专利名称：一种注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶及其制备与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医用美容填充材料，特别涉及ー种注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶及制备方法和在软组织填充材料中的应用。
(ニ)
背景技术：
目前在组织修补、组织增强中，非手术治疗的增长迅速，所占比例已经超过了 80% ；由于局部注射属于微创治疗方法，只需将某些药物和化学制剂注入结构松弛的软组织局部，改善局部松弛程度，提高局部耐受压力的能力，从而使该组织恢复其正常功能或外观。随着科学技术的不断发展，组织填充材料也越来越多，根据其成分和生物学特征可以将它们分为生物材料类和细胞注射产品类。
采用细胞注射是极具应用前景的治疗方法，细胞可以合成并分泌细胞外基质，能促进胶原蛋白分子的合成，恢复缺损组织。但由于细胞产品多为液态，注射到局部组织后难以控制其分布，不能塑型，影响组织修补、增强的效果。已报道的用于组织修补、增强类的生物材料已有很多，其中透明质酸较为突出。透明质酸是β -D-Nこ酰氨基葡萄糖和β -D-葡萄糖醛酸相互结合的直链状高分子多糖，由于不具有种属及脏器特异性。透明质酸有特殊的流体力学性能，这使它具有高度粘弾性、可塑性、滲透性和良好的生物相容性。它还具有防止组织粘连，大大減少手术后并发症，同时，有促进创伤愈合，减少症痕的优点。当植入到人体内之后，不引起异体排斥反应和过敏反应。天然的外源性的透明质酸分子量大约在10万飞00万Dalton，在体内的存留时间大约在3 15天左右，很大程度上限制了其在某些领域的应用。专利CN1590444A采用透明质酸(HA)与交联剂(BDDE)用适当比例反应2_24小时，形成透明质酸凝胶。単一的透明质酸凝胶作为软组织填充材料，过一段时间就会因代谢而分解吸收，达不到长期填充的目的。专利CN101502676A采用的方法为，将聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球和交联透明质酸凝胶微粒混合。由于PMMA微球的存在，使产品在肌体组织中的存留具有持久性。然而由于PMMA是ー种高分子聚合物，会对局部组织产生异物刺激，生物相容性相对较差。研究表明，蚕丝由约75%的丝素和约25%的丝胶所组成，它是蚕在絹丝腺内分泌出来的天然蛋白质，由18种氨基酸组成,主要由重复的Gly-Ala-Gly-Ala-Ser多胎单元组成，与人体胶原蛋白有一定的相似。它无毒性、无刺激性，是ー种降解缓慢，且相对稳定的生物材料，被广泛用于生物材料学科、组织工程及药物释放等领域。有研究者采用超声诱导或聚合物静电作用等方法制备丝素蛋白一透明质酸复合凝胶。与单纯的透明质酸凝胶相比，大大延长了凝胶的降解时间。然采用上述方法制备的复合凝胶，仅靠单纯丝素蛋白，或丝素蛋白和透明质酸之间的物理作用，透明质酸含量较少，复合凝胶的吸水性较差。因此，寻找ー种制备丝素蛋白和透明质酸复合凝胶的方法，能够使材料具良好生物相容性，且兼具良好的吸水性、缓慢的降解速度。故探寻ー种兼具良好生物相容性、吸水性、体内保留时间长的丝素蛋白和透明质酸复合材料，能够长期有效的组织修补、增强材料，成为本发明的出发点。
发明内容
本发明目的是克服上述已有技术的不足，采用制备透明质酸、丝素蛋白复合材料的方法，提供一种兼具良好生物相容性、力学性能及良好的吸水性，能够长期有效的组织修ネト、增强材料。本发明采用的技术方案是ー种注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐广50份和交联剂O. 08^4份；所述丝素蛋白微球是将质量浓度5%的丝素蛋白溶液在25°C下静置凝胶后，在24000rpm/min条件下均质5min，过筛，收集过20(Γ325目筛的丝素蛋白微球；所述交联剂为ニこ烯基砜或ニ缩水甘油醚类化合物，优选为ニこ烯基砜、こニ醇ニ缩水甘油醚、丁ニ醇ニ缩水甘油醚或聚丙ニ醇ニ缩水甘油醚中的ー种或两种以上任意比例的混合，最优选丁ニ醇ニ缩水甘油醚。所述透明质酸盐优选为透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁中的ー种或两种以 上任意比例的混合，更优选为透明质酸钠。