专利名称：非肽缓激肽拮抗剂用于治疗和预防肝脏疾病及有关的并发症的制作方法
缓激肽和同族的肽是能引起炎症和疼痛的并且作用于血管的体内固有的物质。由EP-A 622361、US 5,212,182、US 5,216,165、US5,438,064、WO 9604251和未公开德国专利申请P19610784.9已知取代的、稠合的杂双环和其用作缓激肽-受体拮抗剂的用途及其作为药剂用于控制由缓激肽促成、引起或促进的状态。
令人惊异的是现在发现，这类结构的非肽的缓激肽-拮抗剂还适合作为药物用于治疗慢性纤维变性的肝脏疾病(肝硬化和肝纤维化)和急性肝脏疾病和预防并发症，特别是用于预防或者治疗门静脉高压，代偿机能障碍现象如腹水，水肿形成，肝肾综合证，血压过高的胃病和结肠病，脾肿大以及通过门静脉高压，侧支循环和充血所致的在胃肠道内的出血并发症和由于慢性肌活动过度循环情况所致的一种心脏病及其后遗症。
非肽的缓激肽-拮抗剂适合作为在用CCl4诱发的大鼠肝纤维化模型中显示出一种排钠利尿的效果的化合物。
适合的非肽的缓激肽-拮抗剂尤其是式(I)的肽及其生理耐受盐
其中各符号具有下述意义D为1.式(II)基团
2.式(III)-(VI)基团
E为1.式(VII)基团
2.氢、卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷硫基、(C1-C4)烷氧基、其中后三种基团中的一或多个氢原子可被氟取代；X1为氮或C-R4；X2为氮或C-R5；X3为氮或C-R6；X4为氧、氮或N-R7；R1、R2相同或不同并为氢、卤素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；R3为氢、卤素、(C1-C6)烷基、(C6-C12)芳基、(C1-C3)烷基-(C6-C12)芳基、(C3-C5)链烯基、(C1-C4)烷氧基、CO2R11；R4为氢、卤素、(C1-C4)烷基、羟基、(C1-C4)烷硫基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、(C1-C4)二烷基氨基、(C1-C4)烷氧基，其任选地被羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基或(C1-C4)烷基氨基取代，或(C6-C12)芳基，其任选地被(C1-C4)烷基或CO2R11取代；R5为1.氢或(C1-C4)烷基
R6为1.氢、卤素、(C1-C4)烷基、羟基、(C1-C4)烷硫基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、(C1-C4)二烷基氨基、(C1-C4)烷氧基，其任选地被羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基或(C1-C4)烷基氨基取代，或(C6-C12)芳基，其任选地被(C1-C4)烷基或CO2R11所取代；2.式(VIII)基团
R7为(C1-C4)烷基、(C6-C12)芳基、或(C1-C3)烷基-(C6-C12)芳基；R8、R9为相同或不同的并代表氢或卤素；A为(C1-C3)烷二基；Q为O或NR11；R10为式(IX)基团
R11、R14为氢或(C1-C4)烷基；G为O或H2R12当G＝O时代表氢并且当G＝H2时代表氢或R16CO；R13为(C1-C4)烷基、(C3-C7)环烷基、-(CH2)m-(C3-C7)环烷基、-(CH2)m-CONR11R11，或
m、n相同或不同并代表0-6的数字；AA代表氨基酸如蛋氨酸，丙氨酸、苯丙氨酸、2-氯苯丙氨酸、3-氯苯丙氨酸、4-氯苯丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、3-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、酪氨酸、o-甲基酪氨酸、β-(2-噻吩基)-丙氨酸、甘氨酸、环己基丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、正亮氨酸、苯基甘氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、氨基丙酸或氨基丁酸；Y为1.(C2-C6)-链烯二基；2.(C1-C8)-烷二基；3.(C3-C10)环烯二基；4.-(CH)p-To-(CH2)q-其中1.至4.中的基团可任选地用一个或多个基团如O-R18、NO2、CN、CO2R11、SO3R18、NR20R21、SO2NR20R21、CONR20R21取代；T为O、NR21或S；O为数字零或1；p、q相同或不同并代表数字0-6；R15为1.氢
