本发明系有关于一种药物组合物，特别是有关于一种减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎及促进受损肝脏再生之药物组合物。
背景技术：
：肝癌在全球癌症死因中男性排名第五，女性排名第八。肝癌在早期阶段几乎不易查觉，因此，常延误最佳治疗时机。临床上以外科手术切除或肝脏移植为最佳之治疗手段，但，大部份肝癌病人在被诊断出罹患肝癌时多属于晚期，只有15％的病人可接受手术切除，且其治愈率低于5％。另外，有使用栓塞、电烧、放射等治疗方法，但其复发率高达8成以上。临床有症状而被诊断出为肝癌者，其平均存活率仅约6个月，可见肝癌不但死亡率高，预后也非常差。目前，肝癌常用之化学治疗药物例如Fluorouracil、Pirarubicin、Oxaliplatin、Cisplatin等，其疗效非常有限。目前，最新疗法为使用多种激酶抑制剂的标靶药物(Sorafenib)，用于治疗晚期肝细胞癌或原发性肝癌，可延长肝癌患者平均存活时间。2008年全球癌症治疗市场规模已达531亿美元(NatureReviewinCancer)，而肝癌治疗相关市场约有25.2亿美元，可见治疗肝癌之相关新药开发具有非常大的市场潜力。技术实现要素：本发明之一实施例，提供一种减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎、促进受损肝脏再生和/或逆转肝纤维化之药物组合物，包括：一有效量之原花青素；以及一药学上可接受之载体或盐类，其中该原花青素之单体具有下列化学式。上述化学式中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar。本发明药物组合物(BEL-X)经实验测试发现可应用于各种肝脏疾病之治疗，包含(1)由慢性B型肝炎病毒或C型肝炎病毒感染所引起之肝癌，本发明药物组合物(BEL-X)可单独使用或作为其他各种治疗法之辅助治疗剂，其可改善与提升肝癌病患之肝功能，减缓肝癌恶化时程，提高肝癌病患可进行手术率与手术成功率，降低术后复发率，可增加肝癌病患之存活率与延长存活时间，同时，亦可提升肝癌病患之生活品质。(2)本发明药物组合物(BEL-X)可单独使用或与其他临床治疗药物合并使用来治疗肝纤维化病患。(3)本发明药物组合物(BEL-X)可单独使用或与其他临床治疗药物合并使用来治疗肝发炎病患，例如：脂肪肝疾病，以改善其肝功能防止肝硬化与肝癌之发生。即，本发明如下述。1.一种减缓肝癌恶化之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。2.根据项1所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。3.根据项1所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。4.根据项1所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。5.根据项1所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。6.根据项5所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。7.根据项1所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。8.根据项1所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。9.根据项8所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。10.根据项9所述的减缓肝癌恶化之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。11.一种改善肝功能之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。12.根据项11所述的改善肝功能之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。13.根据项11所述的改善肝功能之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。14.根据项11所述的改善肝功能之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。15.根据项11所述的改善肝功能之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。16.根据项15所述的改善肝功能之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。17.根据项11所述的改善肝功能之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。18.根据项11所述的改善肝功能之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。19.根据项18所述的改善肝功能之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。20.根据项19所述的改善肝功能之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。21.一种改善肝纤维化之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。22.根据项21所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。23.根据项21所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。24.根据项21所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。25.根据项21所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。26.根据项25所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。