H.Park等人报道了黄烷酮具有抑制胃癌细胞AGS增殖的作用，并发现分子机制为抑制Tcf活性。
此外，很多含噻二唑片段的化合物具有抗肿瘤毒性。2003年Z.Zhang等人报道了4，5-二胺基噻二唑衍生物具有抗增殖作用，其中作用最强的化合物4-胺基羰基-5-苯胺基1，2，3-噻二唑的IC50值仅为1μM。
发明内容
本发明的目的是提供多取代黄烷并噻二唑啉类化合物，是含有噻二唑啉环的黄烷酮衍生物2-芳基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物，具有以下结构通式
其中A环可为无取代，单取代或多取代，R1为H、Cl、CH3O-、CH3-；B环可为无取代，单取代或多取代，R2为H、Cl、CH3O-、CH3-、-OCH2O-；R3为NO2-、CH3SO2-、CH3CONH-；R4为CH3-、CH3CH2-、CH3CH2CH2-、(CH3)2CH-；本发明的另一个目的是提供多取代黄烷并噻二唑啉类化合物(2-芳基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物)的制备方法，通过以下步骤实现本发明的合成路线
(1)上述反应式是用于制备目标化合物VI(2-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉)(R3＝NO2)，目标化合物VII(2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉)(R3＝SO2CH3)和目标化合物VIII(2-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉)(R3＝NHCOCH3)的反应式。其中化合物Ia(2-羟基苯乙酮)(R1′＝H)可直接购买，化合物Ib(2-羟基-4-甲氧基苯乙酮)(R1′＝4-甲氧基)和化合物Ic(2-羟基-4，6-二甲氧基)(R1′＝4，6-二甲氧基)可按文献方法(K.C.Gulatiet al，Org Synth，Coll.Vol.II，522&K.Y.T.Juntend et al，EP0292576)制得，化合物II(查耳酮类化合物)和化合物III(黄烷酮类化合物)可按文献方法(Xiaoyong Bu et al，Synthesis，1997，11，1246-1248)制得。
(2)化合物III(黄烷酮类化合物)在质子性溶剂中，在醋酸存在下与对硝基苯肼或对甲砜基苯肼缩合得到相应的化合物IV(黄烷酮-4-硝基苯腙类化合物)或化合物V(黄烷酮-4-甲砜基苯腙类化合物)，所用的质子性溶剂为甲醇，乙醇等，反应温度一般在30-80℃，得到的产物可直接用于下一步反应。
(3)化合物IV(黄烷酮-4-硝基苯腙类化合物)或化合物V(黄烷酮-4-甲砜基苯腙类化合物)在氮气保护下与SOCl2环合，反应温度一般为60-80℃，也可在超声辐射(功率250W，频率25kHz，室温)下进行，反应时间为30分钟，所得中间产物再与醇反应可得到目标化合物VI(2-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物)或化合物VII(2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物)，反应在30-80℃进行，或在超声辐射下(室温)进行，反应时间为30分钟，所用的醇可以是甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇等，所得产物经过柱层析(洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯)可得纯品。
(4)化合物VI氢化后可得R3为氨基的中间体，无需分离直接经乙酸酐酰化后可得目标化合物VIII(2-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉)。氢化反应可用钯碳(Pd-C)，雷尼镍(Raney-Ni)催化。乙酰化一般采用乙酸酐或乙酰氯作为酰化试剂，用吡啶催化，在室温条件下进行，所得产物经过柱层析(洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯)可得纯品。
本发明的又一个目的是多取代黄烷并噻二唑啉类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。初步的体外筛选发现它们对多种肿瘤细胞株，包括Bel-7402，ECA-2，PC-3，HL-60，MCF-7，A549等均有抑制增殖作用，其中2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIIa)、2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-8-甲基-4′-甲氧基-3a，4-二乙氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIIIb)和2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-8-甲基-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIIe)对6种肿瘤细胞株的抑制作用都较显著，其抗肿瘤活性大于母体化合物黄烷酮。体内试验结果表明，化合物VIIa可明显抑制小鼠S180实体瘤生长(P＜0.01)，具有显著的治疗作用。对化合物VIIa抗肿瘤活性的机制研究表明，它能诱导肿瘤细胞凋亡。
本发明的特点是以具有活性的黄烷酮为先导化合物，在黄烷酮母核的3，4位上引入1，2，3-噻二唑啉环。这是一类结构全新的化合物，初步的药理活性筛选试验表明多数化合物对肿瘤细胞有体外抑制作用，部分化合物具有显著的抑制增殖作用。与母体化合物黄烷酮相比，抗肿瘤活性明显提高，说明这个杂环的引入能增强黄烷酮的抗肿瘤活性。其中代表化合物VIIa具有体内抗肿瘤活性，其机制为诱导肿瘤细胞凋亡。
图1为化合物VIIa作用于HL-60细胞的流式细胞术结果。
图2为琼脂糖凝胶电泳分析HL-60梯状DNA。
具体实施例方式
本发明结合实施例和附图作进一步的说明。以下的实施例是说明本发明的，而不是以任何方式限制本发明。
实施例1黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVa)的制备将黄烷酮0.448g(2mmol)、4-硝基苯肼0.306g(2mmol)、乙醇20mL和乙酸0.02mL加至反应瓶中，回流6hr，固体溶解后又析出黄色固体。冷却，抽滤，滤饼用少量乙醇洗，减压干燥，得到黄色固体(化合物IVa)0.626g，收率87.2％。熔点249-250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.77-2.84(m，1H)，3.35-3.40(m，1H)，5.25(dd，1H，J＝12.0Hz，3.2Hz)，6.96(d，1H，J＝8.4Hz)，7.03(t，1H，J＝8.0，16.0Hz)，7.27(t，1H，J＝8.0，16.0Hz)，7.35(m，2H)，7.38(d，1H，J＝7.2Hz)，7.44(t，2H，J＝7.2，14.4Hz)，7.56(d，2H，J＝7.2Hz)，8.07(d，1H，J＝8.0Hz)，8.11(d，2H，J＝8.8Hz)，10.31(s，1H)。
实施例24′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVb)的制备操作过程与实施例1同，只是用4′-甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到金黄色固体(化合物IVb)，收率93.2％。熔点237-238℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.80-2.87(m，1H)，3.29-3.34(m，1H)，3.75(s，3H)，5.18(dd，1H，J＝12.0Hz，2.8Hz)，6.93(d，1H，J＝8.0Hz)，6.98(d，2H，J＝8.8Hz)，7.27(t，1H，J＝8.0，16.0Hz)，7.32(m，2H)，7.47(d，2H，J＝8.8Hz)，7.56(d，2H，J＝7.2Hz)，8.06(d，1H，J＝7.6Hz)，8.11(d，2H，J＝7.6Hz)，10.31(s，1H)。