进ー步，所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐10 30份和交联剂O. 8 2. 4份。更进一歩，所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐30份和交联剂2. 4份。更进一歩，所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐20份和交联剂I. 6份。更进一歩，所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐10份和交联剂O. 8份。进ー步，本发明所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶的制备方法为(1)丝素蛋白微球的制备将桑蚕蚕丝加入到质量浓度O. 2%的碳酸钠水溶液中，96 100°C水浴60min，过滤，取滤饼重复水浴操作3次，取最后一次过滤的滤饼干燥后用9mol/L的溴化锂水溶液溶解，在60°C水浴6h，然后在8000rpm条件下离心5min，收集上清液，用截留分子量(MW)为800(Γ14000的透析袋在室温下进行透析，以纯化水为透析液，磁力搅拌透析3天，取截留液用水配制成质量浓度5%的丝素蛋白溶液(取一定量所述的截留液在80°C烘箱中干燥4h至恒重，计算出截留液的含水量，进而将截留液用水配制成质量浓度5%的丝素蛋白溶液)；将质量浓度5%的丝素蛋白溶液在25°C下静置凝胶后，在24000rpm/min条件下均质5min，过筛，收集过20(Γ325目筛的丝素蛋白微粒；所述碳酸钠水溶液的体积用量以桑蚕蚕丝质量计为67. 5^125ml/g (优选67. 5ml/g)，所述溴化锂水溶液的体积用量以桑蚕蚕丝质量计为5飞.25ml/g；(2)注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶的制备将配方量的透明质酸盐用质量浓度1%的氢氧化钠水溶液配制成O. lg/ml的透明质酸盐溶液，然后将配方量的丝素蛋白微粒加入到上述透明质酸盐溶液中充分混匀，再加入配方量交联剂混匀，25飞(TC条件下静置2lh，形成丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料，将丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料置于截留分子量(MW) 8000^14000的透析袋中，以pH为7. 4的PBS缓冲液为透析液进行透析处理，取透析处理后的复合凝胶材料(即截留液)在24000rpm/min条件下均质5 15min,过60目筛，收集粒径为60目筛的颗粒即为所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶；所述透明质酸盐为透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁中的ー种或两种以上任意比例的混合，优选透明质酸钠，所述交联剂为ニこ烯基砜、こニ醇ニ缩水甘油醚、丁ニ醇ニ缩水甘油醚或聚丙ニ醇ニ缩水甘油醚中的ー种或两种以上任意比例的混合，优选丁ニ醇ニ缩水甘油醚。进ー步，步骤(2)加入交联剂混匀后，优选在3(T40°C条件下静置。进ー步，步骤(2)加入交联剂混匀后，优选在4 6h条件下静置。
本发明提供所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶在软组织填充材料中的应用，它具有粒径均一，易于注射、与单纯的HA注射凝胶相比，存留时间长等优点。所述软组织填充材料是指面部除皱等微整形填充材料。丝素蛋白微球的平均粒径范围为I 120μπι，优选2(Γ 00μπι，更优选5(Γ75μπι，由
于丝素蛋白微球在溶液中为白色，不透明，因此，本发明复合凝胶外观呈现乳白色。与现有技术相比，本发明所述的丝素蛋白透明质酸复合凝胶具有以下显著优点I)本发明与传统透明质酸单纯交联的凝胶相比，丝素蛋白透明质酸复合凝胶体外抗酶解能力显著提高，体外抗酶解试验证明，在相同酶液，相同时间作用下，丝素蛋白透明质酸复合凝胶内的透明质酸的体外抗酶解能力随着丝素蛋白颗粒的增加而增加，由此可以发现，丝素蛋白颗粒的加入，有效的减缓了复合凝胶的降解速度，延长其在组织修补，填充的作用时间，提闻了材料的有效性；2)本发明与单纯丝素蛋白颗粒材料相比，HA的加入，增加了材料的吸水性，提高材料的润滑度和储水功能，可显著增加材料的填充效果；3)本发明与单纯物理方法混合丝素蛋白颗粒和HA颗粒相比，由于丝素蛋白颗粒是包裹在HA凝胶颗粒中的，两者混合更加均匀，SD大鼠体内试验证明，丝素蛋白透明质酸复合凝胶和单纯的透明质酸交联凝胶一祥，炎症反应小，生物相容性好，这提高了材料的安全性。