27.根据项21所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。28.根据项21所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。29.根据项28所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。30.根据项29所述的改善肝纤维化之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。31.一种改善肝硬化之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。32.根据项31所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。33.根据项31所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。34.根据项31所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。35.根据项31所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。36.根据项35所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。37.根据项31所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。38.根据项31所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。39.根据项38所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。40.根据项39所述的改善肝硬化之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。41.一种改善肝发炎之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。42.根据项41所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。43.根据项41所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。44.根据项41所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。45.根据项41所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。46.根据项45所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。47.根据项41所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。48.根据项41所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。49.根据项48所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。50.根据项49所述的改善肝发炎之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。51.一种促进受损肝脏再生之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。52.根据项51所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。53.根据项51所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。54.根据项51所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。55.根据项51所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。56.根据项55所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。57.根据项51所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。58.根据项51所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。59.根据项58所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。60.根据项59所述的促进受损肝脏再生之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。61.一种逆转肝纤维化之药物组合物，包括：一有效量之原花青素，该原花青素之单体具有下列化学式：其中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H，当R1为OH时，R2为H，R3为H，当R1为OH时，R2为OH，R3为H或当R1为OH时，R2为OH，R3为OH，R4为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar；以及一药学上可接受之载体或盐类。62.根据项61所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。63.根据项61所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之聚合度介于2～30。64.根据项61所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。65.根据项61所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄酮类化合物。66.