专利名称：：用于治疗泌尿系统疾病的pde抑制剂及其组合的制作方法
技术领域：
：本发明涉及磷酸二酯酶(PDE)及PDE抑制剂的药理作用。更具体的说，本发明涉及PDE-5与PDE-4抑制剂及其在制备用于治疗泌尿系统紊乱的药物中的用途。
背景技术：
：造成膀胱出口梗阻(BOO)的良性前列腺增生(BPH)是男性中非常普遍的赘生物。据估计大约80%的50岁以上男性具有中度到重度的症状，包括尿频、夜尿和尿急，伴有尿流緩慢和尿潴留。因此在西方国家越来越认为BPH是一个主要的健康保健难题(Guess1995)。除了前列腺手术(占所有BPH患者的20%),这种疾病的常规治疗方法包括应用5a-还原酶抑制剂(非那雄胺)和a阻滞剂(坦洛新、多沙唑嗪、特拉唑。秦、阿夫唑。秦)(Truss2001)。5a-还原酶抑制剂影响BPH的机械性组分并且抑制前列腺组织的增生。a阻滞剂影响动力性组分并且通过松弛前列腺平滑肌降低尿道阻力而减少BPH的刺激性症状。另外a阻滞剂能够直接松弛膀胱平滑肌细胞从而减少膀胱的非排尿性收缩。但是所有这些治疗方法效力有限和/或具有不良副作用(Carbone2003)。因此，人们致力于各种新的治疗方法以抑制前列腺间质的增殖或降低前列腺和膀胱平滑肌的张力。这些方法包括使用芳香酶抑制剂(Sciarra2000)、生长因子拮抗剂(Desgrandchamps1997)、钾通道开方文剂(Gopalakrishnan2004)和内皮素拮抗剂(Andersson2002)。已经确定环核苷酸cAMP和cGMP可降低平滑肌张力(Drescher1994)。cAMP和cGMP分别通过腺苷酸环化酶和鸟苷酸环化酶由各自相应的核苦三磷酸合成。环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)促进二者降解而非常有效的调节细胞内cAMP和cGMP水平。至今已经鉴别出11种不同的PDE家族成员，它们的结构、对底物的调节性和特异性都不同(Soderling2000)。对于PDE治疗泌尿系统紊乱的作用缺乏了解，对于PDE同种型的性质了解不及其^f也方面，许多文献均公开于鉴定出新型PDE之前。即使下泌尿道即膀胱、尿道和前列腺组织中表达有PDE，仍然缺乏或无一致性的mRNA表达数据和所有PDE同源基因的直接对比。有一些证据表明非特异性的PDE抑制剂能够松弛人前列腺组织(Drescher1994)。但关于PDE-5抑制效应的数据非常有限。已知扎普司特这种PDE-5抑制剂也抑制PDE-6、PDE-9和PDE-ll，在体外能够松弛预收缩态的人前列腺组织(tlckert2001)，但是在此组织内其它PDE家族的作用仍需确定。在膀胱内，通过IBMX非特异性阻断不同的PDE(抑制PDE-]、PDE-2、PDE-3、PDE-4、PDE-5、PDE-6、PDE-10和PDE-11)可松弛雌性豚鼠膀胱，而扎普司特无效(Gillespie2004)。尽管有这些不相一致的发现，PDE-5在松弛海绵体及治疗勃起机能障碍方面的作用已广为人知，并且在市场中已经存在非常有效的并有选择性的PDE-5抑制剂。有效且选^^性的PDE-4抑制剂主要用于治疗哮喘和COPD(Spina2003)。发明公开由PDEmRNA表达谱提供的本发明的一个方面证明了，不仅在前列腺中而且在膀胱组织中有大量的cGMP依赖的PDE-5和cAMP依赖的PDE-4(图1、2)。因此，PDE-5或PDE-4的选择性抑制剂，尤其是二者的组合，不仅可以減少前列腺的收缩性，而且，二者组合的另一个益处是可以改善由膀胱出口梗阻引起的刺激症状，膀胱出口梗阻常频繁发生在泌尿系统紊乱时。PDE-5的选择性抑制剂有伐地那非、昔多芬和他达那非，PDE-4的选择性抑制剂有罗氟司特。本发明的治疗剂所针对的泌尿系统紊乱包括良性前列腺增生(BPH)、下尿路症状(LUTS),尤其是由BPH-诱导的膀胱出口梗阻(BOO)所致剌激症状。因为不^叉膀胱的症状性刺激而且潜在的由BPH诱导的膀胱出口梗阻可以用特异性PDE-5和/或PDE-4的抑制剂(尤其是它们的组合)治疗，因此这种治疗相对本领域已知的其他治疗方法提供了很多好处。其他的尤其是用上面提到的抑制剂或抑制剂的组合治疗有很多益处的泌尿系统紊乱是泌尿生殖系统紊乱，包括神经原性膀胱症状[也称为膀胱过动症(OAB)或间质性膀胱炎(IC)]、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI,UUI,SUI，OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍。本发明的另一方面证明了PDE-5的抑制剂伐地那非对大鼠尿道环有舒张作用，ECso值为0.96pmol/l,并且大鼠前列腺和膀胱条的EC50值分别为1.1和5.0pmol/l(图3，表1)。本发明的另一方面证明了PDE-4的抑制剂罗氟司特和PDE-5的抑制剂伐地那非都对兔膀胱条有舒张作用，IC50值分别为260nmo1/1和1.7limol/l(图4，表2)。本发明的另一方面证明了PDE-5的抑制剂伐地那非显著减少大鼠膀胱出口梗阻(BOO)模型中作为BPH的刺激症状的测量标准的非排泄收缩的次数(图5)。本发明提供了单独或与PDE-4抑制剂组合有效治疗泌尿系统紊乱的PDE-5抑制剂。尤其是本发明的化合物他达那非((6R,12aR)-2，3，6，7,12,12a-六氢-2-曱基-6-(3,4-亚甲基-二氧基苯基)吡嗪并(l',2':l，6)吡啶(3,4-b)吲哚-l,4-二酮)、伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌。秦-1-基-1-磺酰)苯基)-5-曱基-7-丙基-31^咪唑(5,1力(1，2,4)三嗪-4-酮)、昔多芬(3-[2-乙氧基-5-(4-甲基哌嗪-l-基)磺酰-苯基]-7-曱基-9-丙基-2,4,7，8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3,8,10-三烯-5-酮)、t^fe"a,/5-[2-丙氧基_5-(1-曱基-2-吡咯烷基乙基氨基磺酰)苯基]-曱基-3-丙基-1,6-二氢7H-吡唑并(4，3-d)嘧啶-7-酮、达声他非7-(3-溴-4-曱氧千基)-l-乙基-8-[[(1,2)-2-羟基环戊基]氨基]-3-(2-羟乙基)-3,7-二氢-1-嘌呤-2,6-二酮、Jva加,/4-([(3-氯-4-甲氧苯基)甲基]氨基)-2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-l-基]-N-(嘧啶-2-基甲基)嘧啶-5-曱酰胺、SurfaceLogix的SLx2101，Z^4S34779三唑并[l,2-]黄嘌呤，6-曱基-4-丙基-2-[2-丙氧基-5-(4-曱基哌嗪基)磺酰基]苯基、罗氟司特(3-(环丙基曱氧基)-1^(3,5-二氯吡啶-4-基)_4-(二氟曱氧基)苯曱酰胺)、西洛司特(4-氰基-4-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯基)-环己烷-l-羧酸)和吡拉米司特(3-环戊氧基-N-(3，5-二氯吡啶一4-基)-4-曱氧基-苯曱酰胺)。