专利名称：一种促乳中草药添加剂及其应用方法
技术领域：
本发明属于农业畜牧兽医应用领域，具体涉及一种促乳中草药技术。
(二)
背景技术：
目前哺乳动物产后常表现出泌乳不足或泌乳潜力得不到高效发挥。调查研究表明，有 30%-40%的产妇无奶或少奶；母猪产后泌乳不足的发病率高达30%。在过去的20年中，随着 遗传育种技术的进步，母猪的繁殖能力发生了巨大变化，平均产活仔率提高了9%。但母猪难 以产生足够的乳以满足窝产仔数的增加。从仔猪8-10日龄起，母猪的泌乳量就开始显得不足。 随着泌乳期的延长，乳的供需矛盾日益增加。宠物犬在产后也易出现少乳和无乳。奶牛、奶 山羊等乳用动物的产奶量较低也是困扰我国动物生产者的常见问题之一。
因此，解决母乳不足和充分发挥母畜泌乳潜力成为一个亟待解决的重要课题。育种学家、 营养学家和泌乳生理生化学家分别在遗传育种学、营养学和生理生化学方面取得了一定进展。 随着非营养性调控物质研究和应用的日趋深入，试图通过添加剂来调控和充分挖掘哺乳动物 的乳产量成为一大研究热点。以往人们热衷于用外源激素或类激素物质，如雌激素、孕激素、 生L(激素和碘化酪蛋白等，促进乳腺发育和人工诱发泌乳或者使用抗牛素预防和治疗疾病來 保障母体健康。但由于外源性激素和类激素物质对人畜健康的危害，严重限制了该项技术的 推广应用。抗生素的药物残留、耐药性对环境和人类健康也存在很大威胁。
针对这一现实问题，学者们已经考虑到了祖国文化瑰宝——中草药。我国从古代开始就 发现许多中草药具有补气益血、通经下乳作用，而且具有成分天然性、功能多样性、毒副作 用小、无耐药性、不污染环境等优势，被认为是激素或抗生素的理想替代品之一。但目前用 于动物促奶的中草药添加剂主要依靠传统经验组方，其有效成分不明确、作用效果不稳定、 机理不清楚。因此通过众多试验初筛出促奶效果明显的中草药单剂，从营养学、内分泌学和 免疫学等方面探测其效果和机理。为中草药更好地用T动物生产或人类催乳做出贡献。
(三)
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够提高动物产奶量，促进乳腺发育，增强免疫和抗氧化功 能的促乳中草药添加剂。
本发明的目的是这样实现的它包括王不留行药材，将王不留行60 65'C下烘干，过40 目筛粉碎后得到王不留行原粉。
本发明的另一 目的在十提供一种王不留行的应用方法，即将王不留行原粉按1%的量均匀 添加至动物词粮中，动物饲粮包括大鼠和母猪饲粮以及奶牛精料。本发明的目的是解决大鼠、母猪和奶牛等哺乳动物产后泌乳不足的问题。为解决上述问 题，本发明所采用的技术方案是先用大鼠作为模型动物，从几十种中草药中筛选出具有稳定 促乳效果的中草药，然后再将这些中草药用于大鼠、母猪和奶牛试验。最后发现在大鼠和母 猪饲粮以及奶牛精料补充料中添加1%王不留行促乳效果最好，提高产奶量8.85%-18.23%。且 发现添加1%王不留行后促进大鼠、母猪和奶牛乳腺发育，提高血液红细胞数量和血红蛋白水 平，同时免疫、内分泌和抗氧化功能增强。并对子代内脏器官、血液生理生化指标以及免疫、 内分泌和抗氧化功能没有负面影响。具有很好的经济效益和生态效益。
受试验动物、研究方法等诸多客观条件的限制，中草药单剂对哺乳动物泌乳调控和机 制方面的试验研究甚少，而要真正有效地在畜牧生产中利用中草药的促乳作用，必须从理论 上去揭示中草药促乳效应的黑箱。而要打开黑箱，必须先研究单剂的效果和机制，明确其靶
点作用机理，然后再考虑组合效应或通过提取物来微量化。如果直接以奶牛、母猪、奶山羊 等家畜做中草药促奶效果筛选和机理试验，试验设计困难，成本昂贵。由于大鼠和人类及畜 产哺乳动物基因组的高度同源，生理生化及发育过程基本相同，对环境和药物的反应也及其 相似，所以大鼠已经成为建造人类乳腺相关模型及研究机制的最重要实验动物。所以本发明 以国际通用哺乳动物模型——大鼠为试验动物，初筛出促奶效果明显的中草药单剂，并从生 理学、内分泌学和免疫学等方面揭示其机理，为以后母畜生产试验做一些基础性的研究工作， 本发明从以下六个方面开展了中草药单剂促乳效果、机理及对子代影响的基础研究。