根据项65所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该黄酮类化合物包括儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。67.根据项61所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素之单体包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)。68.根据项61所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该原花青素萃取自一植物。69.根据项68所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该植物包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物。70.根据项69所述的逆转肝纤维化之药物组合物，其中该荨麻科(Urticaceae)之植物包括山苎麻。71.项1～70中任一项所述的药物组合物在制造减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎、促进受损肝脏再生和/或逆转肝纤维化的药物中的用途。72.项1～70中任一项所述的药物组合物用于减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎、促进受损肝脏再生和/或逆转肝纤维化。为让本发明之上述目的、特征及优点能更明显易懂，下文特举一较佳实施例，并配合附图，作详细说明如下。附图说明图1代表3-黄烷醇(3-flavanol)，3，4-黄烷醇(3，4-flavanol)，儿茶素(catechin)，表儿茶素(epicatechin)。图2a与图2b代表原花青素山苎麻95％酒精萃取物，再纯化后之原花青素之热分解气相层析质谱图。图3代表山苎麻95％酒精萃取物，再纯化后之原花青素的红外光吸收光谱图。图4a与4b代表山苎麻95％酒精萃取物，再纯化后之原花青素的原花青素之高效液相层析之质谱正/负质谱图。图5a-c代表山苎麻95％酒精萃取物，再纯化后之原花青素的13C-NMR和1H-NMR图谱。图6a与6b依据1HNMR及13CNMR之检验图谱显示，本发明纯化之原花青素高分子之单体连结以4-8为主，4-8及4-6之连结单位分别如图6a与6b所示。图7a-c代表山苎麻95％酒精萃取物，再纯化后之原花青素介质辅助激光脱附离子化质谱图谱。图8系显示本发明药物组合物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠诱发肝癌存活率之影响。图9系显示本发明药物组合物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠肝癌恶化程度之影响，以肝重/体重比进行评估。图10系显示本发明药物组合物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠诱发肝癌肝功能之影响，以肝功能指数ALT进行评估。图11系显示本发明药物组合物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠诱发肝癌肝功能之影响，以肝功能指数AST进行评估。图12系显示本发明药物组合物(BEL-X)对保护化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化之影响，以羟脯氨酸含量(hydroxyproline)进行评估。图13系显示本发明药物组合物(BEL-X)对保护化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化之影响，以α-SMA染色面积进行评估。图14系显示本发明药物组合物(BEL-X)对化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化之影响，以羟脯氨酸含量进行评估。图15～16系显示本发明药物组合物(BEL-X)对化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化/肝癌存活率之影响。图17系显示本发明药物组合物(BEL-X)对化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化肝再生之影响，以肝体积再生比例进行评估。具体实施方式本发明以原花青素作为药物组合物(BEL-X)之有效成分，以达减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎及促进受损肝脏再生之目的。本发明可自一植物萃取出原花青素，其具有减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎及促进受损肝脏再生之功效。在一实施例中，使用的植物可包括杜鹃花科(Ericaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、松科(Pinaceae)、葡萄科(Vitaceae)或荨麻科(Urticaceae)之植物，较佳为荨麻科(Urticaceae)之山苎麻。而植物之萃取部分可包括根、茎、叶和/或果实。本发明可以一般习知方法进行植物萃取。在一实施例中，将一植物之根、茎、叶和/或果实干燥后进行切片或磨碎，之后，以一萃取液对植物进行萃取。在一实施例中，选择以山苎麻之根和/或茎进行萃取。上述萃取液可选择水或水与不同极性溶剂混合之溶液。与水不同极性的溶剂可包括酒精、丙酮、甲醇或醋酸乙脂。上述溶剂可单独使用、混合使用或与水混合使用。萃取液与植物之比例并无特定限制，在一实施例中，萃取液与植物之比例为1∶10(W/W)。于萃取过程中，萃取温度会随萃取液之不同而有些许改变。在一实施例中，可利用室温浸泡。在另一实施例中，可加热至不同萃取液之回流温度(60～100℃)。萃取时间约为2小时至7天，其长短端视操作之萃取温度而定。另于萃取操作中，可视需要将例如氯化钠、稀无机酸(如稀盐酸)或有机酸(如维生素C或酒石酸)加入萃取液中，以调节萃取液之pH值。之后，将含有原花青素活性成分的萃取物浓缩后进行干燥，或可视需要对上述萃取物进行部分纯化或完全纯化。