专利名称：一种注射用n(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于化学制药的技术领域，具体涉及注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂及其制备方法。
背景技术：
M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺是由丙氨酸和谷氨酰胺缩合反应得到的二肽类物质，进入体内后N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺迅速水解为丙氨酸及谷氨酰胺，为接受肠外营养的病人提供谷氨酰胺。谷氨酰胺在人体中起着重要作用，一些重要的细胞功能，如蛋白质的合成、细胞的吞噬作用和淋巴细胞的增殖、以及肠粘膜细胞的能量供应等都必须依赖充足的谷氨酰胺， 所以在临床上补充外源性的谷氨酰胺是非常有益的。在各种创伤、感染等应激条件下，谷氨酰胺需要量大大增加，此时补充适当的外源性的谷氨酰胺对于患者的恢复具有重要作用。 特别是当病人不能正常饮食，而靠静脉营养或要素饮食支持时，谷氨酰胺是必须补充的重要营养素。由于谷氨酰胺在水中溶解度差，在水溶液中不稳定，在加热灭菌的条件下还会生成有毒的焦谷氨酸和氨，所以一般静脉使用的复方氨基酸溶液中都不含谷氨酰胺。而 N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是谷氨酰胺的良好载体，进入体内后迅速水解为丙氨酸及谷氨酰胺。N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺克服了谷氨酰胺的本身的缺点，溶解度好、稳定性好、 加热灭菌不会形成焦谷氨酸和氨，因此是谷氨酰胺的理想替代物。目前国内已上市的M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺剂型为输液剂和粉针剂，由于 N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺稳定性较差，溶液状态长期放置易分解，而且注射液存在杂质含量高、纯度低，不便于运输、贮藏等缺点。专利CN1004^931C中公开了一种M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺无菌粉针剂的制备方法，其分别对M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺和甘露醇进行无菌精制，得到无菌原料再进行混合分装。该方法复杂繁琐，无菌精制成本高，而且加入的甘露醇不起起到保护NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺稳定性的目的，还会影响主药含量及活性。本研究人员在长期的实际运用过程中，还发现M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺在实际生产中采用的方法，一直存在几个问题，一是成品水分不易控制，标准中规定其水分含量不得超过3%，二是产品冻型不好，三是稳定性和复水性差。水分超标容易使无水的干粉再次吸潮，影响产品稳定性；冻型不好主要表现为得到的干粉外观不尽如人意，往往会出现气孔、萎缩、干燥结块、松散和变色等情况，干粉冻型不好，不仅影响产品外观，而且造成干粉的含量不均一，使用时复水性较差等不良影响。
发明内容
本发明的目的在于提供一种注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺及其制备方法，以解决现有产品中的水分超标、产品冻型不好、稳定性和复水性差以及辅料影响产品含量等问题。具体地，本发明提供如下技术方案1、一种注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，由M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料直接经配液、冻干、分装制备而成，制备方法经过以下步骤(1)取NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入注射用水，充分搅拌使其完全溶解；(2)溶液中加入针用活性碳，充分搅拌，过滤脱炭，再经0. 2 μ m的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，抽真空，加热， 升华干燥，解吸干燥，破真空，冻干结束；(4)通入干燥除菌高纯氮气，待恢复至常压，出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。2、根据技术方案1所述的注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，制备方法经过以下步骤(1)取M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制药液总量的注射用水，充分搅拌使其完全溶解为浓度为20% -25%的溶液；(2)加入配液总量0. 1-0. 4%的针用活性碳，搅拌溶解5-20分钟，过滤脱炭，再经 0. 2 μ m的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，每盘装量厚度为10_15mm，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，预冻温度为-50 40°C，达温后保持2-5小时，抽真空，真空度为10-25Pa， 加热，温度升至-200C，保持0. 5-2小时，升至-10°C保持3-6小时，升温至-5°C，保持0. 5-2 小时，升至0°C，待干燥层消失后保温1-4小时；然后升高压力，压力升高数每分钟小于3Pa， 温度再升至10°C，保持0. 5-2小时，升至30°C，保温1-2小时，待真空稳定后做压力升高测试，每分钟压力升高< 3pa，冻干结束；(4)通入流速为0. 12-0. 15L/s的干燥除菌高纯氮气，时间为10_30分钟，恢复至常压，出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。