本发明的另一方面是筛选PDE抑制剂的一种方法，尤其是用于单独或组合使用的PDE-4和PDE-5的抑制剂筛选的方法，用于上面提到的泌尿系统紊乱的治疗的药剂的制备。本发明提供鉴别用于泌尿系统紊乱治疗的PDE抑制剂的方法(此处也称为"筛选实验，，)。这些方法能够鉴别可以与磷酸二酯酶结合和/或对PDE1A的生物活性或它的表达具有激活或抑制作用的候选或受试化合物或物质(例如肽、拟肽、小分子或其他分子)，然后在体内实验中测定哪些化合物对泌尿系统紊乱有关的症状或疾病有作用。可以与PDE-4或PDE-5结合和/或对PDE-4或PDE-5的活性或表达有激活或抑制作用的候选或受试化合物或试剂可以通过使用表达PDE-4和/或PDE-5的细胞的实验(基于细胞的实验)或使用单独的PDE-4和/或PDE-5的实验(无细胞实验)来鉴别。不同的实验可以使用多种PDE的变异体(例如，全长PDE,—种PDE的生物活性片段，或一种包括全部或部分PDE的融合蛋白)。此外，PDE-4和/或PDE-5可以从任何合适的哺乳动物得到。这种实验可以是直接或间接检测受试化合物或已知的PDE-4或PDE-5配体对PDE-4或PDE-5的结合情况的结合实验。这种实验也可以是直接或间接检测PDE-4或PDE-5活性的活性实验。这种实验也可以是直接或间接检测PDE-4和/或PDE-5mRNA或PDE-4和/或PDE-5蛋白表达的表达实验。各种筛选实验结合体内实验能够检测受试化合物对泌尿系统紊乱症状的作用。本发明包括生物化学，无细胞实验，这些实验可以鉴别适合作为用于药理学药物开发的先导结构的PDE的抑制剂和激动剂。这些实验包括用受试化合物接触PDE-4和/或PDE-5并测定受试化合物作为PDE-4和/或PDE-5的酶活性的拮抗剂(优选)或激动剂起作用的能力。在一个实施方案中，实验包括通过用受试化合物接触PDE-4和/或PDE-5后测量cAMP或cGMP转变为它的一磷酸核苷的转化来监测PDE-4和/或PDE-5的PDE活性。例如，可以通过叶吏用[Hansen,R.S.,和Beavo,J.A.,PITASUSA1982,79:2788-92]描述的含有氖的化合物3HcAMP和3HcGMP检测cAMP和cGMP水平。为了筛选包含大量化合物的化合物库，可以应用[Bardelle,C.等(1999)Ana1.Biochem.275:148-155]描述的基于平板的微量滴定闪烁亲近分析法(SPA)。或者，可使用市售的SPA试剂盒(AmershamPharmacia)实验重组蛋白的磷酸二酯酶活性。PDE酶水解环核苷酸，例如4吏cAMP和cGMP成为线性相对物。SPA实验利用氚标记的环核苷酸[3H]cAMP或[3H]cGMP，其理论根据是氚标记的非环状产物与SPA珠的选择性相互作用，而环状底物不能有效结合。放射标记产物与闪烁珠结合后发光，这种光可以用闪烁探测器分析。本发明药用组合物配制成与其预期给药途径相容。给药途径的例子包括胃肠外给药(例如，静脉、动脉、皮内、皮下、肌肉、吸入、经皮肤、经粘膜、经鼻子和直肠给药)，经口腔给药(例如含片、舌下、口腔粘膜和口服给药)和局部给药(例如溶液或混悬液的局部滴入和局部埋植剂)。适合注射的药用组合物包括无菌含水溶液(如果有效成分充分溶解在水中)、混悬液、乳剂和用于无菌注射溶液或分散剂的临时制备的无菌粉末。载体可以是溶剂或分散剂包含，例如，水、乙醇、药学可接受的多元醇像甘油、丙二醇、液态聚乙二醇和它们的合适的混合物。药学上可接受的成分可以加入，例如緩沖液、防腐剂、抗氧化剂、等渗剂或表面活性剂。储库型注射液的理论根据是已知的制备原则如油性溶液或混悬液或生物可降解聚合物的颗粒。对于吸入给药，这些化合物以气溶胶喷雾形式制成从压力容器或分散器中喷出而给药，压力容器或*器包含来自喷雾器雾化器或干粉吸入装置的合适的抛射剂。全身用药也可以是经粘膜或经皮方式。对于经粘膜或经皮给药，制剂中使用了可以透过屏障的渗透剂。这些渗透剂是本领域公知的，包括，例如经粘膜给药的去污剂、胆汁酸盐和夫西地酸衍生物。经粘膜给药可以通过使用鼻腔喷雾、舌下或口腔含化制剂或栓剂来完成。对于经皮给药，活性化合物制成本领域普遍知道的软膏剂、片剂、凝胶剂或乳剂。这些化合物也可以制备成一全剂形式(例如，用传统的栓剂基质如可可豆脂和其他甘油酯)或用于直肠用药的保留灌肠剂形式。口服组合物一般包括惰性稀释剂或填充剂和功能辅料。它们可以包在胶嚢中或压制成片剂。其它合适剂型是泡腾片剂、咀嚼片、口分散片、软明胶胶嚢、充满液体的硬明胶胶嚢、嚢中粉剂和口服液体。本领域已知的用于口服剂型制备的合适的功能辅料包括，例如，粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基曱基纤维素，崩解剂如交联聚乙烯吡咯烷酮或交联羧曱基纤维素钠，助流剂如二氧化硅胶体、润滑剂如硬脂酸镁、聚乙二醇或硬脂酸，甜味剂如阿斯巴甜、蔗糖或糖精钠以及调味剂如薄荷或橙调料。在一个实施方案中，这些活性化合物用可以保护化合物抵抗从体内快速消除的载体制备，例如控释片或填充在胶嚢中的包衣片或胃肠外控释制剂，包括埋植剂和微嚢给药系统。可以使用生物可降解的或生物相容的聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚肝、聚乙醇酸、胶原、多正酯类、聚乳酸或聚乙醇聚乳酸共聚物。在另一个实施方案中，本发明提供PDE-4和PDE-5抑制剂的组合和它们在制备治疗泌尿系统紊乱的药用组合物中的用途，其中这些组合物包含i)包含对PDE-4和PDE-5活性有抑制作用的一种化合物的药用组合物，或ii)包含一个使用单位中至少一种PDE-4抑制剂和至少一种PDE-5抑制剂作为固定组合的药用组合物，或iii)含有至少两组药用组合物的药盒，每组由至少一种包含至少一剂量单位的PDE-5抑制剂的药物制剂和至少一种包含至少一剂量单位的PDE-4抑制剂的药物制剂构成，其中所述的药用组合物的每种使用单位以单次剂量或多次剂量形式，按顺序组合给药。本发明进一步提供一种筛选PDE5抑制剂的方法，PDE5抑制剂作为治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的疾病的有效治疗剂，该方法包4舌步骤i)使受试化合物与PDE5多肽相接触(可能有或没有PDE4抑制活性)，ii)在受试化合物的一定浓度下或没有所述的受试化合物时测定PDE5多肽的活性，iii)在所述受试化合物的不同浓度下测定所述的PDE5多肽的活性，iv)选择至少一种对PDE5多肽有抑制作用的化合物。一种筛选PDE4抑制剂的方法，PDE4抑制剂作为治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的疾病的有效治疗剂，该方法包括步骤i)使受试化合物与PDE4多肽相接触(可能有或没有PDE5抑制活性)，ii)在受试化合物的一定浓度下或没有所述的受试化合物时测定PDE4多肽的活性，iii)在所述受试化合物的不同浓度下测定所述的PDE4多肽的活性，iv)选择至少一种对PDE4多肽有抑制作用的化合物。