在一实施例中，部分纯化的方法是将干燥之萃取物以95％酒精和/或甲醇水溶液回溶，之后，利用不同极性之溶剂萃取，以去除部分杂质，例如先以非极性溶剂(如正己烷)去除脂质及非极性物质，再以三氯甲烷和/或乙酸乙脂萃取去除小分子酚类化合物。之后，将经溶剂萃取后之水层进行浓缩干燥，即可取得部分更加纯化之原花青素物质。若欲进行完全纯化，其步骤可包括以酒精或甲醇水溶液溶解上述经部分纯化的萃取物，再将其置入分子筛管柱中。之后，以不同溶液和/或混合溶液冲提，进行原花青素之纯化分离。在一实施例中，不同溶液冲提的顺序为：95％酒精、95％酒精/甲醇(1∶1，v/v)、50％甲醇与50％丙酮水溶液。将每一冲提液冲提出来的溶液进行分段收集。之后，以液相层析仪(280nm)检测冲提出来的溶液中经纯化的原花青素。收集不同冲提液冲提出来的溶液，可得到不同分子量分布的原花青素溶液。之后，将上述不同阶段冲提出来的溶液以低于40℃之温度浓缩，并冷冻干燥，即可得到纯化之原花青素。在一实施例中，进行冲提的分子筛管柱为SephadexLH-20管柱(购自德国安玛西亚股份有限公司)。本发明经上述纯化后之原花青素，其单体具有下列化学式。在一实施例中，当R1为OCH3时，R2为OH，R3为H。在另一实施例中，当R1为OH时，R2为H，R3为H。在另一实施例中，当R1为OH时，R2为OH，R3为H。在另一实施例中，当R1为OH时，R2为OH，R3为OH。上述化学式中，R4可为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar。上述原花青素的单体可包括于C2、C3或C4位置之R或S光学异构物。上述原花青素的单体结构中可包括黄酮类化合物，例如儿茶素(catechin)、表儿茶素(epicatechin)、表阿夫儿茶精(epiafzelechin)、没食子酸儿茶素(gallocatechin)、galloepicatechin、表没食子儿茶素(epigallocatechin)、gallates、黄酮醇(flavonols)、黄烷双醇(flavandiols)、无色矢车菊素(leucocyanidins)或花青素(procynidins)。在一实施例中，原花青素的单体可包括黄烷-3-醇(flavan-3-ol)或黄烷衍生物。本发明原花青素的聚合度介于2～30，较佳介于3～20。本发明原花青素的单体可以C4、C8碳键、C4、C6碳键或C2、C7氧键彼此相连。本发明原花青素的平均分子量介于600～10,000。在一实施例中，本发明纯化的原花青素可包括单一聚合度之原花青素。在另一实施例中，本发明纯化的原花青素可包括不同聚合度之原花青素混合物。本发明可以上述萃取之原花青素制成一用于减缓肝癌恶化、改善肝功能、改善肝纤维化、改善肝硬化、改善肝发炎及促进受损肝脏再生的药物组合物，其可包括原花青素与一药学上可接受之载体或盐类。药学上可接受之载体可包括，但不限定于溶剂、分散介质(dispersionmedium)、包衣(coating)、抗菌试剂、抗真菌试剂、等渗透压与吸收延迟(absorptiondelaying)试剂或药学施用相容剂。对于不同给药方式，可利用习知方法将药物组合物配制成各种适当剂型(dosageform)。药学上可接受之盐类可包括，但不限定于无机盐类或有机盐类。无机盐类可包括例如钠、钾或胺盐的碱金族盐类，例如镁或钙盐的碱土族盐类，或例如锌、铝或锆盐的含二价或四价阳离子盐类。有机盐类可包括二环己胺盐类、甲基-D-葡糖胺或例如精氨酸、赖氨酸、组氨酸或谷氨酰胺的氨基酸盐类。本发明药物组合物(BEL-X)的给药方式可包括口服、非口服、经吸入喷雾(inhalationspray)或经植入贮存器(implantedreservoir)的方式给药。非口服方式可包括经皮下(subcutaneous)、皮内(intracutaneous)、静脉内(intravenous)、肌肉内(intramuscular)、关节内(intraarticular)、动脉(intraarterial)、滑囊(腔)内(intrasynovial)、胸骨内(intrasternal)、蜘蛛膜下腔(intrathecal)或疾病部位内(intraleaional)注射或灌注技术。口服剂型可包括，但不限定于药锭、胶囊、乳剂(emulsions)、水性悬浮液(aqueoussuspensions)、分散液(dispersions)或溶液。本发明药物组合物(BEL-X)经实验测试发现可应用于各种肝脏疾病之治疗，包含(1)由慢性B型肝炎病毒或C型肝炎病毒感染所引起之肝癌，本发明药物组合物(BEL-X)可单独使用或作为其他各种治疗法之辅助治疗剂，其可改善与提升肝癌病患之肝功能，减缓肝癌恶化时程，提高肝癌病患可进行手术率与手术成功率，降低术后复发率，可增加肝癌病患之存活率与延长存活时间，同时，亦可提升肝癌病患之生活品质。(2)本发明药物组合物(BEL-X)可单独使用或与其他临床治疗药物合并使用来治疗肝纤维化病患。(3)本发明药物组合物(BEL-X)可单独使用或与其他临床治疗药物合并使用来治疗肝发炎病患，例如：脂肪肝疾病，以改善其肝功能防止肝硬化与肝癌之发生。实施例实施例11.原花青素聚合物之单体结构测定原花青素单体之结构是以热分解气相层析质谱仪检测(GasChrimatograph-MassSpectrometry)。检测的方法是将固体之纯化原花青素(自行纯化之样品)，直接置于热分解气相层析仪，以分段温度(50℃至500℃)或单一温度之设定操作方式逐渐加温或瞬间加温，将加热分解的样品经热分解仪之特定的金属管柱分离，经质谱仪侦测器所产生的图谱，判定出原花青素聚合物之单体结构。原花青素聚合物之质谱图与结构分析分别显示于图2a与2b。其中图2b-e之左半部为图2a波峰之m/z值及其化学结构，而右半部为左半部波峰之单体解析。判定出之原花青素聚合物之单体结构分子式如下所示：其中，R1为OCH3、R2为OH且R3为H，或R1为OH且R2与R3皆为H，或R1与R2皆为OH且R3为H，或R1、R2与R3皆为OH。而因热分解所测得之质谱显示含有配糖体讯号的peak，因此推定R4的组成可能为3-(α)-OH、3-(β)-OH、3-(α)-O-sugar或3-(β)-O-sugar。2.红外光吸收光谱分析将纯化之原花青素样品和氯化钾混合压片，以穿透式红外光谱检测，结果如图3所示，其中较强的吸收波峰为3412.38nm，1610.57nm，1521.40nm，1441.14nm，1284.86nm，1100.88nm。