实施例35，7-二甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVc)的制备操作过程与实施例1同，只是用5，7-二甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到橙红色固体(化合物IVc)，收率89.3％。熔点214-216℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.73-2.80(m，1H)，3.30-3.35(m，1H)，3.77(s，3H)，3.92(s，3H)，5.18(dd，1H，J＝12.0Hz，3.2Hz)，6.23(d，1H，J＝2.4Hz)，6.30(d，1H，J＝2.4Hz)，7.29(d，2H，J＝2.4Hz)，7.39(t，1H，J＝7.2，14.4Hz)，7.46(t，2H，J＝7.2，14.4Hz)，7.56(d，2H，J＝8.0Hz)，8.13(d，2H，J＝8.0Hz)，10.12(s，1H)。
实施例45，7-二甲氧基-2′-氯黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVd)的制备操作过程与实施例1同，只是用5，7-二甲氧-2′-氯基黄烷酮代替黄烷酮。得到黄色固体(化合物IVd)，收率85.3％。熔点185-187℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.67-2.74(m，1H)，3.31-3.36(m，1H)，3.75(s，3H)，3.90(s，3H)，5.37(dd，1H，J＝12.0Hz，2.4Hz)，6.22(d，1H，J＝2.4Hz)，6.31(d，1H，J＝2.4Hz)，7.27(brs，2H)，7.40-7.54(m，3H)，7.74(d，1H，J＝8.0Hz)，8.10(d，2H，J＝8.8Hz)，10.10(s，1H)。
实施例54′-甲基-5，7-二甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVe)的制备操作过程与实施例1同，只是用4′-甲基-5，7-二甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到红色固体(化合物IVe)，收率89.7％。熔点208-210℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.31(s，3H)，2.69-2.76(m，1H)，3.23-3.28(m，1H)，3.74(s，3H)，3.88(s，3H)，5.10(dd，1H，J＝12.0Hz，3.2Hz)，6.19(d，J＝2.0Hz)，6.26(d，J＝2.0Hz)，7.22-7.35(m，4H)，7.41(d，2H，J＝8.0Hz)，8.10(d，2H，J＝9.2Hz)，10.11(s，1H)。
实施例64′，5，7-三甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVf)的制备操作过程与实施例1同，只是用4′，5，7-三甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到深红色固体(化合物IVf)，收率89.7％。熔点208-210℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.72-2.79(m，1H)，3.21-3.26(m，1H)，3.73(s，3H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，5.08(dd，1H，J＝12.0Hz，2.8Hz)，6.18(d，1H，J＝2.4Hz)，6.24(d，1H，J＝2.4Hz)，6.97(d，2H，J＝8.4Hz)，7.27(brs，2H)，7.45(d，2H，J＝8.4Hz)，8.10(d，2H，J＝9.2Hz)，10.12(s，1H)。
实施例73′，5，7-三甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVg)的制备操作过程与实施例1同，只是用3′，5，7-三甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到红色固体(化合物IVg)，收率86.7％。熔点188-189℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.78-2.85(m，1H)，3.31-3.36(m，1H)，3.79(s，3H)，3.92(s，3H)，4.03(s，3H)，5.57(dd，1H，J＝12.0Hz，3.2Hz)，6.22(d，1H，J＝2.0Hz)，6.30(d，1H，J＝2.0Hz)，6.78(d，1H，J＝1.6Hz)，6.86(dd，1H，J＝8.4Hz，1.6Hz)，6.92(d，J＝8.4Hz)，7.35(d，2H，J＝8.0Hz)，8.10(d，2H，J＝8.0Hz)，11.30(s，1H)。
实施例83′，4′，5，7-三甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVh)的制备操作过程与实施例1同，只是用3′，4′，5，7-三甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到红色固体(化合物IVh)，收率90.4％。熔点204-205℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.81-2.88(m，1H)，3.22-3.27(m，1H)，3.77(s，3H)，3.81(s，3H)，4.02(s，3H)，4.04(s，3H)，6.08-6.12(m，1H)，6.21(d，1H，J＝2.0Hz)，6.30(d，1H，J＝2.0Hz)，7.01(d，1H，J＝8.4Hz)，7.08(dd，1H，J＝8.4Hz，2.0Hz)，7.14(d，1H，J＝2.0Hz)，7.29(brs，2H)，8.15(d，2H，J＝8.8Hz)，10.16(s，1H)。
实施例96-甲基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVi)的制备操作过程与实施例1同，只是用6-甲基黄烷酮代替黄烷酮。得到橙黄色固体(化合物IVi)，收率85.3％。熔点＞250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.32(s，3H)，2.76-2.83(m，1H)，3.35-3.40(m，1H)，5.22(dd，J＝12.0Hz，2.4Hz，1H)，6.88(d，1H，J＝8.0Hz)，7.11(dd，1H，J＝8.0，1.2Hz)，7.35(d，2H，J＝7.2Hz)，7.40(d，1H，J＝7.2Hz)，7.45(t，2H，J＝7.2，14.4Hz)，7.57(d，2H，J＝7.6Hz)，7.89(d，1H，J＝1.2Hz)，8.14(d，2H，J＝7.6Hz)，10.29(s，1H)。
实施例106-甲基-3′，4′-二氧亚甲基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVj)的制备操作过程与实施例1同，只是用6-甲基-3′，4′-二氧亚甲基黄烷酮代替黄烷酮。得到橙红色固体(化合物IVj)，收率93.4％。熔点＞250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.29(s，3H)，2.74-2.81(m，1H)，3.27-3.32(m，1H)，5.10(dd，1H，J＝12.0Hz，2.8Hz)，6.02(s，2H)，6.83(d，1H，J＝8.0Hz)，6.94(d，1H，J＝8.0Hz)，7.01(d，1H，J＝9.2Hz)，7.08(d，1H，J＝8.0Hz)，7.14(s，1H)，7.33(d，2H，J＝8.4Hz)，7.84(s，1H)，8.12(d，2H，J＝8.4Hz)，10.26(s，1H)。
实施例116-甲基-3′，4′-二甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVk)的制备操作过程与实施例1同，只是用6-甲基-3′，4′-二甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到橙红色固体(化合物IVk)，收率89.6％。熔点＞250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.29(s，3H)，2.82-2.89(m，1H)，3.27-3.33(m，1H)，3.74(s，3H)，3.76(s，3H)，5.10(dd，1H，J＝10.0Hz，2.4Hz)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz)，6.97(d，2H，J＝8.4Hz)，7.04-7.09(m，2H)，7.16(s，1H)，7.33(d，2H，J＝8.8Hz)，7.85(s，1H)，8.11(d，2H，J＝8.8Hz)，10.27(s，1H)。