一、 筛选具有促奶作用的中草药单剂。选用妊娠雌性大鼠72只，分成9组，每组8只。 从妊娠期第18天到泌乳期第22天，对照组饲喂基础词粮，试验组分别在基础伺粮的基础上 添加1%中草药(王不留行)。母鼠分娩后当日将每窝仔鼠一律调整为8只。结果表明与对 照组相比，王不留行显著提高了泌乳中后期母鼠的泌乳量和仔鼠增重(尸<0.05或尸O.Ol)， 并对泌乳大鼠的采食量和体重均没有显著影响(&0.05)。
二、 验证步骤一筛选出的促乳中草药是否具有稳定的作用效果，并观察了对泌乳母鼠和 仔鼠血常规值、血液生化指标及其仔鼠脏器系数的影响。选用妊娠雌性大鼠64只，分成4组， 每组16只。从妊娠期第18天到泌乳期第22天，对照组饲喂基础词粮，试验组分别在基础饲 粮的基础上添加1%中草药(王不留行)。母鼠分娩后当闩将每窝仔鼠一律调整为8只。结果 与试验一相一致与对照组相比，王不留行显著提高了泌乳中后期母鼠的泌乳量和仔鼠增重
(尸<0.05或PO.Ol)，同时改善了料奶比(尸<0.05或PO.Ol)。各组仔鼠的脏器(心、肝、 肾、脾和肺)系数差异不显著(/^>0.05)。与对照组相比，王不留行显著提高泌乳期母鼠血液 红细胞数量、红细胞压积和血红蛋白含量(尸<0.05)。各组仔鼠的血常规值及母鼠和仔鼠的血 清生化参数(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶活性和葡萄糖、尿素氮、胆固醇、甘油三酯、总蛋白、白蛋白含量)差异均不显著(&0.05)。
三、 探讨促乳中草药对泌乳母鼠和仔鼠内分泌、免疫和抗氧化功能的影响。选用妊娠18 天大鼠96只，分成4组，每组24只。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮的基础 上添加1%中草药(王不留行)。母鼠分娩后当日将每窝仔鼠一律调整为8只。结果表明，在 内分泌指标方面与对照组相比，王不留行草能显著提高泌乳中后期母鼠血清中生长激素
(GH)、胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)和催乳素(PRL)含量(尸<0.05或尸O.Ol)，但对雌 激素和胰岛素浓度影响不显著(/ >0.05)。在哺乳中后期，王不留行组哺乳仔鼠血清中GH、 IGF-1、T3和T4含量显著高于对照组(尸0.05或尸O.01)，但胰岛素含量差异不显著(PX).05)。 在免疫指标方面王不留行组哺乳仔鼠脾脏淋巴细胞转化率和小肠粘膜分泌型免疫球蛋白A
(slgA)含量均显著高于对照组。泌乳期内各组母鼠和仔鼠血清中免疫球蛋白G (IgG)、白 细胞介素-2 (IL-2)均差异不显著(i^0.05)。在抗氧化指标方面与对照组相比，王不留行、 组22日龄哺乳仔鼠血清SOD活性和TAOC水平及肝脏中SOD活性显著提高(户<0.05)，而 血清中MDA水平显著降低(户<0.05)。
四、 探讨促乳中草药对泌乳母鼠肠道菌群及其仔鼠肠道菌群、形态和消化酶活性的影响。 选用妊娠18天大鼠32只，分成4组，每组8只。对照组饲喂基础词粮，试验组分别在基础饲粮 的基础上添加P/。中草药(王不留行)。母鼠分娩后当日将每窝仔鼠一律调整为8只。结果表明 与对照组相比，王不留行组哺乳仔鼠肠道大肠杆菌数量显著减少(尸<0.05)，双歧杆菌数量显 著增加(户<0.05);王不留行组仔鼠绒毛高度、粘膜厚度和腺窝深度显著提高(PO.05或 PO.01);王不留行组仔鼠十二指肠淀粉酶和胰蛋白酶活性也显著提高(尸<0.05)。