3.高效液相层析质谱图谱分析将纯化之原花青素样品，以高效液层析质谱仪(电喷洒正/负质谱仪，HPLC/ESI+，HPLC/ESI-)(MicromassQuattro/Waters2690)检测，侦测到原花青素聚合度1到6的单体及聚合物，及含有164之配糖体(即单体分子量加一个配糖分子量164)。纯化之原花青素之高效液相层析之的质谱正/负质谱图如图4a与4b所示。4.核磁共振碳13(13CNMR)和氢(1HNMR)图谱分析纯化之原花青素样品以碳13(13CNMR)和氢(1HNMR)核磁共振仪器检测，碳13(13CNMR)之结果如图5a-c所示。其中在142-145.7ppm除显示doublet-doublet之波峰外，并没有另外的波峰，显示单体有花青素，而没有飞燕草素(delphindin)，即B环有3个-OH取代基者，此处与EGA/MS所分析结果相同。而在图5b中R1＝H或OH而R2＝H或OH或OCH。依据1HNMR及13CNMR之检验图谱显示，本发明纯化之原花青素高分子之单体连结以4-8为主。4-8及4-6之连结单位分别如图6a与6b所示。5.介质辅助激光脱附离子化质谱(MatrixAssistedLaserDesorptionIonizationTime-of-Flight(MALDI-TOF))分析部分纯化之原花青素分子量分布是以介质辅助激光脱附离子化质谱仪测定。结果如图7a-c所示。检测之结果显示经部分纯化之原花青素之分子量分布是500-5000，由分子量分布之检测结果显示，推定高分子之聚合度约为2-18。实施例2含原花青素萃取物之制备(1)将山苎麻药材的根部与连接根部的茎部以水洗净，置于自然环境下干燥。将干燥后的药材切片至约5mm厚度，储存于4℃备用。取储存备用的山苎麻药材，以研磨器研磨，取过筛后小于网孔20(20mesh)的粉末。之后，加入重量10倍(1∶10，w/w)的95％酒精，加热回流2小时(共二次)。待静置冷却回温后，收集回温的萃取液，并倒入离心袋中以离心机离心过滤。之后，将过滤液置于温度控制在低于40℃的减压浓缩机中进行浓缩，并利用冷冻干燥机干燥之，即可得到含原花青素的萃取物。实施例3含原花青素萃取物之制备(2)取实施例2储存于4℃的干燥药材，以研磨器研磨，取过筛后小于网孔20(20mesh)的粉末。之后，加入重量10倍(1∶10，w/w)的逆渗透处理水(RO水)，加热回流2小时(共二次)。待静置冷却回温后，收集回温的萃取液，并加入酒精(95％至50％)水溶液。于混合后静置冷却待沉淀。将上层液倒入离心袋中以离心机离心过滤。之后，将过滤液置于温度控制在低于40℃的减压浓缩机中进行浓缩，并利用冷冻干燥机干燥之，即可得到含原花青素的萃取物。实施例4含原花青素萃取物之纯化(1)将实施例2或3含原花青素的萃取物加入正己烷(1∶10，w/v)加热回流(bySoxheltapparatus)6小时，以去除萃取物中的脂质。得到的固体物以70％甲醇水溶液和/或0.3维生素C水溶液溶解，并置于温度控制在低于40℃的减压浓缩机中进行浓缩，以去除溶剂。之后，将浓缩体加入三氯甲烷(1∶1，三氯甲烷：浓缩体，v/v)，并以振荡器振荡30分钟(多次萃取)。取水层加入乙酸乙脂(1∶1，乙酸乙脂：水层，v/v)，振荡30分钟(多次萃取)。再取水层置于温度控制在低于40℃的减压浓缩机中进行浓缩，并利用冷冻干燥机干燥之，即可得到部分纯化的原花青素。实施例5含原花青素萃取物之纯化(2)将实施例2或3含原花青素的萃取物加入水/酒精溶解(1∶10，w/v)。之后，加入正己烷(1∶10，v/v)，以振荡器振荡30分钟(多次萃取)，以去除萃取物中的脂质。取水层加入乙酸乙脂(1∶1，乙酸乙脂：水层，v/v)，振荡30分钟(多次萃取)。再取水层加入正丁醇(1∶10，v/v)，以振荡器振荡30分钟(多次萃取)。再取水层置于温度控制在低于40℃的减压浓缩机中进行浓缩，并利用冷冻干燥机干燥之，即可得到部分纯化的原花青素。实施例6含原花青素萃取物之纯化(3)将实施例4所得的部分纯化原花青素，以分子筛管柱层析(GelPermeationChromatography，4cmdiameterx45cmlongSephadexLH-20)进行再纯化。首先，以不同极性的溶液进行冲提，以去除杂质。之后，取2.5克部分纯化的原花青素，以0.5mL95％酒精溶解之。接着，将溶解后的样品置入分子筛管柱中，以一系列溶剂(冲提液)连续冲提，并收集不同溶剂(冲提液)冲提出的流洗液。冲提液分别为300mL95％酒精溶液、300mL95％酒精/甲醇(1/1，v/v)、300mL甲醇、300mL50％甲醇水溶液与300mL50％丙酮水溶液。除了以300mL95％酒精冲提液冲提出的流洗液外，其他各段冲提出的流洗液均置于温度控制在低于40℃的减压浓缩机中进行浓缩，并利用冷冻干燥机干燥之，即可得到部分纯化或完全纯化的原花青素。之后，将上述干燥后的物质储存于-20℃备用。实施例7药物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠诱发肝癌存活率之影响实验动物：实验所使用的动物亲代种源为2006年BBRC1所发表之B型肝炎病毒X转基因鼠C57BL/6J-HBx(A0112line)之公鼠。实验分组与实验设计：小鼠实验组别共分6组，包括非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)、非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)、转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)与转基因鼠之药物试验组(TgBEL-Xtreated)3组：分别于小鼠9月龄起(TgBEL-Xtreated9-20M)、12月龄起(TgBEL-Xtreated12-20M)与15月龄起(TgBEL-Xtreated15-20M)开始每日给予口服药物BEL-X(本发明药物组合物)一次，持续给药至20月龄。非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)与转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)自小鼠9月龄起，每日给予动物饮用水一次，持续至20月龄。