实施例126-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVl)的制备操作过程与实施例1同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到橙红色固体(化合物IVl)，收率89.5％。熔点＞250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.31(s，3H)，2.78-2.85(m，1H)，3.29-3.34(m，1H)，3.78(s，3H)，5.15(dd，J＝12.0Hz，2.4Hz，1H)，6.85(d，1H，J＝8.4Hz)，7.00(d，2H，J＝8.0Hz)，7.10(dd，1H，J＝8.4Hz，1.6Hz)，7.35(d，2H，J＝8.0Hz)，7.49(d，2H，J＝8.8Hz)，7.88(d，1H，J＝1.6Hz)，8.14(d，2H，J＝8.8Hz)，10.30(s，1H)。
实施例13黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(化合物Va)的制备将黄烷酮0.448g(2mmol)、4-甲砜基苯肼验算盐0.445g(2mmol)、乙醇20mL和乙酸0.02mL加至反应瓶中，回流6hr，固体溶解后又析出白色固体。冷却，抽滤，滤饼用少量乙醇洗，减压干燥，得到白色絮状固体(化合物Va)0.699g，收率89.4％。熔点249-250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.73-2.80(m，1H)，3.08(s，3H)，3.29-3.34(m，1H)，5.23(dd，1H，J＝12.0Hz，2.8Hz)，6.95(d，1H，J＝8.0Hz)，7.02(t，1H，J＝8.0，16.0Hz)，7.25(t，1H，J＝8.0Hz)，7.34-7.45(m，5H)，7.56(d，2H，J＝8.8Hz)，7.70(d，2H，J＝8.8Hz)，8.05(dd，1H，J＝8.0Hz，2.0Hz)，9.99(s，H)。
实施例146-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(化合物Vb)的制备操作过程与实施例13同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到白色固体(化合物Vb)，收率92.1％。熔点＞250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.31(s，3H)，2.75-2.82(m，1H)，3.11(s，3H)，3.27-3.32(m，1H)，3.78(s，3H)，5.13(dd，J＝12.0Hz，2.4Hz，1H)，6.84(d，1H，J＝8.4Hz)，7.00(d，2H，J＝8.0Hz)，7.07(dd，1H，J＝8.4Hz，1.6Hz)，7.38(d，2H，J＝8.4Hz)，7.49(d，2H，J＝8.0Hz)，7.73(d，2H，J＝8.4Hz)，7.86(d，1H，J＝1.6Hz)，9.97(s，1H)。
实施例154′-甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(化合物Vc)的制备操作过程与实施例13同，只是用4′-甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到白色固体(化合物Vc)，收率93.4％。熔点＞250℃。
2.76-2.83(m，1H)，3.08(s，3H)，3.28-3.33(m，1H)，3.75(s，3H)，5.16(dd，1H，J＝12.0Hz，3.2Hz)，6.92(d，1H，J＝8.0Hz)，6.98(d，2H，J＝8.8Hz)，7.24(t，1H，J＝8.0，16.0Hz)，7.35(d，2H，J＝8.8Hz)，7.47(d，2H，J＝8.8Hz)，8.05(d，1H，J＝8.0Hz)，9.98(s，1H)。
实施例165，7-二甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(化合物Vd)的制备操作过程与实施例13同，只是用5，7-二甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到白色固体(化合物Vd)，收率85.3％。熔点225-227℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.74-2.81(m，1H)，3.04(s，3H)，3.25-3.30(m，1H)，3.71(s，3H)，3.76(s，3H)，5.49(dd，1H，J＝10.0Hz，2.8Hz)，6.13(d，1H，J＝2.0Hz)，6.93(d，2H，J＝8.8Hz)，7.23-7.39(m，5H)，7.65(d，1H，J＝8.8Hz)，11.42(s，1H)。
实施例176-甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(化合物Ve)的制备操作过程与实施例13同，只是用6-甲氧基黄烷酮代替黄烷酮。得到浅黄色固体(化合物Ve)，收率86.3％。熔点＞250℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)2.29(s，3H)，2.70-2.77(m，1H)，3.08(s，3H)，3.31-3.36(m，1H)，5.18(dd，J＝12.0Hz，2.8Hz)，6.84(d，1H，J＝8.4Hz)，7.06(d，1H，J＝8.8Hz)，7.36(t，2H，J＝8.8Hz)，7.43(t，2H，J＝8.4Hz)，7.54(d，2H，J＝8.8Hz)，7.70(d，2H，J＝8.8Hz)，7.84(s，1H)，9.94(s，1H)。
实施例182-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIa)的制备将黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVa)0.72g(2mmol)分批加至SOCl216mL(0.22mol)中，氮气保护下加热回流30min，减压除去SOCl2，加无水乙醇16mL，加热回流30min，冷却，减压回收乙醇，加水20mL稀释，二氯甲烷提取(10mL×3)，合并有机层，饱和氯化钠溶液洗(10mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压回收二氯甲烷，所得粗品经柱层析(洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯＝100mL∶20mL)分离得橙红色固体(化合物VIa)，收率58.3％，熔点192-194℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.80(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.88(t，3H，J＝7.2Hz，)，2.86-2.90(m，1H)，3.08-3.12(m，1H)，3.26-3.30(m，1H)，3.37-3.41(m，1H)，7.24-7.31(m，2H)，7.57(d，3H，J＝8.8Hz)，7.65(d，2H，J＝8.8Hz)，7.74(d，1H，J＝9.2Hz)，8.09(dd，1H，J＝8.0Hz，1.6Hz)，8.21(dd，1H，J＝9.2Hz，2.8Hz)，8.42(d，1H，J＝2.8Hz)。IR2921，1609cm-1。
实施例192-(4-硝基-2-氯苯基)-4′-甲氧基-3a，4-二乙氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIb)的制备操作过程与实施例18同，只是用4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVb)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIb)。收率58.3％，分解点170℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.80(t，3H，J＝7.2Hz)，0.88(t，3H，J＝7.2Hz)，2.86-2.90(m，1H，)，3.08-3.12(m，1H)，3.26-3.30(m，1H)，3.37-3.41(m，1H)，3.96(s，3H)，6.93(d，2H，J＝8.8Hz)，7.24-7.31(m，2H)，7.57(d，1H，J＝8.8Hz)，7.61(d，2H，J＝8.8Hz)，7.71(d，1H，J＝9.2Hz)，8.09(dd，1H，J＝8.0Hz，1.6Hz)，8.19(dd，1H，J＝9.2Hz，2.8Hz)，8.29(d，1H，J＝2.8Hz)。IR2921，1609cm-1。