五、 探讨促乳中草药对泌乳母鼠乳腺发育的影响。选用妊娠18天大鼠96只，分成4组， 每组24只。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮的基础上添加1%中草药(王不留 行)。母鼠分娩后当日将每窝仔鼠一律调整为8只。结果表明与对照组相比，王不留行组泌 乳大鼠乳腺湿重和乳腺指数显著提高(PO.05或尸O.01);王不留行也显著提高了泌乳大鼠 乳腺DNA含量(户<0.05)。利用实时荧光定量PCR的相对定量分析方法，发现王不留行促进 了泌乳大鼠乳腺(i-酪蛋白和PRL受体基因的表达。
六、 探讨促乳中草药对断乳仔鼠生长性能的影响。选用妊娠18天大鼠32只，分成4组，每 组8只。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础词粮的基础上添加1%中草药(王不留行)。 母鼠分娩后当闩将每窝仔鼠一律调整为8只。仔鼠在22日龄断奶，每窝选择中等大小两只雌性 仔鼠和两只雄性仔鼠，原笼饲养4周，均饲喂基础饲粮。结果表明，在断乳后l-4周，王不留 行组仔鼠体重和采食量均显著高于对照组(PO.05或尸O.01)。与对照组相比，在断乳后第l 周，王不留行组仔鼠的闩增重显著提高(户O.Ol)，死亡率明显下降。上述试验结果表明，王不留行具有稳定的促乳功效，能对子代生长发育产生积极的影响。 中草药促乳机理涉及内分泌、免疫和抗氧化等多种途径。 本发明的有益效果有
1) 王不留行能够提高泌乳大鼠的泌乳量，改善料奶比，促进哺乳仔鼠生长；
2) 王不留行能提高泌乳母鼠血液中红细胞数目和血红蛋白含量；
3) 王不留行能显著提高泌乳大鼠泌乳期血清中GH、 IGF-1、 PRL水平及哺乳仔鼠血清 中GH、 IGF-1、 T3和T4水平；
4) 泌乳大鼠饲粮中添加王不留行，能显著提高哺乳仔鼠脾脏淋巴细胞转化率和小肠粘膜
slgA含量；
5) 王不留行饲喂泌乳大鼠，能减少哺乳仔鼠肠道大肠杆菌定植、促进双歧杆菌增殖；
6) 王不留行饲喂泌乳大鼠，能显著提高22日龄哺乳仔鼠絨毛高度、粘膜厚度和腺窝深
度；
7) 王不留行泌乳大鼠，能提高了 22日龄哺乳仔鼠十二指肠淀粉酶和胰蛋白酶活性；
8) 王不留行能显著提高泌乳大鼠乳腺湿重和乳腺指数和泌乳大鼠乳腺DNA含量，还能 促进泌乳大鼠乳腺P-酪蛋白和PRL受体基因的表达；
9) 在母鼠哺乳饲粮中添加王不留行，能提高22日龄断乳仔鼠的成活率、采食量和断乳早 期的增重速度。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明
本实施例将王不留行烘干60~65°C、过40目筛粉碎后按1%的量均匀添加到泌乳大鼠、 母猪饲粮或泌乳奶牛精料补充料中，经实验证明能提高产奶量，促进乳腺发育，增强免疫和 抗氧化功能。
1、试验动物和饲粮
本实施例采用150只Sprague Dawley (SD)雌性大鼠(体重220士10g)与雄鼠合笼(雌 雄比例为3: 1)，次晨取雌鼠阴道分泌物镜检，发现精子为妊娠第1天，单笼饲养。在妊娠 第18天，选择108只母鼠，随机分为9组，每组12只。对照组饲喂基础饲粮(基础饲粮配 方与营养成分见表l)，试验组词粮基础饲粮+ 1°/。中草药(王不留行)。王不留行中草药购 自哈尔滨市宝卡大药房，烘干(60~65°C)后粉碎，过40目筛。在分娩后当日选择窝产仔数 8-12只、母鼠休重和仔鼠平均休重相近的72窝，并将每窝仔鼠数调整到8只。试验从母鼠妊 娠第18大丌始到泌乳期第22天结束。研究王不留行对母鼠泌乳量的影响。表l大鼠基础饲粮配方及营养水平 原料Ingredients % 营养成分Composition(3) %