图I葡萄糖醛酸标准曲线；图2丝素蛋白透明质酸复合凝胶体外抗降解能力样本I为实施例I制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶，样本2为实施例2制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶，样本3为实施例3制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶；图3丝素蛋白透明质酸复合凝胶在体内植入两周后的组织切片显微图，A为实施例I制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶在体内植入两周后的组织切片显微图，B为实施例I制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶在体内植入八周后的组织切片显微图；图4丝素蛋白透明质酸复合凝胶及透明质酸凝胶在体内植入两周后的组织切片显微图，Al为实施例广4制备丝素蛋白透明质酸复合凝胶和透明质酸凝胶体内植入两周的HE染色图片，E为对照样本(PBS)体内植入两周后的HE染色图片。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此实施例I :丝素蛋白透明质酸复合凝胶(I)丝素蛋白微球的制备40g桑蚕蚕丝加入到2700ml质量浓度O. 2%的碳酸钠水溶液中，96 100°C水浴60min，过滤，取滤饼重复水浴3次，取最后一次过滤的滤饼在60°C烘干后用9mol/L的溴化锂水溶液200ml缓慢溶解，在60°C水浴6h，然后8000rpm离心5min，取上清，将离心处理后的上清液装入透析袋(MW8，00(Γ14，000)，以纯化水为透析液，磁力搅拌透析三天，取截留液，并用纯化水配制成质量浓度为5%的丝素蛋白溶液。在25°C条件下，将上述5%丝素蛋白溶液静置形成白色凝胶材料5g，将凝胶材料用均质机(T25, IKA)在24000rpm/min条件下均质5min后,得到直径大小不同的丝素蛋白凝胶颗粒5g，过滤，收集过200目筛的丝素蛋白颗粒3. 5g，称取少量收集的丝素蛋白颗粒干燥 至恒重确定丝素蛋白颗粒的含水量，并确定丝素蛋白颗粒质量浓度为3. 23%。(2)丝素蛋白透明质酸复合凝胶将O. 7g透明质酸钠溶解在7ml质量浓度1%氢氧化钠溶液中制成O. lg/ml透明质酸钠溶液，并向透明质酸钠溶液中加入步骤(I)获得的丝素蛋白颗粒O. 712g (O. 023/0. 0323=0. 712g，丝素蛋白颗粒干重为O. 023g),充分混合后加入56 μ I (O. 056g)的BDDE (1，4-丁ニ醇ニ缩水甘油醚)，混合均匀后，置于40°C条件下静置4小时进行交联，即可形成丝素蛋白-HA复合凝胶材料。将上述丝素蛋白-HA复合凝胶材料加入到MW8，000-14, 000的透析袋中，以pH值为7. 4的PBS缓冲液为透析液，在磁力搅拌下进行透析处理，将透析处理后的复合凝胶材料用均质机在24000rpm/min条件下均质IOmin后，置于注射器内挤压使凝胶通过60目筛，收集复合凝胶颗粒，120°C高温高压蒸汽灭菌15min后，进行无菌分装，装入一次性注射器中。即得到注射用的丝素蛋白透明质酸复合凝胶35g，可用作皮下注射产品。取丝素蛋白透明质酸复合凝胶用蒸馏水作等质量比稀释(配比见表I所示)，混合均匀后，室温(25°C)静置半小时，测量溶液的pH值，每个样本重复三次，并取平均值作为样本的pH值，结果见表I所