实施例202-(4-硝基-2-氯苯基)-7，9-二甲氧基-3a，4-二乙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIc)的制备操作过程与实施例18同，只是用5，7-二甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVc)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIc)。收率53.1％，分解点219℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)0.88(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.97(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.84-2.91(m，1H)，3.15-3.22(m，1H)，3.33-3.40(m，1H)，3.44-3.51(m，1H)，4.03(s，3H)，4.06(s，3H)，6.39(s，1H)，7.41(d，2H，J＝8.0Hz)，7.68(d，3H，J＝8.0Hz)，8.10(dd，1H，J＝8.8Hz，2.4Hz)，8.30(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2924，1601cm-1。
实施例212-(4-硝基-2-氯苯基)-7，9-二甲氧基-3a，4-二乙氧基-2′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VId)的制备操作过程与实施例18同，只是用5，7-二甲氧基-2′-氯黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVd)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VId)。收率45.3％，熔点221-224℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)0.91(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，1.01(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.87-2.95(m，1H)，3.22-3.29(m，1H)，3.45-3.61(m，2H)，4.03(s，3H)，4.05(s，3H)，6.39(s，1H)，7.30-7.35(m，2H)，7.42-7.44(m，1H)，7.71(d，1H，J＝9.2Hz)，7.87-7.69(m，1H)，8.10(d，1H，J＝9.2)，8.29(s，1H)。IR2972，1603cm-1。
实施例222-(4-硝基-2-氯苯基)-4′-甲基-7，9-二甲氧基-3a，4-二乙氧基-6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIe)的制备操作过程与实施例18同，只是用4′-甲基-5，7-二甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVe)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIe)。收率58.3％，分解点130℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)0.82(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.90(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.43(s，3H)，2.86-2.90(m，1H)，3.08-3.12(m，1H)，3.26-3.30(m，1H)，3.37-3.41(m，1H)，6.41(s，1H)，7.03(d，2H，J＝8.8Hz)，7.22(d，2H，J＝8.8Hz)，7.75(d，1H，J＝9.2Hz)，8.19(dd，1H，J＝9.2Hz，2.8Hz)，8.39(d，1H，J＝2.8Hz)。IR2927，1598cm-1。
实施例232-(4-硝基-2-氯苯基)-4′，7，9-三甲氧基-3a，4-二乙氧基-6-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIf)的制备操作过程与实施例18同，只是用4′，5，7-三甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVf)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIf)。收率40.1％，熔点171-173℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.88(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，1.00(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.84-2.92(m，1H)，3.19-3.26(m，1H)，3.34-3.42(m，1H)，3.48-3.56(m，1H)，3.85(s，3H)，3.98(s，3H)，4.02(s，3H)，6.61(s，1H)，6.94(d，2H，J＝8.8Hz)，7.60(d，2H，J＝8.8Hz)，7.69(d，1H，J＝9.2Hz)，8.08(dd，1H，J＝9.2Hz，1.6Hz)，8.30(d，1H，J＝1.6Hz)。IR2927，1583cm-1。
实施例242-(4-硝基-2-氯苯基)-4′，5′，7，9-四甲氧基-3a，4-二乙氧基-2′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIg)的制备将5，7，3′，4′-四甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVg)0.95g(2mmol)加至SOCl216mL(0.43mol)中，氮气保护下超声辐射下反应30min，减压除去SOCl2，加无水乙醇16mL，继续超声辐射下反应30min，减压回收乙醇，加水20mL稀释，二氯甲烷提取(10mL×3)，饱和氯化钠溶液洗(10mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压回收二氯甲烷，所得粗品经柱层析分离(洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯＝100mL∶20mL)得到橙红色固体(化合物VIg)。收率45.7％，熔点207-208℃。
1H NMR(δ，DMSO-d6)0.83(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.96(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.78-2.86(m，1H)，3.07-3.15(m，1H)，3.35-3.42(m，1H)，3.51-3.59(m，1H)，3.77(s，3H)，3.83(s，3H)，4.03(s，3H)，4.05(s，3H)，6.72(s，1H)，7.03(s，1H)，7.28(s，2H)，7.68(d，1H，J＝9.2Hz)，8.24(dd，1H，J＝9.2Hz，2.8Hz)，8.42(d，1H，J＝2.8Hz)。IR2923，1589cm-1。
实施例252-(4-硝基-2-氯苯基)-3′，7，9-三甲氧基-3a，4-二乙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIh)的制备操作过程与实施例18同，只是用3′，5，7-三甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVh)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIh)。收率53.4％，分解点111℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.95(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，1.01(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.87-2.95(m，1H)，3.24-3.32(m，1H)，3.47-3.63(m，2H)，3.92(s，3H)，4.03(s，3H)，4.06(s，3H)，6.40(s，1H)，6.96-7.00(m，1H)，7.10-7.14(m，1H)，7.43(s，1H)，7.71(d，1H，J＝8.8Hz)，8.10(dd，1H，J＝8.8Hz，2.4Hz)，8.29(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2938，1602cm-1。