非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)亦自小鼠9月龄起，每日给予口服药物BEL-X一次，持续给药至20月龄。BEL-X药物之剂量为1,000mg/kg/天。结论：1.请参阅图8，B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠在20月龄时100％会产生肝癌，其存活率约为64％(Tgmock9-20M)。而不同月龄喂食药物BEL-X之存活率分别为：9-20月龄(TgBEL-Xtreated9-20M)70％，12-20月龄(TgBEL-Xtreated12-20M)100％，15-20月龄(TgBEL-Xtreated15-20M)58％。2.以Chi-Square进行统计分析发现，B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠在12-20月龄给药BEL-X，其20月龄时存活率可达100％，具显著差异。3.B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠在早期诱发肝癌喂食BEL-X可增加产生肝癌基因鼠公鼠的存活率。实施例8药物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠肝癌恶化程度减缓之影响实验动物：实验所使用的动物亲代种源为2006年BBRC1所发表之B型肝炎病毒X转基因鼠C57BL/6J-HBx(A0112line)之公鼠。实验分组与实验设计：小鼠实验组别共分6组，包括非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)、非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)、转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)与转基因鼠之药物试验组(TgBEL-Xtreated)3组：分别于小鼠9月龄起(TgBEL-Xtreated9-20M)、12月龄起(TgBEL-Xtreated12-20M)与15月龄起(TgBEL-Xtreated15-20M)开始每日给予口服药物BEL-X(本发明药物组合物)一次，持续给药至20月龄。非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)与转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)自小鼠9月龄起，每日给予动物饮用水一次，持续至20月龄。非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)亦自小鼠9月龄起，每日给予口服药物BEL-X一次，持续给药至20月龄。BEL-X药物之剂量为1,000mg/kg/天。测定肝重与体重的比率：将动物牺牲解剖并进行肝脏(含肝肿瘤)采样。将所秤得的肝重除以小鼠的体重，即可得到肝重与体重的比率(liver/Bodyweight)。结论：1.请参阅图9，正常非转基因鼠(Non-Tgmock)的肝重与体重比例约为5％，而B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠(Tgmock)在20月龄时因产生肝癌，故其肝重与体重比例上升至13％左右，以ANOVA统计分析发现，转基因鼠与正常非转基因鼠的肝重与体重比例具显著差异。2.正常非转基因鼠喂食BEL-X连续1年(9-20月龄)(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)后肝重与体重比例与未喂药组相同均为5％，显示此药物对正常动物无任何影响。3.B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠在不同月龄喂食药物BEL-X发现，三组肝重与体重比例下降为8％左右，而9-20月龄(TgBEL-Xtreated9-20M)与12-20月龄(TgBEL-Xtreated12-20M)给药组与未给药组(Tgmock9-20M)具有显著统计差异。实施例9药物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠诱发肝癌其肝功能之影响(1)实验动物：实验所使用的动物亲代种源为2006年BBRC1所发表之B型肝炎病毒X转基因鼠C57BL/6J-HBx(A0112line)之公鼠。实验分组与实验设计：小鼠实验组别共分6组，包括非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)、非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)、转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)与转基因鼠之药物试验组(TgBEL-Xtreated)3组：分别于小鼠9月龄起(TgBEL-Xtreated9-20M)、12月龄起(TgBEL-Xtreated12-20M)与15月龄起(TgBEL-Xtreated15-20M)开始每日给予口服药物BEL-X(本发明药物组合物)一次，持续给药至18月龄。非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)与转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)自小鼠9月龄起，每日给予动物饮用水一次，持续至20月龄。非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-18M)亦自小鼠9月龄起，每日给予口服药物BEL-X一次，持续给药至18月龄。BEL-X药物之剂量为1,000mg/kg/天。肝功能ICG检测：以靛氰绿(indocyaninegreen，ICG)静脉注射10分钟后，测定ICG滞留于血中的浓度(mg/dl)，以作为肝功能的指标。本试验共进行2次，分别于小鼠12月龄及18月龄时执行。结论：1.请参阅下表1，18月龄正常非转基因鼠(Non-Tgmock9-20M)ICG的代谢值为2.25±0.89mg/dl，此结果与18月龄喂食BEL-X组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)无显著差异。