一种筛选PDE5抑制剂和PDE4抑制剂的组合的方法，该组合作为治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的疾病的有效治疗剂，该方法包括步骤i)使第一种受试化合物与PDE5多肽相接触ii)在第一种受试化合物的一定浓度下或没有所述的第一种受试化合物时测定PDE5多肽的活性，iii)在所述第一种受试化合物的不同浓度下测定PDE5多肽的活性，iv)选择至少一种对PDE5多肽有抑制作用的第一种化合物，v)使第二种受试化合物与PDE4多肽相接触，vi)在第二种受试化合物的一定浓度下或没有所述的第二种受试化合物时测定PDE4多肽的活性，vii)在所述第二种受试化合物的不同浓度下测定PDE4多肽的活性，viii)选择至少一种对PDE4多肽有抑制作用的第二种化合物，ix)组合至少一种有PDE5抑制活性的第一种化合物和至少一种有PDE4抑制活性的第二种化合物。篩选方法包括在细胞内或细胞表面接触受试化合物，其中细胞是在体外的。筛选方法包括在无细胞系统中用PDE-4或PDE-5多肽接触受试化合物。筛选方法涉及与检测标记偶联的受试化合物。本发明尤其提供一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)、下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI，UUI,SUI，OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含一种调节PDE-5多肽的活性的治疗剂。一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含一种调节PDE-4多肽的活性的治疗剂。一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含的治疗剂是上面提到的选择性治疗剂的组合。一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含一种调节PDE-5多肽和PDE-4多肽的活性的治疗剂。一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含一种选自由罗氟司特(3-(环丙基曱氧基)-N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(二氟曱氧基)苯甲酰胺)、西洛司特(4-氰基-4-(3-环戊氧基-4-曱氧基-苯基)-环己烷-l-羧酸)和吡拉米司特(3-环戊氧基-N-(3，5-二氯吡啶_4-基)-4-曱氧基-苯曱酰胺)构成的PDE-4抑制剂组的PDE-4抑制剂。一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI,UUI，SUI，OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含一种选自由他达那非((6R，12aR)-2，3,6,7,12,12a-六氢-2-曱基-6-(3，4-亚曱基-二氧基苯基)吡嗪并(l',2':1,6)吡啶(3，4-b)吲哚-1，4-二酮)、伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌。秦_1_基_1_磺酰)苯基)_5_甲基_7-丙基-3^1-咪唑(5,1-1)(1，2,4)三嗪-4-酮)、昔多芬(3-[2-乙氧基-5-(4-曱基哌嗪-1-基)磺酰-苯基]-7-甲基-9-丙基-2,4，7，8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3，8，10-三烯-5-酮)、i7&"a刀/5-[2-丙氧基_5-(1-曱基-2-吡咯烷基乙基氨基磺酰)苯基]-曱基-3-丙基-l,6-二氢7H-吡唑并(4,3-d)嘧啶-7-S同、达声他非7-(3-溴-4-曱氧卡基)-l-乙基-8-[[(1,2)-2-羟基环戊基]氨基]-3-(2-羟乙基)-3,7-二氢-l-嘌呤-2,6-二酮、^va"a力/4-{[(3-氯-4-曱氧苯基)曱基]氨基卜2-[(2S)-2-(羟曱基)吡咯烷-1-基]-^(嘧啶-2-基曱基)嘧啶-5-曱酰胺、SurfaceLogix的SLx2101,Z^S"3W79三唑并[l，2-]黄噤呤,6-曱基-4-丙基-2-[2-丙氧基-5-(4-甲基哌嗪基)》黄酰]苯基或其盐、水合物或盐的水合物构成的PDE-5抑制剂组的PDE-5抑制剂。一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，该组合物包含至少一种选自由罗氟司特(3-(环丙基甲氧基)-N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(二氟曱氧基)苯曱酰胺)、西洛司特(4-氰基-4-(3-环戊氧基-4-曱氧基-苯基)-环己烷-l-羧酸)和吡拉米司特(3-环戊氧基-N-(3,5-二氯吡啶_4-基)-4-甲氧基-苯曱酰胺)构成的PDE-4抑制剂组的PDE-4抑制剂和至少一种选自由伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基-1-磺酰)苯基)_5-曱基-7-丙基-3H-咪唑(5，]-f)(1，2，4)三嗪-4-酮)、昔多芬(3-[2-乙氧基_5_(4_曱基哌噪-l—基)磺酰-笨基]—7-曱基-9-丙基-2,4,7,8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3，8，10-三烯5-酮)和祐迷,卞A((6R,12aR)-2,3，6，7，12,12a-六氢-2-甲基-6-(3,4-亚甲基-二氧基苯基)构成的PDE-5抑制剂组的PDE-5抑制剂的组合物。PDE-5抑制剂在制备药用组合物中的用途，用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI,UUI，SUI,OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病在内的哺乳动物疾病。PDE-4抑制剂在制备药用组合物中的用途，用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病。至少一种PDE-4抑制剂和至少一种PDE-5抑制剂的组合在制备药用组合物中的用途，用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、沖动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI,UUI,SUI,OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病在内的哺乳动物疾病。