实施例262-(4-硝基-2-氯苯基)-8-甲基-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIi)的制备操作过程与实施例18同，只是用6-甲基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVi)代替黄烷酮4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIi)。收率76.5％，分解点171℃1H NMR(δ，DMSO-d6)0.80(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.89(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.38(s，3H)，2.86-2.90(m，1H)，3.07-3.11(m，1H)，3.24-3.28(m，1H)，3.35-3.39(m，1H)，7.18(d，1H，J＝8.4Hz)，7.38(dd，1H，J＝8.4Hz，1.6Hz)，7.56(d，2H，J＝8.8Hz)，7.64(d，2H，J＝8.8Hz)，7.74(d，1H，J＝9.2Hz)，7.89(d，1H，J＝1.6Hz)，8.21(dd，1H，J＝9.2Hz，2.8Hz)，8.42(d，1H，J＝2.8Hz)。IR2977，1582cm-1。
实施例272-(4-硝基-2-氯苯基)-8-甲基-3a，4-二乙氧基-4′，5′-二氧亚甲基-2′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIj)的制备操作过程与实施例24同，只是用6-甲基-3′，4′-二氧亚甲基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVj)代替5，7，3′，4′-四甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，得到橙黄色固体(化合物VIj)。收率37.2％，熔点104-106℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.85(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.92(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.85-2.93(m，1H)，3.11-3.19(m，1H)，3.36-3.50(m，2H)，6.14(d，1H，J＝1.2Hz)，6.17(d，1H，J＝1.2Hz)，7.10(s，1H)，7.13(d，1H，J＝8.0Hz)，7.22(s，1H)，7.37(dd，1H，J＝8.0Hz，1.6Hz)，7.75(d，1H，J＝9.2Hz)，7.87(d，1H，J＝1.6Hz)，9.19(dd，1H，J＝9.2Hz，2.4Hz)，8.41(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2977，2870，1582，926cm-1。
实施例282-(4-硝基-2-氯苯基)-8-甲基-4′，5′-二甲氧基-3a，4-二乙氧基-2′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIk)的制备操作过程与实施例24同，只是用6-甲基-3′，4′-二甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(化合物IVk)代替5，7，3′，4′-四甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，得到橙黄色固体(化合物VIk)。收率53.2％，熔点105-107℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.81(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.89(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.37(s，3H)，2.80-2.87(m，1H)，3.05-3.12(m，1H)，3.31-3.37(m，1H)，3.41-3.48(m，1H)，3.73(s，3H)，3.78(s，3H)，6.97(s，1H)，7.10(d，1H，J＝8.4Hz)，7.21(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝8.0Hz，1.6Hz)，7.71(d，1H，J＝9.2Hz)，7.31(dd，1H，J＝8.4Hz，1.6Hz)，7.83(d，1H，J＝1.6Hz)，8.15(dd，1H，J＝9.2Hz，2.4Hz)，8.28(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2927，1587cm-1。
实施例292-(4-硝基-2-氯苯基)-8-甲基-4′-甲氧基-3a，4-二乙氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(化合物VIl)的制备操作过程与实施例18同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVI)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，得到橙红色固体(化合物VIl)。收率53.2％，熔点221-224℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.89(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.99(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.85-2.93(m，1H)，3.21-3.27(m，1H)，3.43-3.60(m，2H)，3.92(s，3H)，6.93(d，2H，J＝8.8Hz)，7.18(d，1H，J＝8.4Hz)，7.38(dd，1H，J＝8.4Hz，1.6Hz)，7.61(d，2H，J＝8.8Hz)，7.73(d，1H，J＝9.2Hz)，7.89(d，1H，J＝1.6Hz)，8.10(d，1H，J＝9.2Hz)，8.29(s，1H)。IR2927，1589cm-1。
实施例302-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4，7，9-四甲氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIm)的制备操作过程与实施例18同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVc)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用甲醇代替乙醇，得到橙红色固体(化合物VIm)。收率52.4％，熔点107-108℃。
1H NMR(δ，CDCl3)2.90(s，3H)，3.13(s，3H)，4.03(s，3H)，4.06(s，3H)，6.41(s，1H)，7.43(d，2H，J＝8.4Hz)，7.57-7.72(m，3H)，8.10(d，1H，J＝9.6Hz)，8.30(s，1H)。IR2980，1597cm-1。
实施例312-(4-硝基-2-氯苯基)-7，9-四甲氧基-3a，4-二丙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIn)的制备操作过程与实施例18同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVc)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用丙醇代替乙醇，得到橙红色固体(化合物VIn)。收率34.5％，熔点203-204℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.53(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.64(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，1.23-1.39(m，4H)，2.74-2.79(m，1H)，3.12-3.18(m，1H)，3.24-3.29(m，1H，)，3.35-3.40(m，1H)，4.03(s，3H)，4.05(s，3H)，6.39(s，1H)，7.40(d，2H，J＝8.4Hz)，7.66-7.69(m，3H)，8.10(dd，1H，J＝8.8Hz，2.4Hz)，8.30(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2925，1605cm-1。