2.(C1-C5)烷基，3.(C6-C10)芳基，4.(C1-C9)杂芳基，其中3.和4.中的基团可任选地用一或多个基团取代，如卤素、CN、NO2、(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、(C2-C5)链烯基，其中最后三个基团可任选地部分或完全用卤素取代，(C1-C5)烷氧基；(C1-C5)烷硫基、NR20R21、CO2R19、SO3R18、SO2NR20R21、SO2R18、O-R18；NR20CO-R15；R16为氢、(C1-C4)烷基、(C6-C12)芳基、(C1-C4)烷基-(C6-C12)芳基、全氟(C1-C4)烷基；R17为氢、卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、全氟(C1-C4)烷基、NO2、OH、NH2、CONR16R16、NR16CONR16R16；R18、R19、R20相同或不同并代表氢、(C1-C5)烷基、(C3-C5)链烯基、(C6-C12)芳基-(C1-C3)烷基、(C3-C10)环烷基、(C3-C10)环烷基-(C1-C3)烷基、C(O)-O-(C1-C5)烷基、或C(O)-NH-(C1-C5)烷基；R21为氢、C(O)-O-(C1-C5)烷基、C(O)-O-(C1-C3)烷基-(C6-C10)芳基；Z为-R14N-R22；R22代表
R23为(C1-C4)烷基，
或
烷基和链烯基可以是直链的或支化的。这也适用于由其衍生的基团如烷氧基。
链烯基代表单或多重不饱和化合物如1，4-丁二烯基、8，11-庚二烯基、8，11，14-庚三烯基、丁烯基。相应地也适用于环烯基。
环烷基代表单或双环化合物如环丙基、环戊基、环己基、双环壬基。相应地也适用于环烯基。
(C6-C12)芳基例如是苯基、萘基、或联苯基，优选苯基。这相应地适用于由其衍生的基团，如芳烷基。
卤素为氟、氢、溴或碘，优选氯或氟。
(C1-C9)杂芳基理解为这样的基团，它衍生自苯基或萘基，其中的一个或多个CH基团可被N替代和/或其中至少两个相邻的CH基团(在形成五元芳环情况下)可被S、NH或O替代。此外双环基团(如中氮茚基)的缩合位的一或两个原子可以是N原子。
杂芳基尤其为呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、肉啉基，苯并吡喃酮基，香豆素基、吡喃酮基、呋喃二酮基。
式(I)化合物的生理可耐受盐可理解为其有机或无机盐，如在Remington’s Pharmaceutical Sciences(雷明顿制药学)(A.R.Gennard Editor，Mack Rublishing Co.，Easton PA，17.Auflage，1418页(1985))中所描述的。基于其生理和化学稳定性及其溶解性，酸性基团尤其优选钠-、钾-、钙-和铵盐；碱性基团尤其优选盐酸、硫酸、磷酸、或羧酸或磺酸，如乙酸、柠檬酸、苯甲酸、马来酸、富马酸、酒石酸和对甲苯磺酸的盐。
合适的非肽的缓激肽拮抗剂及其制备例如描述于专利申请EP-A622361，US5,212,182，US5,216,165，US5,438,064和WO9604251和未公开的德国专利申请P19610784.9中，其中公开了式IA化合物及其生理耐受盐
其中各符号具有下述含义a) X1-X3相同或不同并且为N或CR5；R1和R2相同或不同并为1.H2.卤素；c) R3和R4相同或不同并为1.H2.卤素3.(C1-C5)烷基4.(C2-C5)链烯基；d) R5为1.H2.卤素3.(C1-C6)烷基4.O-R65.S-R66.NHR67.(C6-C12)芳基8.(C6-C12)芳基-(C1-C3)烷基9.-C(O)-OR6
10.-C(O)-H；其中3.、7.和8.中的基团可任选地被一个或多个基团如OR6、SR6、NO2、CN、NHR6或卤素取代e) R6和R8相同或不同并且是1.H2.(C1-C5)烷基3.(C3-C5)链烯基4.(C6-C12)芳基-(C1-C3)烷基；f) R7为1.(C1-C5)烷基，其中氢可部分或完全被氟或氯替代2.(C1-C5)烷氧基，其中氢可部分或完全被氟或氯替代；g) B为氨基羧酸，例如蛋氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、2-氯苯丙氨酸、3-氯苯丙氨酸、4-氯苯丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、3-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、酪氨酸、o-甲基酪氨酸、β-(2-噻吩基)-丙氨酸、甘氨酸、环己基丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、正亮氨酸、苯基甘氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、氨基丙酸或氨基丁酸；h) D为1.(C2-C5)链烯二基2.(C1-C5)烷二基3.-(CH2)n-Yp-(CH2)m-；i) E为1.O2.S；j) Y为1.O2.S3.NR8；k) n和m相同或不同并为0-3；l) o为数字1-3；m) p为数字0或1。