作为PDE-4多肽和PDE-5多肽的抑制剂的药物在制备药用组合物中的用途，用于治疗哺乳动物疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)。PDE-5抑制剂在制备药用组合物中的用途，用于治疗哺乳动物疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI,UUI,SUI，OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病，该PDE-5抑制剂选自由他达那非((6R，12aR)-2,3,6,7，12,12a-六氢-2-曱基-6-(3,4-亚曱基-二氧基苯基)吡噪并(l'，2':l，6)吡啶(3，4-b)吲哚-l,4-二酮)、伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌。秦-1-基-1-磺酰)苯基)-5-曱基-7-丙基-3H-咪唑(5,l-f)(l,2，4)三嗪-4-酮)、昔多芬(3-[2-乙氧基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰-苯基]-7-曱基1-9-丙基-2,4,7，8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3,8,10-三烯5-酮)、f/cfe"q//5-[2-丙氧基-5-(l-曱基-2-吡咯烷基乙基氨基磺酰)苯基]-曱基-3-丙基-l,6-二氬7H-吡唑并(4,3-d)嘧啶-7-酮、达声他非7-(3-溴-4-甲氧苄基)-l-乙基-8-[[(1，2)-2-羟基环戊基]氨基]-3-(2-羟乙基)-3,7-二氢-1-嘌呤-2，6-二酮、4-U(3-氯-4-甲氧苯基)曱基]氨基卜2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷画l-基]-N-(嘧口定-2-基曱基)嘧啶-5-曱酰胺、SurfaceLogix的SLx2101，三唑并[l，2-]黄噪呤,6-甲基-4-丙基-2-[2-丙氧基-5-(4-曱基哌嗪基)磺酰]苯基或其盐、水合物或盐的水合物构成的PDE-5抑制剂组。PDE-4抑制剂在制备药用组合物中的用途，用于治疗哺乳动物疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)，该PDE-4抑制剂选自罗氟司特(3-(环丙基甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺)、西洛司特(4_氰基-4-(3-环戊氧基-4-曱氧基-苯基)-环己烷-l-羧酸)和吡拉米司特(3-环戊氧基-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-曱氧基-苯曱酰胺)的PDE-4抑制剂。至少一种PDE-4抑制剂和至少一种PDE-5抑制剂的组合在制备药用组合物中的用途，用于治疗哺乳动物疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI，UUI，SUI,OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病，PDE-4抑制剂选自罗氟司特(3-(环丙基曱氧基)-N-(3，5-二氯吡啶_4_基)_4-(二氟曱氧基)苯曱酰胺)、西洛司特(4-氰基-4-(3-环戊氧基-4_曱氧基—苯基)_环己烷-l-羧酸)和吡拉米司特(3-环戊氧基-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-甲氧基-苯甲酰胺)的PDE-4抑制剂，PDE-5抑制剂选自伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-l-基-l-磺酰)苯基)-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑(5,1-f)(1,2,4)三嗪-4-酮)、昔多芬(3-[2-乙氧基-5-(4-曱基哌嗪-l-基)磺酰-苯基]-7-甲基-9-丙基-2，4,7，8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3，8,10-三烯5-酮)和他达那非((6R，12aR)-2,3，6,7,12,12a-六氢—2—曱基-6-(3,4-亚曱基-二氧基苯基)的PDE-5抑制剂。一种用于制备药用组合物的方法，所述药用组合物有效治疗哺乳动物疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、沖动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI，UUI，SUI,OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌/^系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍的疾病，该方法包括步骤i)按照上面描述的筛选方法鉴别PDE-5抑制剂ii)按照上面描述的筛选方法鉴别PDE-4抑制剂，iii)检测所述的抑制剂是否可以改善哺乳动物疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)的疾病的症状；和iii)用合适的药用载体与至少一种所述的抑制剂组合。一种药用组合物的制备的方法，其中PDE5抑制剂选自由伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基-1-磺酰)苯基)-5-曱基-7-丙基-3H-咪唑(5，l-f)(l，2,4)三。秦-4-酮)、昔多芬(3-[2-乙氧基-5-(4-曱基哌嗪-l-基)磺酰-苯基]-7-甲基l-9-丙基-2,4,7,8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3,8,10-三烯5-酮)、他达那非((6R，12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢—2—曱基一6-(3,4-亚甲基-二氧基苯基)、Udenafil5-[2-丙氧基-5-(l-曱基-2-吡咯烷基乙基氨基磺酰)苯基]-曱基-3-丙基-l,6-二氢7H-吡唑并(4，3-d)嘧啶-7-酮、达声他非7-(3_溴_4_甲氧苄基)_1_乙基-8-[[(1,2)-2-羟基环戊基]氨基]-3-(2-羟乙基)-3,7-二氢-l-嘌呤-2，6-二酮、」va"q//4-{[(3-氯-4-曱氧苯基)曱基]氨基}-2-[(2S)-2-(羟曱基)吡咯烷-1-基]-N-(嘧啶-2-基曱基)嘧啶-5-甲酰胺、SurfaceLogix的SLx2101和L451^779三唑并[l,2-]黄嘌呤，6-曱基陽4画丙基-2-[2-丙氧基-5-(4-甲基哌嗪基)磺酰]苯基构成的PDE-5抑制剂组。