3、根据技术方案2所述的注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，制备方法经过以下步骤(1)取N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制药液总量的注射用水，充分搅拌使其完全溶解为浓度为20%的溶液；(2)加入配液总量0. 3%的针用活性碳，搅拌溶解10分钟，过滤脱炭，再经0. 2μπι 的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，每盘装量厚度为12mm，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，预冻温度为_40°C，达温后保持3. 5小时，抽真空，真空度为10-25Pa，加热，温度升至-20°C，保持1小时，升至-10°C保持4小时，升温至_5°C，保持1小时，升至0°C，待干燥层消失后保温2小时；然后升高压力，压力每分钟升高数小于3Pa，温度再升至10°C，保持1 小时，升至30°C，保温2小时，待真空稳定后做压力升高测试，每分钟压力升高< 3pa，冻干结束；
(4)通入流速为0. 12-0. 15L/s的干燥除菌高纯氮气，时间为20分钟，恢复至常压，出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。4、根据技术方案1-3所述的任意一种注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂， 配液步骤(1)中，按照重量份计，M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的浓度为20%-25%。5、根据技术方案4所述的注射用N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，配液步骤(1) 中，按照重量份计，N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的浓度为20%。本发明人针对现有技术中的缺陷，采取了以下技术措施对于辅料影响药物活性及水溶性，不能保护药物稳定性的问题，本发明人在注射用NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺处方中未添加任何辅料，极大地保持药物活性不受辅料干扰，在水溶液中迅速溶解，同时未添加辅料也降低了生产成本。对于产品不稳定，易吸潮，水分超标问题，本发明人在注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺生产过程的冷冻干燥结束后，采用氮气保护，通入干燥的高纯氮气经除菌过滤后进入前箱复压，将制品与洁净空气中的水份和氧气彻底隔离起来，避免产品吸潮和缓慢氧化，增加药品的稳定性。二是优化冻干过程参数，使产品充分干燥，去除残余水分。对于产品结晶度不高、冻型不好问题，本发明人通过对工艺处方和冻干条件进行分析，首先调整了冻干溶液的浓度及冻干盘的装盘厚度。其次对产品的冻干参数条件进行不断摸索，发现影响成品冻型的主要是预冻和升华干燥阶段升温速度不均衡、保温时间短等因素，本发明延长了预冻过程的保温时间，使样品内温度自动平衡，消除其中的温度梯度，溶液完全形成固态，避免了在升华过程中溶解周围产品从而导致冻型萎缩；在升华干燥阶段将升温的速度改为相对平稳，升温差距降低，每上升一个温度段进行适当的保温，这样可以使药品在比较均衡的条件下进行升华，避免了升温过快或者板层温度差异大，导致产品还有较大水分从而影响冻型。本发明通过对技术参数的选择，找到了解决现有技术问题的方法，因此，采用本发明方法制得的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有如下有益效果1、无添加任何辅料，直接采用冻干后的M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺无菌粉末分装，避免辅料对药物活性、稳定性、水溶性等的影响，同时未添加辅料，节约了生产成本。2、在配制过程中，调整了冻干溶液的浓度及冻干盘的装盘厚度，避免了浓度及厚度造成冻干后产品的含水量偏高及冻型不好的影响。3、在冻干过程中，采用最合适的工艺参数，极大程度的避免了冻干过程中水份去除不净及温度控制不好对产品形态的不良影响，将产品水分控制在最低水平；同时温度传递均勻，不会出现塌陷、气泡、松散、萎缩等现象，且制得的产品疏松饱满，小颗粒细晶体较多，颗粒均勻。4、冷冻干燥结束后，采用氮气保护，避免产品吸潮和缓慢氧化，增加药品的稳定性。5、得到的产品水溶性好，加水速溶，纯度高，稳定性高。为了使本领域普通技术人员更好的理解本发明，本申请人进行了一系列实验研究，以证明本发明的效果1、辅料选择实验取N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料200g，加120ml注射用水溶解，分成4份，分别加入药用辅料甘露醇、乳糖、氯化钠及不加辅料，再加入0. Ig针用活性碳，搅拌溶解15分钟，过滤脱炭，再经0. 2 μ m的过滤器进行除菌过滤，冻干，出箱。以药物的溶解度、溶液澄清度与颜色、水分、含量，产品外观形态为指标，考察辅料对药物的影响。结果如下表1。表1辅料选择实验
组别溶解度溶液澄清度与颜色水分含量外观形态甘露醇组易溶略有浑浊、无色3.8%95.4%表明萎缩乳糖组易溶略有浑浊、微黄色5. 2%93. 6%塌陷、变色氣化钠组易溶略有浑浊、乳內色4. 4%93. 1%结块、变硬未加辅料组极易溶解澄清无色2.6%98. 2%疏松、饱满 实验表明，未添加辅料的N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在冻干以后，主药在水溶液中迅速溶解，溶液澄清无色，含量高于添加辅料组，水分控制达到小于3%的标准，同时外观饱满疏松，因此，我们选择不添加任何辅料，对产品进行冻干。2、溶液浓度及装盘厚度研究溶液的浓度过高或过低导致冻干后产品干燥结块或萎缩、水分不合格等，同样装盘的溶液过厚也会导致冻干后产品的含水量偏高。本实验选取NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，分别制成10%、15%、20%、25%、30%五种不同的溶液浓度(g/100ml水)，装盘厚度控制在10-15mm之间，以产品冻型及水分为指标，考察溶液浓度及装盘厚度对产品成型性的影响。结果如下表2。表2溶液浓度装及盘厚度范围选择实验