2.B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠(Tgmock9-20M)在18月龄时因产生肝癌，故其ICG代谢迟缓延至4.46±1.17mg/dl，以nonparametric统计分析发现，转基因鼠与正常非转基因鼠的ICG代谢具显著差异。3.B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠在三组不同月龄喂食药物BEL-X发现，三组的ICG代谢率均比未给药组(Tgmock9-20M)低，而在9月龄开始喂食药物BEL-X(TgBEL-Xtreated9-20M)与未给药组(Tgmock9-20M)具有显著统计差异，显示BEL-X可改善肝癌动物的肝功能。表1组别18月龄时血中ICG浓度(mg/dl)Non-Tgmock9-20M2.25±0.89Non-TgBEL-Xtreated9-20M2.13±0.92Tgmock9-20M4.46±1.17TgBEL-Xtreated9-20M2.63±0.76TgBEL-Xtreated12-20M3.47±0.77TgBEL-Xtreated15-20M3.87±0.72实施例10药物(BEL-X)对B型肝炎病毒X转基因鼠诱发肝癌其肝功能之影响(2)实验动物：实验所使用的动物亲代种源为2006年BBRC1所发表之B型肝炎病毒X转基因鼠C57BL/6J-HBx(A0112line)之公鼠。实验分组与实验设计：小鼠实验组别共分6组，包括非转基因鼠之对照组(，Non-Tgmock9-20M)、非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)、转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)与转基因鼠之药物试验组(TgBEL-Xtreated)3组：分别于小鼠9月龄起(TgBEL-Xtreated9-20M)、12月龄起(TgBEL-Xtreated12-20M)与15月龄起(TgBEL-Xtreated15-20M)开始每日给予口服药物BEL-X(本发明药物组合物)一次，持续给药至20月龄。非转基因鼠之对照组(Non-Tgmock9-20M)与转基因鼠之对照组(Tgmock9-20M)自小鼠9月龄起，每日给予动物饮用水一次，持续至20月龄。非转基因鼠之药物对照组(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)亦自小鼠9月龄起，每日给予口服药物BEL-X一次，持续给药至20月龄。BEL-X药物之剂量为1,000mg/kg/天。肝功能酶谷丙转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)检测：所有小鼠每月定期采血(下颚或心脏采血)一次，全血于eppendorf中室温下静置30分钟以上。凝血后以1,800g离心10分钟。离心后，将血清移至新eppendorf中于-20℃储存至检测当日。以湿式血清生化仪(HITACHI7080)测定血清中的ALT与AST值。由于B型肝炎病毒X转基因鼠公鼠产生肝病变与动物月龄具关联性，故将9-20月龄每组动物所测得肝功能指数ALT与AST，由9月龄开始，每3个月混合分析。结论：1.请参阅图10、11，正常非转基因鼠(Non-Tgmock9-20M)与B型肝炎病毒X转基因鼠(Tgmock9-20M)从第12月龄开始有差异，而正常非转基因鼠喂食BEL-X(Non-TgBEL-Xtreated9-20M)与未给药组(Non-Tgmock9-20M)肝功能指数无显著差异。2.B型肝炎病毒X转基因鼠在不同月龄喂食药物BEL-X发现，三组的ALT与AST比未给药组(Tgmock9-20M)低，而9-20月龄(TgBEL-Xtreated9-20M)及12-20月龄(TgBEL-Xtreated12-20M)给药组与未给药组(Tgmock9-20M)具有显著统计差异，显示BEL-X可以有效改善肝癌动物的肝功能。实施例11药物(BEL-X)对化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化之影响(1)实验分组与实验设计：将8周大的Wistar大鼠分别喂食二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)(100ppm，添加于饮水中给予)6周(D6组)及9周(D9组)，以诱发产生肝纤维化与肝癌。另外两组动物在喂食DEN同时亦给予BEL-X药物(1000mg/kgbodyweight)(添加于饲料中每日喂食，连续6周(D6H6组)及9周(D9H9组))。动物于不同时间点进行肝癌程度分析。对照组全程不给与任何药物。每个实验组各有10只大鼠。肝纤维化/肝癌程度分析以病理切片染色后判读，并佐以羟脯氨酸生化分析。测定肝脏中羟脯氨酸含量上升可作为肝纤维化的指标。在不同时间点采集各组动物肝脏进行羟脯氨酸含量测定。之后，将肝脏进行切片进行α-SMA免疫染色分析。α-smooth-muscle-actin(α-SMA)含量上升亦为肝纤维化的另一指标。第9周时，采集各组动物肝脏进行α-smooth-muscle-actin免疫染色，并利用显微镜进行肝脏细胞的观察，计算含此标记的细胞量。结论：1.请参阅图12，连续给予DEN9周的动物组(D9组)，其肝脏中羟脯氨酸含量显著上升，显示DEN成功诱发肝纤维化，但同时也喂食BEL-X的实验组(D9H9组)，其羟脯氨酸含量则显著下降，显示BEL-X具有保护肝脏免于因化学物质DEN造成肝纤维化的功能。2.请参阅图13，连续给予DEN9周的动物组(D9组)，其肝脏中α-smooth-muscle-actin含量显著上升，显示DEN成功诱发肝纤维化，但同时也喂食BEL-X的实验组(D9H9组)其含量显著下降，显示BEL-X具有保护肝脏免于化学物质DEN造成肝纤维化的功能。3.另外，连续给予DEN6周同时也喂食BEL-X的实验组(D6H6组)，其α-smooth-muscle-actin含量亦显著下降，显示BEL-X具有早期保护肝脏免于因化学物质DEN造成肝纤维化的功能。