一种药用组合物的制备的方法，其中PDE4抑制剂选自由罗氟司特(3-(环丙基甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-(二氟曱氧基)苯曱酰胺)、西洛司特(4-氰基-4-(3-环戊氧基-4-曱氧基-苯基)-环己烷-l-羧酸)和吡拉米司特(3-环戊氧基-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-曱氧基-苯曱酰胺)构成的PDE-44中制剂组。上面提到的用于调节患有疾病哺乳动物的PDE活性的药用组合物的用途，疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI，UUI,SUI，OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍。一种治疗哺乳动物包括人的疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)的多部分组成的药盒(kitofparts),该药盒含有以下两者的组合至少一种药用组合物，来自伐地那非、昔多芬和他达那非组成的药用组合物；和至少一种药用组合物，来自罗氟司特、西洛司特和吡拉米司特组成的药用组合物。一种有效治疗哺乳动物的疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)的多部分组成的药盒的制备方法，包含步骤i)从伐地那非、昔多芬和他达那非组成的药用组合物中选择至少一种药用组合物ii)从罗氟司特、西洛司特和吡拉米司特组成的药用组合物中选择至少一种药用组合物iii)组合至少两种所述的药用组合物从而制成多部分组成的药盒。一种治疗哺乳动物的疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)的多部分组成的药盒，含有至少一种调节PDE-5多肽活性的治疗剂和他达那非和至少一种调节PDE-4多肽活性的治疗剂的组合。一种有效治疗哺乳动物的疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)的药盒的制备方法，包含步骤i)选择至少一种包含调节PDE-5多肽活性的治疗剂的药用组合物ii)选择至少一种包含调节PDE-4多肽活性的治疗剂的药用组合物iii)组合至少两种所述的药用组合物从而制成药盒。本发明的一个优选实施方案是含有伐地那非或其盐、水合物或盐的水合物的药用组合物，用于治疗哺乳动物的疾病包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、沖动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI，UUI,SUI,OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病。惊人地发现特别是伐地那非或其盐、水合物或盐的水合物显示4艮高的活性并且对治疗神经原性膀胱紊乱(也涉及膀胱过动症或间质性膀胱炎)相对其它PDE-5抑制剂显示更好效果。附图简述图1:PDE-5在SpragueDawley大鼠肾(K)、膀胱(B)、前列腺(P)、尿道(U)和海绵体中的mRNA表达比较。数据是均数+标准偏差，n=10。图2:PDE-4a、-4b、-4c、-4d和PDE-5在SpragueDawley大鼠膀胱和前列腺中的mRNA表达比较。数据是均数+标准偏差，n=10。图3:伐地那非对离体大鼠尿道环(黑色三角形)和膀胱条(黑色菱形)和前列腺条(灰色正方形)的收缩的作用。膀胱条用K+(50mmol/1)的克氏液预收缩。前列腺和尿道组织用10pmol/l新福林预收缩。舒张程度用预收缩的百分比表示。每个点代表均数士标准偏差，n=9。图4:罗氟司特(黑色菱形)和伐地那非(灰色正方形)对离体大鼠膀胱条收缩的作用。膀胱条用K+(50mmol/l)的克氏液预收缩。舒张程度用预收缩的百分比表示。每个点代表均数士标准偏差，n=9。图5:静脉推注给予溶媒(V)和盐酸伐地那非(l、3和10mg/kg)后非排泄收缩的数目百分比。数据是均数+标准偏差，*卩<0.05(配对1检验)。图6:静脉推注给予溶媒(V)和盐酸伐地那非(l、3mg/kg)后相对基础排尿间隔(C)的排尿间隔百分比。数据是均数+标准偏差，*p<0.05(配对t检验)。实施例1组织取样和RNA制备组织收集使用体重为200-250g的雄性SpragueDawley大鼠。大鼠用5%异氟烷(BaxterS.A.)在含有70%N20和30%02的载体中的混合物快速麻醉，然后断头处死。沿中线打开腹部暴露并迅速取出肾和下泌尿道组织如肾髓质、输尿管(urether)、膀胱、前列腺和尿道。用液氮冷冻组织并储存，直到RNA制备。用RNeasy小柱(QiagenInc.)分离总RNA并进一步用DNase消化纯化。PDEmRNA定量用实时定量PCR(TaqMan-PCR,Heid1996)检测大鼠下泌尿道组织中不同的PDE等位基因的mRNA表达。因此用SuperscriptIIRTcDNA合成试剂盒(Gibco，Inc)按照厂商说明将1吗总RNA逆转录成cDNA。通过实时定量PCR用ABIPrism7700序列检测器(AppliedBiosystems，Inc.)检测PDEs的mRNA。每种PDE等位基因mRNA的荧光标记探针的正向和反向引物的特异序列用PrimerExpress1.5Software(AppliedBiosystems,Inc.)设计。在PCR扩增中Taq聚合酶的5'核溶解活性切割探针使5'报告荧光染料和3'荧光猝灭染料分开。阈值循环Ct，与目标mRNA水平反向相关，以使报告荧光发射在本底水平上增加10标准差的循环数形式进行测定。作为管家基因，4象上面描述那才羊j吏用正向引物5'-accttcaacaccccagcca-3',反向引物5'-cagtggtacgaccagaggca-3'和焚光探针5'-6AFM-acgtagccatccaggctgtgttgtcc-TAMARA-3'定量卩-月几动蛋白。PDEmRNA水平用P-肌动蛋白mRNA水平校正并用比较Ct-方法计算相对表达量。PDE-5和PDE-4A、PDE-4B、PDE-4C、PDE-4DmRNA在下泌尿道的表达由于仅有PDE-5在下泌尿道组织中表达谱的不完全的数据，通过TaqManRT-PCR定量雄性SpragueDawley大鼠中PDEmRNA。在膀胱中发现PDE-5的最显著表达(图1)。在尿道、海绵体和前列腺中发现低水平表达(图1)。这些结果说明在下泌尿道尤其是膀胱中有大量PDE-5mRNA表达。此外通过TaqManRT-PCR测定了膀胱和前列腺中所有四种PDE-4等位基因(PDE-4A、PDE-4B、PDE-4C和PDE-40)的PDE-4mRNA表达(图2)。我们发现接近检测限的PDE-4c的很低表达，然而PDE-4A、PDE-4B和-4DmRNA在两种组织中大量表达。在膀胱中PDE-4D是最丰富的PDE-4等位基因mRNA，而在前列腺中PDE-4a和-4D分布几乎相等，并且是PDE-5mRNA表达的2.5倍高(图2)。