式(IA)化合物可如下制备，包括a)使用Cs2CO3或K2CO3在一惰性溶剂，优选DMF或N-甲基吡咯烷中对式(XII)化合物脱质子化
式中X1-X3和R3和R4如式(IA)定义，并于室温下将其与式(XIII)化合物反应
其中R1和R2如式(IA)定义；b)借助于过渡金属卤化物，优选SnCl2或FeCl3，将得到的式(XIV)化合物还原
其中R1、R2、R3、R4、X1、X2和X3如式(IA)定义，得到式(XV)化合物
其中R1、R2、R3、R4、X1、X2和X3如式(IA)定义；c)将式(XV)化合物与B(B-Prot)的活化的、适当保护的氨基羧酸衍生物，优选B的邻苯二甲酰保护的氨基羧酸衍生物的酰氯在惰性溶剂如NMP中，如果合适的话通过加入DMAP，进行反应，并由此得到式(XVI)化合物
其中B、R1、R2、R3、R4、X1、X2和X3如式(IA)定义，并且Prot为氨基保护基，如描述于T.W.Greene“有机合成保护基”( “Protective Groups in organic Synthesis”)，John Wiley，2nd Edition，1991，例如邻苯二甲酰、苄基或对甲氧苄基；d)反应式(XVI)化合物，在惰性溶剂，优选DMF或NMP中用碱金属氢化物、碱金属碳酸盐或烷氧化物作用之后，随后用R6X处理，其中R6如式(IA)定义并且X是离去基团，例如卤素、甲磺酸根或甲苯磺酸根，得到式(XVII)化合物
其中B、R1、R2、R3、R4、R6、X1、X2和X3如式(IA)定义并且Prot如式(XVI)定义；e)从式(XVII)化合物中去除保护基(Prot)，在邻苯二甲酰的情况下优选与肼在溶剂醇中于室温至沸点之间的温度下，优选于室温下反应，得到式(XVIII)化合物
其中B、R1、R2、R3、R4、R6、X1、X2和X3如式(IA)定义并且Prot如式(XVI)定义；f1)将式(XVIII)化合物与式(XIX)活化羧酸衍生物反应
其中R7、o和D如式(IA)定义，优选其酰氯或式(XIX)的羧酸，用用于肽合成中的试剂进行活化，或f2)将式(XVIII)化合物与式(XX)的胺或醇反应
其中R7、o和D如上定义并且Z为OH或NH2，然后将式(XVIII)或(XX)化合物首先与一双重活化的羰基化合物，例如碳化二亚胺、光气或氯碳酸酯，优选光气或碳化二亚胺，优选在0℃和室温之间的温度下于惰性溶剂，优选于二氯甲烷或二甲氧基乙烷中反应以形成脲或尿烷基，或f3)将式(XVIII)化合物与合适的异氰酸酯或异硫氰酸酯优选于0℃至室温间的温度下于惰性溶剂，优选二氯甲烷或二甲氧基乙烷中反应，和g)如果适当，将得到的式(IA)化合物通过已知方法转化为其生理耐受盐。
转化成溴乙基化合物可通过相应的甲基衍生物与N-溴琥珀酰亚胺、二溴海因或溴在惰性溶剂，优选溴苯或环己烷中于60℃至沸点间的温度下反应进行。
所用的偶合试剂可以是可能用于肽合成中的所有活化试剂，参见例如Houben-Wey1，Methoden der organischen Chemie(有机化学方法)，15/2卷，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974，但尤其是碳化二亚胺，例如N，N’-二环己基碳化二亚胺，N，N’-二异丙基碳化二亚胺或N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺。在这种情况下偶合可直接通过向活化试剂中加入羧酸衍生物并且，如果合适的话，一种添加剂诸如1-羟基苯并三唑(HOBt)(W.Konig，R.Geiger，Chem.Ber.103，708(1970)或3-羟基-4-氧代-3，4-二氢苯并三嗪(HOObt)W.Konig，R.Geiger，Chem，Ber.103，2054(1970))进行或否则将羧酸衍生物预活化成对称的酸酐或HOBt或HOObt酯可以单独进行并且可将已活化的物质在合适溶剂中的溶液加到胺中。
可在二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二氯甲烷或提及溶剂的混合物中将氨基酸衍生物偶合或活化成一种上面提及的活化剂。
可不用邻苯二甲酰基，而使用对氨基的两个质子都进行保护的保护基，例如2个苄基。
尤其合适的是这样一些式I化合物及其生理耐受盐，其中D为式(X)基团
E为1.式(XI)基团
2.氢、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；R1和R2相同或不同并且为氢，卤素或(C1-C4)烷基；R4为氢、(C1-C4)烷基、苯基或甲氧基；R5为1.氢或(C1-C4)烷基；
R6为1.氢或(C1-C4)烷基2.式(VIII)基团
R8和R9相同或不同并且为氢或氯；A为-CH2-或-CH2-CH2-；R10为式(IX)基团