权利要求
1.一种注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，其特征在于由M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料直接经配液、冻干、分装制备而成，制备方法经过以下步骤(1)取M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入注射用水，充分搅拌使其完全溶解；(2)溶液中加入针用活性碳，充分搅拌，过滤脱炭，再经0.2 μ m的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，抽真空，加热，升华干燥，解吸干燥，破真空，冻干结束；(4)通入干燥除菌高纯氮气，待恢复至常压，出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用 N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
2.根据权利要求1所述的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，其特征在于制备方法经过以下步骤(1)取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制药液总量的注射用水，充分搅拌使其完全溶解为浓度为20% -25%的溶液；(2)加入配液总量0.1-0. 4 %的针用活性碳，搅拌溶解5-20分钟，过滤脱炭，再经 0. 2 μ m的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，每盘装量厚度为10-15mm，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，预冻温度为-50 _40°C，达温后保持2-5小时，抽真空，真空度为10-25Pa，加热， 温度升至-200C，保持0. 5-2小时，升至-10°C保持3-6小时，升温至-5°C，保持0. 5-2小时， 升至0°C，待干燥层消失后保温1-4小时；然后升高压力，压力升高数每分钟小于3Pa，温度再升至10°C，保持0. 5-2小时，升至30°C，保温1-2小时，待真空稳定后做压力升高测试，每分钟压力升高< 3pa，冻干结束；(4)通入流速为0.12-0. 15L/s的干燥除菌高纯氮气，时间为10-30分钟，恢复至常压， 出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
3.根据权利要求2所述的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，其特征在于制备方法经过以下步骤(1)取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制药液总量的注射用水，充分搅拌使其完全溶解为浓度为20%的溶液；(2)加入配液总量0.3%的针用活性碳，搅拌溶解10分钟，过滤脱炭，再经0. 2μπι的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，每盘装量厚度为12mm，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，预冻温度为-40°C，达温后保持3. 5小时，抽真空，真空度为10-25Pa,加热，温度升至-20°C，保持1小时，升至-10°C保持4小时，升温至_5°C，保持1小时，升至0°C，待干燥层消失后保温2小时；然后升高压力，压力每分钟升高数小于3Pa，温度再升至10°C，保持1 小时，升至30°C，保温2小时，待真空稳定后做压力升高测试，每分钟压力升高< 3pa，冻干结束；(4)通入流速为0.12-0. 15L/s的干燥除菌高纯氮气，时间为20分钟，恢复至常压，出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
4.根据权利要求1-3所述的任意一种注射用NO)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，其特征在于配液步骤(1)中，按照重量份计，M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的浓度为20% -25%。
5.根据权利要求4所述的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂，其特征在于配液步骤(1)中，按照重量份计，M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的浓度为20%。
全文摘要
本发明公开了一种注射用N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制剂及其制备方法，它由N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料直接经配液、冻干、分装制备而成，方法经过以下步骤(1)取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入注射用水，充分搅拌使其完全溶解；(2)溶液中加入针用活性碳，充分搅拌，过滤脱炭，再经0.2μm的过滤器进行除菌过滤；(3)取滤液置于已灭菌的冻干盘中，装入冻干机冷冻箱，进行预冻，抽真空，加热，升华干燥，解吸干燥，破真空，冻干结束；(4)通入干燥除菌高纯氮气，出箱，无菌分装，压塞，轧盖，即得注射用N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
文档编号A61K38/05GK102228444SQ20111009205
公开日2011年11月2日 申请日期2011年4月13日 优先权日2011年4月13日
发明者冯志刚, 周黎亚, 宋婧瑜, 窦啟玲, 隋东虎 申请人:贵州益佰制药股份有限公司