表达谱表明在膀胱和前列腺组织中有大量PDE-5和PDE-4DmRNA。因此，PDE-5或PDE-4的抑制剂尤其是PDE-5和PDE-4抑制剂二者的联合药物例如伐地那非联合罗氟司特不仅可以减少膀胱而且可以减少前列腺的收缩性，因此优于本领域已经存在的治疗泌尿系统紊乱的方法，所述的紊乱包含例如良性前列腺增生(BPH)，尤其是BPH诱导的膀胱出口梗阻(BOO)所致刺激症状，包括但不限于下尿路症状(LUTS)。实施例2组织制备雄性Wistar大鼠(200-300g)用二氧化碳处死。取出组织置于冰冷的的克氏(Krebs-Henseleit)緩沖液中，其组成如下(mmol/l):NaC1112、KC15.9、CaCl22.0、MgCl21.2、NaH2P041.2、NaHC0325.葡萄糖11.5。从膀胱体上切下四个大约2mmx10mm大小相等的纵向条。横向切下前列腺平行于尿道的突出部分得到前列腺条。从每个动物尿道的近心端切割下一个尿道环。用硫喷妥钠麻醉新西兰白兔。取出组织置于冰冷的克氏緩冲液中，其组成如下(mmol/l):NaCl112、KC15.9、CaCl22.0、MgCl21.2、NaH2P041.2、NaHC0325、葡萄糖11.5。从膀胱体上切下大约2mmx10mm大小相等的纵向条。机械活性的记录组织制备物(preparation)置于含有用95%02、5%C02在37°C平衡的克氏液的20ml器官浴中。通过两个夹子使组织条架于两个钩之间。为了记录等长张力，一个钩连接于换能器，换能器又与放大器和图表记录器连接。另一个钩连接一个可动的单位，允许精确调节张力的前负荷。然后给予所有组织60min平衡期，其间清洗组织并每20min调节静息张力到lg。平衡期后，使组织制备物置于！^+(50mmol/l)克氏液中开始每个实验。操作重复3次并且在每次收缩之间清洗组织至少3次。膀胱条用K+(50mmol/l)克氏液预收缩。当收缩稳定时，构成了受试化合物的累积剂量效应曲线。由K+(50mmol/l)克氏液诱导的稳^收缩定义为100%张力。舒张程度用张力百分比表示。前列腺条和尿道环用10_6mo1/1新福林预收缩。通过每次收缩之间的清洗步骤以非累积形式测试这些化合物对前列腺组织的作用。器官浴实验.'伐地那非对离体大鼠泌尿生殖器官的作用在器官浴系统中测试了PDE5抑制剂伐地那非对平滑肌舒张的作用。应用的化合物的浓度范围是10-8-10-511101/1(图3,表i)。伐地那非舒张尿道环的ECs。值为0.96pmo1/1,并且舒张前列腺条和膀胱条的ECso值分别为1.1和5.0jimo1/1。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表l:伐地那非对离体大鼠泌尿生殖组织的收缩的作用。舒张程度用预收缩的百分比表示。每个点代表均值士标准差，n=9。实施例3组织制备雄性Wistar大鼠(200-300g)用二氧化碳处死。取出组织置于冰冷的的克氏緩沖液中，其组成如下(以mmol/l):NaCl112、KC15.9、CaCl22.0、MgCl21.2、NaH2P041.2、NaHC0325、葡萄糖11.5。从膀胱体上切下四个大约2mmx10mm大小相等的纵向条。横向切下前列腺平行于尿道的突出部分得到前列腺条。从每个动物的尿道的近心端切割下一个尿道环。用硫喷妥钠麻醉新西兰白兔。取出组织置于冰冷的克氏缓冲液中，其组成如下(mmol/l):NaC1112、KC15.9、CaCl22.0、MgCl21.2、NaH2P041.2、NaHC0325、葡萄糖11.5。从膀胱体上切下大约2mmx10mm大小相等的纵向条。机械活性的记录组织制备物置于含有用95%02、5°/。C02在37。C平衡的克氏液的20ml器官浴中。通过两个夹子使组织条架于两个钩之间。为了记录等长张力，一个钩连接于换能器，换能器又与放大器和图表记录器连接。另一个钩连接一个可动的单位，允许精确调节张力的前负荷。然后给予所有组织60min平衡期，其间清洗组织并每20min调节静息张力到lg。平衡期后，把组织制备物置于&+(50mmol/l)克氏液中开始每个实验。操作重复3次并且在每次收缩之间清洗组织至少3次。膀胱条用K+(50mmol/l)克氏液预收缩。当收缩稳定时，构成了受试化合物的累积剂量效应曲线。由K+(50mmol/l)克氏液诱导的稳定收缩定义为100%张力。舒张程度用张力百分比表示。前列腺条和尿道环用10_6mo1/1新福林预收缩。通过每次收缩之间的清洗步骤以非累积形式测试这些化合物对前列腺组织的作用。PDE5和PDE4抑制剂对离体家兔膀胱条的作用使用家兔膀胱条在器官浴中测试了PDE5抑制剂伐地那非和PDE4抑制剂罗氟司特对膀胱平滑肌舒张的作用。两种化合物测试浓度为10—、10—Smol/l(图4，表2)。罗氟司特和伐地那非都舒张膀胱条，IC50分别为260nmo1/1和1.7jamol/1(表2)。<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表2:伐地那非和罗氟司特对离体家兔膀胱条的作用。舒张程度用预收缩百分比表示。每点代表均值士SEM，n=9。实施例4所有动物实验均稂据"德国实验动物保护法，，进行，并且根据"TierversuchsvorhabenNo401/A01M010/M011vom09.07.2004"许可的指导原则管理。实验使用体重在200-250克之间的SpragueDawley雌鼠。膀胱出口梗阻对于膀胱出口梗阻，用1.5-2%异氟烷在66%!^20和33%02的载体中的混合物麻醉大鼠。给腹部刮毛，沿低位正中切开，鉴别膀胱和尿道并暴露尿道膀胱连接处。把一个1mm的金属杆沿着尿道置于尿道近心端，用6-0尼龙结扎线系紧尿道和金属杆。连续移出金属杆，用丝线缝合腹部，并用70%乙醇清洁。用10mg/kg力莫敌(Rimadyl)(辉瑞)进行术后镇痛治疗。然后用自来水和标准鼠粮喂养2周。膀胱测压前24小时按照前面的方法用异氟烷麻醉鼠。如前所述进行剖腹手术，暴露膀胱，将一个聚乙烯导管(PE50)植入膀胱顶部。导管用一个套管经皮下隧穿达到动物的后颈部。另外将另一个用于静脉给药的导管(PE10)放入颈静脉，经皮下隧穿至动物后颈部。两条导管均用缝线和胶带固定。有意识下的膀胱内压测量对于膀胱测压要用异氟烷如前所述进行短暂的麻醉，放入Ballman笼并固定。然后在实验开始前，至少对动物进行一小时的记录。然后将膀胱导管连在一个t形管上，t形管与一个换能器相连来测量膀胱内压力(MLT0698，ADInstruments)并与一个输液泵(PerfUsorCompact,BraunMelsungen)相连来以10ml/h的流速连续输入盐溶液。与对照组相比，BOO动物显示出膀胱容量(由于膀胱变大)和非排空收缩增大(模拟BPH的刺激症状)。通过治疗前后计算每次排尿间隔非排空收缩来定量治疗的效果。用a受体阻断剂坦索罗辛(IOpg/kg)作为阳性对照。数值以非排空收缩减少百分数给出。结果统计分析数据用均数土均数的标准误差(SEM)的方式表示，"代表实验数。