实施例322-(4-硝基-2-氯苯基)-7，9-四甲氧基-3a，4-二异丙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIo)的制备操作过程与实施例18同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙(IVc)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用异丙醇代替乙醇，得到橙红色固体(化合物VIo)。收率33.0％，熔点240-241℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.69(d，J＝6.4Hz，6H)，0.81(d，3H，J＝6.0Hz)，1.03(d，3H，J＝6.0Hz)，3.42-3.48(m，1H)，3.92-3.98(m，1H)，4.03(s，3H)，4.05(s，3H)，6.37(s，1H)，7.39(d，2H，J＝8.8Hz)，7.68(d，1H，J＝9.2Hz)，7.73(d，2H，J＝8.8Hz)，8.11(dd，1H，J＝9.2Hz，2.4Hz)，8.31(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2927，1590cm-1。
实施例332-(4-甲砜基-2-氯苯基)-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIa)的制备操作过程与实施例18同，只是用黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(Va)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用异丙醇代替乙醇，得到浅黄色固体(化合物VIIa)。收率72.3％，熔点112-114℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.90(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.95(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.91-2.95(m，1H)，3.08(s，3H)，3.27-3.46(m，3H)，7.14-7.18(m，2H)，7.39(d，2H，J＝8.4Hz)，7.48(m，1H)，7.63-7.66(m，3H)，7.79(dd，1H，J＝8.8Hz，2.0Hz)，7.98(d，1H，J＝2.0Hz)，8.05(dd，1H，J＝8.0Hz，1.6Hz)。IR2954，1608，1585cm-1。
实施例342-(4-甲砜基-2-氯苯基)-8-甲基-4′-甲氧基-3a，4-二乙氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIb)的制备操作过程与实施例18同，只是用6-甲基-4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(Vb)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用异丙醇代替乙醇，得到浅黄色固体(化合物VIIb)。收率69.4％，分解点131℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.90(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.95(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.39(s，3H)，3.07(s，3H)，2.89-2.96(m，1H)，3.22-3.45(m，3H)，6.95(d，2H，J＝8.8Hz)，7.06(d，1H，J＝8.4Hz)，7.25(dd，1H，J＝8.4Hz，2.0Hz)，，7.60(d，2H，J＝8.8Hz)，7.66(d，1H，J＝8.4Hz)，7.78(dd，1H，J＝8.4Hz，2.4Hz)，7.85(d，1H，J＝2.0Hz)，7.97(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2936，1608，1585cm-1。
实施例352-(4-甲砜基-2-氯苯基)-4′-甲氧基-3a，4-二乙氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIc)的制备操作过程与实施例18同，只是用4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(Vc)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用异丙醇代替乙醇，得到黄色固体(化合物VIIc)。收率65.7％，分解点195℃1H NMR(δ，CDCl3)0.88(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.93(t，3H，J＝7.2Hz)，2.89-2.96(m，1H)，3.07(s，3H)，3.24-3.45(m，3H)，6.92(d，2H，J＝8.8Hz)，7.14-7.18(m，2H)，7.60(d，2H，J＝8.8Hz)，7.66(d，1H，J＝8.4Hz)，7.78(dd，1H，J＝8.4Hz，2.4Hz)，7.97(d，1H，J＝2.4Hz)，8.05(dd，1H，J＝8.0Hz，1.6Hz)。IR2936，1608，1585cm-1。
实施例362-(4-甲砜基-2-氯苯基)-7，9-二甲氧基-3a，4-二乙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIId)的制备操作过程与实施例18同，只是用4′-甲氧基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(Vd)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用异丙醇代替乙醇，得到黄色固体(化合物VIId)。收率59.5％，熔点112-114℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.87(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.96(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.84-2.90(m，1H)，3.07(s，3H)，3.18-3.25(m，1H)，3.32-3.40(m，1H)，3.43-3.51(m，1H)，4.03(s，3H)，4.04(s，3H)，6.39(s，1H)，7.40(d，2H，J＝8.4Hz)，7.6-7.69(m，3H)，7.77(dd，1H，J＝8.4Hz，2.4Hz)，7.86(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2927，1608，1577cm-1。
实施例372-(4-甲砜基-2-氯苯基)-8-甲基-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIe)的制备操作过程与实施例18同，只是用8-甲基黄烷酮-4-(4-甲砜基苯基)腙(Ve)代替黄烷酮-4-(4-硝基苯基)腙，用异丙醇代替乙醇，得到黄色固体(化合物VIIe)。收率72.1％，分解点130℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.90(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.95(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.40(s，3H)，2.89-2.96(m，1H)，3.06(s，3H)，3.25-3.46(m，3H)，7.06(d，1H，J＝8.4Hz)，7.25(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz)，7.38(d，2H，J＝8.8Hz)，7.63(d，2H，J＝8.8Hz)，7.66(d，1H，J＝8.4Hz)，7.78(dd，1H，J＝8.42.4Hz)，7.84(d，1H，J＝2.0Hz)，7.98(d，1H，J＝2.4Hz)。IR2979，1609，1592cm-1。
