专利名称：比伐卢定-聚乙二醇化复合物的制作方法
比伐卢定-聚乙二醇化复合物
技术领域：
本发明涉及比伐卢定的聚乙二醇化复合物，其制备方法，含有它们的药物组合物以及其在治疗或预防血栓类疾病的药物中的应用，包括在不稳定型心绞痛、外周动脉介入治疗、心肺移植手术及防栓治疗中的药物中的应用。
背景技术：
动脉粥样硬化等引发的血栓病已经成为世界上首位死亡原因，其发病率在我国呈上升趋势，而抗凝药在该病的治疗中极为重要。在目前众多的抗凝药中，Medicines公司的比伐卢定(Angiomax )是FDA于2000年批准上市的一种抗凝新药，其抗凝成分是水蛭素类似物(片段)。这种药是凝血酶直接的、特异的、可逆性抑制剂，无论凝血酶处于血循环中还是与血栓结合，其均可与其催化位点和阴离子结合位点(又称底物识别位点)发生特异性结合，从而直接抑制凝血酶的活性。它克服了肝素、低分子肝素及水蛭素的缺点，在不稳定型心绞痛、外周动脉介入治疗、心肺移植手术及防栓治疗中显示出良好的作用。但比伐卢定对凝血酶活性位点的抑制持续时间较短,在人体内的半衰期约25分钟。要实现对凝血酶活性位点的长时间抑制，有时需要反复多次注射给药。而比伐卢定价格昂贵，多次反复用药大大增加了患者的就医成本，因此，开发长效、稳定、经济的类似药物或制剂十分必要。蛋白药物经聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)修饰后能显著延长作用，增强水溶性和稳定性，降低免疫原性和抗原性，已有多个PEG修饰的蛋白药物上市。本发明通过在比伐卢定结构中引入半胱氨酸，以实现对比伐卢定进行定点聚乙二醇化修饰的方法及应用尚未见文献报道。
发明内容本发明的目的之一是提供比伐卢定-聚乙二醇复合物。化学合成多肽药物比伐卢定是凝血酶的直接抑制剂，它克服了肝素、低分子肝素及水蛭素的缺点，在不稳定型心绞痛、外周动脉介入治疗、心肺移植手术及防栓抗栓治疗中显示出良好的作用。但比伐卢定的单次剂量为250毫克，目前价格为每克1000元左右。本研究希望通过合成比伐卢定的PEG化修饰产物，能延长比伐卢定的半衰期，减少用药剂量或给药频率，将为比伐卢定带来更广阔的市场，创造更大的经济效益和社会效益。比伐卢定来源于水蛭素复合物，由20个氨基酸残基组成的多肽，分子量是2180，其结构式为D-Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-IIe-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OHο 研究表明其 N-端 Pro-Arg-Pro 和C-端Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu是其与凝血酶结合的两个关键位点，5到8位的4个甘氨酸只是起连接作用，因此选择5、6、7位或8位的甘氨酸进行修饰是理想的位点。本发明所述的比伐卢定(bivalirudin, BVLD)-聚乙二醇复合物为对比伐卢定序 列中第5位到第8位(由N-端到C-端)的任一甘氨酸进行半胱氨酸替代后在半胱氨酸侧链进行聚乙二醇化修饰后得到的新结构化合物，所述复合物为具有式(I)结构的化合物
[Cys (PEG-M)] X-BVLD (I)其中
权利要求
1.一种比伐卢定(bivalirudin,BVLD)_聚乙二醇复合物,其特征在于所述复合物为对比伐卢定序列中第5位到第8位(由N-端到C-端)的任一甘氨酸进行半胱氨酸替代后在半胱氨酸侧链进行聚乙二醇化修饰后得到的新结构化合物。
2.根据权利要求I所述的比伐卢定-聚乙二醇复合物，其特征在于所述复合物为具有式⑴结构的化合物[Cys (PEG-M)] X-BVLD (I) 其中
3.根据权利要求I所述比伐卢定-聚乙二醇复合物，其中该复合物的结构为[Cys (mPEG2000-MAL) ] 7-BVLD, [Cys (mPEG5000-MAL) ] 7-BVLD 和[Cys (mPEG10000-MAL) ] -BVLD。
4.一种药物组合物，其特征在于含有权利要求1-3中至少一种比伐卢定-聚乙二醇复合物和药用辅料。
5.根据权利要求1-3中任一项权利要求所述的比伐卢定-聚乙二醇复合物在制备用于治疗或预防血栓类疾病的药物中的应用，其特征在于所述要去用于治疗不稳定型心绞痛、外周动脉介入治疗、心肺移植手术及防栓治疗。
6.根据权利要求2所述的比伐卢定-聚乙二醇复合物的制备方法，其特征在于包括 将[Cys]X-BVLD溶于纯水中，用碳酸氢钠调节pH到7 8，加入2_3倍摩尔当量的PEG，室温搅拌反应2-3小时，用反相高效液相色谱(RP-HPLC)监测反应进程和分离目标产物，目标产物经冷冻干燥得比伐卢定-聚乙二醇复合物[Cys (PEG-MAL) ]X_BVLD，其中的PEG为马来酰亚胺基聚乙二醇、乙烯基聚乙二醇或碘代乙酰基聚乙二醇。
全文摘要
本发明涉及比伐卢定的聚乙二醇化复合物，其制备方法，含有它们的药物组合物及用途。本发明中的比伐卢定的聚乙二醇化复合物指对比伐卢定序列中第5位到第8位的任一甘氨酸进行半胱氨酸替代后进行聚乙二醇化修饰后得到既保持比伐卢定活性又延长其半衰期的新结构化合物。本发明中的比伐卢定的聚乙二醇化复合物在治疗或预防血栓类疾病的药物中的应用，包括在不稳定型心绞痛，外周动脉介入治疗，心肺移植手术及防栓治疗中的药物中的应用。
文档编号A61P7/02GK102641506SQ20121010432
公开日2012年8月22日 申请日期2012年4月11日 优先权日2012年4月11日
发明者尹志峰, 李云峰, 王小青, 王良友, 赵红玲, 高杨 申请人:承德医学院中药研究所