实施例12药物(BEL-X)对化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化之影响(2)实验分组与实验设计：将8周大的Wistar大鼠分别喂食二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)(100ppm，添加于饮水中给予)，以诱发产生肝纤维化与肝癌。另外三组动物在喂食DEN同时亦给予BEL-X药物(1000mg/kgbodyweight)(添加于饲料中每日喂食，分别于第3-6周、第6-9周与第9-12周喂食)。动物于适当时间点进行肝癌程度分析。对照组(DEN)为喂食DEN过程中，全程不给药。每个实验组各有10只大鼠。肝纤维化/肝癌程度分析以目测法判别，并佐以羟脯氨酸生化分析。测定肝脏中羟脯氨酸含量上升可作为肝纤维化的指标。在第12周采集各组动物肝脏进行羟脯氨酸含量测定。结论：1.请参阅图14，连续给予DEN9周的动物组(DEN)，其肝脏中羟脯氨酸含量显著上升，显示DEN成功诱发肝纤维化，但于早期DEN诱发时期喂食BEL-X的实验组(第3-6周(DEN-BEL-X3-6)与第6-9周(DEN-BEL-X6-9)，其羟脯氨酸含量均显著下降，显示BEL-X具有逆转因化学物质DEN造成肝纤维化的功能。实施例13药物(BEL-X)对化学药物DEN诱发大鼠肝纤维化存活率之影响实验分组与实验设计：将8周大的Wistar大鼠分别喂食二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)(50ppm，添加于饮水中给予)连续10.5周，以诱发产生肝纤维化与肝癌(B组)。在喂食DEN同时分别于0-10.5周(C组)，3-10.5周(D组)，6-10.5周(E组)或在停止喂食DEN后0-3周(F组)将BEL-X药物(1000mg/kgbodyweight)添加于饲料中每日喂食。动物于适当时间点进行肝癌程度分析。对照组为全程不给任何药物(A组)。实验期间纪录动物死亡，以nonparametric统计分析各组存活率。结论：1.请参阅图15，在第13.5周(94天)分析各组存活率发现，单独给予DEN(B组)存活率仅剩40％左右，而不同时间喂食BEL-X的各组均有非常高的存活率(＞80％)，显示BEL-X可显著增加肝纤维化与肝癌的存活率。2.请参阅图16，在第15周(104天)分析DEN诱发肝癌后再给予BEL-X药物3周(F组)的存活率发现：BEL-X给药期间(74-94天)不仅可维持动物100％的存活，停止给予BEL-X药物5天后(95-99天)仍可维持无死亡率。在第15周(104天)时发现其存活率62％仍高于单独给予DEN(B组)在第13.5周(94天)的存活率40％，显示BEL-X对肝硬化与肝癌动物不仅可延长其存活时间，亦可显著增加存活率。实施例14化学药物DEN诱发大鼠肝脏受损后药物(BEL-X)对其肝脏再生之影响(1)实验分组与实验设计：将8周大的Wistar大鼠分别喂食二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)(100ppm，添加于饮水中给予)连续9周，以诱发产生肝纤维化与肝硬化(未给药组)。另外在第6-9周同时添加BEL-X药物(分为BEL-X高剂量组(1,000mg/kgbodyweight)与BEL-X低剂量组(250mg/kgbodyweight))于饲料中每日喂食。在完成喂食药物后，于第9周切除50％肝叶，并于两天后收集肝脏样品，进行切片与H&E染色。之后，在显微镜下观察肝细胞的有丝分裂，以作为肝脏再生依据。肝细胞的有丝分裂计算如下：每只动物至少有3个肝切片，每个切片10个视野，在显微镜放大400X倍率下计数有丝分裂细胞数目，最后求取每组动物的平均值。结论：1.请参阅下表2，化学药物DEN诱发肝纤维化与肝癌后进行肝切发现，未给药组肝脏的有丝分裂数(7.6±4.6)较同时给予高或低剂量BEL-X药物3周动物肝脏的有丝分裂数(12±5.5或13.0±5.6)低许多，显示当化学药物DEN造成肝损伤时，BEL-X具有显著使肝脏再生的功能。表2组别有丝分裂数BEL-X高剂量组12.0±5.5BEL-X低剂量组13.0±5.6未给药组7.6±4.6实施例15化学药物DEN诱发大鼠肝脏受损后药物(BEL-X)对其肝脏再生之影响(2)实验分组与实验设计：将8周大的Wistar大鼠分别喂食二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)(100ppm，添加于饮水中给予)连续9周，以诱发产生肝纤维化与肝硬化(DEN组)。另外在第6-9周同时添加BEL-X药物(1,000mg/kgbodyweight)于饲料中每日喂食(BEL-X组)。另外未喂食DEN及BEL-X者(对照组)进行相同手术。在完成喂食药物后，于第9周以核磁共振摄影检查后，切除30％肝叶。两周后进行第二次核磁共振摄影检查并解剖之。实验期间纪录动物死亡。在完成手术后观察各组动物进食时间与摄食量，并计算各组动物的存活率。结论：1.请参阅图17，说明肝体积的再生比例。正常肝的对照组大鼠其肝再生总量为切除量的92±11％，肝硬化组(DEN组)为切除量的32±7％，而治疗组(BEL-X组)为切除量的79±6％。治疗组(BEL-X组)的肝再生情形明显较肝硬化组(DEN组)为佳，与对照组则无统计上差异。2.请参阅下表3，肝硬化动物在肝切后，其进食时间(27小时)明显较对照组(11小时)延长许多，而BEL-X组于肝切后的进食时间(16小时)明显少于肝硬化组(DEN组)。另肝硬化组(DEN组)的摄食量(42％)与对照组(91％)相差甚多，而BEL-X组的摄食量(83％)亦明显高于肝硬化组(DEN组)，与对照组无差异。此即表示，BEL-X药物对肝硬化动物肝切术后具良好影响，可增加进食量与减少进食时间。3.此外，肝硬化动物的存活率仅55％，然而，当肝硬化动物有喂食BEL-X时，其存活率则与对照组相同，均达100％，由此显示，BEL-X药物确实可增加存活率。表3虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然其并非用以限定本发明，任何熟习此项技艺者，在不脱离本发明之精神和范围内，当可作更动与润饰，因此本发明之保护范围当视后附之权利要求书所界定者为准。当前第1页1 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