实施例382-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIIa)的制备取2-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIa)0.54g(1mmol)加至10mL圆底瓶中，加入Raney-Ni1.0g(湿重)，EtOH 6mL，在室温条件下，通氢气反应6hr，抽滤除去Raney-Ni，母液回收得浆状物，减压干燥。往浆状物中加入吡啶0.34mL，乙酸酐0.34mL，室温搅拌12hr，加水30mL稀释，二氯甲烷提取(10mL×3)，有机层水洗(10mL×3)，饱和食盐水洗(10mL×2)，无水硫酸钠干燥，回收二氯甲烷，得浆状物，柱层析分离(洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯＝100mL∶40mL)得橙红色固体(化合物VIIIa)0.50g，收率89.8％，分解点150℃。
1H NMR(δ，CDCl3)＝0.82(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.90(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.16(s，3H)，2.86-2.90(m，1H)，3.08-3.12(m，1H)，3.26-3.30(m，1H)，3.37-3.41(m，1H)，7.24-7.31(m，2H)，7.35-7.42(brs，4H)，7.59(m，2H)，7.62(d，2H，J＝8.0Hz)，8.07(dd，1H，J＝8.0，1.6Hz)。IR3413，2980，1703，1681，1597cm-1。
实施例392-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-8-甲基-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIIb)的制备操作过程与实施例38同，只是用2-(4-硝基-2-氯苯基)-8-甲基-3a，4-二乙氧基-4′-氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIi)代替化合物VIa，得到橙红色固体(化合物VIIIb)。收率85.4％，分解点187℃。
1HNMR(δ，CDCl3)＝0.89(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，0.97(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.18(s，3H)，2.38(s，3H)，2.92-2.99(m，1H)，3.29-4.44(m，3H)，7.04(d，1H，J＝8.4Hz)，7.19-7.22(m，1H)，7.31-7.37(m，4H)，7.62(d，2H，J＝8.0Hz)，7.69(s，1H)，7.82(d，1H J＝2.0Hz)。IR3417，2979，1698，1595cm-1。
实施例402-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-4′，5′，7，9-四甲氧基-3a，4-二乙氧基-2′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIIc)的制备操作过程与实施例38同，只是用2-(4-硝基-2-氯苯基)-4′，5′，7，9-四甲氧基-3a，4-二乙氧基-2′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIg)代替化合物VIa，得到橙红色固体(化合物VIIIc)。收率84.1％，分解点238℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.92(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，1.03(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.14(s，3H)，3.32-3.40(m，1H)，3.45-3.61(m，2H)，3.70-3.75(m，1H)，3.91(s，3H)，4.00(s，3H)，4.02(s，3H)，6.38(s，1H)，7.03(s，1H)，7.28(s，2H)，7.45(s，2H)，7.57(s，1H)。IR2923，1589cm-1。
实施例412-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-3′，7，9-三甲氧基-3a，4-二乙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIIId)的制备操作过程与实施例38同，只是用2-(4-硝基-2-氯苯基)-3′，7，9-四甲氧基-3a，4-二乙氧基-4′，6-二氯黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉(VIh)代替化合物VIa，得到橙红色固体(化合物VIIId)。收率87.2％，分解点207℃。
1H NMR(δ，CDCl3)0.92(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，1.03(t，3H，J＝7.2，14.4Hz)，2.14(s，3H)，2.91-2.99(m，1H)，3.32-3.40(m，1H)，3.46-3.61(m，2H)，3.91(s，3H)，4.00(s，3H)，4.01(s，3H)，6.38(s，1H)，7.33-7.38(m，2H)，7.41(s，1H)，7.43-7.50(m，2H)，7.57(s，1H)。IR3417，2985，1687，1595cm-1。
实施例422-芳基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉衍生物对不同肿瘤细胞的体外抑制作用1.实验材料细胞株原髓细胞白血病HL-60细胞、人肺癌A549细胞、人肝癌Bel-7402细胞、人食道癌ECA-109细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人前列腺癌PC-3细胞。
培养基RPMI1640培养基，含10％小牛血清。
药物及配制药物为上述所合成化合物VI、VII和VIII，药物溶于DMSO。
2.实验方法将上述处于对数生长期的肿瘤细胞，以2×104个/ml接种于96孔培养板中，每孔加细胞悬液200μl，在培养24h后，分别加入5种浓度的黄烷酮衍生物(0.08-50μg/ml)2μl，每个浓度设3个复孔。细胞在37℃，5％CO2培养箱中孵育72小时后，加入浓度为5mg/ml的MTT溶液10μl，继续培养4小时。吸去上清液，加入100μl DMSO摇匀，用酶标仪于570nm波长下测定各孔的OD值，细胞抑制率的计算公式为细胞抑制率％＝(对照组OD值-用药组OD值)/对照细胞OD值×100％用Bliss法求出IC50。
3.实验结果2-芳基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉衍生物作用72小时后，分别测定IC50值。结果表明，多数化合物对6种肿瘤细胞均有不同程度的体外抑制作用，其中IC50值小于10μg/ml有化合物VIa、VIb、VIc、VIm、VIIa、VIId、VIIe和VIIIc对HL-60白血病细胞；VIb和VIIe对Bel-7402人肝癌细胞；化合物VIa、VIb、VIe、VIm、VIIa、VIIb、VIIc、VIIIb对ECA-109食道癌细胞；化合物VIa、VIb、VIm、VIIa、VIIe、VIIIa、VIIIb对PC-3前列腺癌细胞；化合物VIm、VIIa、VIIe对MCF-7乳腺癌细胞；化合物VIIIa、VIIe、VIIId对A549非小细胞肺癌细胞。它们对肿瘤细胞的体外抑制作用结果参见表1、2。
综合测试此类化合物对不同肿瘤细胞的体外抑制作用，化合物VIIa、VIIe和VIIIb对6种肿瘤细胞株的抑制作用较显著，抗瘤谱较广，其抗肿瘤活性明显大于母体化合物黄烷酮和腙(IVc)。
表1 2-芳基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉衍生物作用72小时对肿瘤细胞的体外抑制作用