R11、R14为氢、甲基或乙基；G为O或H2；R12当G为O时代表氢或当G为H2时代表氢或R16CO；R13为(C1-C4)烷基、环戊基、环己基、-(CH2)mCONR11R11，
m、n相同或不同并且为数字0-2；AA为氨基酸甘氨酸或丙氨酸；Y为1.(C2-C5)链烯二基，2.(C2-C4)烷二基，3.-(CH2)p-To-(CH2)-q；T为O或S；o为数字0或1；p、q相同或不同并为数字0-2；R15为1.氢2.(C1-C5)烷基，3.苯基，4.(C5-C9)杂芳基，其中3.和4.中的基团可任选地被一、二或三个基团取代，取代基如卤素、NO2、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基，其中H原子可部分或完全被卤素取代，(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)烷硫基、NR20R21、NR20CO-(C1-C5)烷基和NR20CO-吡啶基，R16为氢、(C1-C4)烷基、苯基；R17为氢、卤素、(C1-C4)烷基、NO2、NH2；R20为氢、(C1-C4)烷基、苄基；R21为氢、C(O)-O-(C1-C5)烷基；Z为-R14-N-R22R22为
R23为(C1-C4)烷基，
这样的式(I)一些化合物也是特别优选的，其中各符号具有下述含义D为式(X)基团
E为式(XI)基团
R1、R2相同或不同并且为氢、卤素或(C1-C4)烷基；R4为氢、(C1-C4)烷基；R5为氢；R6为氢；R8和R9相同或不同并且为氢或氯；A为-CH2-或-CH2-CH2-；R10为式(IX)基团
R14为氢、甲基或乙基；AA为氨基酸甘氨酸；Y为1.(C2-C5)链烯二基，2.(C1-C4)烷二基，3.-(CH2)p-To-(CH2)q-；T为O或S；o为数字0或1；p、q相同或不同并且为数字0-2；R15为1.氢，2.(C1-C3)烷基，3.苯基，4.(C5-C9)杂芳基，其中3.和4.中的基团可任选地被一、二或三个基团取代，取代基如卤素，NO2、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基，其中H原子可部分或完全被卤素取代，(C1-C3)烷氧基、NR20R21、NR20CO-(C1-C3)烷基和NR20CO-吡啶基，R20为氢、(C1-C4)烷基、苄基；R21为氢、C(O)-O-(C1-C5)烷基。
合适的化合物还有N-[1-[4-(1，1-二甲基乙基)苯基]甲基-4-哌啶基]-8-甲氧基-4-[[4-[[[ 1-(苯基甲基)-4-哌啶基]氨基]羰基]苯基-氨基]-3-喹啉羧酰胺；N-[1-[3-氯苯基]甲基-4-哌啶基]-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯基甲基)-4-哌啶基]氨基]羰基]苯基-氨基]-3-喹啉羧酰胺；8-甲氧基-N-[1-(苯基)甲基-4-哌啶基-[4-[[4-[[[1-(苯基甲基)-4-哌啶基]氨基]羰基]苯基-氨基]-3-喹啉羧酰胺；N-[2-(二甲基氨基)乙基]-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]羰基]苯基-氨基]-3-喹啉羧酰胺-三氟乙酸盐；N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-乙基-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]羰基]苯基-氨基]-3-喹啉羧酰胺；4-[[-4-[[[(3-环戊基-1-氧代丙基)-[1-[6-(二乙氨基)-6-氧代-己基-4-哌啶基氨基]-甲基苯基]-氨基]-8-甲氧基-N-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-3-喹啉羧酰胺；4-[[4-[[(1-丁基-4-哌啶基氨基]甲基]-苯基氨基]-8-甲氧基-N-[1-(苯基甲基)-4-哌啶基]-3-喹啉羧酰胺；N-(1-丁基-4-哌啶基)-8-甲氧基-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]-羰基]-苯基]-氨基]-3-喹啉羧酰胺；N-[1-[6-(二乙氨基)-6-氧代己基-4-哌啶基-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-氨基]-羰基]-苯基]-氨基]-3-喹啉羧酰胺；4-[[4-[[(1-丁基-4-哌啶基)-(1-氧代丁基)-氨基]-甲基]-苯基]-氨基-[8-甲氧基-N-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-3-喹啉羧酰胺；N-[1-[4-[(二乙氨基)-羰基]-苯基-4-哌啶基-