专利名称：一种透明质酸盐凝胶颗粒及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种透明质酸盐凝胶颗粒及其制备方法。
背景技术：
透明质酸(hyaluronic acid,简称HA)，又称为糖醛酸。天然透明质酸是一种高分 子的多糖体，是由葡萄醛酸-N-乙酸氨基葡萄糖为双糖分子单位组成的直链高分子多糖， 平均分子量介于10万到1000万Dalton之间，存在于细胞间质中。从脊椎动物的结缔组织， 如鸡冠、眼球、脐带、软骨等部位，可以萃取出透明质酸。过去透明质酸的来源多萃取自动物 身上，现在则由人工合成，摒除了过敏及感染等问题。透明质酸原本只用于保湿作用，由于其具有高度的粘弹性，良好的生物相容性和 无免疫原性，再植入身体后不引起异体排斥反应和过敏反应，因此目前已列入除皱整形的 行列，这种整形技术是利用细菌发酵所培养出来的非动物稳定性透明质酸，藉由透明质酸 以填充物的方式注射进入真皮皱折凹陷，或希望丰润的部位，达到除皱纹与修饰脸部的效 果，可以立即除皱和改变容貌。透明质酸钠为透明质酸的钠盐，具有良好的生物相容性和独特的粘弹性，用于注 入皮下以减轻皱纹，改进皮肤外观和结构，或改进唇形，鼻形，但是其在室温下能溶解于水 中，而且注射到人体后，能被人体中的酶如透明质酸酶和自由基所分解，在一些应用中会受 到限制，所以目前通过其他方法来制备更稳定的透明质酸钠，尤其是通过交联透明质酸分 子形成凝胶状以提高其在体内的保留时间，其中使用缩水甘油醚对其进行交联，可以得到 可注射到体内，体内保留时间长，填充效果好的凝胶制剂。现有技术中，关于凝胶的交联有很多，如CN159044A公开的凝胶制备方法，但 其所用原料纯度较低需先行脱蛋白处理，这就使其制备方法较复杂，且周期较长；而 CN101264348所使用的交联方法为将透明质酸加入到透明质酸钠溶液中，再通过交联剂交 联，但其交联效果不是很理想，分解周期短；CN101502677公开的方法将凝胶在充分膨胀下 过筛成颗粒，然后再用缓冲液使其收缩，最后过滤或离心收集颗粒，使操作过程中的难度增 加，凝胶颗粒与缓冲液通过离心的分离效果不理想，而且其凝胶颗粒过小，使其在体内的降 解和吸收过快。因此，需要一种原料纯度高、工艺简单的透明质酸盐凝胶颗粒的制备方法及由该 方法制得的透明质酸盐凝胶颗粒。
发明内容
本发明的目的是提供一种透明质酸盐凝胶颗粒。本发明的另一个目的是提供一种制备透明质酸盐凝胶颗粒的方法。本发明的又一个目的是透明质酸盐凝胶颗粒用于美容中的用途。本发明涉及一种透明质酸盐凝胶颗粒，其是由下述步骤制备而成的a.将分子量为50万-500万道尔顿的透明质酸盐加入到0. 5% 的碱溶液中，搅拌使所述透明质酸盐完全溶解，所述透明质酸盐与所述碱溶液配制成为50mg/ml-200mg/ ml的透明质酸盐碱性溶液，然后加入所述透明质酸盐重量的_10衬％的交联剂，搅拌 均勻，在25°C -50°C下反应2-8小时，得凝胶块；b.将所述凝胶块加入到去离子水中于25°C _70°C条件下纯化4-12小时，去除去离 子水，得溶胀的含水凝胶块；以及c.将所述含水凝胶块用生理平衡液清洗，静止透析6-24小时，更换至少两次生理 平衡液，接着去除生理平衡液，将所得到的凝胶块过60-100目筛，得透明质酸盐凝胶颗粒。本发明所用的透明质酸盐选自透明质酸钠，透明质酸钾和透明质酸钙。优选地，本发明的透明质酸盐呈干粉的形式。优选地，本发明的透明质酸盐是透明质酸钠干粉。本发明的碱溶液为本领域常用的碱溶液，如可以采用氢氧化钠水溶液或氢氧化钾 水溶液，优选0. 8 %的氢氧化钠水溶液。所用的交联剂为双环氧化物，其选自乙二醇二缩水甘油醚或丁二醇二缩水甘油 醚，优选丁二醇二缩水甘油醚。本发明所用的生理平衡液为本领域常用的生理平衡液，如选自磷酸盐溶液、氯化 钠溶液和PBS缓冲液，优选PBS缓冲液。本发明还涉及一种透明质酸盐凝胶颗粒的制备方法，其包括下述步骤a.将分子量为50万-500万道尔顿的透明质酸盐加入到0. 5% 的碱溶液中， 搅拌使所述透明质酸盐完全溶解，所述透明质酸盐与所述碱溶液配制成为50mg/ml-200mg/ ml的透明质酸盐碱性溶液，然后加入所述透明质酸盐重量的_10衬％的交联剂，搅拌 均勻，在25°C -50°C下反应2-8小时，得凝胶块；b.