表2 2-芳基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉衍生物作用72小时对肿瘤细胞的体外抑制作用
实施例43化合物VIIa对荷S180肉瘤小鼠的治疗作用1.实验材料瘤株小鼠S180肉瘤。
动物ICR小鼠，雌性，体重18-22g。
药物及配制化合物VIIa由本教研室合成，药物用无水乙醇溶解，用cremphor el助溶，生理盐水稀释为相应给药浓度。
2.实验方法选取ICR种雌性小鼠40只，腋下注射S180细胞悬液0.2ml/只(2.5×106细胞)制成实体瘤模型；接种次日将动物随机分为3组，其中溶剂对照组20只，其余各组每组10只。按不同浓度给药，溶剂对照组腹腔注射生理盐水；给药组腹腔注射化合物VIIa 80mg/kg。上述各组均按0.2ml/10g体重的给药体积给药。每天一次，连续7天。阳性对照组隔日尾静脉注射多烯紫杉醇10mg/kg，按0.1ml/10g体重的给药体积给药。末次给药24hr后，颈椎脱臼处死小鼠，取瘤块称重后按下列公式计算肿瘤生长的抑制率(抑瘤率)。
抑瘤率％＝(对照组瘤重-治疗组瘤重)/对照组瘤重×100％3.实验结果
注***VIIa VS溶剂对照，多烯紫杉醇VS溶剂对照结果表明，化合物VIIa可明显抑制小鼠S180实体瘤生长(P＜0.01)，抑瘤率在30％以上，具有显著的治疗作用。
实施例44化合物VIIa诱导肿瘤细胞凋亡的作用1.实验材料细胞株原髓细胞白血病HL-60细胞。
培养基RPMI 1640培养基，含10％小牛血清。
药物及配制化合物VIIa由本教研室合成，药物溶于DMSO。
2.流式细胞术分析化合物VIIa对肿瘤细胞凋亡及周期的影响取适量对数生长期的HL-60细胞接种，24小时后加入化合物VIIa，使终浓度为0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml，DMSO为溶剂对照，加药48小时后收集细胞，D-Hank’s液洗两遍，用70％冰乙醇4℃固定过夜。PBS洗涤后，1000r/min离心10min，加入RNase A(0.5mg/ml)37℃消化30min，PI(50mg/ml)染色，室温避光15min，FACScan分析DNA亚二倍体的形成及细胞周期的变化。
参见图1，结果显示，化合物VIIa 0.5μg/ml作用48小时即可诱导HL-60白血病细胞出现凋亡特征性的亚二倍体峰，且随着浓度的增加，凋亡率逐渐递增，化合物VIIa 0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml引起HL-60细胞的凋亡率分别为3.93％、25.29％和68.34％；化合物VIIa对细胞周期无明显影响。图中A、B、C、D分别代表DMSO以及化合物VIIa 0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml作用48小时后对细胞DNA含量及周期的影响。
3.DNA Ladder检测化合物VIIa诱导肿瘤细胞凋亡的情况收获细胞(1×106)，加入0.5ml DNA抽提液，1％SDS和Rnase A(5mg/ml)，蛋白酶K(2.5mg/ml)56℃，过夜。加入0.5ml平衡酚，0.5ml氯仿，12000r/min离心10min，取上清，加入氯仿∶异丙醇(480μl∶20ul)，12000r/min离心10min。加入1/10体积3M醋酸钠和2.5倍体积的冷无水乙醇沉淀DNA，-20℃过夜。12000r/min离心10min最后将沉淀用70％乙醇洗两次，晾干。溶解在TE缓冲液中，加DNA加样缓冲液，2％琼脂糖凝胶电泳，EB染色并照相。
DNA电泳结果参见图2，泳道A、B、C、D，E分别代表DMSO，化合物VIIa(0.5μg/ml，1.0μg/ml，2.0μg/ml)和阳性对照。结果表明，化合物VIIa能够诱导HL-60细胞出现代表细胞凋亡的特征性DNA Ladder。
无需进一步详细阐述，相信采用前面所公开的内容，本领域技术人员可最大限度地应用本发明。因此，前面的优选具体实施方案应理解为仅是举例说明，而非以任何方式限制本发明的范围。
权利要求
1.多取代黄烷并噻二唑啉类化合物，其特征是具有以下结构通式 其中A环可为无取代，单取代或多取代，R1为H、Cl、CH3O-、CH3-；B环可为无取代，单取代或多取代，R2为H、Cl、CH3O-、CH3-、-OCH2O-；R3为NO2-、CH3SO2-、CH3CONH-；R4为CH3-、CH3CH2-、CH3CH2CH2-、(CH3)2CH-。
2.根据权利要求1所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物，其特征是目标化合物VI为2-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物。
3.根据权利要求1所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物，其特征是目标化合物VII为2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物。
4.根据权利要求1所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物，其特征是目标化合物VIII为2-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物。
5.根据权利要求1-4任一所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物的制备方法，其特征是通过以下步骤实现(1)以化合物I取代的邻羟基苯乙酮和芳醛为原料，经缩合和环合两步后得到化合物III黄烷酮类化合物，化合物III在质子性溶剂中，在醋酸存在下与对硝基苯肼或对甲砜基苯肼缩合得到化合物IV黄烷酮-4-硝基苯腙类化合物或化合物V黄烷酮-4-甲砜基苯腙类化合物，反应温度一般在30-80℃，反应时间为2-6小时；(2)化合物IV或化合物V在氮气保护下与SOCl2环合，反应温度一般为60-80℃，也可在超声辐射下进行，功率250W，频率25kHz，室温，反应时间为30分钟，所得中间产物再与醇反应可得到目标化合物VI 2-(4-硝基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物或目标化合物VII 2-(4-甲砜基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物，反应在30-80℃进行，或在超声辐射下室温进行，反应时间为30分钟；(3)化合物VI氢化后可得R3为氨基的中间体，无需分离直接经乙酸酐酰化后可得目标化合物VIII 2-(4-乙酰胺基-2-氯苯基)-3a，4-二烷氧基黄烷[4，3-d]-Δ1，9b-1，2，3-噻二唑啉类化合物，乙酰化一般采用乙酸酐或乙酰氯作为酰化试剂，用吡啶催化，在室温条件下进行，所得产物经过柱层析可得纯品，洗脱条件为洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯。
6.根据权利要求5所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物的制备方法，其特征是步骤(1)中所用质子性溶剂选用甲醇或乙醇。
7.根据权利要求5所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物的制备方法，其特征是步骤(2)中所用的醇选用甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇中任一种，所得产物经过柱层析，洗脱剂石油醚∶乙酸乙酯，得纯品。
8.根据权利要求5所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物的制备方法，其特征是步骤(3)中氢化反应选用钯碳或雷尼镍催化。
9.根据权利要求1所述的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明提供多取代黄烷并噻二唑啉类化合物，制备方法是以取代的邻羟基苯乙酮和芳醛为原料，经缩合和环合两步后得到黄烷酮类化合物III，所得的黄烷酮类化合物与取代苯肼缩合后得到取代的黄烷酮－4－苯腙IV和V，苯腙与二氯亚砜环合再经醇处理后得到多取代的黄烷并噻二唑啉类化合物VI和VII，化合物VI再经还原酰化后可得另一类黄烷并噻二唑啉类化合物VIII。本发明提供的多取代黄烷并噻二唑啉类化合物对多种肿瘤细胞株有抑制增殖作用，对肿瘤细胞有体外抑制作用，其抗肿瘤活性大于母体化合物黄烷酮，具有体内抗肿瘤活性，可在制备抗肿瘤药物中的应用。结构通式如上式，其中A环可为无取代，单取代或多取代，R
文档编号A61P35/00GK1793148SQ20051009701
公开日2006年6月28日 申请日期2005年12月31日 优先权日2005年12月31日
发明者胡永洲, 应华洲, 何俏军, 杨波 申请人:浙江大学