/Jn ο实施例2丝素蛋白透明质酸复合凝胶(I)根据实施例I步骤(I)所述的方法，制备过200目筛的丝素蛋白颗粒3. 5g，质量浓度为3. 23%。(2)将O. 7g透明质酸钠溶解在7ml质量浓度1%氢氧化钠溶液中制成O. Ig/ml透明质酸钠溶液，并向透明质酸溶液中加入步骤(I)获得的丝素蛋白颗粒I. 0836g(O. 035/0. 0323=1. 0836g),充分混合后加入56 μ I的BDDE，混合均匀后，置于40°C条件下静置6小时进行交联，形成丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料。将上述丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料进行透析处理，其它操作同实施例1，得到注射用的丝素蛋白透明质酸复合凝胶35g，可用作组织填充注射产品。取丝素蛋白透明质酸复合凝胶用蒸馏水作等质量比稀释(配比见表I所示)，混合均匀后，室温(25°C)静置半小时，测量溶液的PH值，每个样本重复三次，并取平均值作为样本的pH值，结果见表I所示。实施例3 :丝素蛋白透明质酸复合凝胶(I)根据实施例I步骤(I)所述的方法，制备过200目筛的丝素蛋白颗粒3. 5g，质量浓度为3. 23%。(2)将O. 7g透明质酸钠溶解在7ml质量浓度1%氢氧化钠溶液中制成O. lg/ml的透明质酸钠溶液，井向透明质酸钠溶液中加入2. 167g (O. 07/0. 0323=2. 167g)丝素蛋白颗粒，充分混合后加入56 μ I的BDDE，混合均匀后，置于40°C条件下静置5小时进行交联，形成丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料。将丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料进行透析处理，其它操作同实施例1，得到注射用的丝素蛋白透明质酸复合凝胶35g，可用作皮下填充注射产品。取丝素蛋白透明质酸复合凝胶用蒸馏水作等质量比稀释(配比见表I所示)，混合均匀后，室温(25°C)静置半小时，测量溶液的PH值，每个样本重复三次，并取平均值作为样本的pH值，结果见表I所示。实施例4 :透明质酸凝胶的制备将O. 7g透明质酸钠溶解在7ml质量浓度1%氢氧化钠溶液中制成O. lg/ml的透明质酸钠溶液，充分混合后加入56 μ I BDDE,混合均匀后，置于40°C条件下静置5小时进行交 联，即可得到透明质酸凝胶。将透明质酸凝胶进行透析处理后，其它操作同实施例1，即得到注射用的透明质酸凝胶35g。取丝素蛋白透明质酸复合凝胶用蒸馏水作等质量比稀释(配比见表I所示)，混合均匀后，室温(25°C )静置半小时，測量溶液的pH值，每个样本重复三次，并取平均值作为样本的PH值，结果见表I所示。表I丝素蛋白透明质酸复合凝胶pH值
.....涵................................................................................Ilii.......("g)..........................................................I—i "/K.......c'g)^ TpH
2.51342.54027.42实施倒12.53542.51207.41
[2.5199J 2.61281:7.41
均位7.41
T 2.5090I 2.5326[7.41
食施例 2 2.50052.49697.40
[2.5292J 2.53621:7.41
均+tff:; 7.41
[2.5081I 2.5211〔7.40
实施例 3 2.53392.52227.39
し 5」_ 2.5057_ 2.4931_[ 7.40
均7·40
[2.5213I 2.5385Γ .41
实施倒 4 2.51722.51887.40
[2.5494J 2.55311:7.41表I可以看出，实施例f 4所制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶、透明质酸凝胶的pH值均在7.4。实施例5 :体外抗降解能力试验交联透明质酸经过酶解后，会分解成葡萄糖醛酸，葡萄糖醛酸与咔唑试剂作用产生红紫色，颜色的深浅与葡萄糖醛酸的含量成正比。可以通过吸光值确定葡萄糖醛酸的含量。通过考察不同比例丝素蛋白加入量制成的丝素蛋白透明质酸复合凝胶中，葡萄糖醛酸含量的多少，来判断复合凝胶的体外抗酶解能力，从而判断复合凝胶及单纯透明质酸交联凝胶的体外抗酶解能力。具体实施方案如下