将所述凝胶块加入到去离子水中于25°C _70°C条件下纯化4-12小时，去除去离 子水，得溶胀的含水凝胶块；以及c.将所述含水凝胶块用生理平衡液清洗，静止透析6-24小时，更换至少两次生理 平衡液，接着去除生理平衡液，将所得到的凝胶块过60-100目筛，得透明质酸盐凝胶颗粒。将本发明的透明质酸盐凝胶颗粒在室温下，经过真空减压除去反应过程中带进的 空气泡，高压蒸汽灭菌，灌装，即可直接用于注射。使用本发明的凝胶颗粒时，将该凝胶颗粒盛装在由锥头帽封口的一次性玻璃注射 器内，注射接口为旋锁接口，配注射针头(30Gxl/2)，从而将透明质酸盐凝胶颗粒注射入真 皮内，以进行面部皱纹纠正治疗。本发明所用的透明质酸盐为高纯度医用级原料，蛋白含量极低，无需进行脱蛋白 处理，从而降低生产和操作成本，使透明质酸盐在碱溶液条件下进行交联后制得的凝胶颗 粒具有更好的粘弹性，交联效果好，增加了其在人体内的半衰期，使其在体内可存留半年到 一年左右，而已有的凝胶颗粒注射剂至多有半年的存留时间。通过本发明的方法可以使透明质酸盐分子经交联、颗粒化后，更易于注入体内，且 其PH值，渗透压等指标都与人体的生理指标相接近，无副作用，能够更安全地用于医疗美容。本发明的制备方法周期短，操作可行性高，适合工业化生产。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明做进一步说明，以下实施例中采用的物质，除了注明的 之外，其余均为市售。实施例1 将l.Og透明质酸钠干粉(分子量180万道尔顿，采购自山东福瑞达)，加入到IOml 的0. 8%氢氧化钠溶液中，搅拌至透明状使其充分溶解，再加入80μ 1的丁二醇二缩水甘油 醚(CA :2425-79-8)，搅拌均勻，于30°C下恒温反应7小时，得透明状凝胶块，加入到500ml 去离子水中，于70°C恒温6小时，纯化溶胀过程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml PBS 缓冲液(渗透压为 350，每 IOOOml 含有 NaH2PO4 · 2H20 0. 099mg、NaH2PO4 · 2Η201· 123g、 NaCl 10. 45g)静止透析12小时，期间更换两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢 筛，得透明质酸钠凝胶颗粒。实施例2 将l.Og透明质酸钠干粉(分子量180万道尔顿，采购自山东福瑞达)，加入到IOml 的0. 8%氢氧化钠溶液中，搅拌至透明状使其充分溶解，再加入80μ 1的丁二醇二缩水甘油 醚(CA :2425-79-8)，搅拌均勻，于40°C恒温反应4小时，得透明状凝胶块，加入到500ml去 离子水中，于70°C恒温6小时，纯化溶胀过程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml PBS 缓冲液(渗透压为 350，每 IOOOml 含有 NaH2PO4 ·2Η20 0. 099mg,NaH2PO4 ·2Η20 1. 123g、NaCl 10. 45g)静止透析12小时，期间更换两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢筛，得 透明质酸钠凝胶颗粒。实施例3 将l.Og透明质酸钠干粉(分子量180万道尔顿，采购自山东福瑞达)，加入到IOml 的0. 8%氢氧化钠溶液中，搅拌至透明状使其充分溶解，再加入80μ 1的丁二醇二缩水甘油 醚(CA :2425-79-8)，搅拌均勻，于50°C下恒温反应4小时，得透明状凝胶块，加入到500ml 去离子水中，于70°C恒温6小时，纯化溶胀过程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml PBS 缓冲液(渗透压为 350，每 IOOOml 含有 NaH2PO4 · 2H20 0. 099mg、NaH2PO4 · 2Η201· 123g、 NaCl 10. 45g)静止透析12小时，期间更换两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢 筛，得透明质酸钠凝胶颗粒。