专利名称：一种治疗心脑血管疾病的人参皂苷组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及一种由人参皂苷单体恥工与人参皂苷单体Rb1组成的治疗心脑血管疾病的药物组合物。
背景技术：
心脑血管疾病是威胁人类健康的首要疾病，是导致死亡和致残最多的疾病，已被世界卫生组织(WHO)认定为危害人类健康的“头号杀手”，全世界每年约有1500万人死于心脑血管病，占死亡人数的50%以上。我国每年约有400万人死于此病，每M秒就有一个人死于此病，每13秒就有一位人因此而致残，已占我国总死因的40%。根据世界卫生组织预测，至2020年，非传染性疾病将占我国死亡原因的79%，其中心血管疾病占首位。心脑血管疾病有三高一低的特点发病率高、致残率高、死亡率高、治愈率低。全世界心脑血管病发病率最高的国家地区就在中国，中国以北方为高发病区。由此导致的家庭、医疗和经济负担已成为不可小觑的社会问题。社会需要更多疗效显著、安全的心脑血管疾病治疗药物。心脑血管系统疾病用药一直是世界范围内药物研究开发、生产应用的热点。因此，开发生产心脑血管系统疾病用药并实现产业化具有极其重要的社会意义和经济意义。三七总皂苷具有活血祛瘀，通脉活络作用，目前三七总皂苷及其制剂血塞通系列产品临床上广泛用于中风偏瘫、瘀血阻络及脑血管疾病后遗症、胸痹心痛，视网膜中央静脉阻塞属瘀血阻滞证者。三七总皂苷中成分复杂，目前已知并且作为质量控制指标的成分主要有人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl、人参皂苷Re、人参皂苷Rd和三七皂苷R1，其他稀有皂苷因含量较低，很难测定其含量，并且因三七药材的差异及各厂家制备工艺的不同导致不同批次三七总皂苷中人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、三七皂苷Rl和其他稀有皂苷含量均有不同程度的差异和比例的不同。在临床用药过程中因不良反应发生率在逐年上升，随着用量不断增加和扩大，安全性问题已成为重要的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种更加安全的治疗心脑血管疾病的药物组合物，具有药效确切，安全性高，不良反应低的优点。本发明提供的治疗心脑血管疾病的药物组合物，包含人参皂苷单体与人参皂苷单体M3l，其中M3l重量比例为1 4 4 1。作为优选，所述药物组合物由人参皂苷单体与人参皂苷单体Rb1组成，其中Rg1 与Rb1重量比例为1 4 4 1 ；所述心脑血管疾病为出血性疾病或缺血性疾病。更优选地，所述药物组合物中与Rb1重量比例为1 4。本发明还提供一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，包含人参皂苷单体和人参皂苷单体M3l以及药学上可接受的辅料，其中M3l重量比例为1 4 4 1。更优选地，所述药物制剂中与Rb1重量比例为1 4。
作为优选，所述药物制剂为注射液、注射用冻干粉针剂或口服制剂。有文献报道，人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl在实验性心肌缺血、对血管平滑肌作用等方面与三七总皂苷相似，且两者都为扩张血管平滑肌的有效成分。因此在前期研究中，发明人利用心脑血管疾病模型，反复筛选验证由人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl组成的配比组合。随着研究的深入，发明人在以抗血小板聚集、抗血栓和抗耐缺氧为指标的心脑血管疾病模型中发现了更具治疗活性的人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl的配比组合。传统三七中人参皂苷Rgl 人参皂苷Rbl配比约1 1，传统知识认为Rgl是活血化淤的主要成分，Rbl活血化瘀的活性很弱，因此，现有技术中人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl配比与传统三七相符，人参皂苷Rgl 人参皂苷Rbl配比约1 1，且认为三七中人参皂苷Rgl具有较强的溶血作用， 人参皂苷Rbl则无溶血作用。在三七皂苷注射剂标准中，溶血试验一直是安全性评价的重要指标。发明人深入研究意外发现，本发明所述新配比人参皂苷Rgl比例大幅降低，而人参皂苷Rbl比例升高， 尺^与！^^重量比例为1 4，其安全性比三七及三七总皂苷制剂更优。按照本发明，所述药物组合物具有显著的抗血小板聚集作用，可预防血栓形成；特异性心肌耐缺氧模型显示所述药物组合物有非常显著的耐心肌缺氧作用，且小鼠的存活时间Rgl Rbl(l 4)组较三七总皂苷组高出近10%。对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成的影响研究显示，本发明所述药物组合物组具非常显著的保护作用(P <0.01)，且Rgl Rbld 4)组和Rgl Rbl (1 1) 组与三七总皂苷组比较死亡率远低于三七总皂苷组，提示可能三七总皂苷中其他成分影响而导致死亡率升高，而Rbl比例的增高使其对抗胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓的能力加强。