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)4-哌啶基]-氨基]-羰基]-苯基]-氨基-3-喹啉羧酰胺；N-[1-(2-苯乙基)-4-哌啶]-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-氨基]-羰基]-苯基]-氨基]-3-喹啉羧酰胺；4-[[4-[[(-1-丁基-4-哌啶基)-氨基]-羰基]-苯基]-氨基]-8-甲氧基-N-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-3-喹啉羧酰胺；8-甲氧基-N-(1-甲基-4-哌啶基)-4-[[4-[[[1-(苯基甲基)-4-哌啶基]氨基]羰基]苯基]-氨基]-3-喹啉羧酰胺；N-[1-[(3-甲氧基苯基)-甲基]-4-哌啶基-8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-氨基]-羰基]-苯基]-氨基-3-喹啉羧酰胺；8-甲氧基-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-氨基]-羰基]-苯基]-氨基]-1-[[3-(三氟甲基)-苯基]-甲基]-4-哌啶基]-3-喹啉羧酰胺；或7-氯-N-[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-4-[[4-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]-氨基]-羰基]-苯基]-氨基]-3-喹啉羧酸胺；及其生理耐受盐。
更特别优选的是表1-3中所列的例1-45化合物表1
表2
表3
可以经肠内，胃肠外-如皮下、肌内或静脉内-，经鼻，直肠或经吸入来给药。活性物质的剂量取决于体重、年龄和给药方式。
本发明的药物制剂是用本来已知的制备溶液-、混合物-、粒剂-，片剂-或糖衣丸的方法来制备的。
为了胃肠外的应用，将活性化合物或它们的生理上可以耐受的盐，需要的话与制药学上常用的助剂(例如为了等渗化或调pH)以及增溶剂、乳化剂、或其它的助剂一起制成溶液、悬浮液或乳剂。
对于所说明的药物，制成可以注射的长效制剂用于皮下或肌内注射也是有意义的。作为药物形式可以使用例如油质的结晶悬浮液、微胶囊、微粒、小粒或植入物，其中后者由组织可以耐受的聚合物，特别是可生物降解的聚合物，例如基于多乳酸-聚乙二醇酸-共聚物构建的，其它可以考虑的聚合物是聚酰胺，聚酯，聚乙酸酯或多糖。
对于经口应用的形式，可以将活性化合物与对此常用的添加剂如载体物质，稳定剂或惰性的稀释剂混合并通过常用的方法制成合适的给药形式、如片剂、糖衣丸、胶囊、水质的、醇的或油质的悬浮液或水质的、醇的或油质的溶液。作为惰性载体可以应用例如阿拉伯胶，氧化镁，碳酸镁，磷酸钾，乳糖，葡萄糖，硬脂酰富马酸镁或淀粉，特别是玉米淀粉，在此固体药物的配制可以做成干燥的或者是潮湿的粒剂。作为油质的载体物质或溶剂可以考虑植物油或动物油，如葵花油或鱼肝油。
并且也可以考虑口服的长效制剂或者是带有抗胃液的涂层的制剂。长效制剂可以是基于包裹在脂肪、蜡或聚合物内而制成。在此也可以是多涂层的或带外壳的片剂或小丸。
对于所说明的药物通过粘膜给药以达到系统的有效浓度也是有意义的。这涉及到鼻内，吸入和直肠应用的可能性。
对于鼻内的应用形式，是将化合物与对此常用的添加剂如稳定剂或惰性稀释剂混合并通过常用的方法制成适合的给药形式，如粉剂、水质的、醇的或油质的悬浮液或水质的、醇的或油质的溶液，水质的鼻内制剂可以加入螯合剂，如1，2-乙二胺-N，N，N’，N’-四醋酸和缓冲剂如醋酸，磷酸，柠檬酸，酒石酸和它们的盐。多次给药容器(Mehrfachdosenbehalter)含有保存剂如洁尔灭，氯代丁醇，洗必泰，山梨酸，苯甲酸，PHB-酯或有机汞化合物。鼻溶液的给药可以借助定药量的喷雾器来完成或者是做成带有提高粘度成分的滴鼻剂或者是鼻冻胶或鼻油膏。
对于吸入应用可以在应用惰性载体气体的条件下使用喷雾器或加压气体包装。
用于鼻或肺的粉剂给药要求特殊的给药器。
基于体重为75kg的成人，式I化合物的有效剂量计至少为0.01mg/kg/日，优选至少为0.1mg/kg/日，最多为30mg/kg/日，优选0.3至10mg/kg/日，这与病症的严重程度有关。
试验例6化合物(＝化合物A)对于用四氯化碳诱发的大鼠肝纤维化的尿和电解质排出的影响1)方法应用Wistar大鼠(饲养者Hoechst AG，Kastengrund)，开始体重为120-150g进行肝纤维化的引发如在Bickel等，J.Hepatol.，13(Suppl.3)(1991)26-33中所述诱发肝纤维化。动物得到剂量为1ml/kg的四氯化碳(CCl4)，口服每周二次共至少6周，肝纤维化是通过肝的胶原蛋白含量和肝的相关血清指标(胆红素，ALAT，胆酸)证实的。