实施例4 将l.Og透明质酸钠干粉(分子量180万道尔顿，采购自山东福瑞达)，加入到IOml 的0. 8%氢氧化钠溶液中，搅拌至透明状使其充分溶解，再加入40μ 1的丁二醇二缩水甘油 醚(CA :2425-79-8)，搅拌均勻，于50°C下恒温反应4小时，得透明状凝胶块，加入到500ml 去离子水中，于70°C恒温6小时，纯化溶胀过程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml PBS 缓冲液(渗透压为 350，每 IOOOml 含有 NaH2PO4 · 2H20 0. 099mg、NaH2PO4 · 2Η201· 123g、 NaCl 10. 45g)静止透析12小时，期间更换两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢 筛，得透明质酸钠凝胶颗粒。实施例5 将l.Og透明质酸钠干粉(分子量180万道尔顿，采购自山东福瑞达)，加入到IOml 的0. 8%氢氧化钠溶液中，搅拌至透明状使其充分溶解，再加入80μ 1的丁二醇二缩水甘油 醚(CA :2425-79-8)，搅拌均勻，于50°C恒温反应4小时，得透明状凝胶块，加入到500ml去CN 102120833 A说 明 书4/4 页
离子水中，于30°C恒温12小时，纯化溶胀过程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml生 理平衡液(渗透压为 350，每 IOOOml 含有 NaH2PO4 · 2H20 0. 099mg, NaH2PO4 · 2H20 1. 123g、 NaCl 10. 45g)静止透析12小时，期间更换两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢 筛，得透明质酸钠凝胶颗粒。实施例6 将l.Og透明质酸钠干粉(分子量180万道尔顿，采购自山东福瑞达)，加入到IOml 的0. 8%氢氧化钠溶液中，搅拌至透明状使其充分溶解，再加入80μ μ 1的丁二醇二缩水甘 油醚(CA :2425-79-8)，搅拌均勻，于50°C恒温反应4小时，得透明状凝胶块，加入到500ml 去离子水中，于50°C恒温8小时，纯化溶胀过程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml PBS 缓冲液(渗透压为 350，每 IOOOml 含有 NaH2PO4 ·2Η20 0. 099mg、Na2HPO4 · 12Η20 1. 123g、 NaCl 10. 45g)静止透析12小时，期间更换两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢 筛，得透明质酸钠凝胶颗粒。实施例7 将1. Og透明质酸钾干粉，加入到IOml 0. 8%氢氧化钾溶液中，搅拌至透明状使其 充分溶解，再加入80 μ 1的丁二醇二缩水甘油醚(CA 2425-79-8)，搅拌均勻，于50°C恒温 反应4小时，得透明状凝胶块，加入到500ml去离子水中，于70°C恒温6小时，纯化溶胀过 程中换一次水，过滤，将所得凝胶块用500ml PBS缓冲液(渗透压为350，每IOOOml含有 NaH2PO4 ·2Η20 0. 099mg,Na2HPO4 · 12H20 1. 123g、NaCl 10. 45g)静止透析 12 小时，期间更换 两次PBS缓冲液，过滤，将凝胶块过80目不锈钢筛，得透明质酸钾凝胶颗粒。下面的表1为实施例1-7所得到的透明质酸盐凝胶颗粒的性能。表 1
实施例编号实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6实施例7含量(％)99.6100.2101.199.799.499.599.2收率(％)82.484.387.479.686.987.285.6粒度(mm)0.3980.4010.3990.4020.4050.3990.401PH6.97.07.17.17.07.17.0渗透压346342344346.350344345(mOsmol/L) 从表1的数据可以看出，由本发明的方法制备的透明质酸盐凝胶颗粒的pH值，渗 透压等指标都与人体的生理指标相接近，无副作用，能够更安全地用于美容应用。