对断头法小鼠急性脑缺血的影响研究显示，本发明所述药物组合物可显著延长断头小鼠的喘息时间，Rgl RbKl 4、1 5)组的延长率较三七总皂苷组长，而 Rgl RbKl 4)组的延长率较Rgl RbKl 5)组的延长率高。本发明所述药物组合物能明显延长小鼠的凝血时间，其中，Rgl RbKl 4)组的延长率较三七总皂苷组高20 %。溶血实验显示，相同浓度的Rgl Rbl(l 4)组、Rgl Rbl (1 1)组与 Rgl Rbl (4 1)组晚于Rgl Rbl (5 1)组和三七总皂苷组发生溶血反应。本发明所述药物组合物中的人参皂苷或Rb1来源于生药三七、人参、西洋参或半合成，可以从市场上购得，纯度要求为90%以上。本发明所述药物组合物具有活血祛瘀，通脉活络功效，用于瘀血阻络，中风偏瘫， 胸痹心痛及视网膜中央静脉阻塞症，药效确切，不良反应发生率明显降低，Rgl与Rbl重量比例为1 4时，其LD5tl大于1000mg/kg，显著高于三七总皂苷的LD5(^455mg/kg)；可明显抑制血栓形成作用和抗凝作用，能从根本改善缺血性心脑疾病患者因缺血产生的各种损伤。本发明所述药物组合物具有明显的抗血栓、抗血小板聚集和抗耐缺氧作用，并且通过不同比例的配比实验研究发现，其药理活性较三七总皂苷作用强。传统认为三七中人参皂苷Rgl是活血的主要成分，并且具有较强的溶血作用，而人参皂苷Rbl活血作用较弱， 但是本发明证实在复方时，传统认为活血的成分Rgl所占比例少，反而具有更好的活血功效。并且从急性毒性试验和溶血试验看，本发明在安全性方面有明显的改善，本发明与三七总皂苷相比，溶血性明显降低，从而更能保障制剂的安全性。
具体实施例方式本发明公开了一种治疗心脑血管疾病的包含人参皂苷单体Rgl与人参皂苷单体 Rbl的药物组合物，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明治疗心脑血管疾病的人参皂苷单体Rgl和人参皂苷单体Rbl组合物与其他三七总皂苷注射制剂相比具有药效相当，成分清楚固定，质量可控等优势，通过下列药效学实验证明。本发明的更详细情况可在实施例中找到，而不是将保护范围限制到该实施例。下面结合实施例，进一步阐述本发明试验样品人参皂苷Rgl，昆明制药集团股份有限公司提供，纯度99.3%，批号20091011 ；人参皂苷Rbl，昆明制药集团股份有限公司提供，纯度98.6%，批号20091109;三七总皂苷，昆明制药集团股份有限公司提供，含量93%，批号20080115。实施例1、人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl及其配比对ADP诱导家兔体外血小板聚集的影响1 药品1. 1受试药物配制实验前用蒸馏水配制成高浓度为3. 5700mg/ml、中浓度为1. 7850mg/ml、低浓度为 0. 8925mg/ml作为终浓度的溶液，人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的不同配比溶液配制均按人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl上述浓度的不同体积配比混勻而成。正常对照组选用生理盐水，其中各剂量的受试药物及生理盐水中每IOml中加入吐温30 μ 1。以上受试药物在体外给药前均配制成澄明溶液。1. 2 试齐[J二磷酸腺苷(ADP) =Sigma公司产品；枸橼酸钠天津市化学试剂三厂，批号 061107 ；氯化钠注射液昆明南疆制药有限公司，批号Α08070412 ；水合氯醛(分析纯)天津市瑞金特化学品有限公司，批号20060917 ；吐温-80(化学纯CP)国药集团化学试剂有限公司，批号:F20050324o2 动物健康家兔，早兼用，体重2-2. 5kg,四川省医学科学研究院动物研究所提供，生产批号Dossy-2009-10。3 仪器LBY-NJ2血液凝聚仪北京普利生仪器有限公司；LG10-2. 4A高速离心机北京高速离心机厂。4统计方法
计量资料用单因素方差分析，多组间比较采用Durmett检验。试验方法1试验原理富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)具有一定的浊度，PRP中所含血小板数目直接影响到浊度高度。当诱导剂加入PRP后，在搅拌的条件下，血小板聚集成聚集物， PRP浊度下降，透光率增加，因此通过测定PRP的浊度变化来表示血小板的聚集程度。由于血小板聚集仪中的光电系统可将PRP的浊度变化装换为电讯号变化，并用记录仪进行描记。2药物浓度设置及依据2. 1人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl及三七总皂苷高浓度终浓度为3. 57mg/ml而设置。本试验高、中、低浓度组剂量设置按等比级数设置为(1)A药人参皂苷Rgl、B药人参皂苷Rbl及三七总皂苷高剂量组3. 5700mg/ml ； (2)人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl及三七总皂苷中浓度组1. 