把实施例f 3制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶进行体外抗降解能力的測定。( I)标准曲线的绘制用水配制70、60、50、40、3(^8/!111的葡萄糖醛酸标准液，取O. 5ml标准液置于试管中，以O. 5ml蒸馏水作为对照。将标准管及对照管一起置于冰水浴((TC)中，用玻璃移液管缓慢地向每管中分别加入四硼酸钠硫酸2. 5ml，边加边摇匀(注意，需要充分混匀)，置于沸水浴中煮沸20min后取出，冷却至室温(可以冰浴，加速冷却)。各试管中加入O. 1%的咔唑こ醇液(称取O. Ig咔唑,加无水こ醇IOOml溶液)O. Iml,充分混匀后,置于室温放置2h,分别用分光光度计测定530nm处各样品液的吸光值。根据标准液浓度和吸光值绘制葡萄糖醛酸标准曲线(拟合度大于等于O. 995)，见图I所示，曲线方程为y=0. 0384x+0. 1383，R2=O. 9981。(2)分别取实施例广3制备的丝素蛋白透明质酸复合凝胶O. 5g，分别加入300U/ml 透明质酸酶液2ml (透明质酸酶的活力为838U/mg, sigma), 37°C保温降解65h,再分别用pH值为7. 4的PBS缓冲液将上述反应液定容至10ml，各取Iml定容后的反应液加入无水こ醇4ml，在10000r/min离心15min,分别取上清液2ml加pH值为7. 4的PBS缓冲液3ml，作为样品液，平行对照一組。分别取O. 5ml样品液置于试管中，以O. 5ml蒸馏水作为对照。将样品管及对照管一起置于冰水浴中，用玻璃移液管缓慢地向每管中分别加入四硼酸钠硫酸2. 5ml，边加边摇匀(注意，需要充分混匀)，置于沸水浴中煮沸20min后取出，冷却至室温(可以冰浴，加速冷却)。各试管中加入质量浓度O. 1%的咔唑こ醇液O. 1ml，充分混匀后，置于室温放置2h，用分光光度计测定530nm处样品液的吸光值。丝素蛋白透明质酸复合凝胶中透明质酸钠降解后释放出葡萄糖醛酸，降解的越多形成的葡萄糖醛酸就越多，根据葡萄糖醛酸标准曲线的线性回归方程，查得样品液的葡萄糖醛酸浓度，进而获得丝素蛋白透明质酸复合凝胶体外抗降解能力，结果如表2和图2所示。透明质酸酶酶解情况计算方法为HACnif/iil) = -........X N X-*-
Ws xlOOO194.ICS—线性回归得出的稀释样品中的葡萄糖醛酸的均浓度(ug/ml )；ffs-称量凝胶的重量(Ig=Iml)；401. 3=双糖的分子量；194. I=D-葡萄糖醛酸的分子量；N=稀释倍数；可以看出，随着丝素蛋白加入量的不断増加，凝胶的抗酶解能力増加，体外保持的时间增加。表2丝素蛋白透明质酸复合凝胶体外抗降解能力
葡萄糖醛酸浓度透明质酸酶酶解~
实施例 I56.76ug/ml29. 34mg/ml
实施例 237.24ug/ml19.25mg/ml
权利要求
1.ー种注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，其特征在于所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐I飞O份和交联剂O. 08、份；所述丝素蛋白微球是将质量浓度5%的丝素蛋白溶液在25°C下静置凝胶后，在24000rpm/min条件下均质5min，过筛，收集过20(Γ325目筛的丝素蛋白微球；所述交联剂为ニこ烯基砜、こニ醇ニ缩水甘油醚、丁ニ醇ニ缩水甘油醚或聚丙ニ醇ニ缩水甘油醚中的ー种或两种以上任意比例的混合。
2.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，其特征在于所述透明质酸盐为透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁中的ー种或两种以上任意比例的混合。
3.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，其特征在于所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐1(Γ30份和交联剂O. 8^2. 4份。
4.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，其特征在于所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐30份和交联剂2. 4份。