("微量元素预混料组成(%): MnS04.H20， 6.65; ZnS04'H20, 3.39; CuS04,5H20， 0.97; FeS04.7H20， 6.97; KI (含I， 0.65%), 2.2;玉米淀粉，80.80。
'2'维生素预混料组成(kg"): VA, 4000IU; VD3， 1000IU; VE， 50IU; VK3， 50吗；VB,， 6mg; VB2， 6mg; VB6， 7mg; 烟酸，30mg;泛酸钙，16mg;叶酸，2mg;生物素，0.2mg。 (3)为计算值。营养成分含量以风千物质为基础。
2、 饲养管理
SD大鼠由哈尔滨汉方试验鼠类养殖所提供，在东北农业大学动物营养研究所动物房单笼 喂养，自由采食、饮水，室温控制在25士rC左右，相对湿度50%左右，12h光照和黑暗。
3、 检测指标与方法
(1) 大鼠泌乳量
在3、 8、 13、 18 R龄采用仔鼠体重差法(Sampsonand Jansen， 1984)测定大鼠泌乳量， 根据仔鼠体重和增重来评估母鼠泌乳量，其方程为
Yield=[ (0.0322+ (0.0667 x weight) + (0.877 x gain)) x8 '其中 Yield:母鼠日产奶量(g); Weight:仔鼠平均体重(g/d); Gain:仔鼠平均增重(g/d);
8:每窝仔鼠数量。
(2) 母鼠和仔鼠体重
在l、 8、 15、 22闩龄早8: 00称量母鼠和每窝仔鼠重量，计算每周增重速度。称重甜闩 (既7、 14、 21日龄)22:00断料供水。
(3) 采食量
记录哺乳期第1 21天采食量，每周统计1次。哺乳期前2周，因仔鼠完全靠吸吮母乳
7
米Com 29. 71 饼Soybean meal 20 粉Flour 16 麸Wheat bran 12 粱Sorghum 12 粉Fish meal 5
粉Bone meal 2 酉孝 母Brewers dried yeast 1 鱼肝油Cod-liver oil 1 食盐Salt 1
微量元素预混料("Mineral premix 0.25
维生素预混料(2) Vitamin premix 0.04 合计Total 100
粗蛋白Crude protein 19.88
总能Gross energy (MJ/kg) 17.1
蛋氨酸Methionine 0. 36
赖氨酸Lysine 0. 95
钙Calcium 0, 92
总磷Phosphorus 0. 76
玉豆面麦高鱼骨生长，故饲料消耗可视为母鼠采食量，哺乳期第三周则为每窝母鼠和仔鼠的混合采食量。
实验结果表明与对照组相比，王不留行显著提高了泌乳中后期母鼠的泌乳量和仔鼠增 重(尸<0.05或尸O.Ol)，并对泌乳大鼠的采食量和体重均没有显著影响(/^>0.05)。
权利要求
1、一种促乳中草药添加剂，其特征在于它包括王不留行药材，将王不留行60～65℃下烘干，过40目筛粉碎后得到王不留行原粉。
2、 一种促乳中草药添加剂的应用方法，其特征在于将王不留行原粉按1%的量均匀添加至 动物饲粮中。
3、 根据权利要求2所述的一种促乳中草药添加剂的应用方法，其特征在于所述的动物饲粮 包括大鼠和母猪饲粮以及奶牛精料。
全文摘要
本发明提供了一种促乳中草药添加剂及其应用方法。本发明将王不留行60～65℃烘干、过40目筛粉碎后按1％的量均匀添加到泌乳大鼠、母猪饲粮或泌乳奶牛精料补充料中，本发明能提高产奶量8.85％-18.23％，促进乳腺发育，提高血液红细胞数量和血红蛋白水平，增强免疫和抗氧化功能，同时能够提高哺乳动物(大鼠、母猪和奶牛)泌乳性能。
文档编号A61K36/36GK101411402SQ20081020962
公开日2009年4月22日 申请日期2008年12月5日 优先权日2008年12月5日
发明者单安山, 石宝明 申请人:东北农业大学