7850mg/ml ； (3)人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl及三七总皂苷低浓度组 0.8925mg/ml。2. 2给药途径各药均为体外给予。2. 3观察指标血小板最大聚集率及血小板聚集抑制率。3试验步骤3. 1 取血用10%的水合氯醛腹腔注射麻醉家兔，自颈总动脉取血，收集于一次性塑料试管中，采用3. 2%枸橼酸钠抗凝，血液与抗凝剂容积比为9 1，取后立即颠倒混勻(不可用力晃动)。3.2 富血小板血浆(platelet rich plasma, PRP)和贫血小板血浆(platelet poorplasma, PPP)的制备血液于室温分别采用800r/min离心6min，所得上层血浆即为不同转速PRP。剩余血液再以3000r/min离心15min，上层液即为PPP。试验过程中，PRP中的血小板数控制在约为50万个· mm-3。。3. 3血小板最大聚集率(MaxRate)的测定按Born氏比浊法原理采用血小板聚集仪进行测定。分别取不同转速PPP300 μ 1 于比浊杯中调零，取PRP 270 μ 1于另一比浊杯中加溶媒或受试药液30 μ 1，在37°C预热孔中温育5min。测定时将PPP杯插到测试孔中调零，取出PPP杯插入PRP杯，并在PRP中加入搅拌子，然后在仪器操作提示下加入终浓度为15ymol/L的诱导剂ADP 10μ1，诱导血小板聚集，测定5min内血小板最大聚集率。血小板聚集抑制率按下式计算聚集抑制率(％ ) =(1-给药组聚集率/对照组聚集率)X 100%。4试验结果人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl三七总皂苷各浓度和人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl 各配比对ADP诱导家兔体外血小板聚集作用的影响，结果见表1，从表1可以看出与正常对照组比较，人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl高、中剂量组及三七总皂苷高、中、低剂量组与正常对照组比较，差异均具有显著性意义(P < 0. 05、P < 0. 01或？ < 0. 001) ；Rgl Rbl = 1 1,4 1,1 4,2 1,1 2的高浓度及Rgl Rbl = 1 4的中浓度与正常对照组比较，差异均具有显著性意义(P < 0. 05、P < 0. 01或P < 0. 001)。5.结论人参皂苷Rgl，人参皂苷Rbl高、中浓度及三七总皂苷高、中、低浓度，及Rgl Rbl =1 1，4 1,1 4,2 1,1 2的高浓度及Rgl Rbl = 1 4的中浓度具有显著的抗血小板聚集作用。实验结果可见在高中剂量时，Rgl Rbl = I 4对血小板的抑制率与三七总皂苷的相同，提示该配比有预防血栓形成的作用。表1A、B药及三七总皂苷和A B不同配比对ADP诱导家兔体外血小板聚集率的影响(X 士S，n = 6)
权利要求
1.一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，包含人参皂苷单体Rg1与人参皂苷单体Rb1, 其中!^与！^重量比例为1 4 4 1。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，由人参皂苷单体Rg1与人参皂苷单体Rb1组成，其中与Rb1重量比例为1 4 4 1。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，其中与Rb1重量比例为 1 4。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述心脑血管疾病为出血性疾病或缺血性疾病。
5.一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，包含人参皂苷单体恥工和人参皂苷单体Rb1以及药学上可接受的辅料，其中与I^b1重量比例为1 4 4 1。
6.根据权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，收工与Rb1重量比例为1 4。
7.根据权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，其为注射液或注射用冻干粉针剂。
8.根据权利要求5所述药物制剂，其特征在于，其为口服制剂。
全文摘要
本发明涉及医药领域，公开了一种用于治疗心脑血管疾病的药物组合物，包含重量比例为1∶4～4∶1的人参皂苷单体Rg1和人参皂苷单体Rb1。本发明所述药物组合物具有活血祛瘀，通脉活络功效，用于瘀血阻络，中风偏瘫，胸痹心痛及视网膜中央静脉阻塞症，药效确切，不良反应发生率明显降低，Rg1与Rb1重量比例为1∶4时，其LD50大于1000mg/kg，显著高于三七总皂苷LD50，可明显抑制血栓形成作用和抗凝作用，从根本改善缺血性心脑疾病患者因缺血产生的各种损伤。
文档编号A61P9/00GK102397281SQ20101028027
公开日2012年4月4日 申请日期2010年9月9日 优先权日2010年9月9日
发明者刘一丹, 刘国光, 杨旭娟, 高宏涛, 龚云麒 申请人:昆明制药集团股份有限公司