在纤维变性的过程中是将动物保持在如下所述的标准条件下日-夜节律(明期从6.30至18.30)，室温22±2℃和相对空气湿度60±10％。动物得到标准化的大鼠饲料(Altromin R1321)和水随意。
2)尿盐排泄和利尿试验到利尿试验时动物已达到210-260g之间的体重。饲料已经在试验前16小时取走和在整个的试验中不再给。动物允许自由获得水直至试验真正开始。
在利尿试验持续时间内动物被保持在特殊的利尿笼子中。一个控制的利尿是在0时用经口给予每公斤体重20ml水引发。在0到5时和6到24时的收集期单独对每一个动物查明电解质的排泄和尿的体积。
7天后对相同的动物在给予缓激肽-拮抗剂的条件下重新进行试验，动物在0时和6时的时刻得到3mg/kg体重的化合物A(腹膜内，溶于5ml/kg体重的具有下列组成的溶液中DSMO28％、乙醇20％、重蒸馏水44％和0.9％的生理盐水8％，pH5.71)。
钠和钾用火焰光谱分析测定(火焰光度计Eppendorf，Hamburg)。氯是用银滴定法通过电位分析确定终点来测量的(尿氯量计Eppendorf，Hamburg)。分析的结果都用于尿排泄(ml/kg体重)和电解质排泄(mmol/lkg体重)的计算。
3)结果化合物A对于用四氢化碳诱发的纤维化的大鼠尿和电解质排出的影响表(平均值(MW)±标准偏差(SD)，n＝8)收集期收集期1-5小时 6-24小时对照化合物A 对照化合物A尿体积MW24,2 24,5 15,837,5**(ml/kg) SD3,71 11,7 6,389,6钠MW0,3290,92 2,033,45*(mmol/kg) SD0,2561,05 0,468 1,98钾MW0,8680,8392,372,58(mmol/kg) SD0,3260,3591,120,49
MW0,375 0,7041,782,77*(mmol/kg) SD0,167 0,6470,339 1,71渗透克分子浓度 MW7,0720,3*26,360,8**(mosmol/kg)SD2,2 5,32 6,247,68*p＜0.05；**p＜0.001刑量3mg/kg(腹膜内)，在0时和6时4)统计结果是以算术平均值和标准偏差(SD)方式给出的。统计学的检验是用根据Manm-Whitney的非参数试验进行的。
5)结果和评价在用非肽的缓激肽拮抗剂处理之后，肝纤维化的大鼠显示利尿和尿盐排泄的明显增强，作为例子在上面的表中例出了用实施例化合物6(化合物A)得到的实验数据。结果得出明显的、统计意义的增强的利尿及钠和氯的排出。
大鼠用四氢化碳诱发的肝纤维化模型作为对于人的肝硬变的模型是普遍公认的。过剩的钠潴留对于人和动物的肝纤维化和肝硬化是特征性的并被视为是严重的血液动力障碍的后果(Schrier等，肝脏学(Hepatology)8(1988)1151-1157)。这种血液动力障碍形成门静脉高压，与尤其在内脏神经区过度的外周血管扩张(肌活动过多的循环状态)紧密相联。外周血管扩张的原因至今尚不清楚。病理的钠-和水潴留又使症状恶化，这时它可以例如促成水肿形成和腹水。门静脉高压与不适宜的外周血管扩张和钠潴留是有联系的。这些对于肝纤维化和肝硬复的代偿失调现象是负有责任的。这种代偿失调现象不仅包括如形成水肿和腹水等症状，而且也包括所谓的肝肾综合症。(作为严重肝脏疾病后果的肾机能衰竭)。
式I非肽的缓激肽-拮抗剂对于肝纤维化和肝硬化大鼠显著的排钠利尿作用是出乎意料之外的，因为缓激肽-拮抗剂对健度的动物没有显示出这种作用，相反，在特殊的高血压-模型中甚至可以导致利尿和钠排泄的减少。(Madeddu等，英国药理学杂志(Br.J.Pharmacol.)106(1992)380-386；Majima等，高血压(Hypertension)，22(1993)705-714)。因为缓激肽在肾脏中可以通过血管的和小管机制刺激尿盐排泄和利尿。
缓激肽是内源性的肽，在不同的血管区具有强大的血管扩张和增强血管通透性特性。我们的结果表明，缓激肽是过度钠滞留的重要介质。改善的血液动力和毛细血管情况远远过度补偿了通过抑制内源性缓激肽在肾脏中的刺激作用造成可能的钠-和水排泄的限制，因此产生了治疗的益处。
因此式I非肽的缓激肽-拮抗剂适合对于慢性纤维变性的肝脏疾病(肝硬化和肝纤维化)和急性肝脏疾病的治疗和预防。
权利要求
1.应用非肽的缓激肽-拮抗剂或其生理上可以耐受的盐制备用于治疗慢性纤维变性的肝脏疾病(肝硬变和肝纤维化)和急性肝脏疾病和预防并发症的药物。
2.按权利要求1的式I非肽的缓激肽拮抗剂及其生理上可耐受盐的应用
其中各符号具有下述意义D为1.式(II)基团
2.式(III)-(VI)基团
E为1.式(VII)基团