5.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，其特征在于所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐20份和交联剂I. 6份。
6.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，其特征在于所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球I份，透明质酸盐10份和交联剂O. 8份。
7.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶的制备方法，其特征在于所述方法为(1)丝素蛋白微球的制备将桑蚕蚕丝加入到质量浓度O. 2%的碳酸钠水溶液中，96 100°C水浴60min，过滤，取滤饼重复水浴操作3次，取最后一次过滤的滤饼干燥后用9mol/L的溴化锂水溶液溶解,在60°C水浴6h,然后在8000rpm的条件下离心5min,收集上清液，用截留分子量为800(Γ14000的透析袋在室温下进行透析，以纯化水为透析液，磁力搅拌透析3天，取截留液用水配制成质量浓度5%的丝素蛋白溶液；将质量浓度5%的丝素蛋白溶液在25°C下静置凝胶后，在24000rpm/min条件下均质5min，过筛，收集过200 325目筛的丝素蛋白微粒；所述碳酸钠水溶液的体积用量以桑蚕蚕丝质量计为67. 5 125ml/g，所述溴化锂水溶液的体积用量以桑蚕蚕丝质量计为5飞.25ml/g ；(2)注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶的制备将配方量的透明质酸盐用质量浓度1%的氢氧化钠水溶液配制成O. Ig/ml的透明质酸盐溶液，然后将配方量的丝素蛋白微粒加入到上述透明质酸盐溶液中充分混匀，再加入配方量交联剂混匀，25飞(TC条件下静置2 8h，形成丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料，将丝素蛋白透明质酸复合凝胶材料置于截留分子量为800(Γ14000的透析袋中，以pH为7. 4的PBS缓冲液为透析液进行透析处理，取透析后的复合凝胶材料，在24000rpm/min条件下均质5 15min，过60目筛，收集粒径为60目筛的颗粒即为所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶；所述透明质酸盐为透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁中的ー种或两种以上任意比例的混合，所述交联剂为ニこ烯基砜、こニ醇ニ缩水甘油醚、丁ニ醇ニ缩水甘油醚或聚丙ニ醇ニ缩水甘油醚中的ー种或两种以上任意比例的混合。
8.如权利要求7所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶的制备方法，其特征在于步骤(2)所述反应温度为3(T40°C。
9.如权利要求7所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶的制备方法，其特征在于步骤(2)再加交联剂混匀后在3(T40°C条件下静置时间为4 6h。
10.如权利要求I所述注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶在制备软组织填充材料中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶及其制备与应用，所述复合凝胶由如下质量配比的原料组成丝素蛋白微球1份，透明质酸盐1~50份和交联剂0.08~4份；本发明与传统透明质酸单纯交联的凝胶相比，丝素蛋白颗粒的加入，有效的减缓了复合凝胶的降解速度，延长其在组织修补，填充的作用时间，提高了材料的有效性，HA的加入，增加了材料的吸水性，提高材料的润滑度和储水功能；本发明与单纯物理方法混合丝素蛋白颗粒和HA颗粒相比，由于丝素蛋白颗粒是包裹在HA凝胶颗粒中的，两者混合更加均匀，制备的凝胶颗粒炎症反应小，生物相容性好，提高了材料的安全性。
文档编号A61L31/04GK102836465SQ20121031494
公开日2012年12月26日 申请日期2012年8月30日 优先权日2012年8月30日
发明者谢淑君, 陈隆坤, 赵洪石, 其他发明人请求不公开姓名 申请人:浙江星月生物科技股份有限公司