均数间的显著性差异由配对和非配对的Student'st检验得出。概率水平小于0.05视为显著。伐地那非对BOO鼠非排空收缩的作用BOO模型是在麻醉状态下对鼠进行部分尿道结扎。经过这种操作造成的膀胱出口梗阻(BOO)引起膀胱重量显著增力口(数据未显示)说明膀胱明显肥大。通过对有意识动物的膀胱内压测量检测到它也引起膀胱的非排空收缩(NVC)。NVC是BPH刺激症状的一种测量标准，并且静脉给予伐地那非3mg/kgMED时显著减少。实施例5所有动物实验均根据"德国实验动物保护法"进行，并且根据"TierversuchsvorhabenNo401/A01M010/M011vom09,07.2004"许可的指导原则管理。实验使用体重在200-250克之间的SpragueDawley雌鼠。麻醉下的膀胱内压测量为了测量膀胱内压，用乌拉坦(1.2g/kg,腹腔注射)麻醉雌性SD大鼠。剖腹后，暴露出膀胱，结扎并切断双侧输尿管。在膀胱顶部植入一个聚乙烯套管(PE50)后关闭腹腔。膀胱导管连到一个t形管上，t形管与灌输泵(PerftisorCompact,BraunMelsungen)相连来持续灌输盐溶液并和一个换能器(Combitrans;BraunMelsungen)相连来测量膀胱内压力。膀胱内压力信号用Powerlab系统(MLT0698,ADInstrument)记录。外科操作一'J、时平衡期后测量膀胱内压。为静脉注射药物，在左侧股静脉插入带聚乙烯导管的套管。治疗效果用排尿间隔(反映膀胱容量)计算。用0.2。/。醋酸溶液(盐水稀释的)输入膀胱代替盐溶液诱导膀胱过动症，或在膀胱测压前18小时腹腔注射环磷酰胺150mg/kg。结果统计分析数据用均数土均数的标准误差(SEM)表示，"代表实验数。均数间的显著性差异由配对和非配对的Student'st检验测定。概率水平小于0.05视为显著。伐地那非对CYP处理大鼠的排尿间隔的作用静脉给予伐地那非3mg/kgMED时排尿间隔显箸增大。参考文献AnderssonKE,ChappieCR，HofnerK.Futuredrugsforthetreatmentofbenignprostatichyperplasia(用于治疗良性前列腺增生的新型药物).WorldJUrol2002;19:436-42.Bardelle，C.etal.(1999)Anal.Biochem,275:148-155CarboneDJJr，HodgesS:Medicaltherapyforbenignprostatichyperplasia:sexualdysfunctionandimpactonqualityoflife(良性前列腺增生的医疗性功能障碍和对生活质量的影响).IntJImpotRes2003;15:299-306,DesgrandchampsF.Clinicalrelevanceofgrowthfactorantagonistsinthetreatmentofbenignprostatichyperplasia(在治疗良性前歹(j腺增生中生长因子拮抗剂的临床意义).EurUrol.1997;32:28-31.DrescherP，EckertRE,MadsenPO.Smoothmusclecontractilityinprostatichyperplasia:roleofcyclicadenosinemonophosphate(前歹l)^3曾生中的平滑肌收缩性环磷腺苷的作用).Prostate1994;25:76.GopalakrishnanM,ShiehCC.Potassiumchannelsubtypesasmoleculartargetsforoveractivebladderandotherurologicaldisorders(膀胱过度活动症和其他泌尿系统紊乱的钾通道分子靶标).ExpertOpinTherTargets2004;8:437-58.GillespieJI,DrakeMJ.Phosphodiesterase-linkedinhibitonofnonmicturitionactivityintheisolatedbladder.BJUInternational2004;93:1325-1332GuessHA,Epidemiologyandnaturalhistoryofbenignprostatichyperplasia(良性前列腺增生的流行病学和存在历史).UrolClinNorthAm1995;22:247.Hansen,R.S.,andBe汰vo，J.A.，PITASUSA1982,79:2788-92HeidCA,StevensJ,LivakKJ,WilliamsPM，RealtimequantitativePCR,GenomeRes1996;6:986-994.SciarraF,ToscanoV.Roleofestrogensinhumanbenignprostatichyperplasia(雌激素对于良性前列腺增生的作用).ArchAndrol2000;44:213-20.SoderlingSH,BeavoJA,RegulationofcAMPandcGMPsignaling:newphosphodiesterasesandnewfunctions(cAMP和cGMP"ff号"(专导的调节新型磷酸二酯酶和新功能).CurrOpinCellBiol.2000;12:174_179.SpinaD,Phosphodiesterase-4Inhibitorsinthetreatmentofinflammatorylungdisease(磷酸二酯酶-4抑制剂用于治疗炎性肺病)，Drugs2003;63:2575-2594TrussM.C,StiefC，MachtensS,WagnerT,JonasU(Eds)Pharmak:otherapieinderUrologie,Springer2001UckertS，KutheA，JonasU,StiefCG，Characterizationandfunctionalrelevanceofcyclicnucleotidephosphodiesteraseisoenzymesofthehumanprostate(人前列腺的环核苷酸磷酸二酯酶同功酶的特征及功能意义).JUrol2001;166:2484-2490.YingJ,YaoD，JiangY,RenX,XuM,ThepositiveeffectofsildenafilonLUTSfromBPHwhiletreatingED(昔多芬对于LUTS的BPB及ED治疗的阳性效果)ZhonghuaNanKeXue200410:681-683。权利要求1.一种筛选PDE5抑制剂的方法，所述PDE5抑制剂用作治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的疾病的有效治疗剂，所述方法包括步骤i)使受试化合物与PDE5多肽相接触，ii)在受试化合物的一定浓度下或没有所述的受试化合物时测定PDE5多肽的活性，iii)在所述受试化合物的不同浓度下测定所述的PDE5多肽的活性，iv)选择至少一种对PDE5多肽有抑制作用的化合物。