2.氢、卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷硫基、(C1-C4)烷氧基、其中后三种基团中的一或多个氢原子可被氟取代；X1为氮或C-R4；X2为氮或C-R5；X3为氮或C-R6；X4为氧、氮或N-R7；R1、R2相同或不同并为氢、卤素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；R3为氢、卤素、(C1-C6)烷基、(C6-C12)芳基、(C1-C3)烷基-(C6-C12)芳基、(C3-C5)链烯基、(C1-C4)烷氧基、CO2R11；R4为氢、卤素、(C1-C4)烷基、羟基、(C1-C4)烷硫基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、(C1-C4)二烷基氨基、(C1-C4)烷氧基，其任选地被羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基或(C1-C4)烷基氨基取代，或(C6-C12)芳基，其任选地被(C1-C4)烷基或CO2R11取代；R5为1.氢或(C1-C4)烷基2.
R6为1.氢、卤素、(C1-C4)烷基、羟基、(C1-C4)烷硫基、氨基、(C1-C4)烷基氨基、(C1-C4)二烷基氨基、(C1-C4)烷氧基，其任选地被羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基或(C1-C4)烷基氨基取代，或(C6-C12)芳基，其任选地被(C1-C4)烷基或CO2R11所取代；2.式(VIII)基团
R7为(C1-C4)烷基、(C6-C12)芳基、或(C1-C3)烷基-(C6-C12)芳基；R8、R9为相同或不同的并代表氢或卤素；A为(C1-C3)烷二基；Q为O或NR11；R10为式(IX)基团
R11、R14为氢或(C1-C4)烷基；G为O或H2R12当G＝O时代表氢并且当G＝H2时代表氢或R16CO；R13为(C1-C4)烷基、(C3-C7)环烷基、-(CH2)m-(C3-C7)环烷基、-(CH2)m-CONR11R11，或
m、n相同或不同并代表0-6的数字；AA代表氨基酸如蛋氨酸，丙氨酸、苯丙氨酸、2-氯苯丙氨酸、3-氯苯丙氨酸、4-氯苯丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、3-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、酪氨酸、o-甲基酪氨酸、β-(2-噻吩基)-丙氨酸、甘氨酸、环己基丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、正亮氨酸、苯基甘氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、氨基丙酸或氨基丁酸；Y为1.(C2-C6)-链烯二基；2.(C1-C8)-烷二基；3.(C3-C10)环烯二基；4.-(CH)p-To-(CH2)q-其中1.至4.中的基团可任选地用一个或多个基团如O-R18、NO2、CN、CO2R11、SO3R18、NR20R21、SO2NR20R21、CONR20R21取代；T为O、NR21或S；o为数字零或1；p、q相同或不同并代表数字0-6；R15为1.氢2.(C1-C5)烷基，3.(C6-C10)芳基，4.(C1-C9)杂芳基，其中3.和4.中的基团可任选地用一或多个基团取代，如卤素、CN、NO2、(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、(C2-C5)链烯基，其中最后三个基团可任选地部分或完全用卤素取代，(C1-C5)烷氧基；(C1-C5)烷硫基、NR20R21、CO2R19、SO3R18、SO2NR20R21、SO2R18、O-R18；NR20CO-R15；R16为氢、(C1-C4)烷基、(C6-C12)芳基、(C1-C4)烷基-(C6-C12)芳基、全氟(C1-C4)烷基；R17为氢、卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、全氟(C1-C4)烷基、NO2、OH、NH2、CONR16R16、NR16CONR16R16；R18、R19、R20相同或不同并代表氢、(C1-C5)烷基、(C3-C5)链烯基、(C6-C12)芳基-(C1-C3)烷基、(C3-C10)环烷基、(C3-C10)环烷基-(C1-C3)烷基、C(O)-O-(C1-C5)烷基、或C(O)-NH-(C1-C5)烷基；R21为氢、C(O)-O-(C1-C5)烷基、C(O)-O-(C1-C3)烷基-(C6-C10)芳基；Z为-R14N-R22；R22代表
R23为(C1-C4)烷基，
3.按权利要求2的式I非肽的缓激肽拮抗剂及其生理上可耐受盐的应用，其中各符号具有下述含义D为式(X)基团
E为1.式(XI)基团
2.氢、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；R1和R2相同或不同并且为氢，卤素或(C1-C4)烷基；R4为氢、(C1-C4)烷基、苯基或甲氧基；R5为1.氢或(C1-C4)烷基；2.