权利要求
1.一种透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述透明质酸盐凝胶颗粒是由下述步骤制备 而成的a.将分子量为50万-500万道尔顿的透明质酸盐加入到0.5%的碱溶液中，搅 拌使所述透明质酸盐完全溶解，所述透明质酸盐与所述碱溶液配制成为50mg/ml-200mg/ml 的透明质酸盐碱性溶液，然后加入所述透明质酸盐重量的-10wt%的交联剂，搅拌均 勻，在25°C -50°C下反应2-8小时，得凝胶块；b.将所述凝胶块加入到去离子水中于25°C-70°C条件下纯化4-12小时，去除去离子 水，得溶胀的含水凝胶块；以及c.将所述含水凝胶块用生理平衡液清洗，静止透析6-M小时，更换至少两次生理平衡 液，接着去除生理平衡液，将所得到的凝胶块过60-100目筛，得透明质酸盐凝胶颗粒。
2.如权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述透明质酸盐选自透明质 酸钠，透明质酸钾和透明质酸钙；所述碱溶液为氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液；所述 生理平衡液选自磷酸盐溶液、氯化钠溶液和PBS缓冲液；所述交联剂为双环氧化物。
3.如权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述透明质酸盐呈干粉的形式。
4.如权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述透明质酸盐是透明质酸 钠干粉。
5.如权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述碱溶液为0.8%的氢氧 化钠水溶液。
6.如权利要求2所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述双环氧化物是乙二醇二 缩水甘油醚或丁二醇二缩水甘油醚。
7.如权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述生理平衡液是PBS缓冲液。
8.如权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒，其特征在于所述透明质酸盐凝胶颗粒作 为注射剂直接用于注射。
9.一种制备如权利要求1-8中任一项所述的透明质酸盐凝胶颗粒的方法，其特征在于 所述方法包括下述步骤a.将分子量为50万-500万道尔顿的透明质酸盐加入到0.5%的碱溶液中，搅 拌使所述透明质酸盐完全溶解，所述透明质酸盐与所述碱溶液配制成为50mg/ml-200mg/ml 的透明质酸盐碱性溶液，然后加入所述透明质酸盐重量的-10wt%的交联剂，搅拌均 勻，在25°C -50°C下反应2-8小时，得凝胶块；b.将所述凝胶块加入到去离子水中于25°C-70°C条件下纯化4-12小时，去除去离子 水，得溶胀的含水凝胶块；以及c.将所述含水凝胶块用生理平衡液清洗，静止透析6-M小时，更换至少两次生理平衡 液，接着去除生理平衡液，将所得到的凝胶块过60-100目筛，得透明质酸盐凝胶颗粒。
10.权利要求1所述的透明质酸盐凝胶颗粒用于美容中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种透明质酸盐凝胶颗粒及其制备方法。本发明的透明质酸盐凝胶颗粒的制备方法包括使用透明质酸盐与交联剂交联，经过吸水溶胀形成凝胶，再用生理平衡液进行平衡、透析，最后过筛制得透明质酸盐凝胶颗粒。通过本发明的方法制备的透明质酸盐凝胶颗粒具有更好的交联效果，其粘度，粒度，稳定性均非常适用于美容用途。
文档编号A61L27/20GK102120833SQ20111000428
公开日2011年7月13日 申请日期2011年1月10日 优先权日2011年1月10日
发明者郝宏山 申请人:深圳市资福药业有限公司