2.—种筛选PDE4抑制剂的方法，所述PDE4抑制剂用作治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的疾病的有效治疗剂，所述方法包括步骤i)使受试化合物与PDE4多肽相接触，ii)在受试化合物的一定浓度下或没有所述的受试化合物时测定PDE4多肽的活性，iii)在所述受试化合物的不同浓度下测定所述的PDE4多肽的活性，iv)选4奪至少一种对PDE4多肽有抑制作用的化合物。3.—种筛选PDE5抑制剂和PDE4抑制剂的联合药物的方法，所述联合药物用作治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的疾病的有效治疗剂，所述方法包括步骤i)使第一种受试化合物与PDE5多肽相接触，ii)在第一种受试化合物的一定浓度下或没有所述的第一种受试化合物时测定PDE5多肽的活性，iii)在所述第一种受试化合物的不同浓度下测定PDE5多肽的活性，iv)选择至少一种对PDE5多肽有抑制作用的第一种化合物，v)使第二种受试化合物与PDE4多肽相接触，vi)在第二种受试化合物的一定浓度下或没有所述的第二种受试化合物时测定PDE4多肽的活性，vii)在所述第二种受试化合物的不同浓度下测定PDE4多肽的活性，viii)选择至少一种对PDE4多肽有抑制作用的第二种化合物，ix)组合至少一种有PDE5抑制活性的第一种化合物和至少一种有PDE4抑制活性的第二种化合物。4.一种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)、下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、0U1)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍在内的哺乳动物疾病的药用组合物，所述组合物包含调节PDE-5多肽活性的治疗剂。5.—种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，所述组合物包含调节PDE-4多肽活性的治疗剂。6.—种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病的药用组合物，所述组合物包含的治疗剂是权利要求4和5的治疗剂的联合药物。7.—种用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、冲动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍的疾病在内的哺乳动物疾病的药用组合物，所述组合物包含选自伐地那非、昔多芬、他达那非、Udenafil、达声他非、Avanafil、SLx2101和LAS34179的PDE-5抑制剂。8.PDE-5抑制剂在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、沖动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍在内的哺乳动物疾病。9.PDE-4抑制剂在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病。10.至少一种PDE-4抑制剂和至少一种PDE-5抑制剂的联合药物在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病。11.作为PDE4多肽和PDE5多肽抑制剂的药物在制备药用组合物中的用途，所述药用組合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病。12.选自伐地那非、昔多芬、他达那非、Udenafil、达声他非、Avanafil、SLx2101和LAS34179的PDE-5抑制剂在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、沖动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病、梗阻性尿路病和勃起功能障碍在内的哺乳动物疾病。13.至少一种选自罗氟司特、西洛司特和吡拉米司特的PDE-4抑制剂和至少一种选自伐地那非、昔多芬和他达那非的PDE-5抑制剂的联合药物在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)在内的哺乳动物疾病。14.一种药用组合物，含有至少一种选自伐地那非、昔多芬、他达那非、Udenafil、达声他非、Avanafil、SLx2101和LAS34179的化合物或其盐、水合物或盐的水合物，所述药用组合物用于治疗包括良性前列腺增生(BPH)、膀胱出口梗阻(BOO)和下尿路症状(LUTS)、包括神经原性膀胱症状(OAB)和(IC)在内的泌尿生殖系统紊乱、尿失禁(UI)例如混合失禁、沖动失禁、应激失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛、构成男性和女性生殖泌尿系统的器官的良性和恶性障碍、肾脏疾病例如急性和慢性肾衰、免疫介导的肾脏疾病例如肾脏移植排斥、狼疮性肾炎、免疫复合物肾脏疾病、肾小球病、肾炎、中毒性肾病和梗阻性尿路病在内的哺乳动物疾病。15.—种药用组合物，含有至少一种选自伐地那非、昔多芬、他达那非、Udenafil、达声他非、Av腿fil、SLx2101和LAS34179的化合物或其盐、水合物或盐的水合物，所述药用组合物用于治疗神经原性膀胱障碍、膀胱过动症和间质性膀胱炎。16.—种含有伐地那非或其盐、水合物或盐的水合物的药用组合物，用于治疗神经原性膀胱障碍、膀胱过动症和间质性膀胱炎。17.至少一种选自伐地那非、昔多芬、他达那非、Udenafil、达声他非、Avanafil、SLx2101和LAS34179的化合物或其盐、水合物或盐的水合物在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗神经原性膀胱障碍、膀胱过动症和间质性膀胱炎。18.伐地那非或其盐、水合物或盐的水合物在制备药用组合物中的用途，所述药用组合物用于治疗神经原性膀胱障碍、膀胱过动症和间质性膀胱炎。全文摘要本发明提供了包含PDE-5和PDE-4抑制剂的药用组合物，所述抑制剂单独或组合用于治疗泌尿系统紊乱，包括良性前列腺增生(BPH)、下尿路症状(LUTS)，尤其是BPH-诱导的膀胱出口梗阻(BOO)所致剌激症状。本发明也提供了筛选这种PDE-5和PDE-4抑制剂的方法，所述抑制剂单独或组合可用于制备治疗所述的泌尿系统紊乱的药物。文档编号A61K31/00GK101316934SQ200680044362公开日2008年12月3日申请日期2006年9月16日优先权日2005年9月29日发明者E·乌尔布里克,H·蒂内尔,J·赫特,P·桑德纳申请人:拜耳医药保健股份公司