R6为1.氢或(C1-C4)烷基2.式(VIII)基团
R8和R9相同或不同并且为氢或氯；A为-CH2-或-CH2-CH2-；R10为式(IX)基团
R11、R14为氢、甲基或乙基；G为O或H2；R12当G为O时代表氢或当G为H2时代表氢或R16CO；R13为(C1-C4)烷基、环戊基、环己基、-(CH2)mCONR11R11，
m、n相同或不同并且为数字0-2；AA为氨基酸甘氨酸或丙氨酸；Y为1.(C2-C5)链烯二基，2.(C2-C4)烷二基，3.-(CH2)p-To-(CH2)-q；T为O或S；o为数字0或1；p、q相同或不同并为数字0-2；R15为1.氢2.(C1-C5)烷基，3.苯基，4.(C5-C9)杂芳基，其中3.和4.中的基团可任选地被一、二或三个基团取代，取代基如卤素、NO2、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基，其中H原子可部分或完全被卤素取代，(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)烷硫基、NR20R21、NR20CO-(C1-C5)烷基和NR20CO-吡啶基，R16为氢、(C1-C4)烷基、苯基；R17为氢、卤素、(C1-C4)烷基、NO2、NH2；R20为氢、(C1-C4)烷基、苄基；R21为氢、C(O)-O-(C1-C5)烷基；Z为-R14-N-R22R22为
R23为(C1-C4)烷基，
4.按权利要求2或3的式I非肽的缓激肽拮抗剂及其生理上可耐受盐的应用，其中各符号具有下述D为式(X)基团
E为式(XI)基团
R1、R2相同或不同并且为氢、卤素或(C1-C4)烷基；R4为氢、(C1-C4)烷基；R5为氢；R6为氢；R8和R9相同或不同并且为氢或氯；A为-CH2-或-CH2-CH2-；R10为式(IX)基团
R14为氢、甲基或乙基；AA为氨基酸甘氨酸；Y为1.(C2-C5)链烯二基，2.(C1-C4)烷二基，3.-(CH2)p-To-(CH2)q-；T为O或S；o为数字0或1；p、q相同或不同并且为数字0-2；R15为1.氢，2.(C1-C3)烷基，3.苯基，4.(C5-C9)杂芳基，其中3.和4.中的基团可任选地被一、二或三个基团的取代，取代基如卤素，NO2、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基，其中H原子可部分或完全被卤素取代，(C1-C3)烷氧基、NR20R21、NR20CO-(C1-C3)烷基和NR20CO-吡啶基，R20为氢、(C1-C4)烷基、苄基；R21为氢、C(O)-O-(C1-C5)烷基。
全文摘要
本发明涉及应用非肽的缓激肽－拮抗剂制备用于治疗慢性纤维发生肝脏疾病(肝硬化和肝纤维化)和急性肝脏疾病和预防并发症,特别是用于预防和治疗门静脉高压,代偿机能障碍现象如腹水,水肿形成,肝肾综合症,血压过高的胃病和结肠病,脾肿大以及通过门静脉高压,侧支循环和充血所致的胃肠道内的出血并发症和由于慢性肌活动过度循环情况所致的一种心脏病及其后遗症的药物。
文档编号A61K31/33GK1176102SQ97113108
公开日1998年3月18日 申请日期1997年5月21日 优先权日1996年5月22日
发明者H·赫茨施, A·瓦格纳, K·沃斯, M·洛珀特, M·比克尔 申请人:赫彻斯特股份公司